核因子κB在烧伤血清诱导内皮细胞细胞间黏附分子1表达中的作用

目的探讨核因子κB(NF-κB)在烧伤血清诱导内皮细胞(EC)分泌细胞间黏附分子(ICAM)1中的作用。方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养后,分别用正常人血清(对照组)、烧伤患者血清(烧伤血清组)、吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)+烧伤患者血清(PDTC组)刺激。于刺激0.5、1.0、2.0、4．0 b时采用电泳迁移率分析法测定HUVEC NF-κB的活性;流式细胞术检测刺激3．0、6.0、12．0、24．0 h时HUVEC膜表面ICAM-1的表达。结果刺激后烧伤血清组、PDTC组细胞NF-κB活性均明显高于对照组(P<0．01),1．0 h时达峰值[(21.03±4．87)、(7.44±0．60)×104积分灰度值],以后逐渐降低;PDTC组明显低于烧伤血清组(P<0.01)。刺激后烧伤血清组、PDTC组ICAM-1的表达均增加,刺激12．0 h吋达峰值(平均荧光密度各为327±37、142±31),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0．01);PDTC组刺激12．0、24．0 h时低于烧伤血清组(P<0．01)。结论烧伤血清通过活化NF-κB,从而启动EC对黏附分子的合成和释放,提示NF-κB在烧伤血清诱导EC分泌黏附分子过程中起重要作用。     

皮瓣缺血再灌注期间核因子-κB活性的变化及其意义

目的　探讨核因子(NF) κB活性变化在皮瓣缺血再灌注(I/R)损伤中的作用。方法将60只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组;I/R组;吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)处理组。制备右下腹岛状皮瓣I/R模型。PDTC处理组于再灌注前及早期,分2次静脉注射PDTC(3 0 0mg/kg体重)。采用免疫组织化学及凝胶电泳迁移率法,检测皮瓣NF κB活化情况,并行组织学观察。结果　I/R组再灌注后NF κBp65阳性细胞较对照组明显增加,NF κB活性于再灌注1、3h显著增强;PDTC处理组再灌注1、2h阳性细胞数(7.90±3 .73、10 .60±3 .2 0 )较I/R组(19.5 0±6.93、18.5 0±5 .68)明显减少(P均<0 .0 1) ,再灌注1hNF κB活性受到抑制,中性粒细胞浸润及组织水肿程度较I/R组明显改善。结论　NF κB活化可能在中性粒细胞介导的皮瓣I/R损伤中起重要作用     

一氧化氮对岛状肌皮瓣缺血再灌注损伤的影响

目的观察NO对岛状肌皮瓣I/R损伤的影响并探讨其作用机制.方法选用白色小家猪15只,随机分为I/R组、I/R+NO供体L-arg组及对照组.制作猪腹直肌岛状肌皮瓣I/R模型,于再灌注前后给予L-arg, 检测I/R不同时相皮瓣静脉血中NO的间接含量、皮瓣NTR渗出,计算再灌注完毕后肌肉存活比例. 结果① I/R+L-arg组再灌注0.5小时、1小时NO间接含量(75.07±12.54)μmol/L、(86.86±20.15)μmol/L,明显高于I/R 组(46.75±11.77)μmol/L、(40.38±10.78)μmol/L(P＜0.01).②再灌注1小时、4小时I/R+L-arg组皮瓣NTR计数(66.50±17.33～153.80±38.53)/20个高倍视野明显低于I/R组(171.50±44.50,316.80±52.85)/20个高倍视野(P＜0.01).③再灌注完毕后,I/R+L-arg组皮瓣肌肉的存活比例(83.70±15.60)%明显高于I/R 组(24.07±12.35)%(P＜0.01).结论于缺血后再灌注前及再灌注早期给予L-arg,适当增加内源性NO的产生,能有效减轻肌皮瓣缺血再灌注损伤.     

