海藻糖保护同种带瓣大动脉的最适浓度

背景：目前液氮低温保护组织和器官技术已经非常成熟,但其保护剂一直以来争论不一。目的：观察不同冷冻保护剂对液氮深低温冻存同种带瓣大动脉组织细胞凋亡和代谢的影响,寻求最佳的冷冻保护剂及冷冻保护剂的最适浓度。方法：取新西兰大白兔带瓣主动脉、肺动脉标本,将其在液氮中冻存12,15,18个月,冻存液分别使用0.1mol/L二甲基亚砜,0.1mol/L海藻糖,0.1mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜,0.2mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜,0.3mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜。标本复温后,免疫组织化学方法检测标本的细胞凋亡情况,葡萄糖消耗量测定法检测组织细胞的代谢水平。结果与结论：免疫组织化学和葡萄糖消耗量测定结果均显示经0.1mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜,0.2mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜冻存液处理的标本冻存效果最好,其次是经0.3mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜处理和经0.1mol/L海藻糖单独处理的标本,单独使用0.1mol/L二甲基亚砜处理的标本冻存效果最差。说明海藻糖对液氮深低温保存同种带瓣大动脉活性有很好的保护作用,单独使用海藻糖优于单独使用二甲基亚砜,联合应用海藻糖和二甲基亚砜效果更好,且联合应用的海藻糖最佳浓度范围是0.10~0.20mol/L。     

同种带瓣主动脉移植治疗矫正性大动脉转位的术后护理

总结应用同种带瓣主动脉移植治疗２４例矫正性大动脉转位的护理经验。本组病人均合并有其它心内畸形,传导束走行具有特殊性。术后应加强对心律变化的观察及起搏导线的护在植入带瓣主动脉,易发生感染和排斥反应,基础护理十分重要;要熟悉矫正性大动脉转位的解剖特点,让病人保持平卧或适宜体位,防止移植的主动脉扭曲、受压;指导病人正确抗凝;如发现移植的主动脉退化要及时处理,必要时再次手术。     

最适苦参碱浓度并用冻存保护剂对L-02人肝细胞系冻存保护的效应

目的：观察不同浓度剂量苦参碱与冻存保护剂联用对L-02人肝细胞系液氮冻存复苏后功能的影响，探索一种适合肝细胞保存的新方法。 方法：实验于2005—01／07在南方医科大学中心实验室进行。常规培养的L—02人细胞系用胰酶消化后，将收集的L-02人肝细胞系分别以6种不同的冻存液（10％二甲基亚砜、5％二甲基亚砜＋0mg／L苦参碱、5％二甲基亚砜＋0．2mg／L苦参碱、5％二甲基亚砜＋2mg／L苦参碱、5％二甲基亚砜＋6mg／L苦参碱、5％二甲基亚砜＋10mg／L苦参碱）在液氮中冷冻保存1个月。1个月后快速复苏L-02人肝细胞系，进行存活率、形态学及功能检测。结果：03复苏后L-02人肝细胞系的活存率5％二甲基亚砜＋6mg／L苦参碱组明显高于其他处理组[胰酶刚消化的细胞活率为（96．2&;#177;1．4）％，10％二甲基亚砜组（76．6&;#177;3．8）％，5％二甲基亚砜组（81．9&;#177;2．4）％，5％二甲基亚砜&;#177;0．2mg／L苦参碱组（81．6&;#177;2．4）％，5％二甲基亚砜＋2mg／L苦参碱组（84．7&;#177;2．8）％，5％二甲基亚砜＋6mg／L苦参碱组（89．6&;#177;3．4）％，5％二甲基亚砜＋10mg／L苦参碱组（86．9&;#177;1．6）％，P〉0．051。②复苏后5％二甲基亚砜＋6mg／L苦参碱组肝细胞完整性恢复快，肝细胞生长旺盛，细胞膜完整，胞浆内有丰富颗粒，核仁清楚，与未冻存组肝细胞形态相似。③复苏后L-02人肝细胞系培养上清液尿素含量、上清液白蛋白含量5％二甲基亚砜＋6mg／L苦参碱组明显高于其他处理组，与对照组无显著差异。 结论：①苦参碱对L-02人肝细胞液氮冻存有保护作用，6mg／L苦参碱是最好的浓度。②苦参碱、二甲基亚砜有协同作用，5％二甲基亚砜＋6mg／L苦参碱联合冻存保护体系显著提高L-02人肝细胞系的冻存质量。     

