兔角膜碱烧伤模型房水中肿瘤坏死因子α及血管内皮生长因子表达与姜黄素的抑制

背景：稳定的角膜新生血管动物模型是研究角膜新生血管调控机制,姜黄素对碱烧伤角膜新生血管具有抑制作用和保护作用。 目的：探讨姜黄素对碱烧伤角膜新生血管模型中肿瘤坏死因子α及血管内皮生长因子表达的影响,为防治角膜新生血管提供理论依据。 方法：纳入33只新西兰大耳白兔,随机取3只设为正常组,其余30只建立兔角膜碱烧伤诱发角膜新生血管模型,右眼设为对照组给予生理盐水,左眼设为干预组给予姜黄素,裂隙灯观察角膜新生血管生长及角膜混浊情况,酶联免疫吸附实验检测肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子在房水中的表达。 结果：正常组没有角膜新生血管生成。与对照组比较,干预组角膜新生血管受到抑制且角膜混浊较轻(P < 0.05)。房水肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子在3组中均有表达,对照组和干预组明显高于正常组,但干预组低于对照组(P < 0.05)。说明姜黄素可以有效降低角膜碱烧伤后房水肿瘤坏死因子α及血管内皮生长因子的表达进而抑制兔角膜碱烧伤后角膜新生血管的生长。     

膜性肾病小鼠模型的建立与鉴定

目的 建立小鼠膜性肾病模型.方法 取6周龄健康雄性BALB/c小鼠20只,分为对照组和模型组.模型组小鼠皮下注射0.2 mg阳离子牛血清白蛋白(C-BSA)和等体积的完全弗氏佐剂,对照组皮下注射生理盐水和完全弗氏佐剂.2周后,模型组小鼠尾静脉注射阳离子牛血清白蛋白,每周3次,隔日注射,对照组使用生理盐水代替.模型的鉴定则采用血液生化检查和病理检查(PASM染色、IgG免疫荧光染色、透射电镜)等方法.结果 8周后12只模型组小鼠出现高蛋白尿、低蛋白血症和高胆固醇血症;PASM染色显示出类似于早期膜性肾病,IgG免疫荧光染色显示出沿毛细血管壁呈颗粒状物沉积,透射电镜下有足突的广泛融合.结论 C-BSA尾静脉注射小鼠可成功构建小鼠膜性肾病模型.     

缬沙坦抗氧化应激及其对动脉粥样硬化的实验研究

目的 :研究缬沙坦对兔氧化应激水平及其对动脉粥样硬化形成的影响。方法 :采用高胆固醇饲料喂饲另加牛血清白蛋白一次注射方法 ,建立家兔动脉粥样硬化模型 ,18只家兔分为正常对照组、模型组及缬沙坦组 ,各组 6只。 8周后 ,取血清测血脂、丙二醛 (MDA) ;取动脉行形态学检查及血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)的免疫组织化学染色 ;并用超氧化物荧光探针DHE检测原位超氧化物以反映NAD(P)H氧化酶的活性。结果 :8周末 ,模型组及缬沙坦组血脂水平高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,其中 ,缬沙坦组未对血脂产生影响 ;但血清MDA及主动脉内膜病变较模型组减少 ;免疫组织化学结果示缬沙坦组VCAM 1较模型组有显著下降 (P <0 .0 5 ) ;另外 ,血管原位超氧化物也明显下降。结论 :缬沙坦可有效抑制动脉粥样硬化的形成 ,且该效应可能是通过抑制NAD(P)H氧化酶活性 ,并下调下游氧化还原敏感性基因的产物如VCAM 1产生而实现的     

注射用Rtnf的全身过敏性和血管局部刺激性作用研究

目的:观察Rtnf是否具有血管刺激作用、全身过敏反应,评价其注射用药的安全性。方法:通过家兔耳缘静脉刺激实验、豚鼠全身主动过敏实验(ASA)观察注射用药Rtnf的安全性。结果:注射用Rtnf对家兔血管内皮无损伤和刺激作用,病理切片观察,耳廓皮肤的表皮和真皮各结构完好,未见变性、坏死、缺失,表皮下乳头层及网织层无炎细胞渗出、无出血,血管内无血栓形成,附件结构正常;豚鼠未出现过敏现象。结论:在本次实验条件下,注射用Rtnf溶血性试验符合注射用药安全性要求;无血管刺激作用;对豚鼠不致敏。     

