黄芪多糖对孕早期蜕膜TLR4表达与功能的影响

目的：观察黄芪多糖通过孕早期蜕膜TLR4途径对IL-6、TNF-α分泌的影响。方法：采用流式细胞术检测孕早期蜕膜TLR4的表达,并对孕早期蜕膜进行原代培养,将其分为两大组,PBS对照组、LPS刺激组,用0、25、50、125、250mg/L黄芪多糖预处理两组蜕膜细胞48小时,再分别用PBS、LPS处理24小时,采用酶联免疫吸附试验方法检测上清液TNF-α、IL-6的分泌,用流式细胞仪检测蜕膜细胞TLR4的表达。结果：孕早期蜕膜功能性表达TLR4,用LPS刺激细胞后,TLR4表达上调,IL-6、TNF-α的分泌显著增加,用25、50、125、250mg/L黄芪多糖预处理蜕膜细胞48小时后,250mg/L黄芪多糖可以抑制TLR4表达的上调,同时可以抑制LPS刺激蜕膜细胞引起的TNF-α分泌增加,而25、50、125mg/L黄芪多糖不能抑制LPS刺激引起的TLR4表达的上调;但25、50、125、250mg/L黄芪多糖均可以引起IL-6分泌的增加。未经LPS刺激,用25、50、125、250mg/L黄芪多糖作用蜕膜细胞,蜕膜TLR4的表达及IL-6、TNF-α的分泌则无显著性变化。结论：TLR功能性表达于孕早期蜕膜;黄芪多糖可以通过改变蜕膜TLR介导的免疫功能影响母胎界面免疫微环境。     

柯里拉京对BV2细胞感染HSV-1后TLR9/MyD88通路的影响

目的:在1型单纯疱疹病毒侵袭BV2细胞后进行分子水平检测细胞内TLR9、My D88蛋白的表达及TNF-α的分泌,观察柯里拉京对BV2细胞的影响是否通过影响TLR9/My D88通路起作用。方法:构造病毒性脑炎的细胞模型(BV2细胞系)。而且经过MTT法进行核实,TCID50病毒滴度计算,需要采用Reed-Muench法。细胞随机分为6组:HSV-1+柯里拉京组、HSV-1+无菌PBS组、CPG-ODN+柯里拉京组、CPG-ODG+无菌PBS组、无菌PBS+柯里拉京组、无菌PBS+无菌PBS组(空白对照组)。Western Blotting检测TLR9、My D88蛋白的表达,ELISE法检测TNF-α的分泌。结果:HSV-1+柯里拉京组与HSV-1+PBS组相比TNF-α降低具有统计学差异(P0.05);CPG-ODN+柯里拉京组与CPG-ODG+PBS组相比TNF-α降低亦具有统计学差异(P0.05)。结论:TLR9/My D88通路可能会通过启动下游细胞因子TNF-α等介导宿主细胞在HSE中的免疫应答。柯里拉京通过降低TLR9/My D88通路的作用,减少TNF-α的分泌,发挥其治疗作用。     

柯里拉京对BV2细胞感染HSV-1后TLR9、MyD88mRNA表达的影响

目的:在1型单纯疱疹病毒侵袭感染BV2细胞后进行分子检测,分析柯里拉京对感染后BV2细胞后TLR9、My D88mRNA在BV2细胞的表达情况。方法:建立细胞模型(BV2细胞系)柯里拉京的用药浓度及干预时间。而且经过MTT法进行核实,TCID50病毒滴度计算,需要采用Reed-Muench法。细胞随机分为6组:HSV-1+柯里拉京组、HSV-1+无菌PBS组、CPG-ODN+柯里拉京组、CPG-ODG+无菌PBS组、无菌PBS+柯里拉京组、无菌PBS+无菌PBS组(空白对照组)。荧光定量聚合酶链反应(PCR)对上述每组TLR9mRNA以及My D88mRNA表达进行检测。结果:HSV-1+柯里拉京组与HSV-1+PBS组相比TLR9、My D88mRNA的表达降低有统计学差异(P0.05);CPG-ODN+柯里拉京组与CPG-ODN+PBS组相比TLR9、My D88mRNA的表达降低有统计学差异(P0.05)。结论:在BV2细胞接受感染HSV-1后,柯里拉京降低TLR9/My D88mRNA的表达,以此来上调免疫应答。     

