辣椒素对人结肠癌SW480细胞株增殖作用的影响

目的了解辣椒素对人结肠癌SW480细胞株增殖作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用MTT检测法,观察终浓度100-400μmol/L的辣椒素作用24、48 h对人结肠癌SW480细胞株生长作用的影响;采用流式细胞仪检测400μmol/L辣椒素作用人结肠癌SW480细胞株后其细胞周期变化和凋亡率。结果辣椒素能抑制结肠癌SW480细胞株增殖,呈浓度、时间依赖性。在400μmol/L辣椒素作用下,结肠癌SW480细胞株停滞于G0/G1期。辣椒素作用24、48 h,SW480细胞凋亡率升高（F=8.73、8.10,q=4.86-7.30,P〈0.01）。结论辣椒素抑制SW480细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能是阻滞细胞周期于G0/G1期。     

阿司匹林经核因子-κB信号通路抑制胃癌细胞株AGS生长

目的 研究阿司匹林是否通过阻断核因子-κB（NF-κB）信号通路对胃癌细胞AGS增殖及周期产生影响。 方法 培养胃癌细胞株AGS,MTT法检测阿司匹林在不同浓度和不同作用时间下对AGS细胞增殖的影响;流式细胞术检测阿司匹林对细胞周期的影响;western blotting 和免疫荧光法检测阿司匹林对AGS细胞 NF-κB p65表达的影响。 结果 阿司匹林在0.1~10 mmol/L浓度区间内,随浓度增加和时间延长,对AGS细胞的抑制率逐渐增加。细胞周期中DNA合成前期(G0/G1期)的细胞比例增加,DNA合成期（S期）细胞比例下降。随阿司匹林浓度增加和作用时间延长,AGS细胞 NF-κB p65的表达渐降。 结论 阿司匹林抑制胃癌细胞AGS的增殖, 诱导细胞G0/G1期阻滞,其作用机制可能是通过阻断NF-κB信号通路实现的。     

海龙基因酶注射液抑制结肠癌细胞生长的研究

目的:观测海龙基因酶注射液对体外培养的人结肠癌细胞株HT-9、SW480的抑制效应,并初步探明其发挥抑制作用的机制。方法:体外培养HT-9、SW480细胞,使用MTT法检测海龙基因酶对正常细胞增殖的抑制作用。利用报告基因技术,检测转染荧光素酶报告基因后的SW480细胞内NF-κB相对活性,观察海龙基因酶对细胞NF-κB活性的影响。分离细胞胞质蛋白,使用免疫蛋白印迹技术检测各组细胞内NF-κB抑制蛋白(IκBα)的含量,观察海龙基因酶对IκBα的影响。结果:海龙基因酶注射液可以有效地抑制两种结肠癌细胞的增殖,并具有良好的剂量-效应关系。荧光素酶报告基因检测结果表明TNF-α可明显增强NF-κB活性(P<0.05),而海龙基因酶可抑制这种激活作用(P<0.05);免疫蛋白印迹实验表明,海龙基因酶可有效抑制细胞内IκBα的降解。结论:海龙基因酶注射液可以抑制IκBα的降解,从而抑制NF-κB活性并影响结肠癌细胞增殖。     

二烯丙基二硫对人结肠癌SW480细胞增殖抑制的作用

目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide，DADS)对人结肠癌细胞系SW480增殖抑制作用及机制。方法以人结肠癌SW480细胞为实验研究对象，通过MTT法测定DADS对SW480细胞的增殖抑制效应，采用HE染色及流式细胞仪检测药物作用前后细胞形态学及细胞周期分布等方面的变化。结果MTT法测定结果显示DADS可抑制SW480细胞增殖。呈浓度依赖性；形态学观察发现DADS诱导SW480细胞呈现出成熟分化的特征；随着DADS浓度加大，阻滞在G2／M期的细胞数目增多，亚二倍体峰逐渐增高。结论DADS可抑制人结肠癌SW480细胞增殖，使癌细胞阻滞于G2/M期。     