VEGF/bFGF复合多肽抗体的制备及对卵巢癌细胞增殖抑制作用

目的研究VEGF/bFGF复合多肽(VBP3)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)血管新生和人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制的影响。方法通过镍离子柱亲和层析和离子交换层析方法纯化出诱导表达的VBP3蛋白,免疫Balb/c小鼠制备抗bFGF和抗VEGF的多克隆抗体,酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测抗体效价和特异性。成管试验研究抗体对HUVEC细胞的成管影响,CCK-8检测抗体对SKOV3增殖抑制的影响。Western blot检测抗体对bFGF和VEGF下游信号通路中Erk1/2和Akt磷酸化的影响。结果 SDS-PAGE鉴定出了纯度较高的VBP3蛋白;ELISA方法检测出了高滴度的抗体;HUVEC的成管实验结果表明VBP3多克隆抗体在一定程度上抑制了HUVEC的成管;CCK-8检测出抗体体外抑制了SKOV3细胞增殖,在抗体质量浓度为100μg/ml时抑制率达到39.20%。Western blot结果表明抗bFGF和抗VEGF多克隆抗体显著抑制FGFR和VEGFR下游信号通路中Erk1/2和Akt的磷酸化。结论 VBP3可能作为一种多肽疫苗抑制肿瘤的生长。     

连翘苷对Lewis肺癌VEGF和内皮抑素表达的影响

 目的: 探讨连翘苷对Lewis肺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成抑制因子内皮抑制素(endostatin)蛋白表达的影响。方法: 免疫组化染色检测临床收集的正常肺部组织、癌旁组织和肺癌组织样本中VEGF和endostatin的蛋白表达。设空白对照组10只,同时于40只小鼠右肢腋窝皮下接种Lewis瘤细胞,随机分为模型组、连翘苷低剂量组、连翘苷中剂量组和连翘苷高剂量组,每组10只。模型组每天1次灌胃等体积无菌水;连翘苷低、中剂量组每天灌胃5、10 g/kg连翘苷1次;高剂量组每天灌胃10 g/kg连翘苷2次。给药20 d后取肺部组织进行HE染色和免疫组化染色检测肿瘤组织形态学与肺部组织中VEGF和endostatin的蛋白表达。 结果: 临床样本中,与正常组织和癌旁组织相比,肺癌组织中的VEGF呈高表达,endostatin呈低表达。连翘苷随剂量增加可显著减少Lewis肺癌小鼠肿瘤体积和瘤组织密度;给予不同剂量连翘苷后,VEGF在肺癌组织中表达显著低于模型对照组,而endostatin表达则明显高于模型对照组。结论: 连翘苷通过下调VEGF的表达、上调endostatin的表达而发挥抑制肺部肿瘤发展的作用。     

大鼠下丘脑室旁核对神经免疫调节的基因调控研究

下丘脑室旁核(paraventricular nucleus of hypothalamus,PVN)是神经免疫调节的整合性中枢 ,为了探讨 PVN内肽能神经元对免疫调节的基因调控 ,本研究采用 SD大鼠 10 0只 ,随机分为免疫增强、免疫抑制及其对照组各 2 5只 ,分别用皮下注射牛血清白蛋白 (BSA)或腹腔注射环磷酰胺建立免疫增强和免疫抑制动物模型 ,观察血清 Ig G及 IL - 2动态变化 ,以了解免疫应答过程。在免疫反应开始增强 (E1组 ) /或开始抑制 (I1 组 )及免疫反应达高峰(E2 组 ) /或抑制最低 (I2 组 )时灌注取脑 ,冰冻切片 (30μm ) ,以地高辛标记的 AVPc DNA寡核苷…     