最适苦参碱浓度并用冻存保护剂对L-02人肝细胞系冻存保护的效应

目的:观察不同浓度剂量苦参碱与冻存保护剂联用对L-02人肝细胞系液氮冻存复苏后功能的影响,探索一种适合肝细胞保存的新方法。方法:实验于2005-01/07在南方医科大学中心实验室进行。常规培养的L-02人细胞系用胰酶消化后,将收集的L-02人肝细胞系分别以6种不同的冻存液(10%二甲基亚砜、5%二甲基亚砜 0mg/L苦参碱、5%二甲基亚砜 0.2mg/L苦参碱、5%二甲基亚砜 2mg/L苦参碱、5%二甲基亚砜 6mg/L苦参碱、5%二甲基亚砜 10mg/L苦参碱)在液氮中冷冻保存1个月。1个月后快速复苏L-02人肝细胞系,进行存活率、形态学及功能检测。结果:①复苏后L-02人肝细胞系的活存率5%二甲基亚砜 6mg/L苦参碱组明显高于其他处理组[胰酶刚消化的细胞活率为(96.2±1.4)%,10%二甲基亚砜组(76.6±3.8)%,5%二甲基亚砜组(81.9±2.4)%,5%二甲基亚砜 0.2mg/L苦参碱组(81.6±2.4)%,5%二甲基亚砜 2mg/L苦参碱组(84.7±2.8)%,5%二甲基亚砜 6mg/L苦参碱组(89.6±3.4)%,5%二甲基亚砜 10mg/L苦参碱组(86.9±1.6)%,P>0.05]。②复苏后5%二甲基亚砜 6mg/L苦参碱组肝细胞完整性恢复快,肝细胞生长旺盛,细胞膜完整,胞浆内有丰富颗粒,核仁清楚,与未冻存组肝细胞形态相似。③复苏后L-02人肝细胞系培养上清液尿素含量、上清液白蛋白含量5%二甲基亚砜 6mg/L苦参碱组明显高于其他处理组,与对照组无显著差异。结论:①苦参碱对L-02人肝细胞液氮冻存有保护作用,6mg/L苦参碱是最好的浓度。②苦参碱、二甲基亚砜有协同作用,5%二甲基亚砜 6mg/L苦参碱联合冻存保护体系显著提高L-02人肝细胞系的冻存质量。     

60Coγ照射加深低温保存对大鼠同种带瓣主肺动脉免疫原性的作用

目的本实验应用60Coγ射线照射加液氮深低温保存大鼠同种带瓣主肺动脉（Valvedpulmonary hongraf conduit,VPHC）,并建立大鼠VPHC颈总动脉移植模型,观察不同照射剂量对同种带瓣主肺动脉免疫原性的作用,寻找合适照射剂量,为进一步基础研究及临床应用提供理论依据。方法1月龄雌性Wistar大鼠50只,作为供体,成年雄性赋）大鼠50只,作为受体,随机分为实验对照组（单纯深低温保存组）、300Gy照射组、600Gy照射组、900Gy照射组和1200Gy照射组,另取10只sD大鼠行颈总动脉切断吻合术,作为空白对照组。应用流式细胞术对VPHC移植术后1周、2周、3周受体鼠外周血行CD4＋T细胞及CD8＋T细胞检测。结果600Gy照射组VPHC移植术后1周、2周、3周CD4＋T细胞、cD8＋T细胞百分率及cD4＋／cD8＋与空白对照组相比无显著性差异（P〉0．05）,与实验对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论应用60Gy 60Coγ射线对VPHC进行照射在保持VPHC活性的同时明显降低了其免疫原性。     

