郁金提取物对福尔马林致痛小鼠海马NF-κB蛋白表达和外周血清IL-1β含量的影响

目的:探讨郁金提取物对福尔马林引起的炎性疼痛小鼠镇痛作用的机制。方法:采用清醒小鼠单侧足底皮下注射5%福尔马林20μL,取小鼠海马组织和外周血清,采用免疫组化法测定各组小鼠海马组织CA1区核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达,采用放射免疫法测定各组小鼠外周血清白介素-1β(IL-1β)含量的变化。结果:郁金提取物能显著降低福尔马林模型小鼠外周血清中IL-1β的含量和海马组织CA1区NF-κB蛋白的表达(P0.01),其结果具有一定的剂量相关性。结论:郁金提取物对福尔马林引起的炎性疼痛干预作用可能与抑制NF-κB和及其下游因子IL-1β参与的炎症反应有关。     

黄芩苷对溃疡性结肠炎患者NF-κB及磷酸化NF-κB表达的影响

目的：本研究旨在探讨UC患者外周血单个核细胞NF-κB及磷酸化NF-κB及相关细胞因子在溃疡性结肠炎（UC）中的表达,并进一步探讨体外黄芩苷干预的作用.方法：应用westernblotting蛋白水平检测UC患者外周血单个核细胞NF-κBp65和Phospho-NF-kBp65,用ELISA法检测血清IFN-r、IL-4、IL-6、IL-10水平及体外黄芩苷干预下的检测上述指标.结果：与健康对照组和IBS-D组相比较,p-NK-FB明显增高,NK-FB明显下降,p-NK-FB/NK-FB明显增高,差异有显著性（P〈0.05）;IBS-D组和健康对照组之间无显著性差异（P〉0.05）.体外培养体外黄芩苷干预下,在40umol浓度干预下p-NK-FB/NK-FB较未干预前、DMSO干预、5umol干预、10umol和20umol浓度干预下下降,存在显著性差异（P〈0.05）.从ELISA检测较高浓度的黄芩苷能够明显抑制IFN-r、IL-6等细胞因子,可以使IL-4、IL-10升高.结论：黄芩苷作为黄芩汤的重要组成成分之一,可能是一种潜在的免疫抑制剂,可能抑制p-NK-FB/NK-FB,调节免疫平衡而缓解溃疡性结肠炎的炎症反应,为深入研究UC的发病机制及新药开发提供理论基础.     

金银花对病毒性心肌炎小鼠Caspase-3、NF-κB表达的影响

目的探讨中药金银花对病毒性心肌炎小鼠Caspase-3、NF-κB表达的影响。方法将80只雄性BALB/c小鼠随机分为4组,每组20只,分别为正常对照组、模型组、金银花低剂量组和金银花高剂量组。模型组和金银花高、低剂量组小鼠均腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3),建立病毒性心肌炎模型。金银花高、低剂量组于注射病毒后30 min开始灌服金银花药液,每日1次,共14 d;模型组以0.9%NaCl溶液灌胃;正常对照组用不含病毒的等量Eagle液腹腔注射,等量的0.9%NaCl溶液灌胃。各组分别在14 d随机抽取15只小鼠处死,HE染色观察心肌病理改变,免疫组化检测心肌组织中Caspase-3、NF-κB的表达。结果模型组的Caspase-3、NF-κB表达水平均明显高于正常对照组,金银花高、低剂量组的Caspase-3、NF-κB表达较模型组均明显减轻;金银花高剂量组的Caspase-3、NF-κB表达水平较金银花低剂量组减轻。结论金银花可明显抑制病毒性心肌炎小鼠Caspase-3、NF-κB的表达,为临床应用金银花治疗病毒性心肌炎提供了实验依据。     

康莱特注射液对免疫低下小鼠的免疫功能及NF-κB蛋白表达的影响

目的：观察康莱特注射液对免疫低下小鼠的免疫功能以及核因子-kappaB（NF-κB）和IκB蛋白表达的影响。方法：将40只C57BL/6小鼠随机分为KLT高、低剂量组、模型组和空白对照组各10只。除空白对照组外,其余小鼠给予环孢素A建立免疫低下模型,同时KLT高、低剂量组每天腹腔注射KLT 25、6.25 mL/kg,连续给药7 d。取脾脏称重并计算脾脏指数,并检测脾细胞中IL-2的表达及脾脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达。结果：KLT高、低剂量组脾脏指数比模型组和空白对照组显著升高（P〈0.05）;与模型组相比,IL-2的表达在KLT高、低剂量组中显著升高（P〈0.05）;与模型组比较,KLT高、低剂量组NF-κB蛋白在胞核内表达升高,IκBα蛋白在胞质中表达降低。结论：KLT在免疫低下小鼠模型中,通过提高脾脏指数、IL-2的表达,以及对NF-κB、IκBα蛋白表达的影响,以达到提高机体免疫功能的目的。     