用白百破和牛痘疫苗免疫动物后,脑组织的体液和细胞免疫反应

本文旨在研究接种白百破和牛痘疫苗的豚鼠产生抗脑自身抗体的动态以及淋巴组织对脑提取物和末梢血对自身红细胞的细胞免疫反应。实验时,取体重200—250克豚鼠60只,分成三组:第一组动物用白百破疫苗免疫,隔日一次,共三次,每次皮下注射0.5毫升;第二组豚鼠心脏内注射牛痘苗,接种5个注射剂量;第三组为对照组。在不同试验时期杀死豚鼠(每期杀死4—6只)取其血清,用间接免疫荧光法检查抗脑的自身抗体。     

血管内皮生长因子与肿瘤治疗

血管内皮生长因子 (VEGF)是肿瘤血管新生的重要作用因子。在绝大多数恶性肿瘤中均呈现VEGF及其受体的高表达 ,从而形成旁 自分泌作用方式 ,促进内皮细胞分裂、增殖 ,诱导血管新生 ,并直接作用于肿瘤细胞 ,刺激肿瘤细胞生长。采用各种方法阻断VEGF与其受体的相互作用 ,可以阻断肿瘤血管新生 ,抑制肿瘤生长转移 ,为肿瘤临床治疗提供新的靶点     

广藿香油对家兔内毒素性发热的作用

 目的:探讨广藿香油对家兔内毒素性发热的解热作用及机制。方法:根据实验当天体重及基础体温将42雄性只家兔随机分为7组,分别为空白对照组、模型对照组、西药阳性组、中药阳性组及广藿香油高、中、低（2%、1%和0.5%）3个剂量组。除空白对照组外,其余6组均按1 mL/kg经耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素（2 mg/L）复制家兔内毒素性发热模型,0.5 h后经耳缘静脉给药,空白和模型对照组注射等量的0.5% 吐温80,西药、中药阳性组和广藿香油高、中、低剂量组分别注射对应剂量药物,观察各组家兔体温变化,采用放射免疫法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α（TNF-α）以及下丘脑环磷酸腺苷（cAMP）和前列腺素E2（PGE2）的含量。结果:与空白对照组相比,模型对照组家兔体温、IL-1β、TNF-α、cAMP和PGE2显著上升（P<0.01或P<0.05）;广藿香油对发热家兔的体温升高有明显的抑制作用,广藿香油高剂量组给药后1.5～5.5 h,家兔体温分别升高(1.06±1.55)、(1.62±1.36)、(1.38±1.22)、(0.98±0.98)和(0.48±0.95) ℃,广藿香油中剂量组给药后3.5～5.5 h,体温分别升高(1.47±0.73)、(1.15±0.68)和(0.63±0.54) ℃,广藿香油低剂量组给药后各时点均有降低发热家兔体温的趋势;广藿香油可明显抑制血清中TNF-α和下丘脑中cAMP含量的升高,有降低血清中IL-1β和下丘脑中PGE2含量升高的趋势。结论: 广藿香油对家兔内毒性发热有显著解热作用,其机制可能与抑制血清中TNF-α和下丘脑中cAMP含量升高有关。     

重组鼠疫组分疫苗毒理学研究

目的研究重组鼠疫组分疫苗的毒理学作用以评价其安全性,为进一步临床研究提供实验依据。 方法对重组鼠疫组分疫苗进行急性毒性试验,将疫苗1次给予小鼠后,观察所产生的毒性反应和死亡情况,及小鼠对该药物的最大耐受量。分别进行小鼠和豚鼠的异常毒性试验,观察动物有无异常反应,7d后每只动物体重变化。进行家兔的局部刺激试验,注射给药后对动物和注射部位进行肉眼观察,取注射局部皮肤组织进行病理检查。进行豚鼠的全身过敏试验,将致敏的动物静脉快速注射攻击,观察豚鼠有无过敏症状。 结果2种浓度疫苗经腹腔和皮下2种途径注射小鼠,均未引起小鼠的异常症状和死亡,小鼠对重组鼠疫组分疫苗的最大耐受量大于10000μg／kg。小鼠和豚鼠的异常毒性试验表明,注射后7d每组动物均全部健存、无异常反应,且7d后每只动物体重均有增加,均符合2005年版《中华人民共和国药典》三部要求。局部刺激试验中疫苗对家兔注射局部皮肤未引起明显的组织病理学改变。全身过敏试验未出现任何异常反应。 结论重组鼠疫组分疫苗的急性毒性试验、异常毒性试验、局部刺激试验和全身过敏试验毒理学实验结果显示,重组鼠疫组分疫苗用皮下注射的途径进行免疫是安全的。     