同种带瓣大动脉的制备及保存经验

同种带瓣管道移植治疗复杂先天性心脏病是一种较为理想的替代材料,逐渐获得广泛的临床应用,找院从１９９７年１２月~２０００年１２月共制作同种带瓣大动脉５５根,其中主动脉３０根,肺动脉２５根,现将同种带瓣大动脉的制备及保存方法介绍如下。     

低温保存同种异体带瓣主动脉移植的免疫反应

背景:前期研究证实,液氮低温保存同种异体主动脉能保持其细胞的生物活性和组织结构的完整性,但有关同种异体带瓣主动脉移植的排斥反应研究较少.目的:观察同种异体带瓣主动脉移植后移植物的免疫指标变化特点.方法:将低温保存的SD大鼠带瓣丰动脉异位植入Wistar大鼠腹主动脉,分组干预:同种异体移植组不进行干预;免疫干预组移植后给予环孢素A;对照组为假移植,将腹主动脉切断后直接吻合.移植后1,2,3,4,5周收集移植动物血清标本,免疫组织化学染色测量MHC Ⅱ阳性表达,淋巴细胞涂片免疫组织化学测定CD4+、CD8+百分率;应用酶联法测定血清中自细胞介素2,肿痛坏死因子α水平.结果与结论:同种异体主动脉移植后1～4周可见MHC显著阳性,CD4+、CD4+/CD8+比值明显增高,血清中自细胞介素2和肿瘤坏死因子α水平明显增高.并在移植后5周内维持较高水平,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05).环孢素A对同种异体主动脉移植物内膜增厚、淋巴细胞浸润、MHC Ⅱ表达、T淋巴细胞激活、白细胞介素2和肿瘤坏死因子α水平的增高具有明显抑制作用(P<0.05).说明低温保存同种异体主动脉移植后有明确的免疫排斥反应发生,环孢素A对同种异体移植后的免疫排斥反应有明显抑制作用.     

应用同种带瓣管道治疗复杂先天性心脏病的观察

通过对23例应用同种异体带瓣管道治疗复杂先天性心脏患者的观察。认为入院认真的宣教、术前正确的指导可消除病人的紧张、恐惧心理，使病人能积极的配合医疗方案，并加强术后观察，可减少并发症、提高疗效成功率为95.7％。死亡率4．3％o术后同种管道吻合口通畅，无压差、无扭曲和受压，同种瓣膜活动良好出院，出院后随访无死亡，紫绀消失，生长发育良好，能正常生活、学习。     

生物膜的保护剂海藻糖在冻干红细胞中的应用

海藻糖作为一种稳定的非还原性双糖，在细胞冷冻、干燥、冻干过程中对细胞活性有着良好的保护作用并已广泛应用于人血细胞的冻干．海藻糖以其异常的水合能力、独特的玻璃化转换和晶体转变行为及抗高温潮湿的特性受到密切关注，并成为细胞保存研究中首选的一种保护剂。海藻糖对细胞的保护机制、海藻糖导入哺乳细胞的实验方法以及红细胞对海藻糖负载的可能作用机制部是近几年细胞保存研究的热点，本文就以上几方面的进展详细进行论述.     

液氮保存的同种主动脉瓣光镜及电镜观察

目的 研究液氮保存对同种主动脉瓣（ＨＡＶ）组织结构的影响,为临床上合理使用ＨＡＶ提供理论依据。方法 用光镜及电镜对新鲜及液氮保存３个月、８个月、２４个月的ＨＡＶ进行了形态学观察。结果 光镜下各组瓣膜之间的组织结构无明显差异;电镜下,与新鲜ＨＡＶ相比,液氮保存３个月、８个月的ＨＡＶ超微结构改变较轻,保存２４个月的ＨＡＶ可见胶原纤维散乱溶解及断裂,成纤维细胞线粒体肿胀及内质网扩张。结论液氮保存对ＨＡＶ     

