参芪扶正注射液联合IFN-α对肝癌细胞STAT1基因表达的影响

目的:研究参芪扶正注射液与干扰素α(IFN-α)联用时对肝癌细胞STAT1基因表达的影响,探讨其对IFN-α协同增效的作用机制。方法:运用MTT法检测IFN-α注射液单独或与参芪扶正注射液联合对MHCC97-L细胞增殖的影响;运用Real-time PCR和Western-blot分别检测IFN-α单独或与参芪扶正注射液联用对STAT1 RNA和蛋白质表达的影响;构建STAT1干扰慢病毒载体并实现其在MHCC97-L中表达,通过RT-PCR、We s te rn-Blot验证其干扰STAT1表达的有效性;MTT法检测IFN-α单独或联合参芪扶正注射液对STAT1基因"沉默"细胞株增殖的影响。结果 :与单独使用IFN-α相比,参芪扶正注射液与IFN-α联用可以增强IFN-α对人肝癌MHCC97-L的抑制作用(P<0.01),并上调STAT1 mRNA(P<0.05)和蛋白质的表达(P<0.05);成功构建STAT1基因"沉默"的MHCC97-L细胞株;参芪扶正注射液协同IFN-α对STAT1基因"沉默"MHCC97-L的抑制率与单独使用IFN-α差异无统计学意义(P>0.05)。结论:参芪扶正注射液可上调人肝癌细胞MHCC97-L中STAT1的表达,从而提高IFN-α的疗效。     

参芪注射液协同IFN-α抑制肝癌细胞体外增殖、迁移能力和侵袭性的研究

目的：探讨参芪扶正注射液协同IFN-α对肝癌SM M C-7721细胞体外增殖与侵袭力的影响。方法：在SMMC-7721体外培养系中加入小剂量参芪扶正注射液（0.5 g/L）及IFN-α,MTT法检测参芪扶正注射液协同IFN-α对SMMC-7721细胞增殖作用的影响;Transwell检测参芪扶正注射液对SM M C-7721细胞迁移能力的抑制作用;Invasion实验检测参芪扶正注射液对SM M C-7721细胞增殖能力的影响。结果：与单独使用IFN-α相比较,参芪扶正注射液联合IFN-α能够降低SMMC-7721细胞的增殖能力（P<0.05）;同时还能够抑制SMMC-7721细胞的迁移能力（P<0.05）以及侵袭能力（P<0.05）。结论：参芪扶正注射液协同IFN-α在体外可以有效抑制SMMC-7721细胞的增殖能力,并降低其迁移力及侵袭性。     

参芪扶正注射液对淋巴细胞的作用

目的:观察参芪扶正注射液对淋巴细胞的作用.方法:用参芪扶正注射液处理Jurkat淋巴细胞,通过台盘兰染色计数和流式细胞计观察其对淋巴细胞的作用,用参芪处理过的淋巴细胞分别加入化疗药和肝癌细胞,观察两种细胞的反应.结果:参芪扶正注射液处理过的淋巴细胞,细胞增殖快,有较强的抵抗化疗药诱导凋亡的能力,杀伤肝癌细胞的能力增强.结论:参芪扶正注射液具有多方面的免疫调节作用.     