VEGF/bFGF复合多肽疫苗对雌性小鼠的毒性及其生殖的影响

目的:初步探究血管内皮生长因子(VEGF)/碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)复合多肽疫苗(VEGF/b FGF complex peptide vaccine,VBP3)对雌性小鼠的毒性及其生殖的影响。方法:通过镍离子亲和层析柱纯化VBP3蛋白,将纯化获得的VBP3免疫雌性BALB/c小鼠,酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测小鼠血清抗体效价和特异性,监测亲本小鼠体重,测定亲本小鼠脏器重量并对小鼠脏器进行HE染色观察;将免疫小鼠与未免疫雄性小鼠交配后,测定F1代小鼠存活率、体重、相关脏器重量,并对相关脏器进行HE染色观察。结果:间接ELISA检测结果显示免疫小鼠血清中抗VEGF、抗b FGF抗体滴度分别为1∶3 000、1∶20 000,且免疫组F1代小鼠能检测出低滴度的抗b FGF抗体,但抗VEGF抗体不能检出。在小鼠生产率实验中,免疫组与对照组崽鼠数目未见明显差异,但免疫组F1代小鼠存活率较对照组降低(P0.05)。在亲本小鼠中,免疫组小鼠各脏器重量与对照组比较均未有差异,而在F1代小鼠中,2个组别的小鼠肝脏重量存在差异,但其它脏器重量未有差异;HE染色显示,在亲本小鼠中,2个组别小鼠的各脏器形态未有明显差异;在F1代小鼠中,免疫组F1代小鼠的肝脏与对照组相比存在形态差异。结论:VEGF/b FGF复合多肽疫苗未对亲本小鼠主要脏器造成直接损伤,但对亲本小鼠的生殖及F1代小鼠健康具有一定的影响。     

新型可注射可降解磷酸钙骨水泥的生物相容性

背景：体外实验已证实新型磷酸钙骨水泥有良好的可注射性、力学性能、抗溃散性及体外降解性能。 目的：验证新型可注射、可降解磷酸钙骨水泥的生物相容性。 方法：①急性毒性实验：分别向昆明小鼠尾静脉可注射新型磷酸钙骨水泥浸提液与生理盐水。②热源实验：在新西兰兔耳缘静脉注射新型磷酸钙骨水泥浸提液。③溶血实验：在兔抗凝血分别加入新型磷酸钙骨水泥浸提液、生理盐水及双蒸水。④迟发型超敏反应实验：在豚鼠肩胛骨内侧部位分别注射可注射新型磷酸钙骨水泥浸提液与生理盐水,并进行敷贴激发实验。⑤体外细胞毒性实验：在L929系小鼠成纤维细胞株培养液中分别加入可注射新型磷酸钙骨水泥浸提液、聚乙烯浸提液及苯酚溶液。⑥微核实验：分别在昆明小鼠腹腔注射可注射新型磷酸钙骨水泥浸提液、生理盐水与环磷酰胺。⑦肌肉植入实验：将新型磷酸钙骨水泥植入新西兰兔脊柱两侧肌肉内。 结果与结论：新型可注射磷酸钙骨水泥无毒,无刺激性及致敏性,无热源反应,具有良好的血液相容性,植入动物肌肉后为非组织刺激物,具有良好的生物相容性,因而具有较好的生物安全性。     

Sensitization induced in guinea pigs with beta-propiolactone-treated serum albumin: experimental evidence for the cause of allergic reactions in humans receiving human diploid cell rabies vaccines

beta-Propiolactone-treated (BPL-T) homologous serum albumin caused anaphylaxis in guinea pigs with a frequency and severity equal to that of guinea pigs inoculated with human albumin. Untreated guinea pig serum albumin did not cause any reactions in these animals. Some recipients of current rabies vaccine produced in human diploid cells available in the USA develop systemic allergic reactions, usually following booster immunization. The BPL-T human albumin component of the vaccines was believed to be the cause of the complications. Our studies support this conclusion.     