核因子κB抑制剂对缺血再灌注皮瓣TNF-α和ICAM-1表达的影响

目的观察缺血再灌注（I／R）期间，皮瓣肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（1CAM-1）表达及核因子κB（NF—κB）活性抑制剂的影响。方法雄性Wistar大鼠27只，随机分为对照组（A组）、I／R组（B组）及吡咯烷二硫氨基甲酸酯（PDTC）处理组（C组）。制备右下腹岛状皮瓣I／R模型。C组于再灌注前及早期，各静脉注射PDTC 300mg／kg。逆转录-聚合酶链式反应法检测皮瓣再灌注2、6h TNFα、ICAM-1 mRNA表达。测定再灌注12h皮瓣髓过氧化物酶活性（MPO）并行组织学观察。结果B组再灌注2、6h TNF—α、ICAM-1表达较A组明显增加（P〈0．01）。C组再灌注2、6hTNF—α、ICAM-1表达明显低于B组（P〈0．01，P〈0．05）；再灌注12h，组织MPO活性及中性粒细胞浸润、水肿情况明显减轻。结论再灌注早期炎症介质表达增加在皮瓣I／R损伤中起重要作用。NF—κB抑制剂可下调TNF—α和ICAM-1转录表达，明显减轻皮瓣I／R损伤。     

镧对内毒素/脂多糖诱导的巨噬细胞核因子κB活化的抑制作用

目的 了解稀土元素镧对内毒素／脂多糖（LPS）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞（Mφ）核因子KB（NF-κB）活化的影响,并探讨其机制。方法分离培养小鼠腹腔Mφ,分为：空白对照组,无刺激因素：LPS组,用1μg／mlLPS刺激30min;镧离子（La^3＋）组,用2,5μmol／L La^3＋刺激30min;La^3＋＋LPS组,先后用2,5-μmol／L La^3＋、1μg／ml LPS各刺激30min;La^3＋／L PS组,2．5μmol／L La^3＋刺激30min后,洗涤细胞,再加入1μg／ml LPS刺激30min。采用细胞免疫荧光染色法观察NF-κB在各组细胞中的分布与表达;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测胞核中NF-κB／p65蛋白活性;蛋白质印迹法检测细胞核内NF-κB／p65蛋白及胞质中核因子抑制蛋白α（IκBα）的表达量。ELISA法测定各组细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。结果 （1）免疫荧光染色显示,空白对照组、La^3＋组、La^3＋＋LPS组和La^3＋／LPS组M小绿色荧光多分布于胞质,胞核荧光强度分别为42±7、73±30、48±11和67±19;LPS组绿色荧光集中于胞核,荧光强度为116±14,明显高于其余4组（P〈0.01）。（2）胞核NF-κB／p65蛋白活性：LPS组吸光度值为0．435±0．066,与空白对照组（0．048±0．027）、La^3＋组（0．062±0．049）、La^3＋＋LPS组（0.066±0.031）、La^3＋／LPS组（0．108±0.017）比较．明显偏高（P〈0．01）。（3）LPS组M由胞核NF-κB／p65蛋白表达水平明显高于其余4组,胞质IκBα蛋白表达水平明显低于其余4组。（4）TNF-α含量：La^3＋组培养上清液中TNF-α含量低于试剂盒检测下限（25pg／m1）及空白对照组（P〈0.05）,La^3＋＋LPS组和La^3＋／LPS组低于LPS组（P〈0．01）,但高于空白对照组。结论 LPS可激活小鼠腹腔M由NF-κB／p65核移位,并使胞核中NF-κB／p65的表达量和活性升高、胞质IκBα蛋白表达下调,导致TNF-α分泌增多。镧可抑制上述效应。     