参芪扶正注射液联合多西他赛对乳腺癌患者细胞免疫功能影响

目的:探讨参芪扶正注射液联合多西他赛治疗乳腺癌晚期患者的临床疗效以及对细胞免疫功能的影响。方法:搜集晚期乳腺癌患者100例,按照随机数字表法随机分为两组,研究组采用参芪扶正注射液联合多西他赛常规化疗,对照组采用生理盐水联合多西他赛常规化疗,每组50例。所有患者均接受常规化疗方案,于治疗结束后观察疗效及T淋巴细胞亚群和树突状细胞指标的变化。结果:治疗后研究组完全缓解+部分缓解的患者为30例(60%),显著高于对照组17例(34%)(P0.05)。研究组患者CD3+、CD4+比例[(66.48±9.76)%和(42.89±8.66)%]和CD4+/CD8+比例[(1.88±0.84)%]均显著高于治疗前(59.68±8.54)%、(22.67±5.59)%、(1.06±0.56)%(P0.05),同时也显著高于治疗后的对照组(61.59±8.77)%、(25.16±4.69)%、(1.23±0.71)%(P0.05),而CD8+比例显著下降[(22.55±3.79)%],明显低于治疗前(29.36±4.62)%以及对照组(28.87±5.19)%患者(P0.05)。治疗后研究组患者CD80、CD83、CD86细胞百分比(9.29±2.78)%、(12.48±3.26)%、(48.17±11.21)%显著高于治疗前(6.76±1.59)%、(8.26±2.15)%、(35.49±8.73)%(P0.05),而对照组在治疗前后变化不显著(P0.05)。对照组总的不良反应事件为26例(52%),显著高于研究组患者14例(28%)(P0.05)。结论:参芪扶正注射液能够提高乳腺癌患者细胞免疫功能,在乳腺癌的化疗过程中可作为减毒增效的辅助用药。     

RNA干扰技术探讨参芪扶正注射液对MHCC97L细胞侵袭力的影响

目的:通过检测参芪扶正注射液对肝癌MHCC97L细胞侵袭力及其VEGF基因表达的影响,明确其降低肝癌瘤株侵袭力的作用,并通过RNA干扰技术加以验证。方法:在MHCC97L体外培养系中加入参芪扶正注射液(0.5 g/L)作用24 h后,Transwell检测参芪扶正注射液对MHCC97L细胞侵袭性的影响;同时使用Real-time PCR和Western-blot分别检测药物组、阴性对照组和空白对照组中VEGF基因的转录与表达情况,确定参芪扶正注射液对VEGF基因转录与表达的影响;构建VEGF干扰慢病毒载体并实现其在人肝癌细胞MHCC97L中表达,并通过RT-PCR、Western-Blot进行验证,确定其干扰VEGF基因表达的有效性;Transw ell检测参芪扶正注射液对VEGF沉默瘤株侵袭力的影响并与正常瘤株进行比较。结果:参芪扶正注射液能够降低MHCC97L细胞中VEGF基因的转录与表达(P0.05),并能够降低肿瘤侵袭力(P0.05);VEGF基因沉默瘤株构建成功;VEGF基因沉默后,参芪扶正注射液对MHCC97L瘤株侵袭力的影响不显著(P0.05)。结论:参芪扶正注射液可以通过抑制MHCC97L细胞VEGF基因的表达以降低其侵袭力。     

参芪扶正注射液对心脏瓣膜置换术的心肌保护作用

目的研究参芪扶正注射液(SF)对心肺转流(CPB)心脏瓣膜置换术中心肌缺血-再灌注的保护作用。方法48例择期行心内直视瓣膜替换术患者随机均分为两组,治疗组(SF组)应用SF500ml(250ml于阻断主动脉前泵入,250ml至术毕泵完);对照组(C组)以生理盐水500ml同法泵入。在麻醉诱导后15min(T0)、CPB30min(T1)及主动脉开放后30min(T2)、2h(T3)、12h(T4)、24h(T5)检测血清肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI);于T0、主动脉开放后5、10min时从冠状静脉窦取血测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)浓度。结果两组患者CK、CK-MB在T1~T5时与T0时比较均明显升高(P<0.01);SF组CK、cTnI T2~T5时升高幅度明显低于C组(P<0.01);SF组CK-MBT2~T4时升高幅度低于C组(P<0.05或P<0.01);在主动脉开放后5、10min时,两组SOD含量均有明显下降(P<0.01),而在开放后10minC组下降更明显(P<0.01);MDA含量在主动脉开放后5、10min两组均有明显升高(P<0.05或P<0.01),而C组升高更明显(P<0.01)。结论SF对心肌缺血-再灌注损伤有保护作用。     

