广藿香醇体外抗呼吸道病毒作用研究

目的:观察广藿香醇体外抗流感病毒、腺病毒和柯萨奇病毒的效果,为抗病毒性感冒新药研发提供依据。方法:建立流感病毒感染MDCK细胞、腺病毒感染Hep-2细胞和柯萨奇病毒感染Hela细胞模型,以细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)法作为观察和检测指标,了解药物对细胞的毒性、药物体外抗病毒效果及作用机理。根据不同病毒的易感性,实验中分别以利巴韦林和阿昔洛韦作为对照药。结果:广藿香醇对MDCK、Hep-2和Hela细胞的TC50浓度均为125μg/ml,TC0浓度为31.25μg/ml。广藿香醇能抑制H1N1、CVB3和Ad-3所致的细胞病变,对H1N1的IC50为31.25μg/ml,治疗指数(TI)为4.00;对CVB3的IC50为62μg/ml,TI为2.00;对Ad-3的IC50为31.25μg/ml,TI为4.00。广藿香醇对3种病毒的直接作用效果都优于抗病毒吸附和抗病毒生物合成,同一浓度下广藿香醇对Ad-3的抑制率明显高于对H1N1和CVB3的抑制。结论:在体外抗病毒实验中,广藿香醇显示出抗柯萨奇病毒、抗腺病毒和抗甲型流感病毒的作用。     

广藿香三种有效部位体外抗柯萨奇病毒B3作用的初步研究

目的:研究广藿香三种有效部位体外抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)作用,从而明确广藿香的抗病毒性能,为其进一步开发利用奠定基础.方法:通过CPE法和MTT法检测药物对Hela细胞的毒性及对CVB3引起的细胞病变抑制作用,判断药物毒性及药物抗病毒效应.结果:广藿香的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物、水提取物对HeLa细胞的半数中毒浓度(TC50)分别为765.59、1140.56、2700.30 μg/mL.广藿香的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物具有较好的抗CVB3作用,IC50分别为26.92、13.84 μg/mL,而其水提取物无抗CVB3的作用.结论:广藿香的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物体外具有抗CVB3作用,但其具体的作用机理仍需进一步研究.     

清热合剂体外抗呼吸道合胞病毒作用

目的：了解清热合剂对呼吸道合胞病毒（RSV）的抑制作用。方法：采用细胞培养技术，以双黄连为阳性对照药，观察清热合剂在非洲绿猴肾细胞（VERO）和咽喉癌上皮细胞（HEP-2）细胞中对RSV的抑制作用。结果：在VERO细胞中，清热合剂半数中毒浓度（TD50）为31．62mg／mL，抗合胞病毒的半数有效浓度（IC50）为0．50mg／mL，治疗指数（33）为63．24；在HEP-2细胞中，TD50为32．10mg／mL，抗合胞病毒的IC50为0．54mg／mL，TI为59．44。且对RSV抑制作用存在明显的量效反应关系（P〈0．01）。结论：清热合剂在VERO和HEP-2细胞中对RSV有明显抑制作用。     

羊栖菜提取物的体外抗病毒作用

目的:探讨羊栖菜提取物的体外抗病毒作用。方法:对羊栖菜的提取物进行了常见的第三类病原体病毒呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A_(16)、柯萨奇病毒B_2、柯萨奇病毒B_3、柯萨奇病毒B_5(CVA_(16)、CVB_2、CVB_3、CVB_5)等7种病毒的抗病毒效应研究,显微镜下观察细胞存活率。结果:羊栖菜提取物对上述7种病毒的抑制能力远远优于广谱抗病毒药物利巴韦林,尤以对EV71的抑制效果最为明显,抑毒指数极高。结论:羊栖菜提取物对这7种病毒均具有良好的抑制作用,为进一步研究羊栖菜提取物对第三类病原体病毒的广谱抗病毒作用奠定基础。     

毛支饮体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

随着抗生素的广泛应用,细菌感染性疾病明显减少,但病毒感染性疾病日益增多.近年来,毛细支气管炎(以下简称毛支)的发病率呈逐年上升的趋势,毛支多发生在婴幼儿,主要由呼吸道合胞病毒(RSV)引起.RSV感染可引起患儿反复喘息,与哮喘的发病密切相关.Sigurs等[1]对RSV毛支住院患儿随访,发现7年后毛支组与对照组哮喘累积患病率分别为30％、3％,喘息累积发生率为68％、34％.     