一氧化氮对岛状肌皮瓣缺血再灌注损伤的影响

目的　观察NO对岛状肌皮瓣I/R损伤的影响并探讨其作用机制。方法　选用白色小家猪 15只 ,随机分为I/R组、I/R +NO供体L -arg组及对照组。制作猪腹直肌岛状肌皮瓣I/R模型 ,于再灌注前后给予L -arg ,检测I/R不同时相皮瓣静脉血中NO的间接含量、皮瓣NTR渗出 ,计算再灌注完毕后肌肉存活比例。结果　①I/R +L -arg组再灌注 0 .5小时、1小时NO间接含量 ( 75 .0 7± 12 .5 4 ) μmol/L、( 86.86± 2 0 .15 ) μmol/L ,明显高于I/R组 ( 4 6.75± 11.77) μmol/L、( 4 0 .3 8± 10 .78) μmol/L(P <0 .0 1)。②再灌注 1小时、4小时I/R +L -arg组皮瓣NTR计数 ( 66.5 0± 17.3 3～ 15 3 .80± 3 8.5 3 ) / 2 0个高倍视野明显低于I/R组 ( 171.5 0± 4 4 .5 0 ,3 16.80± 5 2 .85 ) / 2 0个高倍视野 (P <0 .0 1)。③再灌注完毕后 ,I/R +L -arg组皮瓣肌肉的存活比例 ( 83 .70± 15 .60 ) %明显高于I/R组 ( 2 4 .0 7± 12 .3 5 ) % (P <0 .0 1)。结论　于缺血后再灌注前及再灌注早期给予L -arg ,适当增加内源性NO的产生 ,能有效减轻肌皮瓣缺血再灌注损伤。     

人IκBα突变体在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用

目的探讨人IκBαM在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法将DA→Lewis大鼠原位肝移植模型分3组:组I为对照组,组Ⅱ为PcDNA 3．0组,组Ⅲ为PcDNA 3．0-IκBαM组。观察生存时间、肝脏组织病理、肝功能,流式细胞仪检测抗原递呈细胞(APC)表面CD80、CD86,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-2的表达。结果Ⅲ组与I、Ⅱ组相比较:(1)受体存活时问明显延长,差异有统计学意义[(23．0±6．5)d比(14．0±4．3)d;(23．0±6．5)d比(13．5±4．5)d, P<0．05];(2)移植后7 d汇管区轻、中度量淋巴细胞浸润;(3)肝功能指标术后3、7 d差异有统计学意义(P<0．05);(4)术后3 d APC表面CD86表达水平明显降低[(22．46±4．53)％比(37．29±4．15)%;(22．46±4．53)%比(35．82±3．92)％,P<0．05],术后7 d APC表面CD80的表达水平明显降低[(24．47±7．10)％比(45．70±5．22)％;(24．47±7．10)％比(43．27±6．38)％,P<0．05],差异有统计学意义;(5)术后3、7 d血清IL-2明显降低,以7 d为显著[(578．65±85．50)ng／L比(973．24±102．47)ng／L;(578．65±85．50)ng／L比(1 021．10±125．32)ng／L,P<0．05]。结论IκBαM可通过抑制APC表面共刺激分子的表达在急性排斥反应中发挥保护作用。     

肝缺血再灌注损伤中乌司他丁对核因子-κB活化的影响及对损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁及核因子(NK)-κB在肝缺血再灌注(I/R)损伤中的作用。方法制作大鼠部分肝I/R模型,分为:A假手术组,B肝缺血90min组,C肝缺血90min、再灌注120min组,D肝缺血90min、再灌注120min加乌司他丁组。光镜观察肝脏组织学改变,测定血清酶学水平和肝组织中髓过氧化物酶(MPO)含量,sABC免疫组织化学方法测定肝组织中NF-κB的活化程度。结果A组肝细胞索排列有序,肝细胞形态正常;B组肝小叶结构紊乱,肝血窦和中央静脉有轻度淤血,内皮细胞和肝细胞水肿变性;C组肝细胞坏死较明显,D组上述改变明显减轻;B组的血清ALT、AST和MPO分别为454.1±26.2、819.1±18.2I U/L和0.908±0.189U/g,肝组织NF-κB活化程度为1.89±0.12(与A组比较,P<0.05);C组分别为1156.9±216.3、2150.5±209.8I U/L和2.126±0.160U/g,肝组织NF-κB活化程度为2.86±0.20(与A组比较,P<0.01);D组分别为553.6±19.4、897.6±23.9I U/L和1.128±0.162U/g,肝组织NF-κB活化程度为2.04±0.16(与C组比较,P<0.01)。结论乌司他丁能减轻NF-κB活化,减轻肝I/R时中性粒细胞通过释放蛋白酶造成的肝损伤。     