原位生长纳米羟基磷灰石晶须增强β-磷酸三钙多孔支架的生物安全性

背景：通过纳米羟基磷灰石原位生长明显提高了磷酸钙支架的强度与韧性。 目的：体外评价纳米羟基磷灰石晶须/β-磷酸三钙(nHAW/β-TCP)作为人工骨支架材料的生物相容性。 方法：急性全身毒性试验：30只小白鼠随机分为静脉实验组,腹腔实验组和对照组,分别注射浸提液及生理盐水,24,48,72 h观察动物的一般状态。溶血试验：材料浸提液与稀释人鲜血混合观察红细胞溶解情况,545 nm下检测A值计算溶血率;致敏试验：16只豚鼠随机分为实验组、阴性对照组和阳性对照组,每只豚鼠脊柱两侧皮内注射等体积nHAW/β-TCP支架材料浸提液、生理盐水及二硝基氟苯。于注射后即刻和24,48,72 h观察局部皮肤反应。细胞毒性试验：材料浸提液培养细胞进行细胞形态大体观察,采用CCK-8法观察细胞活性。 结果与结论：急性全身毒性试验：人工骨浸提液静脉及腹腔注射后不引起小鼠呼吸、进食改变或死亡,体质量稳定。溶血试验：nHAW/β-TCP的溶血率小于ISO规定的5%,可认为这种材料无溶血作用。致敏试验：豚鼠皮内注射后未出现过敏反应。细胞毒性试验：CCK-8细胞毒性试验显示不同浓度人工骨浸提液的细胞毒性为0级。提示nHAW/β-TCP复合支架不引起全身毒性反应、溶血反应和过敏反应,且无细胞毒性,生物相容性良好,符合组织工程人工骨支架材料的应用要求。     

Inhibition of experimental allergic encephalomyelitis by carrier administered prior to challenge with encephalitogenic peptide-carrier conjugate

Guinea pigs can be rendered unresponsive to experimental allergic encephalomyelitis (EAE) challenge by prior injections of myelin basic protein (BP) or peptides derived from BP. The synthesized tryptophan-containing peptide (TrpP, corresponding to residues 114-122) which is the primary encephalitogenic sequence in BP (for guinea pigs) had been conjugated to the non-central nervous system protein bovine serum albumin (BSA) and used for EAE challenge. It has been shown in this study that prechallenge treatment with the BSA carrier alone can significantly inhibit the induction of EAE by TrpP-BSA conjugate. That carrier treatment is immunologically specific was determined when prior treatment with cytochrome c did not protect animals from EAE challenge with TrpP conjugated to BSA. In addition, in disease induced with BP or TrpP, and while TrpP did protect guinea pigs challenged with TrpP, it did not protect those challenged with BP. This last finding raises the possibility of a second encephalitogenic sequence in BP or an important role for the carrier in the TrpP conjugate.     

构建糖尿病膀胱病豚鼠模型及其尿动力学评价

背景：糖尿病性膀胱病是糖尿病患者最常见的慢性并发症之一,建立糖尿病膀胱病动物模型为相关研究提供实验动物平台。 目的：建立糖尿病膀胱病豚鼠模型并进行尿动力学评价。 方法：50只英国种短毛雌性豚鼠,实验组(n=42)以单次腹腔注射链脲佐菌素法诱导糖尿病豚鼠,对照组(n=8)注射相应剂量空白枸橼酸缓冲液,分别在9周和12周时行尿动力学检查,确定膀胱功能失代偿豚鼠即糖尿病性膀胱病组和代偿豚鼠即代偿组豚鼠尿动力学特点。 结果与结论：42只豚鼠有20只成功诱导出糖尿病。糖尿病豚鼠中,9周时9只糖尿病组豚鼠,6只膀胱功能代偿,3只失代偿;12周时,另外9只糖尿病组豚鼠,1只膀胱功能代偿,8只失代偿(89%)。糖尿病性膀胱病组豚鼠残余尿量增加(0.72±0.08) mL、最大逼尿肌压下降(0.63±0.05) kPa、膀胱容量增加(2.01±0.05) mL及膀胱顺应性增加(3.47±0.41) mL/kPa,与对照组及代偿组比较,差异均存在显著性意义(P < 0.001)。豚鼠一般可在诱导糖尿病成功后12周发生糖尿病性膀胱病,表现出膀胱残余尿量增加等相应的尿动力学改变。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