槟榔提取物体外抗柯萨奇病毒B3及单纯疱疹病毒1型和乙型肝炎病毒的研究

目的 从槟榔9种提取物中体外筛选出抗柯萨奇病毒B3,单纯疱疹病毒1型活性成分,从其中3种提取物中体外筛选出抗乙型肝炎病毒的活性成分.方法 通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、MTF法,判断药物毒性及药物抗病毒效应.结果 槟榔9种提取物对Hela,Vero细胞具有一定的毒性,而无抗病毒活性,3种提取物不能有效地抑制HepG2.2.15细胞HBeAg的表达.结论 槟榔9种提取物体外无抗柯萨奇病毒B3、单纯疱疹病毒1型的作用,3种提取物体外无抗乙型肝炎病毒的作用.     

甘草体外抑制呼吸道合胞病毒作用研究

目的:开发安全有效的抗呼吸道合胞病毒的新药.方法:采用细胞病变抑制实验观察甘草在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用.结果:甘草半数中毒浓度(TC50)为3.43g/L;抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.2535g/L,治疗指数(TI)为13.53;甘草对呼吸道合胞病毒的抑制作用存在量效反应关系;在感染后0 h、2 h、4 h、6 h、8 h,甘草均有抑制呼吸道合胞病毒的作用.结论:甘草在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用,其作用机制是多途径的.     

清咽滴丸抗常见呼吸道病毒的实验研究

 目的 研究清咽滴丸对呼吸道常见病毒的抑制作用。方法 应用MTT方法,检测清咽滴丸对单纯疱疹病毒（HSV-1）和腺病毒（ADV11）的直接抑制作用、侵入细胞的抑制作用。应用鸡胚培养法,检测清咽滴丸体外灭活流感病毒的作用。建立ICR小鼠感染流感病毒模型,观察并记录小鼠的死亡情况,检测肺指数、肺脏病理改变及T、B淋巴细胞增殖情况和脾指数。结果 ①清咽滴丸对HSV-1和ADV11有直接抑制作用并且可抑制其侵入细胞。②鸡胚实验结果显示,清咽滴丸具有明显体外灭活病毒的作用。③动物实验结果显示,清咽滴丸不能降低动物的死亡率,但却可明显延长其平均存活时间;对肺脏有较好的抗炎作用;有刺激免疫细胞增殖,调节机体免疫功能的作用。结论 清咽滴丸有明确的体外灭活病毒和一定的抗流感病毒鼠肺适应株（FM1）和调节机体免疫力的作用。在抗HSV-1和ADV11实验中,表现出确切的直接抑制作用和阻断病毒侵入细胞的作用。     

桑叶乙醇提取物体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的:研究桑叶体外对呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法:采用细胞培养技术,将51.2 g·L-1桑叶液(70%乙醇提取物)倍比稀释后与密度为1.0×104/m L Hep-2细胞作用72 h,观察细胞病变效应(CPE),通过MTT法测定半数中毒浓度(TC50)。不同浓度桑叶液、Hep-2细胞与0.01 m L 100 TCID50RSV作用1,2 h后,测定其半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),以利巴韦林为阳性对照,评判桑叶抗RSV效果。结果:桑叶质量浓度在0.01~12.8 g·L-1,对RSV的抑制率表现出量效关系,TC506.56 g·L-1,IC501.015 g·L-1,TI 6.46。桑叶体外有抗RSV作用,比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大(P<0.05)。结论:桑叶对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒。     

抗病毒颗粒体外抑制呼吸道合胞病毒的实验研究

目的探讨抗病毒颗粒对呼吸道合胞病毒（RSV）的体外抑制作用。方法采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,观察抗病毒颗粒在人喉癌传代细胞（Hep-2）中对RSV的抑制作用。结果在Hep-2细胞中,抗病毒颗粒CC50为9.05,EC50为0.62,TI为2.085,且对RSV抑制作用存在明显的量-效关系。结论抗病毒颗粒在Hep-2细胞中对RSV有明显抑制作用。     

HPLC法测定广藿香油中广藿香酮的含量

目的 建立广藿香油中广藿香酮的高效液相色谱测定法.方法采用高效液相色谱法.色谱柱为YMC-Pack C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.2％磷酸溶液(60:40,V/V);检测波长:310 nm;流速:1 mL·min-1;柱温:35℃.结果广藿香酮在0.25～5 μg范围内呈良好线性关系,r=1.0000,平均回收率为101.16％,RSD=1.49％(n=6);10批样品中广藿香酮含量在3.54～40.19 mg·g-1范围内.结论此法简便快速、准确可靠,可用于广藿香油含量的测定和质量监控.     