L-精氨酸对心肺移植缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨一氧化氮(NO)前体L-精氨酸(L-Arg)在心肺移植中对心肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将30条成年犬随机分为对照组、实验A(L-Arg 100 mg／kg体重)、B(L-Arg 500 mg／kg体重)3组,每组10条,采用标准法行心肺移植,A、B组心肺保护液中加入不同剂量L-Arg,供心肺放入4℃EC液保存4-5 h。监测心率、平均动脉压(MAP)、肺动脉平均压(MPAP),股静脉血一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、乳酸脱氢酶同工酶 (LDH)含量、股动脉血氧分压(PaO2),测定肺干湿重比(W／DR)及观察心肺超微结构以评价心肺保护的效果。结果主动脉开放60 min,B组NO(82．76±12．34)μmol／L、A、B组SOD(60．19±12．42)、 (100．38±16．55)NU／ml较对照组(29．43±12．42)μmol/L、(26．65±5．68)NU／ml高(P<0．05),B组 cTnI(11．07±2．62)mg／L、MDA(2．48±0．51)nmol／ml、LDH(592．8±51．92)U／L较对照组(23．16± 2．76)mg／L、(4．48±0．54)nmol／ml、(719．80±292．16)U／L低(P<0．05),B组PaO2(207．60± 32．72)mmHg(1 mm Hg=0．133 kPa)高于对照组(130．20±13．36)mm Hg(P<0．05),A、B组W／DR (84．82±1．14)％、83．84±1．63)％小于对照组(88．44±1．42)％(P<0．05),电镜检查A、B组心肺损伤轻于对照组。结论供心肺可安全保存4-5 h,在心肺移植实验中加入L-Arg可使NO含量增加, 减轻心肺缺血再灌注损伤,B组(500 mg／kg体重)效果更好。     

左旋卡尼汀对离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨左旋卡尼汀增补于停搏液中对离体鼠心再灌注损伤的保护作用。方法将32只SD大鼠随机分为左旋卡尼汀3个剂量(2．5、5．0、10．0 mmol／L)组和对照组。离体鼠心在改良的Langendorff灌注模型上30 min预灌注,120 min缺血、60 min再灌注。缺血前及再灌注期间测定血流动力学指标、心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和三磷酸腺苷(ATP)水平。电镜观察心肌超微结构。结果再灌注60 min后,左旋卡尼汀5 mmol／L剂量组和10 mmol／L剂量组与对照组相比,冠脉流量(CF)[(68．39±12．71)％、(72．27±6．27)％比(44．94±13．26)％]、左室收缩压(LVSP)[(73．04±3．32)％、(77．8±3．80)％比(62．29±4．14)％]、左室舒张末压(LVEDP)[(0．38±0．01)、(0．36±0．01)比(0．43±0．01)mmHg(1mmHg=0．133 kPa)]、左室压力变化速率(+dp／dt)[(69．66±0．92)％、(71．34±0．66)％比(62．16±1．21))％]、(-dp／dt) [(68．39±12．71)％、(72．27±6．27)％比(44．94±13．26)％],其差异均有统计学意义(P＜0．01)。心肌超微结构的改善,也优于对照组,尤其是10 mmol／L剂量组,2．5 ml／L组没有变化。左旋卡尼汀5 mmol／L剂量组和10 mmol／L剂量组丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(19．04±0．41)、(17．60±0．53)nmol／mg蛋白比(27．36±1．23)nmol／mg蛋白,P＜0．01),超氧化物歧化酶(SOD) [(218．20±14．91)、(238．63±7．61)U／mg蛋白比(141．80±15．17)U／mg蛋白]含量和三磷酸腺苷(ATP)水平[(3．83±0．20)、(5．26±0．18)μmol／L比(1．36±0．08)μmol／L]显著高于对照组(P＜0．01)。结论左旋卡尼汀(5～10 mmol／L)增补于停搏液中可减轻心肌缺血再灌注损伤,具有良好的心肌保护作用并在一定范围内呈剂量依赖性,10mmol／L剂量组心肌保护效果最佳。     

