白细胞介素-17/Th17细胞与血管炎性疾病

CD4+辅助性T淋巴细胞是一群由多个亚型细胞共同组成的复杂细胞群,包括Th1细胞、Th2细胞、调节性T细胞和Th17细胞.这些细胞来源于共同的原始T淋巴细胞,在体内不同的微环境下发育为生物学功能有显著差异、甚至完全相反的各类效应细胞,并分别具有各自特异的转录因子.Th17 细胞是最近发现的CD4+助性T细胞亚群,在自身免疫性疾病和慢性炎症的发病、发展、转归过程中有非常重要的作用.Th17细胞主要分泌白细胞介素(interleukin,IL)-17A、IL-17F、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)等细胞因子.IL-17A,又名IL-17,虽然它主要由记忆性T淋巴细胞分泌,但却在天然免疫和宿主防御中有着特殊功能.越来越多的实验证据表明,IL-17、Th17细胞在血管炎性疾病的发生、发展中具有一定的作用,本文拟就近几年对IL-17/Th17细胞和血管炎性疾病关系的研究进展进行综述.     

白细胞介素-33促进胶原诱导性关节炎的实验研究

目的 探讨新型细胞因子自细胞介素(IL)-33在胶原诱导性关节炎(CIA)发病中的作用.方法 建它DBA/1小鼠的CIA模型.以牛Ⅱ型胶原(CⅡ)/完全福氏佐剂(CFA)免疫,从免疫后第21天开始每天注射IL-33或磷酸盐缓冲液(PBS)共5 d.免疫后第28天取小鼠淋巴结细胞体外培养,培养上清的细胞因子浓度以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测或Luminex检测.同时检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体和血清中的细胞因子浓度.鼠爪脱钙后行病理检查.采用两样本均数的t检验、χ~2检验进行统计学处理.结果 IL-33可使小鼠实验性的关节炎发病加重,致炎性细胞因子和抗Ⅱ型胶原抗体产生增多(P<0.05).PBS组与IL-33组的IgG2a型Ⅱ型胶原抗体为[(1.24±0.33)mg/L和(1.96±0.16)mg/L,P<0.05],而IgG1型抗Ⅱ型胶原抗体为[(1.1±0.4)ms/L和(1.7±0.4)mg/L,P<0.05).结论 IL-33是炎性关节病中的重要致炎因子.这一IL-1家族新成员是潜在的类风湿关节炎(RA)治疗靶点.     

质粒编码白细胞介素-4在胶原诱导鼠关节炎中的作用研究

目的 评价由基因枪和真皮内注射两种途径给予编码白细胞介素(IL)-4质粒对Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导鼠关节炎(CIA)的治疗效果。方法 采用两种途径把编码IL-4质粒给予CⅡ诱导的142只DBA／l小鼠，并对临床可见症状评分；抗CⅡIgG用酶联免疫吸附试验检测，质粒IL-4 cDNA用聚合酶链反应(PCR)法检测。结果 与真皮内注射比较，基因枪给予质粒IL-4更能有效抑制CⅡ诱导关节炎发生和严重程度：与对照质粒比较，体外cⅡ诱导和基因枪治疗小鼠脾细胞多Th2细胞因子应答。结论 IL-4质粒可以作为类风湿关节炎基因治疗的一种新的临床手段。     

独活寄生汤抑制白细胞介素-1β诱导的软骨细胞凋亡的作用机制

目的探讨独活寄生汤抑制白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞凋亡的作用机制。方法从8只SPF级SD大鼠膝关节分离获取软骨细胞并培养,采用Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定。噻唑蓝(MTT)检测不同浓度独活寄生汤对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响,从而优化独活寄生汤最佳干预浓度。将第2代软骨细胞随机分为空白组、模型组、独活寄生汤组,空白组以含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养液培养,模型组以10 ng/ml IL-1β和10%FBS的DMEM培养液培养,独活寄生汤组采用300μg/ml独活寄生汤、10 ng/ml IL-1β和10%FBS的DMEM培养液培养。干预48 h,逆转录PCR检测各组软骨细胞中miR-98的表达;Western印迹法检测各组软骨细胞中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达。结果Ⅱ型胶原免疫组化染色后阳性组软骨细胞胞质为棕黄色。100、200、300、400μg/ml独活寄生汤均能抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,以300μg/ml独活寄生汤最为明显(P0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组软骨细胞中miR-98表达明显下降(P0.05)。与模型组比较,独活寄生汤组软骨细胞中的Bcl-2蛋白表达显著升高,而Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达明显下降(P0.05)。结论独活寄生汤能够抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,可能是通过下调miR-98起作用的。     

