忍冬苷的合成及其对雷公藤甲素诱导肝损伤的保护作用

目的:研究忍冬苷的合成方法及其对雷公藤甲素诱导的肝损伤的保护作用.方法:以来源丰富的新橙皮苷为原料,经I2脱氢,AlCl3脱甲基,制得忍冬苷;采用雷公藤甲素诱导的人系L02肝细胞损伤模型评价忍冬苷的保肝作用.结果:合成了忍冬苷并发现其对雷公藤甲素诱导的肝损伤具有很好的保护作用.结论:合成方法简便可行、收率高、成本低,适合工业化生产;忍冬苷对雷公藤甲素诱导的肝损伤具有很好的保护作用.     

京尼平苷对雷公藤甲素肝损伤的保护作用

目的:观察不同剂量京尼平苷对雷公藤甲素所致小鼠肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:32只小鼠随机平均分成4组:空白对照组,每天灌胃生理盐水;雷公藤甲素组,每天灌胃雷公藤甲素400μg/kg;京尼平苷50mg/kg组:每天灌胃雷公藤甲素400ug/kg+京尼平苷50mg/kg;京尼平苷150mg/kg组:每天灌胃雷公藤甲素400ug/kg+京尼平苷150mg/kg。每天给药1次,连续28d后检测血清中ALT、AST、TBIL、ALP和LDH,测定肝组织中MDA、GST、GSH、SOD和UGT1含量。HE染色观察肝脏病理改变。结果:与雷公藤甲素组相比,联合给予京尼平苷150mg/kg的小鼠ALT、AST、TBIL和ALP有显著的下降,联合给予京尼平苷50mg/kg对ALT、AST、TBIL和LDH的改变没有显著性影响。京尼平苷150mg/kg和50mg/kg剂量均能不同程度的升高肝组织中GST、GSH、SOD和UGT1含量,但不能改善肝组织中MDA的含量。病理检查结果也显示京尼平苷的联合给予改善了雷公藤甲素引起的病理改变。结论:京尼平苷150mg/kg和50mg/kg剂量均能保护雷公藤甲素引起的小鼠肝损伤,其中150mg/kg剂量的保护效果更佳,其保护机制有待深入的研究。     

雷公藤甲素的肝损伤及减毒策略

传统中药雷公藤是临床上的常用药物，具有祛风湿、杀虫解毒、消肿止痛、活血通络的功效。现代药理学表明，雷公藤具有抗炎、抗肿瘤和免疫抑制等药理作用。现广泛用于自身免疫性疾病、肾脏性疾病和肿瘤等疾病的治疗。雷公藤具有多种化学成分，其中雷公藤甲素（TP）对人体消化、循环、生殖等系统均具有不同程度的损害，以肝损伤最常见，这极大的限制了TP在新药研发和产业化应用中的拓展空间。因此，笔者聚焦于TP致肝损伤这一研究热点，针对TP致肝损伤的临床表现、损伤机制及减毒策略进行国内外相关文献的检索和整理，这有助于为TP的临床用药安全性和科学用药监管提供科学依据。TP致肝损伤的临床表现多为氨基转移酶异常、食欲不振、恶心呕吐、纳差、皮肤和巩膜黄染、小便黄等。以上临床表现的机制涉及细胞凋亡、氧化应激、影响细胞色素P450超家族、巨噬细胞极化和生物钟基因Clock调控等几个方面。其中细胞凋亡与神经源性位点缺口同系物蛋白1（Notch1）、动力蛋白相关蛋白1（Drp1）-细胞色素C（Cyt C）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、肿瘤抑制蛋白53（p53）、FAS细胞表面死亡受体（Fas）/Caspase-8等信号通路有关；氧化应激与抑制核转录因子E₂相关因子（NRF2）信号通路、促进细胞色素P450 2E1（CYP2E1）表达引发活性氧（ROS）过度积累等有关；对细胞色素P450超家族的影响表现为：降低细胞色素P450 3A（CYP3A）、细胞色素P450 2C9（CYP2C9）、细胞色素P450 2C19（CYP2C19）、细胞色素P450 1A2（CYP1A2）等的底物亲和力、活性和表达；促进巨噬细胞向M1型转化与引发炎症因子分泌和内毒素积累有关；机体内在的生物钟基因Clock的节律性调控与影响细胞色素P450 3A11（CYP3A11）代谢酶的表达有关。临床应用中的减毒策略包括炮制减毒和配伍减毒法，有助于减毒的中药及单体成分包括甘草、白芍、金钱草、绿豆、生地黄、藏红花素和芍药苷等。通过对上述内容进行综述和探讨，为TP的相关研究和临床应用提供更多参考。     