RNAi沉默VEGF对胃癌细胞增殖的影响

目的利用RNA干扰技术抑制VEGF基因表达,探讨RNA干扰对胃癌细胞的增殖的影响。方法设计靶向VEGF基因shRNA．构建质粒pcDNA3．1-shRNA—VEGF并利用lipofectamine^TM2000转染胃癌细胞株BGC-823．采用RT—PCR和Western blot技术观察胃癌细胞VEGF mRNA及蛋白表达的变化,同时观察胃癌细胞增殖的变化。结果和对照组相比,VEGF—shRNAB、C组VEGF表达和细胞增殖均明显下调。结论RNAi明显抑制了VEGF的表达和胃癌细胞增殖。     

参芪扶正注射液对重症急性胰腺炎大鼠心肌保护的作用

目的:探讨参芪扶正注射液对SAP大鼠心肌保护的作用及机制。方法:清洁级雄性SD大鼠26只随机分为3组:K组为假手术组;M组为仅建立SAP大鼠模型组;S组为造模后予腹腔注射中药参芪扶正注射液。观察3组大鼠术后24h血清肌酸磷酸肌酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌细胞Na+-K+-ATPase活性、线粒体膜电位及心肌细胞凋亡指数,并对心脏及胰腺组织行病理学检查。结果:S组大鼠血清CK-MB、LDH、胰腺及心脏病理评分和心肌细胞凋亡指数均低于M组(P<0.01),但高于K组(P<0.01),S组Na+-K+-ATPase活性、线粒体膜电位没有降低的细胞比例高于M组(P<0.05),但低于K组(P<0.01)。结论:参芪扶正注射液对SAP引起的心肌损伤有保护作用。     

磁性纳米复合物对人肝癌细胞增殖能力的影响

目的探讨磁性纳米复合物对人肝细胞癌(肝癌)细胞(Hep G2细胞株)增殖能力的影响。方法以聚乙烯亚胺包被的磁性纳米复合物(PEI-SPIO)作为基因载体复合富含亮氨酸重复单位的G蛋白耦联受体(LGR)5-小干扰RNA(siRNA),待细胞融合达60%时转染Hep G2细胞建立PEI组,等量的单纯LGR5-siRNA转染Hep G2建立SI组,另设未转染对照(Ctrl)组。采用MRI T2扫描检测纳米复合物进入细胞的效率,细胞计数试剂盒(CCK)-8实验检测细胞增殖抑制率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞LGR5的信使核糖核酸(mRNA)表达水平,蛋白印迹法检测LGR5、cyclin D1蛋白表达。结果 PEI组Hep G2细胞的MRI T2信号明显减低。与Ctrl组相比,PEI组Hep G2细胞的细胞增殖抑制率明显升高,LGR5 mRNA的相对表达量和LGR5、cyclin D1蛋白相对表达量均明显降低(均为P0.05),而SI组细胞的相应指标差异无统计学意义(均为P0.05)。结论磁性纳米复合物PEI-SPIO复合LGR5-siRNA可有效转染Hep G2细胞,其机制可能是通过下调cyclin D1表达水平抑制人肝癌Hep G2细胞的增殖能力。     

GPR49基因对肝癌细胞增殖侵袭能力的影响

目的  探讨肝癌细胞系Huh7细胞中G蛋白偶联受体49(GPR49)基因对肝癌细胞侵袭能力的影响及其分子生物学机制。方法  根据转染的小干扰RNA(si-RNA)不同, 将Huh7细胞分为GPR49-siRNA(si-GPR49)组和阴性对照NC-siRNA(si-NC)组, 另设未转染Huh7细胞为对照组(control组)。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法分别检测3组细胞GPR49、细胞周期素D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)的信使核糖核酸(mRNA)和蛋白的表达。采用MTT法和Transwell法分别检测各组细胞增殖能力和侵袭能力。结果  si-GPR49组GPR49 mRNA的相对表达量为control组的(23.8±3.1)%(P < 0.05)。与control组相比, si-GPR49组GPR49、cyclin D1、MMP9蛋白的表达量均明显降低(均为P < 0.05)。MTT检测细胞增殖能力实验结果显示, si-GPR49组细胞在72 h的吸光度(OD)值(0.53±0.12)明显低于control组(1.35±0.28), 差异有统计学意义(P < 0.05)。si-GPR49组平均穿膜细胞数为(13.6±2.5)个, 明显低于control组的(65.3±6.1)个, 差异有统计学意义(P < 0.05)。结论  GPR49-siRNA可抑制Huh7细胞GPR49基因表达。其机制可能是通过降低cyclin D1水平抑制Huh7细胞的增殖能力, 通过影响MMP9蛋白表达水平抑制Huh7细胞的迁移和侵袭能力。     