关于吡咯烷二巯基氨甲酸减轻大鼠肾缺血再灌注损伤的机制研究

目的：探讨肾缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤中细胞凋亡的发生机制和吡咯烷二巯基氨甲酸（pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC）对其保护作用。方法：健康雄性Wistar大鼠随机分为3组：（1）I/R组：建立大鼠肾I/R模型;（2）PDTC组：I/R前20 min经大鼠尾静脉注射PDTC 100 mg/kg;（3）假手术组。分别于不同时间点（即0 h、2 h、8 h、24 h）处死。免疫组化检测肾组织中NF-κB、caspase-3蛋白的表达,ELISA检测肾组织匀浆中iNOS活性和NO的含量。结果：I/R组NF-κB表达于再灌注后2 h明显升高,8 h达到高峰,主要表达于胞核中,24 h开始下降;iNOS、NO、caspase-3于再灌注后2 h开始表达上调,此后一直呈上升趋势,与假手术组和PDTC组相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）。PDTC组上述指标,再灌注后2 h时表达上调,8 h达到高峰,与假手术组比较均差异有统计学意义（P〈0.05）,再灌注后24 h,差异无统计学意义。结论：肾I/R损伤可引起肾组织结构损伤和细胞凋亡,这与NF-κB引起的NO高表达有关,应用NF-κB抑制剂PDTC可发挥明显的保护作用。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路和核因子-κB/抑制因子κB通路在烧伤后促炎性细胞因子产生中的相互作用

目的探讨烧伤后p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路和核因子(NF)-κB/抑制因子(I)κB通路在调控细胞因子产生方面的地位及是否存在相互作用。方法人单核细胞株THP-1分为正常血清对照组、烧伤血清组、烧伤血清+SB203580组(p38 MAPK特异性抑制剂)和烧伤血清+PDTC(NF-κB特异性抑制剂)组,每组均实验8次。血清刺激24 h后,酶联免疫吸附法测定上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的含量,蛋白印迹(W estern b lot)法检测THP-1内p38 MAPK的活性和IκBα的表达,凝胶电泳迁移率变化分析法检测THP-1内NF-κB和激活蛋白(AP-1)活性的变化。结果和正常血清相比,烧伤血清刺激后24 h,THP-1上清液中TNF-α和IL-1β的含量均明显上升[分别为(7.30±0.84)ng/m l和(2.20±0.28)ng/m l,P<0.05;(2.88±0.38)ng/m l和(0.81±0.14)ng/m l,P<0.05],p38 MAPK活性升高(4728±582和1291±163,P<0.05),IκBα含量下降(1211±115和2658±318,P<0.05),THP-1中NF-κB活性和AP-1活性均较正常血清显著升高(1636±170和317±32,P<0.05;946±137和361±40,P<0.05),使用SB203580和PDTC均能抑制烧伤血清刺激后THP-1上清液中TNF-α和IL-1β的含量的上升。预先给予SB203580能抑制烧伤血清刺激后THP-1中p38 MAPK和AP-1活性升高,但对IκBα含量和NF-κB活性无显著影响;预先给予PDTC可以防止烧伤血清刺激后THP-1中IκBα含量的下降和NF-κB活性的升高,而对p38 MAPK和AP-1活性无影响。结论在烧伤后全身炎症反应的发生中,p38 MAPK信号转导通路和NF-κB/IκB通路是两个平行和独立的信号转导通路,彼此之间没有直接的联系,共同调节着烧伤后单核细胞TNF-α和IL-1β的产生。     

严重烧伤患者休克期降钙素基因相关肽及神经肽Y的变化对心脏功能的影响

目的研究严重烧伤患者休克期降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽Y(NPY)的变化对心脏功能的影响。方法将60例严重烧伤(烧伤总面积32％-96％TBSA)患者设为试验组,常规进行休克期液体复苏和创面处理;另选60例健康志愿者作为对照组。检测试验组患者伤后1、3、6、12、24、48 h和对照组人员血液中CGRP、NPY、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的含量,并对其进行相关性分析。结果伤后3 h试验组患者CGRP水平为(28±6)ng／L,较对照组(55±7)ng／L降低,12 h达低谷(15±4)ng／L,伤后48 h仍低于对照组(P<0．05)。伤后1h试验组NPY、cTnT值[(136±20) ng／L、(0．41±0．08)μg/L]较对照组[(86±13)g／L、(0.16±0．06)／μg／L]升高,12 h达峰值[(189±31)ng／L、(1．78±0．47)μg／L],48 h仍高于对照组(P<0．05)。CGRP与cTnT变化呈显著负相关(r=-0.76,P<0．01);NPY与cTnT变化呈显著正相关(r=0．79,P<0．01)。结论血液中CGRP值降低、NPY值升高在严重烧伤休克期心肌损害中可能起着重要作用。     