康莱特注射液对免疫低下小鼠的免疫功能及NF-κB蛋白表达的影响

目的:观察康莱特注射液对免疫低下小鼠的免疫功能以及核因子-kappaB(NF-κB)和IκB蛋白表达的影响.方法:将40只C57BL/6小鼠随机分为KLT高、低剂量组、模型组和空白对照组各10只.除空白对照组外,其余小鼠给予环孢素A建立免疫低下模型,同时KLT高、低剂量组每天腹腔注射KLT 25、6.25 mL/kg,连续给药7 d.取脾脏称重并计算脾脏指数,并检测脾细胞中IL-2的表达及脾脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达.结果:KLT高、低剂量组脾脏指数比模型组和空白对照组显著升高(P<0.05);与模型组相比,IL-2的表达在KLT高、低剂量组中显著升高(P<0.05);与模型组比较,KLT高、低剂量组NF-κB蛋白在胞核内表达升高,IκBα蛋白在胞质中表达降低.结论:KLT在免疫低下小鼠模型中,通过提高脾脏指数、IL-2的表达,以及对NF-κB、IκBα蛋白表达的影响,以达到提高机体免疫功能的目的.     

外寒对小鼠肺组织BAFF和NF-κB表达的影响

目的:观察外寒对小鼠肺组织BAFF和NF-κB表达的影响。方法:50只昆明小鼠随机分为5组:常温对照组、4℃7天组、4℃14天组、0℃7天组、0℃14天组,置于人工气候箱中处理后取小鼠肺脏进行病理切片,ELISA法检测IgG-S和IgG-R,实时荧光定量PCR检测BAFF的表达,Western blot法检测小鼠肺组织中NF-κB蛋白的表达情况。结果 4℃7天组、0℃7天组小鼠肺部出现明显的病理的改变,肺泡内出现大量的渗出液,各实验处理组IgG-S和IgG-R较常温对照组明显升高,差异具有显著性意义,实时荧光定量PCR检测发现各处理组BAFF的表达与常温对照组比较,明显上调,Western blot结果显示各处理组NF-κB蛋白的表达较常温对照组明显增加。结论外寒通过上调BAFF和NF-κB的表达,促发机会的获得性免疫。     

山茱萸提取物对脑梗死大鼠大脑皮层一氧化氮与核转录因子-κB表达的影响

目的:观察光化学法诱导脑梗死大鼠大脑皮层一氧化氮(NO)与核转录因子-κB(NF-κB)含量的变化,以及中药山茱萸提取物(主要成分为环烯醚萜苷)对其的影响.方法:大鼠预先灌胃给药7 d后,制作光化学致脑梗死模型,采用分光光度法检测脑组织中NO和一氧化氮合酶(NOS)的变化,免疫组织化学方法检测NF-κB阳性细胞数量的变化.结果:模型组与对照组相比,出现了明显的梗死灶,脑皮层NO含量与NOS活性增加,NF-κB阳性细胞数量增多.与模型组相比,山茱萸提取物能明显减小脑梗死面积,降低脑皮层NO含量和NOS活性,并显著减少NF-κB阳性细胞数量.结论:山茱萸环烯醚萜苷可通过影响脑内NO,NF-κB的水平发挥对脑梗死的治疗作用.     

外燥对小鼠肺组织NF-κB活性的影响

目的:观察外燥对小鼠肺组织NF-κB活性的影响.方法:120只SPF级昆明种小鼠随机分为温燥组、凉燥组、常温常温组、常温燥组各30只,模拟外燥"温度-相对湿度-风"综合刺激进行造模,造模后第6、第12、第18天检测各组小鼠肺组织NF-κB活性.结果:温燥组、凉燥组第6、第12、第18天肺组织NF-κB活性均低于常温常湿...     