Tet-on基因表达系统调控HIF-1α表达对肝癌细胞增殖的影响

目的 探讨HIF-1α表达对肝癌细胞增殖和细胞周期的影响.方法 利用Tet-on基因表达系统调控肝癌细胞系HepG2中HIF-1α的表达,检测细胞周期和细胞增殖的变化.结果 酶切和DNA测序证实Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α构建成功.获得了受强力霉素调控、稳定表达HIF-1α的肝癌细胞.随着强力霉素浓度增加,hiF-1α基因表达增加,HIF-1α在体外明显增加HepG2细胞增殖活性;G0/G1期细胞指数减少,细胞增殖指数增多.RT-PCR检测结果表明,随着HIF-1α基因表达增加,Cyclin A mRNA表达增加(P＜0.001),Cyclin D1和Cyclin E mRNA表达水平无明显变化(P＞0.05).结论 HIF-1α基因在体外可以通过HIF-1α表达水平的增加而促进肝癌细胞增殖活性,通过CyclinA表达增加缩短了肝癌细胞增殖周期.     

RNAi沉默pyk2基因对鼠脑胶质瘤细胞增殖、侵袭能力的影响

目的 探讨pyk2小干扰RNA表达载体对小鼠脑胶质瘤G422细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 用以pGenesil-1质粒为载体,以pyk2为靶基因,构建短发夹状小干扰RNA表达载体.用pyk2短发夹状小干扰RNA表达载体转染体外培养的人脑胶质瘤G422细胞,反转录聚合酶链反应和Western blot法检测pyk2基因和蛋白表达的改变,噻唑蓝(MTT)比色法检测转染后细胞的增殖情况,Transwell小室法测定转染细胞体外侵袭能力.结果 构建了pGenesil-1-pyk2重组质粒,并成功转染G422细胞.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)显示pyk2 siRNA转染G422细胞后显著降低pyk2mRNA的表达,以48 h为著,下降近70%;Western blot证实转染后pyk2蛋白的表达下降近65%;G422细胞的活力降低为(67.1±5.2)%;Transwell小室测定转染细胞体外侵袭能力明显下降.结论 pGenesil-1-pyk2 siRNA重组质粒明显下调pyk2在胶质瘤细胞中的表达,并抑制肿瘤细胞增殖,抑制其侵袭能力.     

加热联合吲哚美辛对人肝癌MHCC97L细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 观察水浴加热联合吲哚美辛对人肝癌MHCC97L细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 42℃水浴加热前2h加入0.2 mmol/L吲哚美辛,加热组不加药,对照组不加热、不加药,其他处理相同并在同一时间点观察.在不同的时间观察细胞增殖、生长曲线、克隆形成率、流式细胞术(FCM)分析细胞周期、侵袭、运动、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达[酶联免疫吸附试验(ELISA)法].结果 与对照组比较,加热+吲哚美辛明显抑制MHCC97L细胞增殖(P＜0.01),其最大抑制效应为加热后48 h(53.6％),细胞倍增时间延长了2.07倍;加热+吲哚美辛组48、96 h的细胞集落形成率均明显降低(P ＜0.01);FCM显示,吲哚美辛能逆转加热对细胞周期的影响,加热+吲哚美辛组48 h和96 h的G1期细胞比例均明显升高,S+G2期细胞比例均明显降低(P＜0.05).加热+吲哚美辛组48 h和96 h相同数量的细胞穿过人工基底膜到达Transwell小室膜背面的细胞平均数(侵袭实验)和穿过Transwell小室膜到达背面的MHCC97L细胞平均数(运动实验)均明显低于加热组(P＜0.01);ELISA法检测发现,加热+吲哚美辛组48、96 h的分泌量均明显低于加热组(P＜0.05).结论 吲哚美辛抑制体外加热后肝癌细胞的增殖,其作用和抑制细胞进入DNA合成期和分裂期有关;进一步抑制其侵袭运动能力,其作用和MMP-2、VEGF表达降低有关.     