白细胞介素-6在溃疡性结肠炎模型小鼠Th17/Treg细胞失衡中的作用

目的研究白细胞介素-6(IL-6)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型小鼠结肠固有层黏膜局部Th17和调节性T细胞(Treg)失衡中的作用。方法制备葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC模型小鼠(UC组,n=5),检测UC组小鼠和正常对照组小鼠(NC组,n=5)结肠固有层黏膜单个核细胞中Th17细胞及Treg细胞的水平,用CBA检测细胞培养上清IL-6、IL-10、IL-17等细胞因子的水平。结果在DSS诱导的UC小鼠结肠固有层黏膜中,Th17细胞水平均高于NC组(P0.05);IL-17A水平高于NC组(P0.05);Treg细胞水平显著高于NC组(P0.05)。UC模型小鼠结肠固有层黏膜单核细胞培养上清液中IL-10表达水平均低于NC组(P0.05)。UC模型小鼠血清及结肠固有层黏膜单核细胞中,IL-6的水平高于NC组(P0.05),而在其他组织中,两组差异无统计学意义(P0.05);在UC模型小鼠中,血清及结肠固有层单核细胞中IL-6的水平高于其他组织(P0.05)。结论在UC模型小鼠结肠固有层黏膜中存在Th17/Treg细胞的失衡,局部IL-6升高参与了Th17/Treg细胞间的分化失衡,从而在UC模型小鼠的免疫异常发病中起重要作用。     

三氧化二砷对胶原诱导的关节炎大鼠凋亡及肿瘤坏死因子-α白细胞介素-1的作用

目的研究三氧化二砷（As2O3）对Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）模型大鼠滑膜组织凋亡的影响,并进一步探讨As2O3对细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1的作用.方法将72只DA大鼠随机分成正常对照组、CIA大鼠模型组及不同浓度As2O3治疗组,共6组.As2O3治疗后第15天各组取膝关节滑膜、软骨和骨组织,光、电镜观察,TUNEL法检测凋亡.酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清细胞因子IL-1和TNF-α的浓度.结果治疗组滑膜组织病理改变比模型组减轻,滑膜细胞凋亡数明显增多,滑膜细胞超微结构接近正常对照组.并且与模型对照组相比,治疗组大鼠血清IL-1、TNF-α浓度降低,以第Ⅴ组和第Ⅵ组更显著（P＜0.01）.结论As2O3可能通过促进CIA大鼠滑膜细胞及组织的凋亡,抑制炎性因子TNF-α及IL-1的释放,起到减少CIA损害的保护作用.     

干扰素γ促进胰岛β细胞中白细胞介素18和白细胞介素1β转换酶的表达

目的：探讨白细胞介素18（IL－18）和IL－1β转换酶（caspase-1 )在胰岛β细胞的表达状况及其调控机制。方法：大鼠胰岛素瘤（RIN）细胞，FACS纯化的大鼠胰岛β细胞，大鼠离体胰岛和干扰素调节因子1（IRF－1）基因敲除小鼠的离体胰岛与细胞因子孵育后，用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测IL－18和caspase-1 mRNA的表达，用Western blot方法检测IL－18蛋白的表达。结果：（1）干扰素γ（IFN-γ）可增强IL－18mRNA在RIN细胞，纯化大鼠β细胞和大离体胰岛中的表达，该效应在IRF－1基因敲除小鼠胰岛中未见明显变化，（2）IFN-γ显著增强caspase-1mRNA在RIN细胞和大鼠离体胰岛中的表达，该效应在IRF－1基因敲除小鼠胰岛中完全消失；（3）在RIN细胞的培养上清液和细胞裂解物中未能检测到IL－18蛋白。结论：IFN-γ上调IL－18和caspase-1在胰岛β细胞中的表达，IL－18的表达不受转录因子IRF－1的影响，caspse-1的表达呈IRF－1依赖性。     

羧甲基壳聚糖抑制白细胞介素-1β诱导的软骨细胞凋亡及作用机制的研究

目的评价羧甲基壳聚糖对重组人白细胞介素(rhIL)-1β刺激下软骨细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养兔软骨细胞,加入不同浓度羧甲基壳聚糖预处理1h后,加入rhIL-1β共培养24h,通过Annexin V-FITC和PI双标及Hoechst 33342荧光染色检测软骨细胞凋亡；以罗丹明-123荧光染色检测线粒体膜电位和荧光素酶反应检测线粒体合成ATP能力来评价线粒体功能。结果羧甲基壳聚糖能明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,呈剂量依赖性；羧甲基壳聚糖可恢复IL-1β对软骨细胞线粒体功能的损害。结论羧甲基壳聚糖通过保护线粒体功能抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡。     

