膀胱上皮癌ΔNp63、p53及ki-67基因表达与预后的相关性研究

目的探讨ΔNp63在膀胱移行细胞癌（transitional cell carcinoma of bladder,TCCB）中作用及联合检测ΔNp63、p53和ki-67与膀胱上皮癌预后的相关性。方法用免疫组化检测56例膀胱移行细胞癌组织ΔNp63、p53和ki-67的表达,分析免疫染色结果与病理分级、分期和预后的关系。结果膀胱移行细胞癌中ΔNp63、p53和ki-67阳性表达率明显高于正常膀胱黏膜,在高级别、浸润性癌组织中的阳性表达率明显高于低级别、浅表性癌组织,各组阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）;ΔNp63与p53、Ki-67均呈正相关,rs′分别为0.298、0.316,相关性有统计学意义（P〈0.05）。结论ΔNp63可能是TCCB发生和发展的重要促进因素,与膀胱癌的预后密切相关,联合检测ΔNp63、p53和ki-67可以更好地判断TCCB的预后。     

膀胱移行细胞癌中Ki-67与p53及VEGF的表达及临床意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌（TCCB）中Ki-67与p53、VEGF的表达与TCCB临床病理特征的关系及其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色方法检测113例TCCB组织中Ki-67、p53及VEGF的表达,并将结果与临床分期、病理分级进行相关性分析。结果：TCCB中Ki-67、p53和VEGF的表达率分别为82．3％（93／113）、80．5％（91／113）、90．3％（102／113）,Ki-67、p53的表达率及表达强度随着TCCB的临床分期、病理分级的升高而升高（P〈0．05）,VEGF的表达率和表达强度与肿瘤的临床分期呈正相关（P〈0．05）,与病理分级无显著相关性（P〉0．05）;Ki-67与p53、VEGF均呈正相关,r分别为0．240、0．239,相关性有统计学意义（P〈0．05）;在高分期、高分级组TCCB中Ki-67和p53、Ki-67和VEGF联合阳性表达率高于低分期、低分级组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Ki-67的表达与TCCB的恶性程度有关,其与p53和VEGF的过度表达对TCCB的发生、发展起着协同的作用,Ki-67与p53、VEGF的联合检测更有助于TCCB临床分期、病理分级、预后判断及术后辅助治疗方案的制定。     

膀胱移行细胞癌中Survivin与Ki-67、p53的表达及临床意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌中Survivin、p53及Ki-67的表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系及其临床意义. 方法 用免疫组织化学方法 检测88例膀胱移行细胞癌与10例正常膀胱黏膜组织中Survivin、p53及Ki-67的表达,并用RT-PCR方法 验证其中30例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜组织中Survivin的表达. 结果 免疫组织化学方法 显示在膀胱移行细胞癌中Survivin、p53阳性表达率分别为63.6%(56/88)和45.5%(40/88),正常膀胱黏膜组织中均无表达,差异有统计学意义(P<0.01),且Survivin的表达与膀胱癌的临床分期密切相关(P<0.05).膀胱癌组织中Ki-67增殖指数(PI)为20.4士10.7,正常膀胱黏膜组织中为0.RT-PCR方法 显示在30例膀胱移行细胞癌中Survivin阳性表达率为100%,而正常膀胱黏膜组织中均无表达.结论 Survivin与膀胱癌的恶性程度有关,与p53及Ki-67共同参与了膀胱移行细胞癌的发生、发展及进程.     

短发卡RNA表达质粒的构建及对△Np63基因的抑制作用

目的构建△Np63特异性短发卡RNA(shRNA)表达质粒,检测△Np63-shRNA对膀胱移行细胞癌(TCCB)细胞株5637中△Np63信使RNA(mRNA)表达的抑制作用。方法设计合成△Np63 shRNA短链寡核苷酸,克隆到Pgenesil-1质粒载体中,构建△Np63特异shRNA表达质粒,在转染试剂介导下转染5637细胞,6孔板每孔加入0.4μg质粒。半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测△Np63 mRNA表达水平。结果经PstI SalI双酶切及测序鉴定△Np63-shR- NA表达质粒构建成功。在受转染的5637细胞内△Np63-shRNA干预组△Np63 mRNA水平明显低于control组与PBS组(p<0.05),与control组和PBS组比较抑制率分别为57.3%和63.0%。结论△Np63特异性shRNA在5637细胞中对△Np63 mRNA表达显示出很好的抑制作用。     

Cyclin D1、p27、ki-67在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨Cyclin D1、p27、ki-67在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测72例BTCC和8例正常膀胱黏膜组织中Cyclin D1、p27、ki-67的表达。结果CyclinD1及ki-67在BTCC中的表达明显高于正常对照，而p27的表达低于正常对照，且均与膀胱肿瘤的分级分期相关。结论Cyelin D1、p27、ki-67的表达可能与BTCC的生物学行为有关。     