常氧条件下调控表达缺氧诱导因子1α对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨在体外常氧条件下,诱导表达缺氧诱导因子1d（HIF-1α）对肝癌细胞（HepG2）增殖及侵袭能力的影响。方法利用Tet—on基因调控系统构建能诱导表达HIF-1α的HepG2^Tet-on-HIF-1α“细胞系;常氧条件下,噻唑兰法检测HIF-1α对细胞增殖、黏附能力的影响,Transwell法检测其对HepG2细胞侵袭能力的影响。结果常氧条件下,强力霉素（1μg／m1）可诱导HepG2^Tet-on-HIF-1α“细胞HIF-1αmRNA和蛋白表达增加;增殖实验中,Dox（＋）组与Dox（一）组各时段吸光度A490nm值无差异（P〉0．05）;黏附实验中,Dox（＋）组的A490nm值明显高于Dox（-）组（P=0．008）;Dox（＋）组侵袭细胞数[（37．6114-8．424）个]明显高于Dox（-）组[（25．3334-8．117）个]（P〈0．01）。结论Tet—on基因调控系统可上调HIF-1α mRNA的转录并增加其蛋白的表达;常氧条件下,HIF-1α不影响HepG2细胞的增殖,但明显增加其黏附和侵袭能力。     

参芪扶正注射液辅助治疗肺癌合并阻塞性肺部感染者的疗效及对血清细胞因子的影响

目的研究参芪扶正注射液辅助治疗肺癌合并阻塞性肺部感染者的疗效及对血清细胞因子的影响。 方法以2016年2月至2018年2月东莞市桥头医院收治的肺癌合并阻塞性肺部感染者104例为研究对象,以随机数字表法均分成研究组（52例）和对照组（52例）。对照组患者予以肺癌合并阻塞性肺部感染常规治疗。研究组患者则在对照组治疗基础上予以参芪扶正注射液辅助治疗。比较两组患者的临床疗效及相关临床指标,治疗前后血清降钙素原（PCT）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、白细胞介素6（IL-6）及白细胞介素8（IL-8）水平,不良反应发生率。 结果研究组患者治疗总有效率为96.15%（50/52）,高于对照组[82.69%（43/52）],差异有统计学意义（χ² = 4.981、P = 0.026）。研究组患者体温复常时间、白细胞计数恢复时间、住院天数均低于对照组患者（t = 4.107、2.359、6.017,P均< 0.05）。治疗后研究组患者血清PCT、hs-CRP、MMP-9、IL-6及IL-8水平均低于对照组,差异均有统计学意义（t = 22.324、3.531、10.156、20.866、21.583,P均< 0.05）。研究组患者不良反应发生率显著低于对照组,差异有统计学意义（χ² = 4.727,P = 0.030）。 结论参芪扶正注射液辅助治疗肺癌合并阻塞性肺部感染者的疗效显著,有利于促进患者康复,同时可有效降低血清细胞因子水平,安全性较好。     