小剂量白细胞介素-18对胶原诱导性关节炎作用的研究

目的 研究小剂量白细胞介素(IL)-18对早晚期Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)的作用.方法 重组小鼠IL-18(0.2 μg/小鼠)每日1次腹腔注射发病前或发病晚期的CIA小鼠,连用5 d,用关节炎评分评估关节炎病情的进展,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的细胞因子表达水平;用组织学染色评价膝关节的软骨和骨破坏.结果 小剂量IL-18早期免疫干预CIA小鼠,不能降低CIA小鼠关节炎发病率,无法延缓CIA小鼠膝关节病理学进展;滑膜和软骨附近的Th1型细胞因子和Th2型细胞因子与对照组相比差异无统计学意义.小剂量IL-18晚期免疫干预CIA小鼠,加剧了病理学进展,免疫第43天,治疗组关节炎评分(0.33±0.11)显著高于对照组(0.25±0.09)(P<0.05);髌骨及邻近滑膜组织的细胞因子IL-10与IL-18结合蛋白(IL-18BP)与对照组相比显著降低(P<0.05).结论 IL-18对早期Ⅱ型胶原诱导的关节炎没有疗效.IL-18晚期免疫干预CIA小鼠,恶化了关节炎病情,其机制可能为IL-18抑制了IL-10和IL-18BP的表达.     

Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17在粉尘螨致敏哮喘小鼠中的变化

目的探讨Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17(IL-17)在粉尘螨致敏哮喘小鼠中的变化及其意义。方法 20只BALB/c小鼠随机均分为哮喘组和健康对照组。哮喘组小鼠于第0、7和14天每鼠腹腔注射200μl致敏液[含粉尘螨粗浸液提取物50μg,Al(OH)32 mg]致敏。末次免疫后1周采用粉尘螨粗浸液提取物连续进行滴鼻激发,每天1次,每次50μg,激发7次,健康对照组给予等体积的PBS[含Al(OH)32 mg]处理。末次激发后24 h内处死小鼠,取血清和肺泡灌洗液,无菌取脾脏。ELISA检测血清中Ig G1、Ig E和肺泡灌洗液中IL-17的含量;流式细胞仪检测脾脏中Th17细胞百分率。结果哮喘组小鼠血清中Ig G1和Ig E水平分别为(0.10±0.01)pg/ml和(1.15±0.10)pg/ml,高于健康对照组的(0.06±0.01)pg/ml和(0.04±0.01)pg/ml(P0.05);哮喘组小鼠肺泡灌洗液IL-17水平(85.13±2.36)pg/ml高于健康对照组(48.27±4.14)pg/ml(P0.01);哮喘组小鼠脾脏Th17细胞百分率(5.19±0.68)%高于健康对照组(0.95±0.19)%(P0.01),且脾脏Th17细胞百分率与肺泡灌洗液中IL-17水平呈正相关(r=0.851,P0.01)。结论粉尘螨致敏哮喘小鼠较健康小鼠肺泡灌洗液IL-17水平和脾脏Th17细胞数量均升高。     

小剂量白细胞介素-18联合白细胞介素-10在早期Ⅱ型胶原诱导性关节炎中的作用研究

目的 研究不同细胞因子微环境下,白细胞介素(IL)-18对早期Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)的作用.方法 CIA小鼠,发病前给予每只重组小鼠腹腔注射IL-18(0.2 μg/d)/IL-10(0.1 μg/d),IL-18(0.2 μg/d)IL-4(0.1 μg/d),IL-18(0.2 μg/d)IL-12(0.1 μg/d),连用5 d,用关节炎评分评估关节炎病情的进展,用反转录聚合酶链反虚(RT-PCR)测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的细胞因子表达水平;用组织学染色评价膝关节的软骨和骨破坏.采用Wilcoxon rank检验. 结果 IL-18/IL-4组关节炎评分轻度降低.IL-18/IL-10联合治疗有效抑制了C1A小鼠的关节炎症反应,免疫第38天治疗组关节炎评分(0.12±0.20)显著低于对照组(0.29±0.19,P<0.05),阻止了滑膜部位的炎细胞浸润,防止了软骨的破坏.滑膜和其附近软骨的Th1型细胞因子[IL-18(0.22±0.06),IL-12(0.14±0.05)]与炎症性细胞因子[IL-6(0.22±0.11)]水平与对照组相比显著降低(P<0.05),Th2型细胞因子[IL-10(6.35±0.12),IL-4(3.57±0.13)]水平与对照组相比明显升高(P<05). IL-18R(0.40±0.15)水平明显降低(P<0.05).T-bet水平降低,转录因子(GATA)-3水平(5.7l±0.11)显著升高(P<0.05).结论 IL-18/IL-10免疫干预尚未发病的CIA小鼠,可以抑制Th1型免疫反应,使免疫反应向Th2逆转,其机制可能为下调了IL-18/IL-18R水平,诱导了转录因子GATA-3的表达.     