大剂量60Co γ照射加深低温保存对大鼠同种带瓣主动脉活性的影响

目的　研究大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活性与60 Coγ照射剂量之间的关系。方法　分别采用 30 0、6 0 0、90 0和 12 0 0Gy四种剂量对大鼠同种带瓣主动脉进行照射及在液氮中深低温保存三个月 ,观察不同剂量照射后同种带瓣主动脉的病理变化和内皮细胞活性。结果　大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活动度与照射剂量有关。在接受 30 0和6 0 0Gy照射时内皮细胞活动度分别为 (85 .6 7± 2 .5 8) %和 (83.5 5± 2 .75 ) % ,但它们与对照组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;在接受 90 0和 12 0 0Gy照射时内皮细胞活动度分别为 (72 .2 9± 1.96 ) %和 (32 .5 7± 3.4 8) % ,它们与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活动度与60 Coγ照射剂量有关 ,6 0 0Gy可作为参考剂量用于降低同种带瓣主动脉免疫原性的研究。     

Emergency aortic valve replacement for critical aortic stenosis

Objective: To demonstrate that emergency aortic valve replacement can be successfully performed in patients with critical aortic stenosis and reduced left ventricular function even in cardiogenic shock with associated severe multiple organ failure. Design: Retrospective, consecutive case series. Setting: Multidisciplinary intensive care unit of a tertiary care university hospital. Patients: Five patients admitted to the intensive care unit with critical aortic stenosis (aortic valve area 0.56 ± 0.13 cm²) and greatly reduced left ventricular ejection fraction (20 ± 3 %) in prolonged cardiogenic shock and associated multiple organ failure (Multiple organ failure score 6.8 ± 0.5; Acute Physiology, Age, and Chronic Health Evaluation III score 91 ± 27). Intervention: Emergency aortic valve replacement. Results: All patients survived with full recovery of organ function. At follow-up (18 ± 10 months) all patients were in New York Heart Association functional class I or II with improvement of left ventricular ejection fraction to 48 ± 25 %. Conclusions: This excellent outcome suggests that emergency aortic valve replacement should be strongly considered in patients with critical aortic stenosis even in cardiogenic shock and multiple organ failure.     

Indications for aortic valve replacement in aortic stenosis

Aortic stenosis is a common condition, particularly in the elderly. The treatment is surgical, and any patient with symptomatic severe aortic stenosis should be considered for aortic valve replacement. Aortic stenosis causes an increase in afterload to the left ventricle, which when severe can lead to hemodynamic instability. Although the therapy of aortic stenosis is valve replacement, determining whether a patient has symptoms and accurately assessing the severity of stenosis can be difficult. The management of patients with severe aortic stenosis in the intensive care unit setting can be very challenging, particularly when comorbid medical conditions make aortic valve replacement difficult. This article reviews the diagnosis of aortic stenosis, methods of assessing symptoms and severity, and management of severe symptomatic stenosis, particularly in the intensive care unit setting. Components of the history that suggest symptomatic aortic stenosis are presented. The role of physical examination is discussed, as are the echocardiographic means of determining stenosis severity. Other means of assessing severity are addressed, as are circumstances in which there can be difficulty in interpretation, such as severe aortic stenosis and left ventricular dysfunction. Management of patients, focusing on the intensive care unit setting, is reviewed, with a focus on the timing of aortic valve replacement.     

Aortic valve prosthesis tracking for transapical aortic valve implantation

Purpose  

Transapical aortic valve implantation (TA-AVI) is a new minimally invasive surgical treatment of aortic stenosis for high-risk patients. The placement of aortic valve prosthesis (AVP) is performed under 2D X-ray fluoroscopic guidance. Difficult clinical complications can arise if the implanted valve is misplaced. Therefore, we present a method to track the AVP in 2D X-ray fluoroscopic images in order to improve the accuracy of the TA-AVI.