RhoA基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响

目的 构建RhoA-siRNA表达载体,研究其对肝癌HepG2细胞肿瘤生物学行为的影响.方法 利用pGenesil-1 质粒构建RhoA-siRNA表达载体,以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞中建立稳定细胞系,并分为3组.转染 pGenesil-1-RhoA-siRNA 载体者为HepG2/RhoA-siRNA组,转染随机对照载体者为HepG2/control组,未转染的肝癌HepG2细胞作为HepG2组.Western blot检测RhoA-siRNA对其蛋白表达的抑制情况.分别采用MTT法、细胞划痕损伤和平板克隆形成实验检测转染细胞的增殖、迁移和生长潜能,流式细胞仪检测细胞周期变化.采用单凶素方差分析、x2检验比较各组差异.结果 3组细胞蛋白表达水平比较,HepG2/RhoA-siRNA组RhoA蛋白的表达明显下调(F=178.19,P<0.05).HepG2/control组和HepG2组细胞划痕损伤在48 h内愈合,而HepG2/RhoA-siRNA组则不能愈合.HepG2/RhoA-siRNA组克隆形成率低于HepG2组和HepG2/control组,分别为39%±3%、67%±5%、70%±6%,其差异有统计学意义(χ2=33.34,38.69,P<0.05).RhoA基因沉默显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖,细胞周期中G0/G1期细胞数量增多而S期细胞数量减少(F=70.46,76.57,P<0.05).结论 RhoA-siRNA表达载体能抑制肝癌HepG2细胞的增殖和迁移,可为肝癌的基因治疗提供新的方法.     

RhoA基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响

Objective To construct a RhoA-siRNA expression vector and determine its role on the malig-nant behavior of HepG2 cells.Methods A RhoA-siRNA DNA fragment was synthesized and cloned into the expression vector of pGenesil-1.The constructed Rhon-siRNA DNA plasmid was stably transfected into HerG2 cells by lipofectamine,and then HepG2 cells were divided into the HepG2/RhoA-siRNA group (HepG2 cells were transfected with pGenesil-1-RhoA-siRNA),HepG2/control group(HepG2 cells were transfected with control plasmid) and HepG2 group (without plasmid transfection).The inbibitory effect of RhoA-siRNA on RhoA protein expression was shown by Western blot.The proliferation,migration,growth potentiality and cell cycle of transfected HepG2 cells were evaluated by MTT assay,wounded healing,the plate cloning formation test and flow cytometry,respectively.All data were analyzed by one-way analysis of variance (ANOVA) and chi-square test.Results The expression of RhoA protein in the HepG2/RhoA-siRNA group was,significantly decreased compared with that in the other two groups (F=178.19,P<0.05).Scratched cells were healed within 48 hours in the HepG2/control group and HepG2 group,but not in the HepG2/RhoA-siRNA group.The clone formation rates in the HepG2/RhoA-siRNA group,HepG2 group and HepG2/control group were 39%±3%,67%±5%and 70%±6%,respectively,with a significant difference among the three groups(χ2=33.34,38.69,P<0.05).Flow cytometry showed that the number of cells transfected with RhoA-siRNA was highest in the G0/G1 phase and lowest in the S phase(F=70.46,76.57.P<0.05).Conclusion The RhoA-siRNA expression vector can effectively suppress the proliferation and migration of HepG2 cells,which may provide a novel gene therapy for hepatocellular carcinoma.     