槲皮素对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用

目的:观察槲皮素对体外培养的人结肠癌SW480细胞的增殖抑制作用。方法:观察不同浓度(5、10、20、40、80、160μmol/L)的槲皮素及50mg/L的5-Fu(阳性对照组)在不同时间(24、48、72h)对SW480细胞增殖的影响。运用细胞计数试剂盒检测法(CCK-8)检测槲皮素对SW480细胞生长的影响;光学显微镜和电子显微镜下观察槲皮素处理后SW480细胞形态结构的变化;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析槲皮素对SW480细胞的细胞周期分布及凋亡率的影响。结果:CCK-8法检测显示槲皮素对SW480细胞的增殖有抑制作用,其抑制作用随着作用浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05);经槲皮素处理的SW480细胞与阳性对照组比较,呈明显凋亡状态;PI染色FCM分析发现槲皮素以浓度依赖方式诱导SW480细胞G2/M期细胞累积,且细胞凋亡率随药物浓度增加而增加(P<0.05)。结论:槲皮素对人结肠癌SW480细胞的增殖有抑制作用,且能诱导SW480细胞凋亡,是一种高效低毒的药物。     

和厚朴酚对结肠癌细胞生长影响及Caspase凋亡途径相关蛋白的表达研究

目的:探讨和厚朴酚对人结肠癌(SW480)细胞增殖抑制作用及诱导Caspase凋亡途径的研究.方法:利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时问下对SW480细胞体外增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst33258荧光染色检测及Caspase-3,-8,-9 酶活性检测方法和厚朴酚诱导下结肠癌SW480细胞凋亡指标及路径.结果:MTT结果显示和厚朴酚具明显抑制SW480细胞的体外增殖,其抑制率存在剂量和时间依赖性;药物处理24,48,72 h的IC50值分别是54.36、44.72、36.20 μmol/L.和厚朴酚作用细胞后,G0/G1期的细胞比例随药物浓度增加而逐渐增多(P<0.05),表明和厚朴酚能阻滞细胞于G0/G1期.荧光染料 Hoechst33258染色结果显示.细胞核出现典型的凋亡小体.Caspase家族蛋白酶活性检测结果,胞内Caspase-3,-8,-9酶家族分别被激活.其活性随不同时间点升高(P<0.05).结论:和厚朴酚能明显抑制人结肠癌SW480细胞体外增殖,并诱导大肠癌细胞SW480通过激活Caspase途径发生凋亡.     

TLR2通过PI3K/Akt和NF-κB通路促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭

目的探讨Toll样受体2(TLR2)通过PI3K/Akt和NF-κB通路促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭发生的机制。方法于陕西省咸阳市泾阳县医院普通外科采集20例配对的结肠癌组织及正常癌旁组织,其中男12例,女8例,采用免疫组化染色法检测人结肠癌组织及正常癌旁组织中TLR2表达。采用TLR2激动剂Pam3Cys(P3C)(0.1、1.0、10.0μg/mL)处理SW480及HCT116细胞作为观察组(P3C组),未作处理的细胞作为空白对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测人结肠癌细胞株HCT116、SW480增殖情况。采用划痕试验及Transwell小室检测细胞迁移能力及侵袭能力。采用蛋白免疫印迹法检测TLR2对结肠癌细胞PI3K/Akt和NF-κB通路的影响。结果免疫组化染色结果显示:结肠癌组织中TLR2蛋白表达阳性率为80%(16/20),明显高于正常癌旁组织的35%(7/20,P0.05)。划痕试验结果显示:HCT116经P3C处理后48h迁移率显著高于0h迁移率(P0.05);SW480经P3C处理后48h迁移率显著高于0h迁移率(P0.05)。Transwell试验结果显示:HCT116经P3C处理后穿透基底膜细胞数明显高于空白对照组(P0.01);SW480经P3C处理后穿透基底膜细胞数明显高于空白对照组(P0.01)。采用10.0μg/mL P3C刺激HCT116、SW480细胞,随着时间推移TLR2蛋白表达逐渐升高,磷酸化Akt及NF-κB表达显著升高。结论 TLR2高表达于结肠癌组织,可通过PI3K/Akt和NF-κB通路促进肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭。     