P33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨抑癌基因p33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其与突变型P53蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶复合物（SP）方法,检测64例膀胱移行细胞癌组织标本中P33^ING1b、突变型P53蛋白的表达,并与15例正常膀胱黏膜组织进行对照研究。结果64例膀胱移行细胞癌组织中,P33^ING1b蛋白的阳性表达率为64.06%,而正常膀胱黏膜组织中P33^ING1b蛋白阳性表达率为93.33%。P33^ING1b蛋白的表达与膀胱移行细胞癌的WHO肿瘤分级有相关性。根据Spearman相关分析表明P33^ING1b蛋白表达与P53蛋白表达正相关（P〈0.05）。结论P33^ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达下降,可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,p33ING1b与p53基因具有协同作用,同时检测P33^ING1b与P53的表达水平,将有助于膀胱移行细胞癌的诊断与治疗。     

△Np63α在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨原癌基因△Np63α在食管鳞癌中的表达及与临床预后的相关性.方法 应用免疫组织化学SABC法检测304例食管鳞癌组织中△Np63α表达水平及与临床病理的相关性.结果 食管鳞癌组织中△Np63α阳性表达为40％(122/304例);与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P=0.034).△Np63α表达水平与淋巴结转移、分化程度、浸润深度、TNM分期、VEGF表达均明显相关(P=0.001).多因素统计分析提示△Np63α阳性是食管鳞癌预后的独立危险因素(P=0.001).结论 △Np63α阳性表达与肿瘤的复发、转移密切相关.     

CK20和Ki-67在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞角质蛋白20（CK20）和细胞核相关抗原（Ki-67）在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法对经临床确诊的膀胱移行细胞癌患者癌组织标本中CK20（66例）和Ki-67（55例）的表达结果进行回顾性分析。结果CK20在膀胱移行细胞癌表达的阳性率为68．2％（45／66）。CK20表达的阳性指数与膀胱移行细胞癌临床分期和细胞分级均呈正相关（P〈0．05）。复发膀胱移行细胞癌组CK20阳性表达率92．3％（12／13）高于初发膀胱移行细胞癌组62．3％（33／53）（P〈0.05）。Ki-67在膀胱移行细胞癌表达的阳性率为63．6％（35／55）。Ki-67表达的阳性指数与膀胱移行细胞癌细胞分级呈正相关（P〈0.05）。复发膀胱移行细胞癌组Ki-67阳性表达率90．9％（10／11）高于初发膀胱移行细胞癌组56．8％（25／44）（P〈0．05）。Ki-67和CK20的表达阳性指数呈正相关（r=0．493,P〈0．05）。结论研究结果表明CK20和Ki-67的表达与膀胱移行细胞癌的生物学行为相关,因此CK20和Ki-67可作为膀胱移行细胞癌肿瘤病理分级分期以及预后判断的辅助手段。     

ΔNp63蛋白在膀胱移行上皮癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨 p5 3基因家族新成员截短型p6 3(△Np6 3)在膀胱癌组织中的表达及其意义。 方法 :采用免疫组织化学SP法检测 4 0例膀胱移行上皮癌 (TCC)、6例膀胱内翻性乳头状瘤和 8例正常膀胱移行上皮中△Np6 3的表达 ,并分析△Np6 3表达与膀胱癌病理类型、临床分期的关系。 结果 :正常膀胱移行上皮、膀胱内翻性乳头状瘤、TCC中△Np6 3的阳性表达率分别为 37.5 % (3/ 8)、6 6 .7% (4/ 6 )、10 0 % (40 / 4 0 ) ,组间差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。TCCG3 级与G2 级△Np6 3的强阳性、中度阳性表达率显著高于G1级 (P <0 .0 1)。Ta～T1期以△Np6 3弱阳性为主 (6 6 .7% ) ,随TCC浸润程度的增加 ,△Np6 3染色强度逐渐增强。T2 期△Np6 3强阳性表达率为 35 .3% ,T3 ～T4期增至 6 3.6 %。结论 :△Np6 3在TCC中高表达 ,与TCC病理分级、临床分期密切相关 ;△Np6 3可能参与TCC的发生、发展 ,是评估TCC预后的潜在因素之一。     

膀胱移行细胞癌mP53和PCNA表达的相关性及临床意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)突变型P53基因(mP53)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的相关性及临床意义.方法 应用免疫组化二步法,检测50例BTCC组织和10例正常膀胱黏膜中mP53、PCNA的表达,结合临床病理资料进行统计分析.结果 50例BTCC mP53阳性表达率66%,PCNA阳性表达率76%;10例正常膀胱黏膜mP53和PCNA的表达均为阴性(P<0.05);mP53和PCNA表达呈正相关(r=0.63,P<0.05);mP53和PCNA阳性表达率在浸润型肿瘤组、G2和G3级肿瘤组、复发组均较高(P均<0.05).结论 mP53和PCNA在膀胱移行细胞癌中表达均增高,二者与BTCC分期、细胞的分级、复发相关,可作为判断BTCC预后的参考指标.     

