组织工程角膜研究的中国之最

由于感染、外伤、变性、自身免疫疾病等原因可产生角膜混浊变形,严重者可影响视功能,角膜内皮盲和角膜盲等情况。临床移植治疗这些疾病的替代物为组织工程角膜内皮及人工全角膜。应用组织工程技术重建角膜内皮是角膜盲患者复明的希望,也是从根本上解决角膜移植供体材料缺乏和移植后免疫排斥反应等问题的关键。     

组织工程角膜内皮载体材料的研究进展

学术背景：前房注射法移植角膜内皮细胞遭到失败，而采用载体法移植角膜内皮获得成功，提示了载体在组织工程角膜内皮体外构建与移植中的重要性。以各种材料为载体进行角膜内皮细胞体外培养与移植的实验研究广泛开展，获得了初步成功。但材料的免疫相容性、降解，溶解特性、亲细胞性、术后排斥反应、移植疾病传播等难题限制了角膜内皮体外构建与移植的发展，至今无法应用于临床实践。所以，寻找一种理想的载体材料一直是组织工程角膜内皮研究领域的重要课题和研究热点。目的：分析组织工程角膜内皮各种载体材料的优缺点，探索该领域还存在的难题和进一步发展方向。检索策略：应用计算机检索MEDLINE数据库和中国期刊全文数据库1973—01／2007—12的有关文献，检索词为“角膜内皮，组织工程，载体，材料，角膜移植，角膜构建”，限定文章语言分别为英语和中文。共检索到986篇相关文献，其中中文文献645篇，英文文献341篇。根据本文文题和研究目的对文献进行筛选。纳入标准：①选取针对性强，相关度高的文献；②对同一领域的文献选择近期发表或权威杂志的文献；排除重复研究和Meta分析类文章。最后35篇论文被选用。文献评价：选用35篇文献，其中3篇为综述，其余均为临床与实验研究。资料综合：早期开始使用的材料主要有：异体角膜片、明胶薄膜、胶原凝胶、聚羟基乙酸和聚乳酸羟基乙酸、水凝胶膜等，而角膜基质，后弹力膜、羊膜基底膜、角膜基质片、复合生物膜是目前的研究热点。组织工程角膜内皮材料投入临床实践目前还存在许多难题。结论：组织工程角膜内皮载体材料各有优缺点，改善材料的亲细胞性、免疫原性和降解，溶解特性是今后的发展方向，并且应该加强对材料的人体效应和远期影响?     

组织工程角膜上皮移植治疗免角膜碱烧伤:形态学观察

背景:采用健康角膜缘干细胞体外培养形成组织工程化角膜上皮,移植于碱烧伤后角膜创面可促进创面的修复愈合.目的:观察组织工程角膜上皮移植治疗角膜碱烧伤的疗效和时机.设计、时间及地点:对比观察动物实验,于2007-07/2008-06在解放军总医院第一附属医院实验动物科完成.材料:新西兰雌性大白兔21只,体质量2.0～2.5 kg,随机分为对照组和移植组,其中对照组8只16眼,移植组13只再分为:早期移植组,1 d移植组2只4眼、3 d移植组3只6眼、6 d移植组3只6眼、9 d移植组2只4眼;中期移植组,14 d移植组3只6眼.方法:取21只兔上方健康角膜缘组织体外培养制备组织工程角膜上皮.21只兔双眼采用1 mol/L氢氧化钠制作改良角膜碱烧伤模型,移植组在碱烧伤后早期1,3,6,9 d和中期14 d行自体或同种异体组织工程角膜上皮移植,对照组烧伤后持续观察4周.主要观察指标:移植组及对照组烧伤后4周内眼表和组织病理学变化.结果:角膜碱烧伤后1周开始出现角膜上皮的大片脱落,2周角膜上皮大片脱落或溃疡发生率达72%,持续至4周,移植组在4周时发生率仅为25%,大多获得完整的角膜上皮;烧伤后早期移植组角膜基质深层炎性细胞浸润和新生血管生长较对照组明显受到抑制,而中期移植组角膜基质层较对照组并无明显差异;4周内异体组织工程角膜上皮移植的免疫排斥反应并不大于自体移植.结论:自体或同种异体组织工程角膜上皮移植可尽快恢复眼表完整性,且烧伤后早期移植效果明显优于中期移植.     