三氧化二砷联合硼替佐米对K562细胞增殖和凋亡的影响及其机制的实验研究

本研究探讨三氧化二砷（As2O3）单独或联合硼替佐米（Bor）对髓系白血病细胞系K562细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。不同浓度的As2O3、Bor处理细胞24、48h,采用MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测单用As2O3、Bor及二者联用的细胞凋亡率及细胞周期的变化;免疫组织化学法分析各组核转录因子（NF-κB）的表达水平。结果表明,As2O3（0．1-0．8μmol／L）和Bor（5-50nmol／L）均能抑制K562细胞的增殖,且与作用时间和药物浓度有关,时间越长,浓度越大,抑制越明显（P〈0．05）;Bor和As2O3作用48h的IC50值分别为20nmol／L和0．6μmol／L。As2O3（0．5μmol／L）或Bor（10nmol／L）分别单独处理细胞24h,K562细胞凋亡增加,联合用药组的细胞凋亡率高于单药组（P〈0．01）。As2O3或Bor处理K562细胞6h时细胞周期分布显示：As2O3组细胞阻滞于G0／G1期,Bor组细胞阻滞于G2／M期。As2O3或Bor分别单独处理细胞24h,NF-κB表达阳性率及积分较对照组明显降低（P〈0．05）,联合用药组的NF-κB表达阳性率及积分较As2O3及Bor单用组均明显降低（P〈0．01）。结论：As2O3及Bor单药均可以直接抑制K562细胞增殖,促进凋亡,两药小剂量联合作用后,细胞增殖抑制及促凋亡作用较单药明显增强。细胞周期阻滞点的不同及NF-κB表达的下降可能是As2O3和Bor联用后协同作用的机制之一。     

NF-κB抑制剂PDTC对急性白血病细胞HL-60增殖与凋亡的影响

目的:探讨核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)对急性白血病细胞HL-60增殖与凋亡的影响。方法:用PDTC 0、25、50、100μmol/L处理HL-60细胞24、48、72 h,CCK-8实验检测细胞增殖抑制率,Hoechst染色检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、细胞周期蛋白D1 (cyclinD1)、活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleaved caspase 3)、cleaved caspase 8及NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果:25、50、100μmol/L PDTC处理HL-60细胞24、48、72 h后,同一时间点下随着PDTC浓度升高,细胞增殖抑制率越高(r=0.924,P 0.01),在同一PDTC浓度下,随着时间推移,细胞增殖抑制率增高(r=0.952,P 0.01)。在25、50、100μmol/L PDTC处理HL-60细胞48 h后,与对照组比较,PDTC能显著提高HL-60细胞凋亡率,并使细胞周期阻滞在G1期(P 0.01); PDTC能显著下调HL-60细胞BCL-2,cyclinD1、p-NF-κB p65表达(P 0.05),上调BAX、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 8表达(P 0.01); 50、100μmol/L PDTC能显著下调HL-60细胞p-NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)表达(P 0.01)。结论:PDTC能显著抑制急性白血病细胞HL-60的增殖,并诱导细胞凋亡。     

高三尖杉酯碱对K562细胞NF-κB和BCL-2蛋白表达的影响

本研究旨在探讨高三尖杉酯碱（HHT）对K562细胞增殖、凋亡及BCL-2和NF-κB蛋白表达的影响。不同浓度HHT作用K562细胞后用MTT法、流式细胞仪、Western blot等方法分别检测细胞增殖、凋亡、BCL-2及NF-κB蛋白表达水平。结果表明,HHT作用48h,浓度依赖性抑制K562细胞增殖,Ic50为43．89rig／ml。HHT10ng／ml作用48h,K562细胞凋亡率明显增高;细胞周期阻滞于G0／G1期;BCL-2和NF-κB蛋白表达水平明显低于对照组（P〈0．05）。结论：HHT对K562细胞有显著的增殖抑制、细胞周期阻滞和凋亡诱导作用,抑制NF-κB和BCL-2表达可能是其抗CML的机制之一。     

薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响

目的观察薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响。方法结肠癌SW480细胞分为4组,其中A组为对照组,B,C,D组分别在培养基中给予5,10,20mg／L薏苡仁酯处理。采用噻唑蓝比色法检测4组细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果作用24h后,B,C,D组的抑制率分别为16．43％,22．51％,31．24％,呈剂量依赖关系,与A组比较差异均有统计学意义（P〈O．05）;给药后24hD组细胞G0～G,期比例较A组增高,S期细胞比例较A组降低（P〈O．05）;D组24,48h凋亡率明显高于A组,差异有统计学意义（P（0．05）。结论薏苡仁酯可在体外直接抑制结肠癌细胞的增殖,诱导凋亡,在结肠癌中药防治中有一定作用。     