黄连解毒汤对老年痴呆大鼠SOD活性,MDA含量,Ⅰ-κB和NF-κB蛋白表达的影响

目的:研究黄连解毒汤(HJD)对老年性痴呆(AD)模型大鼠脑组织的保护作用。方法:Aβ1-42ICV(侧脑室)显微注射建立AD大鼠模型,50只健康SD大鼠随机分为5组,即对照组,Aβ1-42模型组(AD大鼠组),Aβ1-42+HJD低剂量组(5g.kg-1),Aβ1-42+HJD中剂量组(10g.kg-1),Aβ1-42+HJD高剂量组(15g.kg-1)。在Aβ1-42造模7天后,各组均灌胃给药(对照组和AD大鼠组给以生理盐水),1次/d,连续给药21天。采用生物化学方法检测HJD对AD模型大鼠海马组织SOD活性,MDA含量的影响,蛋白印迹检测方法检测I-κB和NF-κB蛋白的表达。结果:与对照组相比,Aβ1-42模型组大鼠海马组织SOD活性降低,MDA含量升高(P0.01,P0.05),Ⅰ-κB-NF-κB信号通路活化。HJD作用后,AD模型大鼠海马组织SOD活性升高,MDA含量降低(P0.05),并抑制Ⅰ-κB-NF-κB信号通路活化。结论:HJD通过提高SOD活性,降低MDA含量,抑制I-κB-NF-κB信号通路活化,改善AD模型大鼠的脑组织生化学改变和炎症改变,对AD有一定的改善和保护作用。     

草木犀正丁醇提取物对NF-κB和血红素氧合酶1表达的影响

目的:探讨草木犀的正丁醇提取物在炎症中的作用。方法:通过LPS干预RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型,免疫细胞化学法检验NF-κB的表达及分布变化,实时荧光定量RT-PCR法检测血红素氧合酶1(HO-1)的基因表达,Western blot法测定HO-1的蛋白表达量。结果:免疫细胞化学法结果显示药物干预时胞质被染为棕色,NF-κB多分布在胞质未被激活;仅有LPS干预时,胞核被染为棕色,NF-κB集中分布在细胞核表达增强。药物提取物干预后HO-1的mRNA表达水平明显升高,且呈剂量依赖型关系;Western blot结果显示药物干预后HO-1的蛋白表达水平也明显升高。结论:草木犀的正丁醇提取物通过抑制NF-κB的激活,同时促进HO-1的释放而发挥一定的抗炎作用。     

连梅颗粒对糖尿病大鼠腹部脂肪组织中NF-κB及IKKβ蛋白表达的影响

目的：观察连梅颗粒对自发性糖尿病大鼠腹部脂肪组织中NF-κB及IKKβ 蛋白表达的影响。方法：将高脂饲料喂养的雄性SPF级ZDF(Zucker Diabetic Fatty rat）大鼠随机分为模型组、连梅颗粒组、吡格列酮组,普通饲料喂养的雄性SPF级ZL（Zucker Lean）大鼠为正常对照组,每组各10只。连梅颗粒组按照5.1g?kg-1灌胃给药,吡格列酮组按照1.07mg?kg-1灌胃给药,连续给药12周。经Western blot法检测各组大鼠腹部脂肪组织中NF-κB、IKKβ蛋白的表达水平。结果：在治疗第12周末,模型组、吡格列酮组、连梅颗粒组大鼠腹腔脂肪组织中NF-κB、IKKβ蛋白的表达明显高于正常对照组（P<0.01）。连梅颗粒组和吡格列酮组与模型组相比均明显降低（P<0.01,P<0.05）,且连梅颗粒组优于吡格列酮组（P<0.05）。结论：连梅颗粒组在一定程度上能抑制糖尿病大鼠腹部脂肪组织中NF-κB及IKKβ蛋白的表达。     

癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠行为学变化及NF-κB信号通路的影响

目的观察癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠行为学变化及NF-κB信号通路的影响。方法 60只大鼠随机分为假手术组、模型组、苯妥英钠组(0.03 g/kg)及癫痫清颗粒低、中、高剂量组(4.74、9.47、18.94 g/kg),每组10只,灌胃给药7 d,每天1次,末次给药1 h后,假手术组大鼠注射等体积生理盐水,其他各组大鼠左侧海马CA1区单次注射海人藻酸1μg。24 h后,进行行为学检测,免疫蛋白印迹检测NF-κB信号通路中蛋白表达。结果癫痫清颗粒可降低接近反应、响指反应评分,抑制NF-κB p65及p-IκB表达,增加IκB表达。结论癫痫清颗粒可通过调控NF-κB信号通路来改善癫痫大鼠行为学变化,从而发挥抗癫痫作用。     