膀胱移行细胞癌组织中p16、p53和PCNA的表达及其意义

目的:探讨p16、p53蛋白及PCNA在膀胱移行细胞癌的表达及其与病理分级和临床分期关系.方法:采用免疫组化SABC法并结合图像分析方法检测40例膀胱移行细胞癌中p16、p53蛋白及PCNA的表达.结果:3种蛋白在膀胱肿瘤中的表达与正常膀胱组织均有显著差异.p16与病理分级及临床分期呈负相关,p53、PCNA与病理分级呈正相关.结论:p16与p53可作为膀胱移行细胞癌分化程度和预后判断的参考指标,而PC-NA可作为预后判断辅助指标.     

OPN在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的通过检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of the bladder,TCCB)组织及癌旁正常膀胱组织中的表达情况,探讨其在肿瘤组织中的表达与肿瘤的临床分期、病理分级之间的关系,为临床病理诊断及预后判断提供一定的理论依据。方法收集2010年1月至2015年9月在本院泌尿外科手术切除的TCCB组织标本65例,应用免疫组织化学S-P法对65例TCCB组织以及10例癌旁正常膀胱组织标本进行OPN的检测,结合这些患者的临床病历资料进行分析:(1)OPN在TCCB组织与癌旁正常膀胱组织中的表达差异;(2)OPN在TCCB组织中的异常表达与TCCB的临床分期、病理分级之间的关系。结果 OPN在TCCB组织中的阳性表达率为47.7%,在癌旁膀胱正常组织中不表达,其阳性表达率与TCCB的病理分级和临床分期密切相关(P0.05)。结论 OPN对TCCB的病理诊断有一定的意义,可能与TCCB的发生存在一定的关联,可作为TCCB病理诊断的标记物之一;同时,OPN可作为TCCB临床分期及病理分级的一项客观指标,可能与肿瘤的侵袭及转移密切相关,可以帮助判断患者的预后。     

乙酰肝素酶在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨乙酰肝素酶(Heparanase,HPA)在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学方法检测68例膀胱移行细胞癌、24例癌旁组织、15例正常膀胱组织中HPA mRNA的水平及蛋白表达定位,并结合患者临床病理指标及预后进行分析.结果:膀胱移行细胞癌中HPA mRNA检出阳性41例(60.3%),24例癌旁组织中阳性1例(4.2%),1 5例正常膀胱组织中全部阴性,分别与癌组织组比较差异有统计学意义(P<0.01),HPA mRNA的表达在膀胱移行细胞癌不同病理分级、临床分期及淋巴结转移与否分组中显著不同(P<0.01).免疫组织化学结果显示,HPA定位于细胞质及细胞核,阳性率为77.9%(53例),在膀胱移行细胞癌淋巴结转移与否分组中显著不同(P<0.01).结论:HPA在膀胱移行细胞癌的生长浸润、侵袭转移中可能发挥重要作用,可为膀胱移行细胞癌生物学行为和预后的判断提供较客观指标.     

膀胱移行细胞癌中环氧化酶-2表达及其预后价值

目的探讨与膀胱移行细胞癌预后相关的新诊断方法。方法采用免疫组化SP法,检侧68例原发性膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织标本环氧化酶-2(COX-2)的表达,结合临床资料,探讨其相互联系以及其表达与预后的关系。结果68例膀胱移行细胞癌组织中COX-2阳性表达率为63.2%(43/68),与病理分级、临床分期、血管浸润有关(P<0.05),而与淋巴结是否转移无显著性差异(P>0.05);对照组10例正常膀胱黏膜COX-2表达均为阴性;COX-2表达阳性生存超过5年者(54.1%)明显低于COX-2表达阴性者(91.3%)(P<0.05)。结论COX-2表达与膀胱移行细胞癌的恶性程度密切相关,检测COX-2表达对判断膀胱移行细胞癌预后有重要意义。     

膀胱尿路上皮癌中S-100、p53和Ki-67的表达及临床意义

目的：研究膀胱尿路上皮癌中S-100、p53和Ki-67的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测60例膀胱尿路上皮癌及15例正常膀胱组织中S-i00蛋白、p53和Ki-67的表达情况。结果：S-100、p53和Ki-67在膀胱尿路上皮癌中的表达均高于其在正常膀胱黏膜中的表达。膀胱尿路上皮癌组织中S-100阳性表达随着肿瘤病理分级、临床分期的升高而降低;p53与Ki-67阳性表达率随肿瘤病理分级、临床分期的升高而升高;S-100低表达和p53与Ki-67高表达与术后复发密切相关。结论：联合检测S-100、p53及Ki-67的表达可以作为判断膀胱尿路上皮癌生物学行为及预后的重要指标。     