因子Ⅶa依赖组织因子激活PAR2/ERK/NF-κB抑制结肠癌SW620细胞caspase-3表达

摘要：目的：探讨凝血因子Ⅶa对结肠癌SW620细胞增殖能力以及表达凋亡分子天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的影响及其作用机制。 方法：用一定剂量的蛋白酶激活受体2激动剂（PAR2-AP）、凝血因子Ⅶa等刺激物处理SW620细胞,观察细胞生长情况;western blot和定量PCR分别检测细胞表达caspase-3蛋白质及mRNA水平;利用相关抗体、拮抗剂和抑制剂等观察因子Ⅶa对caspase-3表达的效应变化。 结果：PAR2-AP（100 μmol/L）及因子Ⅶa（10 nmol/L）能够明显促进SW620细胞的生长,减少细胞caspase-3蛋白质和mRNA的表达;抗组织因子（TF）抗体（а-TF）、PAR2拮抗剂（PAR2-аAP）、ERK1/2抑制剂U0126以及NF-κB抑制剂PDTC均能逆转因子Ⅶa对SW620细胞caspase-3表达的抑制效应,而p38MAPK抑制剂SB203580对caspase-3的表达无明显的干预作用。 结论：因子Ⅶa依赖TF活化PAR2,经ERK1/2和NF-κB信号通路,抑制SW620细胞caspase-3表达,从而促进细胞的增殖与生长。     

5-FU联合热疗诱导SW480细胞凋亡及其对细胞周期的影响

目的探讨5-Fu（5-氟尿嘧啶）联合热疗诱导SW480细胞（人结直肠癌细胞株）的增殖抑制率、细胞周期各时相的影响及亚细胞结构改变。方法应用MTT比色法检测SW480细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期各时相的变化,电子显微镜观察亚细胞结构变化。结果联合热疗组与5-FU组、热疗组相比差异非常显著,P〈0．01。且SW480细胞周期进程发生明显改变,G1期细胞增多、S期细胞减少、G2／M细胞相对增多,细胞凋亡率升高。电子显微镜结果显示染色质趋边凝集、线粒体膜、溶酶体膜、内质网膜系统明显改变,可见凋亡小体。结论5-FU联合热疗可显著提高SW480细胞增殖抑制率,抑制SW480细胞G1期向S期转化进程,诱导细胞凋亡及亚细胞结构改变。     

过氧化氢作用HepG2对NF-κB途径和细胞敏感时相的相关研究

背景低剂量活性氧可以促进正常细胞和肿瘤细胞增殖、分化,但目前对此过程中所涉及的信号途径及其与细胞敏感时相的关系尚认识不足.目的通过阻断细胞内NF-κB途径和诱导不同细胞时相,观察过氧化氢促进HepG2细胞增殖与NF-κB途径和细胞敏感时相的关系,为抑制、干预肿瘤细胞的生长及改善患者预后功能提供理论依据.设计完全随机实验研究.单位解放军第四军医大学预防医学系毒理学教研室.对象实验于2004-04/2004-08在解放军第四军医大学预防医学系毒理学教研室完成,对象为人肝癌细胞株HepG2细胞,由解放军第四军医大学基础部病理学教研室惠赠.方法以不同剂量过氧化氢直接作用于培养的HepG2细胞,筛选能够促进HepG2细胞增殖的过氧化氢浓度.用50μmol/L的过氧化氢分别处理经NF-κB抑制剂(PDTC)预处理的HepG2细胞和用胸腺嘧啶核苷同步化得到的G1,G2/M,S期HepG2细胞.主要观察指标细胞分别经过氧化氢处理1,24,48 h后,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞吸光度值,比较细胞增殖活性.结果50 μmol/L的过氧化氢作用HepG2细胞24 h后,MTT实验所测吸光度值与对照组相比显著升高(t=0.001,P＜0.01).20 μmol/L PDTC预处理HepG2细胞2 h后,给予50μmol/L过氧化氢作用细胞,MTT实验所测吸光度值与对照组相比差异无显著性意义(t=0.211,P＞0.05).50 μmol/L的过氧化氢作用G期HepG2细胞24 h后,MTT实验所测吸光度值与对照组相比显著升高(t=0.031,P＜0.05).结论低剂量过氧化氢可诱导HepG2细胞增殖,该过程可能包含依赖NF-κB的信号途径的参与;过氧化氢诱导HepG2细胞增殖在细胞周期的不同时相效应敏感性不同,主要诱导G1期细胞增殖.此结论将为肿瘤干预和改善其预后提供实验学数据.     