电针足三里对雷公藤甲素致大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制研究

目的:通过实验观察电针"足三里"对雷公藤甲素所致大鼠急性肝损伤的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白组、电针组和药物组,经电针"足三里"预处理14天后,建立雷公藤甲素急性肝损伤大鼠模型,观察三组大鼠肝组织匀浆ALT、AST、SOD、MDA、TNF-α、NO、IL-10的含量。结果:电针组AST、ALT、MDA、TNF-α、NO指标值均比对照组低,SOD、IL-10指标值比对照组高。结论:电针预处理可以减轻雷公藤甲素对肝组织的损伤,其机理与抑制靶器官损伤相关的因子释放,提高机体抗氧化应激的能力有关。     

雷公藤甲素诱导H22细胞凋亡作用研究

目的研究雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。方法MTT法测定雷公藤甲素对H22肿瘤细胞的抑制率,并通过细胞形态学观测及DNA凝胶电泳分析检测雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。结果雷公藤甲素80μg/L抑制率达41.6%,与浓度成正相关,IC50为85.79μg/L;电镜结果表明,40μg/L以上浓度可明显诱导H22细胞出现凋亡特征;DNA电泳显示明显的梯状条带。结论雷公藤甲素能诱导H22细胞凋亡,表明其具有一定的抗肝癌作用。     

雷公藤甲素的研究进展

查阅有关雷公藤甲素近10年来国内外的文献资料,选取具有较大应用价值及学术意义的内容,按雷公藤甲素的药理、药代学、毒理、临床应用及其半合成等几个方面分别介绍,拟对雷公藤甲素有一个全面的认识。雷公藤及雷公藤甲素是目前我国中药现代化研究的热点,鉴于它们的两面性(生物活性及毒性),利用现代高科技手段,开发高效低毒的新剂型是一项非常有意义的工作。     

雷公藤多苷片中雷公藤甲素与体外肝毒性相关性研究

目的:采用永生化人肝HepaRG细胞明确雷公藤多苷片制剂(Tripterygium Glycoside Tablets,TPT中主要成分雷公藤甲素(triptolide,TP)与肝毒性的相关性。方法:HepaRG细胞经不同浓度TP及TPT作用24 h后,采用细胞计数试剂盒法(cell vounting kit-8,CCK-8)分别测定TP和来自不同厂家的TPT对HepaRG细胞存活率的影响;采用流式检测法测定TP及TPT的对细胞凋亡率的影响;收集细胞培养液检测谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和谷氨酰转肽酶(GGT)等与肝毒性相关的生化指标,并以实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)法测定白细胞介素-6 (IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子表达水平。结果:TP的半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为15.14 nmol·L~(-1)。重点考察不同生产企业间TP含量与毒性差异之间的关联,结果发现,TP含量与细胞毒性、细胞凋亡、ALP、CK、TNF-α和IFN-γ变化直接相关,AST、LDH、TNF-α和IFN-γ是检测TP导致的肝细胞毒性较为灵敏的指标。结论:TP为不同企业TPT制剂中主要肝毒性成分。TPT中其他成分仍存在肝毒性风险,值得进一步研究。     

白芍总苷对雷公藤多苷片所致小鼠急性肝损伤保护作用的实验研究

[目的]运用新建雷公藤多苷片致小鼠急性肝损伤模型,探讨白芍总苷(TGP)对该模型肝损伤保护作用和机制。[方法]连续7d给小鼠灌服TGP,而后以雷公藤多苷片制造小鼠急性肝损伤模型,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)及肝匀浆丙二醛(MDA)的含量。[结果]TGP可以降低肝损伤小鼠血清ALT、AST含量、升高SOD含量,降低肝匀浆中MDA含量。[结论]TGP可以对抗雷公藤多苷片所致小鼠急性肝损伤,其机制与氧自由基产生有关。     

雷公藤多苷肝损伤副作用的临床观察及对策

目的观察雷公藤多苷的肝损伤副作用及相应对策。方法应用不同剂量雷公藤多苷治疗类风湿性关节炎、肾病综合征、紫癜性肾炎患者59例,观察其肝损伤的发生率。结果小剂量(1 mg.kg-1.d-1)雷公藤多苷肝损伤副作用小,大剂量(2 mg.kg-1.d-1)副作用大,但加用保肝药物后副作用发生率降低。结论在应用雷公藤多苷(尤其在双倍剂量)的同时加用保肝药物,可降低其肝损伤的发生率。     