青藤碱对FLS增殖及α7nAChR、TLR2和TLR4表达的影响

目的探讨青藤碱(sinomenine,SIN)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激的大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)增殖及α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptors,α7n ACh R)、Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响。方法组织块法分离培养原代FLS,流式细胞术检测FLS表面标志物CD90。FLS设对照组、TNF-α组、SIN组(100,200,400μmol·L~(-1)),SIN组给予SIN干预30 min后,TNF-α组、SIN组均给予20 ng·m L~(-1)TNF-α刺激24 h,采用MTT法检测各组FLS增殖,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)分泌量,RT-PCR法检测α7n ACh R、TLR2和TLR4 m RNA表达及Western bolt法检测α7n ACh R、TLR2和TLR4蛋白表达。结果 TNF-α刺激FLS后,细胞明显增殖,分泌IL-6明显增加,α7n ACh R、TLR2和TLR4 m RNA及蛋白表达增加,SIN(200,400μmol·L~(-1))能抑制FLS增殖,抑制IL-6分泌,并且下调α7n ACh R、TLR2和TLR4 m RNA及蛋白表达。结论 FLS增殖与α7n ACh R、TLR2和TLR4表达相关,且SIN能抑制FLS增殖,并下调α7n ACh R、TLR2和TLR4表达。     

黄精多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠抑瘤及免疫调节作用

目的探讨黄精多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠抑瘤及免疫调节作用。方法用BALB/c小鼠建立MFC胃癌荷瘤小鼠模型,随机分为对照组、模型组、环磷酰胺组(20 mg/kg)及黄精多糖高、低(400、100 mg/kg)剂量组,灌胃给药21 d。检测抑瘤率,脏器指数,采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定脾淋巴细胞增殖刺激指数及NK细胞活性,ELISA检测血清TNF-α、IL-2、IL-6水平,RT-PCR法检测脾脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达。结果与模型组比较,黄精多糖高、低剂量组瘤重降低(P<0.05),脾脏指数、脾淋巴细胞增殖刺激指数、NK细胞活性均增加(P<0.05);除黄精多糖低剂量组小鼠血清TNF-α、IL-6水平无变化外(P>0.05),其余各组TNF-α、IL-2、IL-6水平均增加(P<0.05);黄精多糖高、低剂量组小鼠脾脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达均降低(P<0.05)。结论 TLR4/NF-κB信号通路的激活受阻可能是黄精多糖在MFC胃癌荷瘤小鼠体内发挥抑瘤作用及免疫调节作用的潜在机制。     

黄芪多糖对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚中TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨黄芪多糖抑制异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚中Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)炎症信号通路的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为6组(每组10只):对照组,异丙肾上腺素组,异丙肾上腺素+黄芪多糖(低、中和高剂量)组,异丙肾上腺素+普萘洛尔组。各给药组连续腹腔注射3周,并于给药1 d后腹腔注射异丙肾上腺素2周。给药3周后,各组动物分别检测全心质量指数(HMI)、左心质量指数(LVMI);取左心室组织进行苏木精—伊红染色法(HE)染色;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌组织心钠素(ANP)和TLR4的mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌组织TLR4、p65蛋白(p65)和核因子κB抑制蛋白α(IκBα)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中TNF-α、IL-6的水平。结果与对照组相比,异丙肾上腺素组大鼠的HMI和LVMI显著增加,ANP、TLR4m RNA表达增加,TLR4、p65的蛋白水平增加和IκBα蛋白水平减少,血清中TNF-α、IL-6明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。与异丙肾上腺素组相比,黄芪多糖400、800mg/(kg·d)和普萘洛尔40 mg/(kg·d)组HMI和LVMI降低,ANP、TLR4 mRNA和TLR4、p65蛋白和血清中TNF-α、IL-6表达显著降低,IκBα蛋白的表达明显增加(P<0.01)。黄芪多糖200 mg/(kg·d)组ANP、TLR4 mRNA和TLR4、p65蛋白和血清中TNF-α的表达降低(P<0.05,P<0.01),IκBα蛋白的表达增高(P<0.05)。结论黄芪多糖能改善异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路有关。     

黄芪甲苷对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞的影响

目的:观察黄芪甲苷对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞干预作用。方法:H9c2心肌细胞培养,传代后随机分为5组,对照组、缺氧/复氧组、黄芪甲苷药物预处理组:培养液中加入终浓度分别为25、50和100μmol/L的黄芪甲苷预处理,12h后进行缺氧/复氧处理。分别收取细胞培养上清液,用酶联免疫吸附技术(Elisa)测定上清液中的白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;采用RT-PCR技术检测NF-κB的基因表达。结果:黄芪甲苷(25、50、100μmol/L)预处理12h后可明显降低IL-6、TNF-α、MDA的含量,可明显提高SOD含量,并可以减低核转录因子NF-κB P65基因表达水平,并且具有一定的量效关系。结论:黄芪甲苷保护缺氧/复氧对H9c2心肌细胞损伤,通过提高SOD含量,降低MDA含量,发挥抗氧化作用,并且抑制炎性因子IL-6、TNF-α分泌,其机制与减低核转录因子NF-κB P65基因表达水平有关。     