组织工程角膜内皮载体材料的研究进展

学术背景:前房注射法移植角膜内皮细胞遭到失败,而采用载体法移植角膜内皮获得成功,提示了载体在组织工程角膜内皮体外构建与移植中的重要性.以各种材料为载体进行角膜内皮细胞体外培养与移植的实验研究广泛开展,获得了初步成功.但材料的免疫相容性、降解/溶解特性、亲细胞性、术后排斥反应、移植疾病传播等难题限制了角膜内皮体外构建与移植的发展,至今无法应用于临床实践.所以,寻找一种理想的载体材料一直是组织工程角膜内皮研究领域的重要课题和研究热点.目的:分析组织工程角膜内皮各种载体材料的优缺点,探索该领域还存在的难题和进一步发展方向. 检索策略:应用计算机检索MEDLINE数据库和中国期刊全文数据库1973-01/2007-12的有关文献,检索词为"角膜内皮,组织工程,载体,材料,角膜移植,角膜构建",限定文章语言分别为英语和中文.共检索到986篇相关文献,其中中文文献645篇,英文文献341篇.根据本文文题和研究目的对文献进行筛选.纳入标准:①选取针对性强,相关度高的文献;②对同一领域的文献选择近期发表或权威杂志的文献;排除重复研究和Meta分析类文章.最后35篇论文被选用.文献评价:选用35篇文献,其中3篇为综述,其余均为临床与实验研究.资料综合:早期开始使用的材料主要有:异体角膜片、明胶薄膜、胶原凝胶、聚羟基乙酸和聚乳酸羟基乙酸、水凝胶膜等,而角膜基质/后弹力膜、羊膜基底膜、角膜基质片、复合生物膜是目前的研究热点.组织工程角膜内皮材料投入临床实践目前还存在许多难题.结论:组织工程角膜内皮载体材料各有优缺点,改善材料的亲细胞性、免疫原性和降解/溶解特性是今后的发展方向,并且应该加强对材料的人体效应和远期影响的研究.     

组织工程角膜内皮层移植的研究与应用

背景:组织工程角膜内皮可以克服角膜内皮移植的短缺并能够改善角膜内皮细胞的质量,其应用前景十分广阔。因此,寻找一种理想的重建角膜内皮方法是组织工程角膜研究领域的重要课题和研究热点。目的:总结并讨论组织工程角膜内皮重建的研究进展。方法:应用计算机检索PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)相关文章,检索时间为2000至2012年,检索词为"corneal endothelial cell,transplantation,tissue engineering",并限定文章语言种类为英语,然后再从中筛选出与主题相关的部分文献。结果与结论:初检得到163篇文章,按主题相关性对文献进一步筛选,最终纳入44篇文章。目前构建单层角膜内皮层的研究较多,也取得了巨大的成绩,但是仍没有一种材料或重建方式可以完全符合临床应用的组织工程的人角膜内皮。每一种材料和方法都各有优缺点,克服这些缺点以及观察在体内的长期影响是今后的发展方向。     

组织工程角膜内皮层移植的研究与应用

背景：组织工程角膜内皮可以克服角膜内皮移植的短缺并能够改善角膜内皮细胞的质量,其应用前景十分广阔。因此,寻找一种理想的重建角膜内皮方法是组织工程角膜研究领域的重要课题和研究热点。目的：总结并讨论组织工程角膜内皮重建的研究进展。方法：应用计算机检索PubMed数据库（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed）相关文章,检索时间为2000至2012年,检索词为＂corneal endothelial cell,transplantation,tissue engineering＂,并限定文章语言种类为英语,然后再从中筛选出与主题相关的部分文献。结果与结论：初检得到163篇文章,按主题相关性对文献进一步筛选,最终纳入44篇文章。目前构建单层角膜内皮层的研究较多,也取得了巨大的成绩,但是仍没有一种材料或重建方式可以完全符合临床应用的组织工程的人角膜内皮。每一种材料和方法都各有优缺点,克服这些缺点以及观察在体内的长期影响是今后的发展方向。     