围介入手术期联合应用IFN-α及ATRA治疗肝癌的机制探讨

目的 在围介入治疗间期,探讨一种疗效好、副作用少的辅助治疗方法 .方法 建立肝癌细胞CBRH7919的大鼠动物模型,选22只接种瘤块组织的Wistar大鼠,3周瘤块形成后全部给予肝动脉结扎.分为2组:(1)对照组(12只):给予腹腔注射等量生理盐水,(2)干扰素-α(IFN-α)和全反式维甲酸(ATRA)联合高剂量组(10只):腹腔给予IFN-α(1000 000 U·kg~(-1)·qod~(-1))隔天1次,腹腔给予ATRA(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))1次/d,于肝动脉结扎后第1天开始用药,治疗10 d后处死动物,测肿瘤组织中转移相关基因表达水平、蛋白表达水平、肿瘤微血管密度及肿瘤细胞凋亡.结果 RT-PCR法检测肿瘤组织中转移相关基因VEGF、bFGF的mRNA表达,两组相比,IFN-α联合ATRA处理组的肿瘤组织中bFGF和VEGF表达显著下降(P＜0.05).免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF、bFGF的蛋白表达水平与RT-PCR结果 一致,IFN-α和ATRA联合处理组的肿瘤组织中bFGF和VEGF下降明显,bFGF表达很弱,而VEGF几乎不表达.ELISA法检测血清中VEGF水平,对照组血清VEGF浓度为(92.5±13.9)pg/ml,IFN-α和ATRA联合处理组血清VEGF浓度为(69.85±20.4)pg/ml,两者相比有统计学差异(P＜0.05).免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD),对照组的肿瘤组织中可见到较多的新生血管,而在IFN-α和ATRA联合处理组的肿瘤组织中新生血管明显减少.MVD在对照组为(114±18)/HP,IFN-α和ATRA联合处理组为(66±5)/HP(P＜0.01).肿瘤细胞凋亡的检测,两组相比,IFN-α和ATRA联合处理组,肿瘤组织出现较大面积的坏死,流式细胞仪检测发现坏死细胞(Annexin V~-PI~+)显著增多,而早期凋亡细胞比例并明显增高.TUNEL法镜下观察到凋亡细胞的细胞核被染成蓝紫色,染色质分布不均.对照组和治疗组的凋亡指数分别为(3.74±1.57)%、(12.34±4.78)%,差异具有显著性(P＜0.05).结论 联合应用IFN-α及ATRA可以抑制肿瘤新生血管形成,进而抑制肝癌生长和转移,提示两种作为抗肿瘤血管形成的药物在介入治疗间期的早期联合应用,在临床防治肝癌术后的复发转移中有一定的作用.     

损伤相关模式分子对人肝癌HepG2细胞增殖能力的影响

目的 观察在DAMPs诱导下人肝癌HepG2细胞增殖能力的变化.方法 将HepG2细胞分为对照组和实验组（10、20、40、80 μl DAMPs处理的HepG2细胞）;MTT比色法检测HepG2细胞的增殖能力;实时荧光定量PCR法检测IL-6 mRNA表达的变化;Western Blot法检测HepG2细胞IL-6蛋白的表达情况.结果 HepG2细胞随着DAMPs剂量的递增及时间的延长增殖能力逐渐增强,呈现明显的量效-时效关系,在剂量40 μl,作用时间36 h时细胞增殖能力达到最强,差异有统计学意义（P〈0.01）;选取作用时间为36 h,随着DAMPs剂量的递增,实时定量PCR法检测到HepG2细胞IL-6 mRNA分别为95.55±4.47,171.80±6.60,453.30±14.47,610.59±12.70,441.04±18.91,差异有统计学意义（P〈0.01）;Western Blot法检测HepG2细胞IL-6蛋白的表达分别为1.47、2.07、2.74、3.44、3.00,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 DAMPs在一定剂量及时间内促进人肝癌HepG2细胞增殖,并且呈现明显的量效-时效关系.     

腹腔镜肝癌根治术联合扶正解毒法治疗原发性肝癌的效果及对肿瘤标志物的影响

目的:探讨腹腔镜肝癌根治术联合扶正解毒法在原发性肝癌患者中的临床应用效果及对其肿瘤标志物的影响。方法:选择 2015年 1月—2017年 10月常州市金坛区人民医院收治的原发性肝癌患者 140例,随机分为两组,各 70例。对照组采用腹腔镜肝癌根治术治疗,观察组在对照组基础上联合扶正解毒法治疗,治疗 4周后,对患者效果进行评估,比较两组近期疗效、证候积分及肿瘤标志物水平。结果:治疗 4周后,观察组的近期有效率为 81.43%,高于对照组的 54.29%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的乏力(0.84±0.21)分、肋痛( 0.91±0.24)分、纳差( 0.87±0.23)分、腹水( 0.94±0.27)分及腹胀评分(0.63±0.16)分均低于对照组,差异有统计学意义( P<0.001);观察组的血清甲胎蛋白( AFP)(13.49±1.21) μg/L、癌胚抗原( CEA)(3.22±0.46)ng/mL及糖类抗原 199(CA199)(21.59±3.41)U/L水平均低于对照组,差异有统计学意义( P<0.001)。结论:腹腔镜肝癌根治术联合扶正解毒法治疗原发性肝癌能获得较好的近期疗效,可降低证候积分及肿瘤标志物水平,值得推广应用。