转Endostatin基因角朊细胞移植对烧伤深Ⅱ°创面愈合及瘢痕增生的影响

目的探讨转内皮生长抑制素(ES)基因角朊细胞移植对烧伤深Ⅱ°创面愈合及瘢痕增生的影响。方法将人体皮肤移植于裸鼠并造成深Ⅱ°烧伤创面。实验分为对照组(11只)、单纯角朊细胞移植组及转ES基因角朊细胞移植组(各10只)。对照组不行细胞移植,创面自行愈合;单纯角朊细胞移植组创面移植培养人角朊细胞;转基因移植组移植转ES基因角朊细胞。观察各组裸鼠创面愈合特点、瘢痕增生情况,并对愈合区组织进行病理切片检查、检测愈合区皮肤组织ES 蛋白表达、I、Ⅲ型前胶原含量。结果转基因移植组裸鼠创面愈合时间(13±5)d与单纯移植组 (14±5)d差异无统计学意义(P>0．05),但明显短于对照组[(25±7)d,P<0．01]。对照组裸鼠创面愈合后瘢痕增生明显,伤后100 d厚度≥0．22 cm,单纯移植组瘢痕增生厚度≥0．17 cm,转基因移植组仅有轻度瘢痕增生,愈合区皮肤组织ES蛋白检测阳性。单纯移植组、转基因移植组愈合区组织前胶原I含量(65．3±8．5)μg／g,(61．4±7．0)μg／g、前胶原I／前胶原Ⅲ比例(0．66±0．15,0．57± 0．13)明显低于对照组(1．51±0．37,P<0．01),而前胶原Ⅲ含量显著高于对照组(P<0．01)。结论转ES基因移植既可加速创面封闭,又能抑制愈合后瘢痕形成。     

蔗糖铁注射液治疗维持性血液透析患者肾性贫血的前瞻性、随机对照多中心研究

目的比较蔗糖铁(森铁能)与右旋糖酐铁(科莫非)静脉注射液治疗维持性血液透析(MHD)患者缺铁性贫血的疗效与安全性。方法采用前瞻性、随机对照的多中心研究。 80例MHD患者分为试验组(蔗糖铁组)与对照组(右旋糖酐铁组),每组各40例。治疗前,两组患者男女性别比例、年龄、维持透析时间、血红蛋白(Hb)、红细胞比容(Hct)、铁蛋白(SP)和转铁蛋白饱和度(TSAT)等均无显著性差异。将100 mg蔗糖铁和100 mg右旋糖酐铁分别稀释于 100 ml生理盐水,于每次血透时使用。每周治疗2次,治疗时间为5周,观察时间共8周。两组患者的总补铁量均为1000 mg。全部病例都合并使用红细胞生成素(FPO)治疗,剂量为120～150 U·kg-1·周-1,皮下或静脉应用。观察并比较两组患者治疗贫血的效果、铁代谢指标变化及不良反应发生情况。结果经治疗后,试验组与对照组的Hb均较治疗前显著升高,分别为[(98．85± 17．45)g／L比 (75．20±9．66)g／L,P<0．01]和[(94．93±14．03)g／L比(75．53±10．61)g／L,P< 0．01];Hct也较治疗前明显升高(P<0．01),而试验组的上升幅度大于对照组,但差异无统计学意义。治疗后两组铁蛋白和转铁蛋白饱和度均明显高于治疗前,试验组铁蛋白为[(399．92± 200．90)μg／L比(106．61±78．24)μg／L,P<0．01];转铁蛋白饱和度为[(27．28±11．87)μg／L比 (17．95±9．17)μg/L,P<0．01]。试验组的上升幅度大于对照组,但两组相比差异无统计学意义。两组患者血清BUN、Scr、ALT和AST等均无明显变化。两组患者均无严重不良反应发生,对照组有1例发生下肢肌肉酸痛。结论蔗糖铁是治疗伴有缺铁的血液透析患者肾性贫血的一种安全而有效的药物。     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注时NF-κB活化和Bcl-2、Caspase-3基因表达的影响