CRTER杂志“软组织工程”栏目关于“组织工程角膜”研究的组稿内容

细菌纤维素构建组织工程角膜基质的方法 组织工程角膜研究设计分型 组织工程角膜上皮移植治疗兔角膜碱烧伤     

组织工程角膜基质的构建

学术背景:角膜供体来源的匮乏及高危角膜移植术后的高排斥率限制了角膜移植的临床应用。构建具有良好生物学活性且能满足一定生理功能要求的组织工程角膜是近年来眼科的研究热点,而角膜基质组织的构建则是利用组织工程技术构建角膜的主要任务、难点和关键所在。目的:总结构建组织工程化角膜基质种子细胞及支架材料的研究进展。检索策略:应用计算机检索Pubmed数据库1980-01/2007-06的相关文献,检索词"cornealstroma;tissueengineering",限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1997-01/2007-06期间的相关文章,检索词"组织工程;角膜基质",限定文章语言种类为中文。共检索到59篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与构建组织工程角膜基质密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。文献评价:文献的来源主要是构建组织工程角膜基质的实验。所选用的30篇文献中,5篇为综述,其余均为临床或基础实验研究。资料综合:①国内角膜盲患者众多,临床上对供体角膜的需求越发迫切。构建具有良好生物学活性且能满足一定生理功能要求的组织工程角膜具有重大的探索价值与临床实际应用意义。②自体或异体角膜基质细胞不仅是最早采用的而且是应用最为广泛的种子细胞。皮肤成纤维细胞应用于构建组织工程角膜基质的文献已见诸于报道。③作为支架材料,胶原、明胶及壳聚糖均有报道用于构建组织工程角膜基质。研究表明人工合成可降解高分子材料聚羟基乙酸材料与角膜基质细胞有较好的亲和力。④随着干细胞研究、材料科学及生物工程学等多学科的发展,组织工程角膜基质的构建越来越凸现其优越性,但它仍然面临许多挑战,比如:如何定向诱导多能干细胞分化为角膜基质细胞;角膜基质支架材料如何改良以保证良好的透明性;支架材料的生物学特性及理化性质需进一步研究。结论:组织工程角膜基质是构建组织工程角膜的重要基础,也预示着临床应用组织工程技术治疗角膜盲时代的到来。它将为解决异体角膜来源匮乏、高危角膜移植成功率低等临床问题提供新的思路。     

后弹力层撕除自动取材角膜内皮移植术的护理

Fuch角膜内皮营养不良、外伤及手术等原因引起的角膜内皮细胞损伤、白内障摘除人工晶体植入引起的大泡性角膜病变等疾病,会引起角膜内皮失代偿、角膜浑浊。     

色素上皮衍生因子对角膜碱烧伤后新生血管形成的抑制

背景：角膜新生血管导致角膜透明性降低,造成严重的视觉障碍.色素上皮衍生因子是一种内源性血管生成抑制剂,其对于角膜新生血管是否具有抑制作用尚不清楚.目的：探索局部运用色素上皮衍生因子对大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用.方法：将20只大鼠随机分为生理盐水组与色素上皮衍生因子组,每组10只.用NaOH溶液将大鼠右眼角膜烧伤诱导产生新生血管.碱烧伤后2组每日分别给予生理盐水和色素上皮衍生因子点眼,并采用裂隙灯显微镜观察和测量各组角膜新生血管生长情况.碱烧伤后12 d处死大鼠,将角膜组织固定切片,行苏木精-伊红染色观察,并进行免疫组织化学染色检测各组大鼠角膜血管内皮生长因子和 CD31的表达.结果与结论：大鼠角膜碱烧伤后3,7,12 d,色素上皮衍生因子组大鼠角膜新生血管面积均小于生理盐水组（P 〈0.05）.角膜碱烧伤后12 d,苏木精-伊红染色显示生理盐水组大鼠角膜产生大量新生血管,角膜组织结构紊乱;色素上皮衍生因子组新生血管较少,角膜组织结构趋于整齐.角膜碱烧伤后12 d,免疫组织化学染色示生理盐水组大鼠角膜上皮和基质层可见血管内皮生长因子大量表达,角膜基质层可见血管内皮生长因子和CD31大量表达;色素上皮衍生因子组新生血管稀少,CD31表达较弱.证实局部应用色素上皮衍生因子可有效抑制大鼠角膜化学伤后的血管新生.     