硼替佐米与阿糖胞苷联用对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bor)单独或联合阿糖胞苷(Ara-C)对髓系白血病细胞系K562细胞增殖、凋亡的影响,并分析可能的作用机制.方法以20 nmoL/L的Bor、0.2μg/ml的Ara-C分别单独处理以及小同序贯方式联合处理K562细胞48 h后,MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞术榆测细胞凋亡率.并在两药分别单独处理6 h后用SP免疫组化法分析细胞NF-κB活性及流式细胞术检测细胞周期的变化.结果不同方式联合用药组细胞生长抑制率与细胞凋亡率均高于 两药分别单独处理组(P<0.01),而且在各联合用药组中,先加入Ara-C预处理6 h后冉序贯加入Bor组的细胞生长抑制率和细胞凋亡率分别为(81.5±4.0)%和(29.2±3.1)%,均高于先加入Bor预处理6 h后序贯Ara-c组[(54.1±4.2)%、(18.7±3.5)%]和同时加入组[(66.2±2.8)%、(21.1±2.2)%](P<0.01).Bor单独处理细胞6 h,细胞NF-κB活性减低,细胞阻滞于G_2/M期;Ara-C单独处理细胞6 h,NF-κB活性增高,G_1期细胞明显增多.结论 Bor可有效抑制K562细胞增殖,并诱导其凋亡,与Ara-C联合,这种效应显著增强,尤以Ara-C预处理后序贯Bor组影响最大.Ara-C预处理后,对NF-κB及细胞剧期的影响可能足发挥更大协同效应的原因.     

双糖链蛋白聚糖对大肠癌细胞生长作用研究

目的研究Biglycan对大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭、凋亡等生长作用影响。方法采用Transwell方法检测Biglycan对大肠癌细胞HT-29和SW480的侵袭能力影响;AV／PI染色检测细胞凋亡情况;Westernblot法检测加药处理前后细胞内Rb、pRb和Ras表达变化。结果100nmol／LBiglycan和50nmol／I。Biglycan可抑制大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭转移,同时可诱导HT-29、SW480细胞发生凋亡;经Biglycan处理后,细胞内Rb总蛋白无显著性变化,pRb和Ras出现下调趋势。结论Biglycan可抑制大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭转移、诱导细胞凋亡,下调pRb和Ras的表达、调控细胞周期从而抑制细胞生长为其可能的作用机制。     

Tetramethylpyrazine inhibits proliferation of colon cancer cells in vitro

BACKGROUNDColon cancer is one of the most common malignancies worldwide, and chemotherapy is a widely used strategy in colon cancer clinical therapy. However, chemotherapy resistance is a major cause of disease recurrence and progression in colon cancer, and thus novel drugs for treatment are urgently needed. Tetramethylpyrazine (TMP), a component of the traditional Chinese medicine Chuanxiong Hort, has been proven to exhibit a beneficial effect in tumors. AIMTo investigate the potential anticancer activity of TMP in colon cancer and its underlying mechanisms.METHODSColon cancer cells were incubated with different concentrations of TMP. Cell viability was evaluated by crystal violet staining assay and cell counting kit-8 assay, and cell apoptosis and cell cycle were assessed by flow cytometry.RESULTSTMP significantly inhibited the proliferation of colon cancer cells in a dose- and time-dependent manner. In addition, flow cytometry revealed that TMP induced cell cycle arrest at the G0/G1 phase. TMP treatment caused early stage apoptosis in SW480 cells, whereas it caused late stage apoptosis in HCT116 cells.CONCLUSIONOur studies demonstrated that TMP inhibits the proliferation of colon cancer cells in a dose- and time-dependent manner by inducing apoptosis and arresting the cell cycle at the G0/G1 phase. Our findings suggest that TMP might serve as a potential novel therapeutic drug in the treatment of human colon cancer.