灭幽汤对幽门螺杆菌相关性胃炎小鼠胃黏膜组织NF-κB和IκBα表达的影响

目的探讨灭幽汤对幽门螺杆菌(H.pylori)感染小鼠胃黏膜组织核转录因子-κB(NF-κB)和核转录因子-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响及其作用机制。方法采用H.pylori菌液灌胃法造模,将造模成功的小鼠按体重分为模型组、灭幽汤组、三九胃泰组、丽珠胃三联组,除模型组每日予生理盐水外,其余组分别予灭幽汤、三九胃泰、丽珠胃三联给药。采用免疫组化法观察胃黏膜组织NF-κB和IκBα蛋白的表达情况。HE染色观察小鼠胃黏膜的病理组织改变。结果正常对照组胃黏膜细胞胞浆有少量NF-κB蛋白表达,胞核内无表达,而模型组NF-κB主要位于细胞核内。与模型组比较,灭幽汤组明显抑制胃组织细胞内NF-κB的核移位,灭幽汤组IκBα的磷酸化程度较模型组明显降低(P0.05)。结论灭幽汤可能通过对降低IκBα的磷酸化程度,抑制NF-κB蛋白表达,发挥其治疗作用。     

双表法对流感病毒感染小鼠肺组织MyD88及NF-κB P65mRNA表达的影响

目的探讨双表法对流感病毒感染小鼠肺组织MyD88及NF-κB P65mRNA表达的影响,探讨双表法的作用机制。方法将120只昆明种小鼠随机分为12组:模型组10只;正常组10只;利巴韦林对照组10只;解表药(银翘散)高、中、低剂量组各10只;固表药(玉屏风散)高、中、低剂量组各10只;双表法(银翘散+玉屏风散)高、中、低剂量组各10只。动物造模后正常组和模型组均以等体积的生理盐水灌胃,各中药治疗组分别予固表法(玉屏风散提取物)、解表法(银翘散提取物)、双表法(玉屏风散+银翘散)、利巴韦林灌胃给药。采用RT-PCR法检测MyD88及NF-κB P65mRNA表达情况。结果正常组和模型组肺组织中均可检测到MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA的表达,但模型组明显高于正常组(P0.05)。双表法高剂量组MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA表达最低,与双表法中低剂量组、解表法各剂量组、固表法各剂量组、利巴韦林组比较均有显著性差异(P均0.05)。结论流感病毒感染小鼠时激活了MyD88/NF-κB P65信号通路,双表法能较好地抑制MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA的表达。     

栀子总环烯醚萜苷对脑出血大鼠血肿周围NF-κB表达的影响

目的:研究栀子总环烯醚萜苷对大鼠脑出血后核转录因子κB(NF-κB)表达影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、尼膜同组、栀子总环烯醚萜苷(20、10mg、5mg/kg)治疗组,采用自体血注入诱发大鼠脑出血模型,每组分别在术后12、24、48和96h4个时间点取脑组织标本,免疫组化检测NF-κB蛋白表达,同时测量脑组织含水量。结果:20~10mg/kg栀子环烯醚萜苷治疗组脑出血后NF-κB P65表达水平及脑含水量明显低于脑出血组。结论:栀子环烯醚萜苷可以抑制脑出血后NF-κB活化,减少炎症因子释放,从而减轻脑水肿。     

桃仁提取物对寒热不同血瘀证大鼠内皮细胞的损伤及NF-κB表达的影响

目的:观察桃仁提取物对寒凝血瘀证和瘀热互结证的大鼠血管内皮的作用及对Caspase1、NF-κB表达的影响,探讨桃仁改善寒热不同血瘀证血管内皮功能的差异及可能的机制。方法:将70只大鼠随机分为生理盐水组(NS)、寒证模型组(M1)、寒证桃仁组(T1)、川芎对照组(C1)和热证模型组(M2)、热证桃仁组(T2)、丹参对照组(C2)。建立两种血瘀证模型,对用药组预防性灌胃给予桃仁、川芎、丹参提取液(分别为8 g/kg,8 g/kg,14 g/kg)。观察各组血管内皮损伤情况,免疫组化及原位杂交法检测损伤因子Caspase1、转录因子NF-κB的表达情况。结果:各用药组血管内皮肿胀减轻,血管壁通透性降低,红细胞漏出和纤维素渗出减少;寒证桃仁组、热证桃仁组Caspas1表达较模型组未见显著差异(P>0.05);NF-κB总蛋白:寒证桃仁组表达与模型组比较无显著差异(P>0.05),而热证桃仁组表达显著增强(P<0.05);NF-κB核蛋白:与相应模型组比较,寒证桃仁组表达显著增强(P<0.05),热证桃仁组未见显著差异(P>0.05);NF-κB mRNA:与相应模型组比较,寒证桃仁组表达未见显著差异(P>0.05),热证桃仁组表达显著增强(P<0.05)。结论:桃仁可同时改善寒热不同血瘀证体征,降低两证血管内皮细胞损伤;对于寒凝血瘀证,桃仁可能通过减少NF-κB总蛋白降解并促进其核移位,发挥转录因子功能,从而改变循环障碍状态;对于瘀热互结证,桃仁可促进NF-κB mRNA转录和NF-κB总蛋白增加,阻止其移入核内而发挥效应,这可能是桃仁干预寒凝血瘀证和瘀热互结证的不同作用方向,其潜在机制有待深入研究。     