气相色谱-质谱联用分析广藿香挥发油成分含量

采用水蒸气蒸馏法从广藿香中提取挥发油。采用不同类型的毛细管柱进行分析,找出最分析条件,用归一化法测定其百分含量,并用气相色谱－质谱法对化学成分进行鉴定。共鉴定了２３个成分,占挥发油总组分的８２％以上。     

四种维药对常见呼吸道病毒作用的体外实验研究

目的:观察4种维药抗常见呼吸道病毒导致病变的抑制作用。方法:分别接种甲1型流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒long株、腺病毒3型、鼻病毒R14型于MDCK、A549、HEL细胞,采用细胞病变抑制法(CPE),观察4种维药复方祖帕糖浆、西帕依固龈液、祖卡木颗粒、感通丹体外对4种常见呼吸道病毒作用。结果:感通丹在无毒浓度50mg/ml下能完全抑制流感病毒A型FM1株,西帕依固龈液在无毒浓度1:200倍稀释时能完全抑制腺病毒3型所致病变,复方祖帕糖浆、祖卡木颗粒分别在无毒浓度1:300、15.94mg/ml浓度下能完全抑制呼吸道合胞病毒。结论:本文所研究维药在体外实验中具有一定的抗病毒作用,有必要深入探讨其作用机制,为维药治疗病毒性呼吸道传染病提供实验室依据。     

参芪止疱颗粒抗HSV-2的体外实验研究

目的:探讨参芪止疱颗粒体外抗HSV-2的作用。方法:利用HFF感染HSV-2,用参芪止疱颗粒予以干预,以ACV做对照药,采用CPE法和MTT法进行实验。结果:实验发现HSV-2的TCID50为104;参芪止疱颗粒对HFF的CC50值大于10mg/ml,表明其对HFF的毒性作用小;在药物直接抗病毒复制实验中,参芪止疱颗粒对感染细胞EC50为0.30mg/ml,TI36表明其对HSV-2感染HFF具有一定保护作用;在HSV-2感染HFF的治疗实验中,参芪止疱颗粒EC50值为0.60mg/ml,TI25,提示其对病毒感染后复制有一定的抑制作用;其对HSV-2复制的抑制作用时相主要在感染后0h、2h、4h。但是,其对HSV-2感染细胞无预防作用。结论:参芪止疱颗粒在体外试验中具有较好的抗HSV-2的作用,值得临床进一步推广。     

广藿香醇药理作用研究进展

广藿香醇(PA)是广藿香的主要活性成分,药理研究表明,PA具有抗炎、抗胃溃疡、抗癌、保护肺和脑损伤、抗菌、预防乳腺炎、结肠炎和动脉粥样硬化、抗光老化、治疗腹泻型肠易激综合征、抗氧化应激、血管舒张和抗伤害等多种作用,初步的作用机制研究表明,其抗炎作用与下调炎症介质的mRNA表达来抑制促炎细胞因子产生及减少细胞外调节蛋白激酶(ERK)介导的NF-JB活化等有关;抗胃溃疡、保护肺损伤和脑损伤及抗光老化作用的作用与其抗氧化和抗炎作用有关;PA抑制MV4-11细胞增殖和诱导其凋亡可能与核转录因子-κB(NF-κB),磷酸化M2型丙酮酸激酶(p-PKM2)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达发生明显改变有关;其抗人结直肠癌细胞作用可能与抑制组蛋白去乙酰化酶(HDAC)-2的表达和HDAC酶活性,以及随后下调c-myc和激活NF-κB通路有关;通过阻断表皮生长因子受体(EGFR)通路的磷酸化和激活c-Jun氨基末端激酶(JNK)诱导A549癌细胞凋亡;抗前列腺癌与线粒体细胞色素C凋亡途径激活有关;其抗病毒作用可能与调节1型螺旋酶(RLH)信号通路或与病毒蛋白或核酸以及病毒与细胞结合的位点直接结合来阻断病毒吸附细胞;其抗菌、预防乳腺炎、结肠炎和动脉粥样硬化作用机制与抗炎有很大的关系,PA的药理作用仍需进一步的研究。为了加快PA药理作用分子机制的探索和发现,扩大其应用前景,本文综述了近10年来PA的代谢、生物活性及其可能的作用机制,以期为PA的开发和应用提供参考。     

Experimental study on anti-inflammatory activity of a TCM recipe consisting of the supercritical fluid CO2 extract of Chrysanthemum indicum, Patchouli Oil and Zedoary Turmeric Oil in vivo

Ethnopharmacological relevance

Chrysanthemum indicum (Compositae) Linné, Pogostemon cablin (Blanco) Benth and Curcuma wenyujin (Zingiberaceae) Y. H. Chen et C. Ling are three of the extensively used herbal remedies among traditional Chinese medicines for the purpose of anti-inflammation. A traditional Chinese medicine (TCM) recipe named CPZ consisting extracts of the above three herbs, has shown noteworthy anti-influenza activity, which is closely related to its anti-inflammatory feature.