组织工程技术构建角膜组织研究进展

同种异体角膜移植是目前治疗角膜盲最常用、最有效的治疗方法，但由于供体来源匮乏限制了此技术的应用。组织工程技术是应用细胞生物学和工程学原理，研究开发制作用于修复、改善损伤组织结构和功能替代物的一门技术。本就组织工程技术构建角膜组织的研究进展进行综述。     

组织工程技术构建角膜组织研究进展

同种异体角膜移植是目前治疗角膜盲最常用、最有效的治疗方法,但由于供体来源匮乏限制了此技术的应用。组织工程技术是应用细胞生物学和工程学原理,研究开发制作用于修复、改善损伤组织结构和功能替代物的一门技术。本文就组织工程技术构建角膜组织的研究进展进行综述。     

人羊膜联合自体角膜缘组织移植治疗易复发性翼状胬肉

目的：探讨人羊膜联合自体角膜缘组织移植治疗易复发性翼状胬肉的临床疗效。方法：先从翼状胬肉颈体部分离胬肉与结膜和巩膜，再白头端剖切而使胬肉更彻底切除，取同眼健康部位之角膜缘组织移植于胬肉切除处角膜缘。再将保存羊膜移植于手术创面，使羊膜之角膜缘侧复盖于角膜缘移植片上。结果：随访45例49只眼，复发2只眼，复发率为4．1％。结论；双向切除能更为彻底切除胬肉。通过联合移植可促使角膜缘组织尽快修复，从而抑制结膜来源的纤维血管组织长入而降低复发率。     

角膜内皮损伤的相关因素分析

角膜保持透明性的重要条件是内皮细胞的生理功能正常和解剖完整，内皮损伤的影响因素取决于年龄，外伤，遗传，代谢遗传，可在相关术后被破坏其组织结构，眼病相关及全身疾病都会影响角膜内皮的生理特性，成人内皮损伤后不能再生，只能靠邻近细胞迁移及扩展，近年来专家和学者对角膜内皮相关研究越发关注，本文就引起角膜内皮损伤的个性因素及相关原理作一综述。     

角膜移植手术

角膜为一透明的组织,俗称"黑眼珠"。它位于眼球的前端,容易受到感染及外伤。角膜疾病使角膜由透明变浑浊影响视力者(如角膜白斑、圆锥角膜、青光眼或人工晶体手术后引起的大疱性角膜病变、角膜营养不良症、角膜溃疡等)均可行角膜移植手术治疗。角膜移植手术是用透明的角膜片置换混浊或有病变部分的角膜,以达到增视、治疗某些角膜病和改善外观的目的。是异体移植效果最好的一种手术,是目前治疗角膜溃疡、角膜混浊等疾病的首选治疗方法,针对不同的角膜疾病,选择的手术方式也不同。     