NF-κB与疾病及中药介入

核因子NF-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)是一个大的转录因子家族,调控着多种炎症因子的表达。它在动脉粥样硬化、关节炎、哮喘、肿瘤等疾病的发展中都起了重要的作用。文章介绍了NF-κB活化的调控机制,包括经典途径和旁路途径,并对NF-κB信号通路在以上相关疾病发生过程的作用及中药对其的影响进行了探讨,尤其着重论述了NF-κB对动脉粥样硬化的影响和相关中药通过阻断或抑制NF-κB信号通路来治疗此病的最新研究成果。     

连花清瘟胶囊对脂多糖致急性肺损伤小鼠IKK/IκB/NF-κB信号通路的影响

目的探讨连花清瘟胶囊对经气管内滴注脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤引起的肺组织炎症因子和IKK/IκB/NF-κB信号通路的蛋白表达的影响。方法将急性肺损伤的100只SPF级18~20 g雄性KM小鼠随机均分为5组,LPS组,地塞米松组,连花清瘟胶囊高、中、低剂量组,另设正常对照组(n=20)。光镜下观察实验小鼠肺组织病理变化,流式细胞术检测外周血中白介素-6(IL-6)的阳性表达率,RT-PCR法检测肺组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达,Western blot检测肺组织中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达。结果与正常对照组相比,LPS组小鼠肺组织中有大量炎性细胞渗出,外周血中IL-6,肺组织中MCP-1 mRNA,NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达均明显升高;与脂多糖组相比,外周血中IL-6的阳性表达率用药组均有所下降,肺组织中MCP-1mRNA表达用药组均改善明显,肺组织中NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达为地塞米松组与高剂量组改善较明显,连花清瘟中、低剂量组也有不同程度改善。结论连花清瘟胶囊能够通过降低IKK/IκB/NF-κB信号通路的表达来减轻肺内炎症反应程度。     

糖痛方对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经PARP及NF-κB表达的影响

目的:观察中药糖痛方对DPN大鼠坐骨神经PARP及NF-κB表达的影响,并探讨其保护作用机制。方法:SD雄性大鼠75只,随机选取15只为正常组,余60只大鼠予一次性腹腔注射STZ溶液(60 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型。4周后结合缺血再灌注制备糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠模型,DPN造模成功后随机分为模型组、糖痛方小、中、大剂量组,每组15只,糖痛方小、中、大剂量组按成人6.25倍、12.5倍、25倍剂量分别给予糖痛方9.17、18.33、36.67 g/kg灌胃,1次/d,连续给药8周,正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水。实验结束后,应用Western Blot法及实时荧光定量PCR检测各组大鼠坐骨神经PARP及NF-κB的表达。结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠坐骨神经PARP-1、PARP-2蛋白和mRNA相对表达均升高;模型组NF-κB mRNA相对表达明显高于正常组(P0.01),差异具有统计学意义。经糖痛方灌胃给药8周后,与模型组比较,各中药组PARP-1、PARP-2蛋白相对表达有不同程度下降(P0.05),且下降程度与糖痛方剂量呈正相关,PARP-1、PARP-2 mRNA相对表达除糖痛方小剂量组外,糖痛方中、大剂量组PARP-1、PARP-2mRNA表达以剂量依赖性方式呈现出不同程度下降趋势(P0.05),与此同时,各中药组NF-κB mRNA相对表达也有不同程度下降。结论:中药糖痛方可通过下调DPN大鼠坐骨神经PARP及NF-κB的表达水平,抑制周围神经损伤的炎症反应,从而起到防治DPN作用。