加味芍药汤联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎的疗效及对患者血清炎症因子的影响

目的:探讨加味芍药汤联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎治疗疗效及对患者血清炎症因子IL-1、IL-8、TNF-α表达的影响。方法:78例溃疡性结肠炎患者按照随机数字表法随机分为对照组与治疗组。对照组给予美沙拉嗪治疗;治疗组在对照组基础上加服加味芍药汤。两组患者一般资料之间进行对比分析数据差异无统计学意义(P<0.05)。结果:治疗组治疗后总有效率(92.31%)显著高于对照组(79.49%),且有显著性差异(P<0.05);治疗组治疗后血清炎症因子IL-1(1.283±0.382)ng/mL、IL-8(0.946±0.318)ng/mL、TNF-α(32.015±1.902)pg/L表达均高于对照组治疗后血清炎症因子IL-1(0.316±0.174)ng/mL、IL-8(0.294±0.068)ng/mL、TNF-α表达(11.372±1.937)pg/L,且有显著性差异(P<0.05);两组不良反应率无统计学意义(P<0.05)。结论:加味芍药汤联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎疗效显著,无明显不良反应,存在血清炎症因子异常。     

青藤碱对 FLS增殖及α7nAChR、TLR2和TLR4表达的影响

摘要：目的 探讨青藤碱(sinomenine, SIN)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激的大鼠成纤维样滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes , FLS）增殖及α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptors, α7nAChR）、Toll样受体2(toll-like receptor 2, TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响。 方法 组织块法分离培养原代FLS,流式细胞术检测FLS表面标志物CD90。FLS设对照组、TNF-α组、SIN组（剂量分别为100,200,400μmol·L-1）,SIN组给予SIN干预30min后,TNF-α组、SIN组均给予20ng·mL-1 TNF-α刺激24h,采用MTT法检测各组 FLS增殖,酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞上清白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6)分泌量,RT-PCR检测α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA表达、Western bolt检测α7nAChR、TLR2和TLR4蛋白表达。 结果 TNF-α刺激FLS后,细胞明显增殖,分泌IL-6明显增加,α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达增加,SIN（200,400μmol·L-1）能抑制FLS增殖,抑制IL-6分泌,并且下调α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达。 结论 FLS增殖与α7nAChR、TLR2和TLR4表达相关,且SIN能抑制FLS增殖,并下调α7nAChR、TLR2和TLR4表达。     

EB病毒感染者肿瘤坏死因子及白介素2水平研究

目的:研究鼻咽癌高发区EB病毒感染者肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素2(IL-2)水平.方法:免疫酶法检测血清EBVCA-IgA确定EB病毒感染者44例为观察组,以健康人18例作为对照组,ELISA法测定血清TNF-α及IL-2水平;比较其血清TNF-α及IL-2水平.结果:EB病毒感染者及健康对照者TNF-α分别为(37.5±18.7)pg/mL及(23.2±9.6)pg/mL,P＜0.01;而IL-2分别为(14.4±7.1)pg/mL及(18.7±6.4)pg/mL,P＜0.05.结论:EB病毒感染者肿瘤坏死因子水平增高而白介素2水平低下.     

Microbial transformations of natural antitumor agents. 9. O-Demethylation of 9-methoxyellipticine

Microbial transformation studies were conducted with 9-methoxyellipticine (1). Several microorganisms including Botrytis allii (NRRL 2502), Cunninghamella echinulata (NRRL 1386), C. echinulata (NRRL 3655), and Penicillium Brevicompactum (ATCC 10418) achieved O-demethylation of (1) in good yield. P. brevicompactum was used to prepare 9-hydroxyellipticine (4) from 1 for isolation and complete identification. High-performance liquid chromatography was used to verify the identity of the major metabolite (4) in other cultures.     