目的观察异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注时NF-κB的活化和Bcl-2、Caspase-3基因表达的影响,并探讨其脑保护的机制。方法 90只雄性Wistar大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,随机将大鼠分为假手术组、缺血再灌注组(I／R)和异丙酚组(缺血前10 min腹腔注射异丙酚100 mg·kg-1)。各组根据再灌注时间不同又分为缺血2 h再灌注2、3、6、12、24、72 h亚组, 每亚组各5只大鼠。于再灌注2、6、12、24 h,采用免疫组织化学染色法分析NF-κB的移位,蛋白质印迹法检测NF-κB的表达量。于再灌注3、6、24、72 h,采用原位杂交法法检测脑组织Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA的表达。于再灌注24 h作神经功能缺陷评分及苏木精-伊红(HE)染色观察缺血皮层组织形态学变化。结果与假手术组比较,I／R组缺血侧大脑皮层NF-κB于再灌注2-24 h明显从细胞浆移位于细胞核内,NF-κB和Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA的表达量增加(P<0．01),大鼠神经功能缺陷评分升高(P<0．01),组织形态学观察可见皮层水肿、淤血,神经元变性坏死。与I／R组比较,异丙酚组NF- κB从细胞浆向细胞核的移位被抑制,NF-κB和Caspase-3 mRNA的表达量减少(P<0．05),Bcl-2 mRNA 的表达量增加(P<0．05),神经功能缺陷评分降低(P<0．05),缺血大脑皮层组织形态学损伤减轻。结论异丙酚的脑保护作用可能与其抑制NF-κB的活化,上调Bcl-2基因和下调Caspase-3基因的表达,从而抑制神经组织细胞凋亡有关。     

C5a反义肽对脓毒症小鼠的保护作用及其机制

目的研究C5a反义肽R4在小鼠体内拮抗C5a的活性以及它对小鼠CLP后脓毒症的保护作用。方法小鼠CLP后分为实验组和对照组,实验组小鼠CLP后立即尾静脉注射反义肽 R4,剂量分别按1．0、2．0、4．0、8．0mg／kg体重,观察小鼠的生存率。取实验组小鼠(4 mg／kg体重) 取血液和肺组织,检测血清ALT、AST、BUN、肌酸酐、尿酸和肺的髓过氧化物酶(MPO)浓度。结果 (1)对照组小鼠ALT、AST、BUN、肌酸酐、尿酸、肺的MPO浓度分别为(344．416±29．786)、 (375．350±13．373)U／L,(25．233±6．006)mmol／L、(48．933±7．306)、(456．000±152．526)μmol／ ml、(4．476±0．880)U／g。正常小鼠组以上参数分别依次为(24．520±8．097)、(116．983±40．963) U／L、(6．917±1．585)mmol／L、(11．083±1．833)μmol／ml、(52．800±9．200)μmol／ml,(0．456± 0．081)U／g。实验组以上参数分别依次为(60．933±7．960)、(163．433±7．925)U／L,(7．200± 1．311)mmol／L,(18．600±1．708)μmol／ml,(158．166±6．924)μmol／ml,(1．005±0．107)U／g。对照组较实验组和正常组小鼠损伤明显,实验组小鼠以上参数较对照组的发生有意义的改善(P< 0．05)。(2)实验组小鼠生存率(33％～50％)比对照组小鼠明显提高(P<0．05)。结论该结果显示 C5a反义肽在小鼠体内有着良好的拮抗C5a的作用,揭示了治疗脓毒症的一种新的药物治疗范畴。     