Aim of this study

To investigated the anti-inflammtory activity of CPZ in vivo for a further exploration of the recipe's anti-inflammatory properties.

Materials and methods

The anti-inflammatory property of CPZ on acute inflammation was evaluated by inflammatory models of dimethylbenzene (DMB)-induced ear vasodilatation and acetic acid-induced capillary permeability enhancement in mice, as well as the carrageenan-induced paw edema rat model, in which inflammation-related cytokine including prostaglandin E₂ (PGE₂), interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor-α (TNF-α), and nitric oxide (NO) in the edematous paw tissue were determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Moreover, effect of CPZ on chronic inflammation was observed through granuloma formation in rats subjected to cotton pellet implantation.

Results

CPZ (340, 170, and 85 mg/kg for mice, p.o.) not only decreased the DMB-induced ear vasodilatation but also attenuated capillary permeability under acetic acid challenge in mice. And the significant inhibition on carrageenan-induced paw edema was observed. Further more, the ELISA results showed that CPZ (170, 85, and 42.5 mg/kg for rats, p.o.) could up-regulate the level of IL-1β in the edema paw tissue of rats significantly while down-regulate that of PGE₂, but no apparent effect on TNF-α or NO was observed in the test. Besides, CPZ had a certain degree of restraining effect on the cotton pellet-induced granuloma formation in rats and the highest dose of 170 mg/kg even showed a significant suppression on it.

Conclusion

The above results indicated that CPZ possessed a potent anti-inflammatory activity, which is indicated to be closely associated with its regulation on IL-1β and PGE₂ thereby mediating the inflammatory response acting at an appropriate level.     

气相色谱法测定广藿香紫苏叶挥发油微乳中百秋李醇的含量

目的:建立广藿香紫苏叶挥发油微乳中百秋李醇的GC含量测定方法。方法:采用挥发油提取器从微乳中提取挥发性成分,用GC法测定挥发油微乳中百秋李醇的含量。色谱条件:HP-5色谱柱;柱温采用程序升温;气化温度为270℃;检测器温度为280℃;分流比为20∶1;流速为1mL·min^-1。结果:表明百秋李醇在0.4064～4.8768μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=0.58904X-0.0214,r=0.9998,平均回收率为97.10%(n=5)。结论:方法准确可靠,重复性好。可用于挥发油微乳中百秋李醇的含量测定。     

金雀异黄酮对体外培养成骨细胞抗缺氧的机制研究

目的:观察金雀异黄酮对缺氧成骨细胞的抗缺氧作用。方法:以大鼠成骨细胞为材料,用三气培养箱建立缺氧模型。设常氧对照组、缺氧对照组和含不同浓度金雀异黄酮的缺氧加药组。比较各组缺氧36 h后细胞活力、ROS含量、细胞凋亡、细胞周期、PCNA表达i、NOS活性和钙化结节面积等,荧光定量PCR检测HIF-1α、BCL-2及Caspase-3 mRNA的表达。结果:金雀异黄酮显著提高缺氧成骨细胞存活率、G1期细胞百分比、钙化结节面积、HIF-1α和BCL-2 mRNA的表达水平,降低凋亡、ROS含量、PCNA表达量i、NOS酶活性和Caspase-3 mRNA表达。结论:金雀异黄酮能保护缺氧成骨细胞并促进其分化。     

感冒方体内外抗菌作用的研究

目的探讨感冒方治疗上呼吸道感染的作用机制。方法通过体内外抗菌实验,观察感冒方的抗菌作用。结果感冒方体外对标准菌株金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和临床分离菌株金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、中葡萄球菌、溶葡萄球菌、乙型链球菌具有一定的抑菌作用,MIC 0.075~0.2 g/mL,体内可延长金黄色葡萄球菌感染小鼠的存活时间和减少感染小鼠的病死率,对肺炎双球菌感染小鼠可提高感染小鼠的存活率。结论感冒方具有较好抗菌作用。