9对“对药”和非“对药”间多分子体系紫外-可见光谱分析

目的：探讨常用中药的组合－“对药”和非“对药”间,在化学成分、分子结构、构型、构象方面相似性差异。方法：（1）按中药多分子体系的脂溶性差异,分为石油醚、氯仿、乙酸乙脂、乙醇和水的溶出性成分集合,然后进行“对药”和非“对药”的对比分析;（2）用紫外－可见光不镀计测定吸收光谱曲线。结果：分析225份样品,约1300个数据,9对“对药”中有6对分别显示：紫外－可见光吸收光谱峰的分布区域重叠较大;相同波峰数和相同波谷数较多;组合后吸收光谱曲线下面积增加趋势较大。结论：提示化学成分相近,分子结构或构型,构象相似是中药（植物药）组方配伍的原则之一。     

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??To summarize the data from clinical trials of anti-proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9)monoclonal antibodies (mAbs) in patients with hypercholesterolaemia.Based on systematic literature review, theresults of clinical trials of different anti-PCSK9 mAbs were presented and evaluated.In phase??, ??, ?? trials, anti-PCSK9 mAbs resulted in 50%-60% reduction in low-density lipoprotein-cholesterol (LDL-C) level and had a lower incidence of adverse effects, compared with placebo or ezetimibein patients with hypercholesterolaemia. Anti-PCSK9 mAbs have demonstrated a significant effect of reducing LDL-C and were well tolerated in short-term (up to 52 weeks) trials.Large phase ??trials are ongoing to evaluate the long-term safety and efficacy as well as the impact of these promising new agents on cardiovascular outcomes.     

阴陵泉穴临床应用概述

阴陵泉穴为足太阴脾经之合穴,属阴水。临床上主要用来治疗腹痛、水肿、黄疸等疾病以及膝关节和周围软组织疾患。近年来对阴陵泉穴的临床应用研究表明其可用于治疗消化系统中的消化不良、泄泻、胃痛和病毒性肝炎,泌尿系统的尿潴留、肾绞痛,运动系统的肩周炎、膝痛、髌骨软骨病,神经系统的隐神经痛,心血管系统的高血脂症等有关疾病,也可以用于帮助骨折后的恢复。对于阴陵泉的临床应用虽然有些发现和突破,但总的来说还不够全面和深入,中国古籍医书中提到的阴陵泉穴可治疗的病症远远多于现在人们对其的应用,故还需要进一步加强对阴陵泉穴的临床应用研究。     

手术治疗膝关节脱位9例

目的探讨治疗膝关节脱位的外科治疗方法并评定其临床结果。方法9例膝关节脱位患者尽可能解剖修复或用自体或(和)异体韧带重建的方法治疗,随访12个月以上,评价其主、客观效果。结果患者的平均lysholm积分84.4分,总体IKDC率接近正常者5例,异常3例,严重异常1例。术后膝关节屈膝达到平均126°,2例明显屈膝受限的患者同时伴有伸膝受限3~5°。结论手术解剖修复和/或重建韧带的方式治疗膝关节脱位,经过12个月随访获得了满意的主、客观效果。多数患者可恢复到日常活动而仅有较少症状。膝关节脱位的预后与膝关节损伤的程度密切相关;手术时机也可能极为重要。     

cis-parthenolid-9-one from Anvillea garcinii

The cis-isomer (2) of the previously isolated parthenolid-9-one (1) was isolated from Anvillea garcinii and the structures and relative stereochemistries of both were determined from NMR data in combination with single-crystal X-ray analysis. In vitro cytotoxicity and in vivo antitumor activity for both compounds are reported.     

9-硝基喜树碱脂质体的释放度研究

 目的考察影响9-硝基喜树碱脂质体释放度的因素。方法采用薄膜-超声法制备了9-硝基喜树碱脂质体。建立了利用高效液相色谱法测定药物释放度的方法,并考察了水合介质渗透压、水合介质pH、胆固醇比例和脂质体粒径等处方因素对脂质体释药的影响。结果9-硝基喜树碱从脂质体中的释放过程符合Higuchi方程。水合介质渗透压、胆固醇比例和脂质体粒径对脂质体的释放度都有显著影响,但水合介质pH的影响不大。结论处方因素可以影响9-硝基喜树碱脂质体的释放度,有必要对这些影响因素进行控制以保证脂质体的缓释效果。     

给旺-9胶囊的胆红素含量测定

目的：为控制给旺-9胶囊的质量标准,照紫外-可见分光光度法测定胆红素的含量。方法：按中国药典2005版（附录VA）照紫外-可见分光光度法在453nm处测定吸光度,对胆红素定量分析。结果：胆红素的含量0．19％,平均回收率为98．41％,RSD0．70％。结论：此方法简便,灵敏,准确,重复性良好。可用于该制剂的质量平价和质量控制。