重组内皮抑制素抑制大鼠角膜移植术后的新生血管

目的:内皮抑制素是一种内源性血管内皮细胞的强效抑制剂,实验拟验证局部应用重组内皮抑制素滴眼液对大鼠角膜移植术后新生血管的抑制作用.方法:实验于2005-09/2006-03在重庆医科大学附属第一医院实验动物中心完成.①选用清洁级成年雌性SD大鼠(受体)60只,Wistar大鼠(供体)30只,建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,供体提供双眼角膜,受体均选择右眼手术.移植术后按随机数字表法分成内皮抑制素组和对照组,分别用50mg/L的内皮抑制素眼液及赋形剂滴眼.②于术后1周、2周、3周、1个月及2个月5个时间点,麻醉后每组随机处死6只大鼠.观察角膜新生血管生长状况;比较各组角膜植片透明度、水肿、新生血管程度及移植排斥反应指数;检测角膜植片上内皮抑制素及血管内皮生长因子的表达情况.结果:60只受体大鼠全部进入结果分析.①内皮抑制素组大鼠角膜新生血管面积显著低于对照组(P＜0.05～0.01).②内皮抑制素组大鼠的排斥反应指数在术后1周、2周、3周、1个月及2个月均低于对照组(P＜0.05～0.01).③与对照组相比,内皮抑制素组角膜植片组织中内皮抑制素的表达明显增强(P＜0.05～0.01),血管内皮生长因子的表达明显降低(P＜0.05～0.01).结论:内皮抑制素滴眼液可以有效抑制大鼠角膜移植术后角膜新生血管的形成,下调角膜植片中血管内皮生长因子的表达,从而降低角膜移植术后免疫排斥反应的发生,为临床防治角膜移植术后新生血管提供了新的思路.     

组织工程化人工角膜的临床应用：距离还有多远？

背景：人工角膜是取代混浊角膜组织而用异质成形材料制成的一种特殊屈光装置,通过手术植入患眼,以取得一定视力.目的：介绍近年来人工角膜研究进展.方法：由第一作者用计算机检索万方医学网和Medline database数据库,检索词分别为“人工角膜、角膜移植、生物相容性、组织工程”和“keratoprosthesis,corneal transplantation,biocompatibility,tissue engineering”,对人工角膜移植的动物实验、临床进展、植入方式及生物相容性、并发症等方面进行探讨.结果与结论：共检索到204篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入50篇文章.人工角膜的研制在近年来有了较大的进步,非组织工程化人工角膜在材料选择,处理和设计方式上有所创新,同时具有活性的组织工程化人工角膜的出现为人工角膜的研制开辟了一条新途径.     

1例角膜内皮移植术的手术配合

目的探讨大泡性角膜病变患者的手术护理。方法角膜内皮移植术。结果角膜内皮移植是一种新技术,较传统的角膜移植术具有痛苦小,损伤小,术后恢复快的特点。结论术者、护士、患者的默契配合是手术顺利完成,提高手术成功率的重要保证。     

1例角膜内皮移植术的手术配合

目的探讨大泡性角膜病变患者的手术护理。方法角膜内皮移植术。结果角膜内皮移植是一种新技术,较传统的角膜移植术具有痛苦小,损伤小,术后恢复快的特点。结论术者、护士、患者的默契配合是手术顺利完成,提高手术成功率的重要保证。     

雷帕霉素滴眼剂抑制大鼠角膜血管新生:血管内皮生长因子及炎症因子的作用

背景:雷帕霉素全身用药可明确抑制角膜移植后植片新生血管的生长,但雷帕霉素滴眼剂能否起到相同或者类似的作用尚有待验证.目的:观察雷帕霉索滴眼剂抑制大鼠角膜新生血管生长过程中血管内皮生长因子及炎症因子的作用.方法:角膜缝线法建立SD大鼠左眼角膜新生血管模型,以抽签法随机分为生理盐水对照组与雷帕霉素滴眼剂组.各组均术后第1天开始用药,4次/d,1滴,次.每日行裂隙灯显微镜检查,术后第3,7,14天测量角膜新生血管的长度,计算新生血管面积.14 d后切取角膜行组织学检查,并采用免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子以及白细胞介素2受体α的表达.结果与结论:生理盐水对照组不同时间点角膜新生血管面积均高于雷帕霉素滴眼剂组(P=0),说明雷帕霉索滴眼剂可抑制缝线后角膜新生血管的生长.与生理盐水对照组比较,雷帕霉素滴眼剂组角膜上皮层、浅基质层、新生血管内皮、角膜缝线处上皮以及浸润的炎性细胞内血管内皮生长因子及白细胞介素2受体α表达明显降低,病理切片上炎性细胞浸润减少.结果提示雷帕霉素滴眼剂抑制角膜新生血管生长,可能通过降低血管内皮生长因子的表达及抑制炎性细胞的分化浸润从而抑制新生血管的生长.