雷公藤中雷公藤甲素和雷公藤乙素的测定

目的建立雷公藤药材中雷公藤甲素和雷公藤乙素的HPLC定量测定方法。方法药材经95%乙醇回流提取,过中性氧化铝柱,三氯甲烷-甲醇(9:1)洗脱,洗脱液蒸干后用流动相定容。色谱柱:Hypersil BDS色谱柱(250mm×4.0mm,5μm)。流动相为乙腈-水(23:77)(雷公藤甲素),乙腈-水(16:84)(雷公藤乙素)。检测波长:220nm。结果雷公藤甲素与雷公藤乙素线性范围均在5～100μg/mL,线性关系良好。平均回收率分别为97.5%和97.3%,RSD<2%(n=9)。结论本方法重现性好,灵敏度高,可用于雷公藤中雷公藤甲素和雷公藤乙素的测定。     

黄芩素对雷公藤甲素诱导的小鼠卵母细胞损伤的保护作用

目的探讨黄芩素对雷公藤甲素诱导小鼠卵母细胞损伤的保护作用。方法健康雌性BALB/C小鼠随机分为对照组,模型组,黄芩素低、高剂量组。对照组ig含5%二甲基亚砜的生理盐水,模型组ig 25μg/kg雷公藤甲素,黄芩素低、高剂量组分别ig 25μg/kg雷公藤甲素+100 mg/kg黄芩素、25μg/kg雷公藤甲素+500 mg/kg黄芩素,共给药50 d。实验第41天起,连续阴道涂片,至第47天,进行超排卵实验。第50天处死各组小鼠,收集计数卵子。留取卵巢进行苏木精-伊红(HE)染色检测卵巢病理,计数各级卵泡。测定各组小鼠卵巢组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的量,评价氧化应激水平。Western blotting法检测小鼠卵母细胞中氧化还原相关蛋白抗硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、硫氧还蛋白(Trx)、谷胱甘肽还原酶(GR)、GSH-Px的表达量。结果雷公藤甲素显著引起小鼠卵巢损伤,表现为卵泡数量显著减少,卵巢间质区域结缔组织疏松;并使SOD活性降低,GSH-Px水平降低,MDA水平增加;黄芩素组小鼠卵巢发育较模型组有明显改善,卵泡细胞数量增多,间质区域结缔组织饱满。卵巢组织中SOD活性升高,GSH-Px水平升高,MDA水平降低。Western blotting结果显示,与对照组比较,模型组小鼠卵母细胞中的TrxR表达量明显下降;与模型组比较,黄芩素组小鼠卵母细胞中TrxR的表达量显著上升。结论黄芩素可通过上调TrxR表达量提高小鼠卵巢组织的抗氧化能力,对雷公藤甲素诱导的卵巢损伤起到保护作用。     

双虎清肝颗粒对刀豆球蛋白A所致肝损伤的防护作用机制研究

目的从一氧化氮（nitric oxide,NO）及总蛋白巯基（total sulfhydryl,TSH）、蛋白巯基（protein-bound sulfhydryl,PSH）的变化来探讨双虎清肝颗粒对刀豆球蛋白A（Concanavalin A,ConA）所致肝损伤的防护作用机制。方法 84只BALB/c雄性小鼠随机分成三组,正常对照组、模型对照组和双虎清肝颗粒组各28只。正常对照组给予生理盐水0.2 ml尾静脉注射;模型对照组尾静脉注射ConA（15 mg/kg）生理盐水溶液0.2 ml;双虎清肝颗粒组每日给予双虎清肝颗粒（5 mg/kg）生理盐水溶液2 ml灌胃一次,连续7天后再按模型对照组处理。观察3小时、6小时、9小时及12小时时血浆谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）及NO2^-含量以及肝组织TSH、PSH含量的变化情况。结果双虎清肝颗粒组各时间点血浆ALT、AST及NO2^-的含量与正常对照组比较均无统计学差异（P〉0.05）,而与模型对照组比较均存在显著性差异（P〈0.05）。双虎清肝颗粒组各时间点肝组织TSH、PSH含量与正常对照组比较均无统计学差异（P〉0.05）,而与模型对照组比较均有显著性差异（P〈0.05）。结论双虎清肝颗粒防护肝损伤的作用机制可能是通过抑制机体NO的生物合成从而降低NO含量、阻断肝细胞TSH及PSH被持续性消耗从而提高肝组织细胞的抗氧化应激能力和解毒能力等方式实现的。     