细胞核增殖抗原与E-钙黏蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨细胞核增殖抗原(Ki-67)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测Ki-67、E-cadherin在48例膀胱移行细胞癌组织中的表达,统计分析其表达与膀胱移行细胞癌临床病理、分期之间的关系.结果 Ki-67、E-cadherin在膀胱移行细胞癌中的阳性表达率分别是83.3％和47.9％,两者呈负相关(P＜0.05).两者表达水平与肿瘤临床分期及病理分级明显相关(P＜0.05).结论 检测Ki-67与E-cadherin有助于判断膀胱移行细胞癌侵袭和转移能力.     

O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的：研究O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）在膀胱移行细胞癌（TCCB）组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测60例膀胱移行细胞癌中MGMT的表达,统计分析其与肿瘤临床病理的关系。结果：膀胱癌组织中MGMT阳性表达率为35．0％（21／60）,明显低于癌旁组织（76．7％．46／60）及正常膀胱组织（86．7％,13／15）（P〈0．015;MGMT蛋白的表达与膀胱移行细胞癌组织分化程度有关（P＜0．05）。而与临床分期无明显关系。结论：MGMT在膀胱移行细胞癌的发生和发展中起抑制作用;MGMT蛋白的表达可能是预断膀胱癌预后的重要指标。     

肝细胞生长因子及其受体在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞生长因子及其受体c-Met在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化方法检测8例正常膀胱黏膜标本及45例膀胱移行细胞癌标本中HGF及c-Met的表达;并以分级、分期、复发、转移等临床特征分组,比较各组的阳性表达率。结果8例正常膀胱黏膜中HGF均为阴性表达,c-Met仅1例为弱阳性表达。而45例膀胱移行细胞癌标本中,两者阳性表达率分别为64.4%和62.2%,共表达率42.2%。肿瘤组织与正常膀胱黏膜比较,HGF及c-Met的表达差异均有统计学意义。肿瘤初发和复发组HGF阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01);Tis~T1组及T2~T4组c-Met的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01)。结论HGF及其受体c-Met在膀胱移行细胞癌中呈过度表达,该信号传导通路主要以自分泌方式激活,在膀胱移行细胞癌的发生、发展及术后复发中可能起重要作用。     

基质金属蛋白酶-7和组织型金属蛋白酶抑制因子-1在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-7（MMP-7）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学技术检测60例膀胱移行细胞癌[Ⅰ级25例,Ⅱ级15例,Ⅲ级20例;浅表性膀胱癌（T1a-T1）29例,浸润性（T2-T4）31例]和5例正常膀胱组织中MMP-7和TIMP-1的表达情况,X2检验分析其表达与膀胱移行细胞癌分级分期的关系。结果MMP-7和TIMP-1在正常膀胱组织中不表达,而在膀胱移行细胞癌组织表达较强。60例膀胱移行细胞癌标本中MMP-7阳性表达40例（66．7％）。MMP-7的阳性表达率与肿瘤的病理分级显著相关,而与肿瘤的临床分期无明显相关性。60例膀胱移行细胞癌标本中TIMP-1阳性表达32例（53．3％）。TIMP-1在不同的组织分化程度,不同临床分期之间均差异无统计学意义（P〉0．05）。而MMP-7／TIMP-1表达比值与肿瘤的病理分级显著相关。结论MMP-7及MMP-7／TIMP-1比值可反映膀胱移行细胞癌的恶性程度,为膀胱移行细胞癌的预后判断提供一种新的参考指标。     

膀胱癌中EPO及其受体的实验研究

目的:通过检测膀胱移行细胞癌(TCC)中的促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)表达,并结合临床病理分级探讨其意义。方法:70例膀胱TCC组织、15例癌旁组织、10例正常膀胱组织分别以免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测EPO和EPOR的蛋白和mRNA的表达。结果:膀胱TCC组织中EPO蛋白阳性表达率62.9%(44/70),EPOR蛋白阳性表达率41.4%(29/70);15例膀胱TCC癌旁组织及10例正常膀胱组织均未见EPO、EPOR蛋白的表达。EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级相关(rs=0.329,P<0.05),而与临床分期无明显的相关性。RT-PCR检测发现膀胱移行细胞癌组织中EPO及EPORmRNA的表达明显高于正常膀胱组织、癌旁组织中EPO及EPORmRNA的表达(P<0.01)。结论:EPO、EPOR在膀胱TCC组织中过表达,提示EPO、EPOR在膀胱TCC的发生、发展过程中可能起重要作用;EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级有明显相关性,可能成为膀胱TCC不良预后的指标之一。