髓系来源的抑制细胞在肝病发病中的作用研究进展

髓系来源的抑制细胞来源于骨髓祖细胞和未成熟的髓系细胞。近年来的研究表明,该细胞参与调节多种肝脏疾病的病理变化。本文系统地归纳了髓系来源的抑制细胞的历史、分群、作用机制和当前该细胞在各种肝病发病中的免疫调控作用及其与疾病进展的关系。     

白细胞介素-17在胶原诱导性关节炎大鼠血清水平及滑膜组织表达

目的探讨胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠不同时期血清白细胞介素（IL）-17水平及在滑膜组织的表达。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测造模组和正常对照组不同时期血清IL—17水平，用免疫组织化学过氧化物酶标记的链霉卵白素（S—P）法检测两组晚期关节滑膜组织IL—17表达。结果对照组和造模组均有一定水平IL—17表达，同期成模组较对照组和造模失败组明显升高（P〈0．01），成模组IL—17在早期就开始升高，到中晚期达到较高浓度，中晚期与早前相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。晚期成模组滑膜组织表达IL-17阳性率亦高于对照组和造模失败组（P〈0．01）。对不同时期血清IL—17水平与关节病理破坏程度进行直线相关性分析呈正相关（早期P〈0．01；中期P〈0．01；晚期P〈0．05）。结论IL—17在CIA大鼠滑膜组织及不同时期血清中高表达，与关节滑膜的病理破坏程度有关，可作为判断类风湿关节炎（RA）预后的重要指标。     

白细胞介素-1β在急性胰腺炎中的作用

急性胰腺炎（AP）发病率呈逐年增高趋势，其发病机制至今尚未完全阐明。在AP中，白细胞过度激活被认为是导致胰腺病变加重、多器官功能衰竭乃至死亡的重要原因。白细胞介素（IL）-1β是中性粒细胞趋化因子，近年大量研究表明IL-1β与AP密切相关，可能在AP的发生、发展中起一定作用，本文就相关内容作一综述。     

白细胞介素-17调控类风湿关节炎滑膜细胞整合素分子表达与增殖作用研究

整合素(integrin)是由α、β 2个亚基构成的异二聚体,在脊椎动物中整合素受体家族包括至少17个α亚基和9个β亚基,共同组成超过25种不同的整合素[1-2].在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的滑膜细胞表面,以αv,α9,β1为主[3].     

白细胞介素-1β诱导关节软骨细胞发生过早衰老的机制

目的 研究软骨降解因子白细胞介素(IL)-1β是否诱导关节软骨细胞发生过早衰老,以及caveolin-1是否介导IL-1β诱导的细胞衰老.方法 培养的关节软骨细胞在IL-1β(10 ng/ml)刺激后,流式细胞术分析细胞周期,染色法测定与衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性,测定累计的细胞群倍增次数反映细胞增殖寿命,Southem印迹测定平均端粒长度,细胞转染caveolin-1的反义寡核苷酸和外源性caveolin-1基因改变细胞内caveolin-1的表达水平,caveolin-1蛋白表达量采用Westem印迹分析.结果 IL-1p可诱导关节软骨细胞停滞在G0/G1期的比例明显升高,而处于S期的细胞比例减少.IL-1β单次刺激可使软骨细胞变得大而平、细胞内SA-β-Gal活性增高,IL-1β反复刺激可使细胞内平均端粒长度缩短加速、增殖寿命缩短.反义寡核苷酸抑制caveolin-1表达,可以阻抑IL-1β诱导的软骨细胞衰老;外源性基因增高细胞内caveolin-1表达,可诱导关节软骨细胞发生过早衰老.结论 IL-1β可诱导关节软骨细胞发生应激诱导的过早衰老和端粒依赖的复制性衰老,该作用是由caveolin-1介导的.提示IL-1β可能通过增高关节软骨细胞内caveolin-1表达,诱导细胞发生过早衰老,从而促进骨关节炎进展.     