葛根素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察葛根素(Pue)对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法:建立大鼠全肝缺血再灌注模型,比较Pue处理对再灌注血ET-1、NO和ALT水平,肝组织中MDA、细胞总钙含量和SOD活性,以及肝组织光镜下的形态学改变.结果:Pue处理可使血NO含量、肝组织SOD活性明显增高;而血ET-1、ALT含量及肝组织MDA、细胞总钙含量明显降低.肝组织形态损伤也明显减轻.Pue保护效应与剂量大小明显相关.结论:葛根素对肝缺血再灌注损伤有显著的药物预适应作用,其主要机制是清除氧自由基、减轻细胞内Ca 超载以及改善微循环.     

Synergistic protective effect of astragaloside IV-tetramethylpyrazine against cerebral ischemic-reperfusion injury induced by transient focal ischemia

Ethnopharmacological relevance

Astragaloside IV and tetramethylpyrazine have been extensively used in the cardio-cerbrovascular diseases of medicine as a chief ingredient of glycoside or alkaloid formulations for the treatment of stroke and myocardial ischemia diseases.

Aim of the study

To investigate the effects of astragaloside IV (ASG IV) and tetramethylpyrazine (TMPZ) on cerebral ischemia-reperfusion (IR) injury model in rat model.

Materials and methods

Rats were randomly divided into the following five groups: sham group, IR group and treatment group including ASG IV, ASG IV–TMPZ and nimodipine treatment. The therapeutic effect was evaluated by micro-positron emission tomography (Micro-PET) using ¹⁸F-fluoro-2-deoxy-d-glucose. The neurological examination, infarct volume and the levels of oxidative stress- and cell apoptosis-related molecules were assessed.

Results

Micro-PET imaging showed that glucose metabolism in the right hippocampus was significantly decreased in the IR group compared to the sham group (P < 0.01). ASG IV and ASG IV–TMPZ treatments reversed the decreased glucose metabolism in the model group (P < 0.05 and P < 0.01, respectively). IR induced the increase of Caspase-3 mRNA levels, MDA content and iNOS activity, but it caused the decrease of SOD activity and Bcl-2 expression compared the sham group (P < 0.01). ASG IV–TMPZ and ASG IV reversed the IR-induced changes of these parameters, i.e. the down regulation of Caspase-3 mRNA, MDA content and iNOS activity, and the up regulation of SOD activity and Bcl-2 expression (P < 0.05).

Conclusion

This study showed that ASG IV–TMPZ played a pivotal synergistic protective role against focal cerebral ischemic reperfusion damage in a rat experimental model.     

白藜芦醇对脓毒血症大鼠心肌损伤的保护作用

目的:观察白藜芦醇对脓毒血症大鼠心肌损伤的治疗效果及其作用机制。方法:采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症大鼠模型。实验分为1正常组、2模型组、3氨苄青霉素钠(200 mg/kg)组、4氨苄青霉素钠(200 mg/kg)+白藜芦醇(20 mg/kg)组、5氨苄青霉素钠(200 mg/kg)+白藜芦醇(40 mg/kg)组、6氨苄青霉素钠(200 mg/kg)+白藜芦醇(80 mg/kg)组。手术后12小时开始给药,每隔12小时1次,连续给药6次后观察各组的血流动力学参数检测心功能;HE染色法观察心肌形态学变化;以ELISA法测定血清TNF-α、IL-6水平,心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;电泳法测TLR4,p65蛋白表达。结果:白藜芦醇(80 mg/kg)联合氨苄青霉素钠(200 mg/kg)治疗与单用氨苄青霉素钠(200 mg/kg)治疗相比,可进一步改善心脏血流动力学参数和心肌形态学变化,降低血清TNF-α、IL-6、MDA水平,增加心肌组织SOD水平,下调TLR4,p65蛋白表达。结论:白藜芦醇对脓毒血症大鼠心肌损伤具有一定的治疗效果,其机制可能与其抗炎抗氧化抑制炎症信号通路相关。     