肿瘤坏死因子-α对肿瘤抑制基因RECK在HepG2细胞中表达的调节作用

目的 探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α对人肝癌细胞HepG2肿瘤抑制基因RECK表达的影响，检测核转录因子（NF）-κB在RECK基因表达的调控中的作用。方法 将培养的细胞分为3组，A组用4种浓度的TNF-α（1、5、50、100μg／L）作用人肝癌细胞HepG2细胞株6h，B组用浓度为50μg／L的TNF-α分别作用HepG2细胞1、6、12、24h，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测RECK mRNA的表达；C组将NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡硌烷（PDTC，10mol／L）与TNF-α（50μg／L）同时作用以及TNF-α（50μg／L）单独作用于HepG2细胞6h，凝胶滞留电泳实验（EMSA）DNA结合反应检测NF-κB出的活性，RT-PCR和Western blot分别检测RECK基因mRNA和蛋白的表达。明胶酶谱试验检测细胞MMP-9的活性。结果HepG2细胞中RECK基因无表达。TNF-α作用后RECK的表达显著增高，作用呈时间和剂量依赖关系（P〈0．01），TNF-α能激活NF-κB并能显著抑制HepG2细胞MMP-9的活性（P〈0．01），而PDTC能显著的抑制这种作用（P〈0．01）。结论TNF-α能上调RECK基因在肝癌细胞系HepG2中的表达同时抑制细胞MMP-9的活性。而NF-κB可能参与了这一过程。     

三碘甲状腺原氨酸在心肌保护中的药理性预适应作用

目的探讨三碘甲状腺原氨酸(T3)预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及相关机制。方法40只SD大鼠随机均分为5组正常对照组,缺血损伤(I/R)组,缺血预适应(IP)组,三碘甲状腺原氨酸(T3)组,三碘甲状腺原氨酸+格列本脲(Glib+T3)组。采用Langendorff灌注实验装置,观察各组心肌缺血再灌注前后心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)、心肌乳酸脱氢酶(LDH)、心肌激酸肌酶同工酶(CK-MB)的含量变化,并取心肌组织行电镜超微结构检查。结果与I/R组相比,T3组(3.0ng/L)明显增加心肌组织SOD的活性[(66.44±7.53)对(46.18±7.81)μmol/mg,P<0.05],减少MDA[(56.17±8.57)对(73.47±7.38)μmol/mg,P<0.05]含量;减少大鼠冠脉流出液中心肌LDH[(29.9±4.5)对(58.1±4.6)IU/L,P<0.05]和CK-MB[(36.7±3.4)对(56.2±3.1)IU/L,P<0.05]的含量,而30μmol/L的Glib与T3合用后,上述心肌保护作用被部分抵消。结论经T3预处理的大鼠心肌具有确切的抗再灌注损伤作用,这一保护作用与KATP通道开放有关。     

建立胰腺癌黏液蛋白核芯肽-连续重复序列核酸疫苗的实验研究

目的构建胰腺癌黏液蛋白核芯肽连续重复序列(MUC1-VNTR)核酸疫苗,研究疫苗所诱生的免疫应答。方法将重组人VNTR基因定向克隆入真核表达载体pcDNA3．1／Myc-his(+) A质粒的多克隆位点中,构建胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗。C57BL／6(H-2b)小鼠2次免疫2周后取血检测抗VNTR抗体,取脾细胞体外以VNTR合成肽特异刺激培养6 d后进行细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)杀伤试验。结果疫苗组小鼠脾细胞CTL的特异性杀伤率(34．8±3．1)％显著高于载体对照组[(9．2±0．8)％,P<0．01]和空白对照组[(6．1±0．6)％,P<0．01]。CTL对未经VNTR合成肽孵育的靶细胞EL4-VNTR杀伤较低(P<0．01)。VU 3C6可抑制CTL对经VNTR合成肽孵育的靶细胞E14-VNTR+的杀伤活性(P<0．01)。疫苗组小鼠血清抗VNTR抗体等效浓度(2324±238)μg/ml 高于载体对照组(1896±533)μg／ml和空白对照组(1736±142)μg／ml,P<0．01。结论本实验构建的胰腺癌MUC1—VNTR核酸疫苗免疫C57BL／6小鼠后可诱生VNTR特异的CTL应答和抗体应答。