新鲜羊膜致I型超敏反应的变应原性研究

研究新鲜人羊膜的变应原性及其致敏后发生I型超敏反应的可能性。建立豚鼠全身主动过敏实验模型。分新鲜羊膜组、新鲜蛋清组(阳性对照)和PBS液组(阴性对照),每组10只豚鼠。观察豚鼠在致敏期和激发后的反应,采用化学荧光法检测外周血组胺含量,血液流变分析系统检测4项血液流变学指标(全血高切变率黏度、全血低切变率黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数)。致敏期间各组豚鼠的体重变化无明显差别(P>0.05);激发后羊膜组豚鼠与阴性组表现一致,无异常反应;羊膜组外周血组胺含量及4项血液流变学指标均与阴性对照无明显差别(P>0.05),与阳性对照有显著性差异(P<0.01)。经规范化无菌处理后的新鲜羊膜,一般不具有变应原性,不会引起I型超敏反应。     

Immunogenic properties of synthetic fragments of influenza virus hemagglutinin, conjugated with a carrier protein

Immunogenic properties of synthetic peptides corresponding to areas 122-133, 136-147, and 154-164 of the heavy chain of A/Aichi/2/68 virus HA were studied in two biological models: rabbits and guinea pigs. Peptides 122-123 and 136-147 together comprise the nearly compete antigenic determinant A, and peptide 154-164 is a part of determinant B. Both animal species immunized with peptide conjugates with bovine serum albumin produced a high immune response to all hapten-peptides. Comparative studies of rabbit and guinea pig sera by hemagglutination-inhibition tests revealed differences in antibody titres (1:10-1:40 for rabbits and 1:512-1:1024 for guinea pigs), the highest titres in both models being observed with peptide 136-147. Examinations of the virus-neutralizing capacity of the sera showed this property to be possessed by anti-(136-147) and anti-(154-164)E, the anti-(136-147) being slightly more active both for rabbits and for guinea pigs.     

Antigen-specific demyelination and significance of the bystander effect in peripheral nerves.

In an experiment designed to evaluate bystander demyelination in peripheral nerve, immune reactions to tuberculin and albumin failed to induce demyelination, except in animals previously sensitized to a myelin component. The peripheral nerves of tuberculin-sensitized rats and guinea pigs and rabbits were examined at intervals from 8 to 144 hours after intraneural challenge with purified protein derivative (PPD). The results were compared with the immune reaction produced by endoneurial injection of bovine serum albumin (BSA) in rats sensitized to BSA in Freund's complete antigen (FCA). Tuberculin-sensitized rats responded to endoneurial PPD injection by developing perivascular lymphocytic infiltrates which were most severe 5 days after injection. Albumin-sensitized rats responded within hours of BSA injection, showing severe endoneurial edema due to vasculitis with extravasation of polymorphonuclear leukocytes, red cells, and fibrin. The reaction tapered off within 2 days. No significant demyelination occurred in either group. However, demyelination was elicited when the hapten galactocerebroside (GC) was included in the sensitizing inoculum. Schwann-cell necrosis was visible 2 days after endoneurial challenge injection, and demyelination became extensive 5 days after injection. The findings were compared with those after direct injection of anti-GC-antibody, which produced demyelination by lysis of Schwann cells. In rabbits the occurrence of demyelination correlated with the presence of circulating antibodies to GC.