调肝理脾方制剂防治小鼠乙醇性肝损伤的实验研究

目的:研究不同工艺的调肝理脾方制剂保护小鼠乙醇性肝损伤的程度及其主要作用环节。方法:采用乙醇肝损伤模型小鼠,以复方鳖甲软肝片为阳性对照,观察调肝理脾方三种不同工艺制剂对乙醇性肝损伤模型小鼠保护效应,观察血液天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),胆固醇(CHOL),甘油三酯(TG)水平,肝组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,及肝脏的病理变化。结果:调肝理脾方3种工艺制剂能显著降低ALT、AST、TG、MAD(P<0.01),显著缓解肝脏病理变化。结论:调肝理脾方制剂对乙醇性肝损伤模型小鼠有保护效应,总体疗效评分显示工艺2组为3种工艺制剂中疗效最好的,而该制剂能通过阻止自由基损伤产生与促进局部损伤修复防治乙醇性肝损伤。     

振动运动和白藜芦醇对2型糖尿病大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨振动运动和白藜芦醇对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用及其机制。方法:采用高脂饮食和链脲佐菌素结合的方法建立大鼠2型糖尿病模型。实验分为:1正常组;2模型组;3振动运动组;4白藜芦醇组20 mg/kg组;5白藜芦醇40mg/kg组;6运动+白藜芦醇20 mg/kg组;7运动+白藜芦醇40 mg/kg组。末次给药或振动运动后血糖仪测大鼠空腹血糖,ELESA法测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察肝组织形态学变化;电泳法测定肝组织NF-κBp65表达。结果:与正常组相比,模型组空腹血糖显著增加,血清ALT、AST、TNF-α、IL-6水平增加,肝组织核蛋白NF-κBp65表达增加。振动运动和白藜芦醇(20、40 mg/kg)都可改善上述病理变化,而振动运动联合白藜芦醇(20、40mg/kg)治疗对上述肝功能的改善以及炎症因子和NF-κBp65表达的抑制作用更为明显。结论:振动运动联合白藜芦醇对糖尿病肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制与抑制NF-κB通路和炎症反应有关。     

二氮嗪对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用

近来研究表明 ,二氮嗪是一种选择性线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂 ,它不仅是血管扩张剂 ,还是耐缺血缺氧损伤的心脏保护药物。本研究的目的旨在从体外培养的PC12细胞水平初步探讨二氮嗪的神经保护作用。1　材料和方法1.1　细胞、药品和试剂大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12细胞 (南京医科大学胡刚教授惠赠 )。二氮嗪 (军事医学科学院毒物药物研究所合成 ,MTTFluka) ,DMEM培养基 (Gibco) ,新牛血清 (杭州四季青生物工程材料研究所 ) ,乳酸脱氢酶 (LDH)试剂盒 (北京中生生物工程高科技公司 )。1.2　方法1.2 .1　PC12细胞的培养及谷氨酸…     

小花清风藤水提取物对对乙酰氨基酚致小鼠药物性肝损伤保护作用研究

观察小花清风藤水提取物对对乙酰氨基酚致小鼠药物性肝损伤的保护作用,并初步探究其可能作用机制。将昆明雄性小鼠共58只,分为6组,正常组8只,模型组、联苯双酯组、小花清风藤水提取物低、中、高剂量组各10只。先适应性喂养1周,第2周正常组灌胃给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠(carboxymethyl cellulose sodium,CMC-Na),其余组均按20 mL·kg-1灌胃给药,每日1次,并在每次给药后除正常组外均给予对乙酰氨基酚(200 mg·kg-1),每天观察实验动物行为及体征,末次给药的次日,取材进行实验。称量肝脏质量和计算质量指数,腹主动脉取血后离心得到血清,检测谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的活性,肝组织匀浆检测肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,r-glutamyl cysteingl+glycine,GSH)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,另取肝组织进行组织形态学分析。结果显示,小花清风藤可减轻对乙酰氨基酚对肝脏的脂质过氧化损伤,降低血清中ALT和AST活性,升高肝组织中SOD和GSH水平,降低肝组织中MDA含量,抑制细胞凋亡从而减轻对乙酰氨基酚对肝组织的损伤,改善肝脏的组织病理学形态,保护肝细胞并恢复肝功能。其中高剂量效果最好,且呈现明显的量效关系。以上研究表明小花清风藤对对乙酰氨基酚致小鼠药物性肝损伤具有显著的保护作用,其作用机制可能与其抗氧化作用和抑制细胞凋亡有关。