羧甲基壳聚糖抑制白细胞介素-1β诱导的大鼠软骨细胞核因子-κB活化

目的 探讨羧甲基壳聚糖对白细胞介素(IL)-1β诱导下大鼠软骨细胞核因子(NF)-κB活化及一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 体外培养大鼠膝关节软骨细胞,用10ng/ml IL-1β刺激,并不加或加入不同浓度的羧甲基壳聚糖处理,通过蛋白质免疫印迹(Westem blot)检测NF-κBn和NF-κBc及I-κB表达,通过蛋白质免疫印迹和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析软骨细胞iNOS的表达.采用单因素方差分析.结果 羧甲基壳聚糖能明显抑制IL-1β诱导下软骨细胞I-κB的降解(0.21±0.06)和NF-κB的核转位,降低IL-1β诱导下软骨细胞iNOS和NO的产量.结论 羧甲基壳聚糖可能通过抑制NF-κB信号通路的活化,而下调IL-1β诱导的软骨细胞iNOS表达,从而保护IL-1β刺激下的软骨细胞.     

白细胞介素-17促进人肝星状细胞活化和胶原蛋白表达

背景:肝星状细胞(HSC)活化是肝纤维化发生、发展的中心环节。白细胞介素-17(IL-17)是辅助性T细胞17(Th17细胞)最重要的效应因子,可引起炎性细胞浸润和组织损伤。前期研究发现慢性乙型肝炎和自身免疫性肝炎患者肝组织中IL-17阳性表达细胞数与肝纤维化程度呈正相关,然而IL-17引起肝纤维化的机制尚未明确。目的:探讨IL-17对人HSC细胞株LX2活化和胶原蛋白表达的影响。方法:以不同浓度IL-17处理人HSC细胞株LX2,采用CCK-8实验检测细胞活力;采用实时荧光定量PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Col-ⅢmRNA表达;采用免疫荧光法检测α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白表达。结果:LX2细胞活力随IL-17浓度增加呈升高趋势,但各浓度组间差异无统计学意义(P0.05)。IL-17处理组(100 ng/mL)α-SMA、Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA表达水平均显著高于空白对照组(P0.05)。随着IL-17浓度的增加,α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白表达逐渐增高。结论:IL-17可促进HSC活化以及Col-Ⅰ、Col-Ⅲ表达,从而促进肝纤维化的发生、发展。     

白细胞介素-1β在心脏移植排斥反应中的作用

目的 :研究白细胞介素 (IL) 1β在大鼠心脏移植排斥反应中心脏局部的表达变化情况 ,探讨其在心脏移植急性排斥反应诊断中的可能作用。方法 :建立大鼠颈部异位心脏移植模型 ,不同品系大鼠之间的移植供、受体分别为SD大鼠和Wistar大鼠 (共 5 0只 ) ,同品系大鼠之间的移植供受体均为Wistar大鼠 (共 5 0只 )。观察移植心脏自然生存时间 ,另于术后第 1、3、5、7、9、11天 ,分别切取移植心脏各 5只 ,提取总RNA ,进行逆转录 ,将目的引物和对照引物在同一管中扩增 ,以两者像素值比值均数作曲线图 ,观察排斥反应时IL 1βmRNA的动态表达情况。结果 :不同品系移植心脏的停跳高峰出现在术后第 6～ 10天。排斥反应时移植心脏局部IL 1βmRNA的表达水平明显增高 ,峰值在术后第 1天。结论 :IL 1β在心脏移植排斥反应中可能起重要的作用 ,IL 1βmRNA的动态检测可望成为早期诊断急性排斥反应的指标     

胶原诱导性关节炎小鼠Th17细胞及相关信号蛋白的动态变化

目的研究鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠淋巴细胞Th17及其转录激活因子STAT3和细胞因子信号蛋白抑制分子SOCS3的动态变化。方法取168只DBA1/J小鼠随机平均分为模型组和对照组,用制备的Ⅱ型胶原乳剂免疫模型组小鼠,在初次免疫后第7、14、21天及加强免疫后第7、14、35天在无菌条件下取腹股沟淋巴结,应用流式细胞术和Western印迹技术检测各组Th17细胞及STAT3、SOCS3的变化情况。结果模型组Th17细胞在加强免疫14 d时比正常组明显升高(P0.05)。模型组STAT3的表达量在初次免疫14 d时比正常组显著升高(P0.05);加强免疫14、21 d比正常组显著升高(P0.05)。模型组SOCS3的表达量在初次免疫14 d时开始上升并持续到加强免疫14 d,与正常组比较具有明显差异(P0.05)。结论 Th17细胞参与了RA的炎症进展,其主要在CIA小鼠病程进展中期起作用,Th17细胞在CIA小鼠病程中的变化与转录激活因子STAT3和细胞因子信号蛋白抑制分子SOCS3有关。