肝硬变大鼠行部分肝叶切除术后枯否细胞DNA和RNA合成功能的变化

作者通过肝硬变大鼠模型，行部分肝叶切除术，动态观察再生肝脏Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ合成功能变化规律，探讨肝再生机制与肝细胞功能衰竭的关系。７０只健康的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，体重２２０－２５０ｇ，分为肝硬变大鼠部分肝叶切除术组（Ｃ－ＰＨ）．正常大鼠部分肝叶除术组（Ｎ－ＰＨ）和假手术组（ＳＯ）。Ｎ－ＰＨ组和Ｃ－ＰＨ组均切除大鼠肝脏的左叶和中叶。各组于不同时相用流式细胞仪测定Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞的ＤＮＡ和ＲＮＡ含量。结果表明：Ｃ－ＰＨ组枯否氏细胞Ｇ２期和Ｍ期ＤＮＡ合成的高峰是在术后２４小时以后，明显落后于Ｎ－ＰＨ组；其Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞增殖系数的峰值在术后４８小时，以后持续高于Ｎ－ＰＨ组和ＳＯ组，但其残肝的重量在术后１周时低于Ｎ－ＰＨ组；Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞ＲＮＡ含量一直低于Ｎ－ＰＨ组和ＳＯ组，于术后一周时其ＲＮＡ合成的水平才恢复到术前的水平。作者认为，肝硬变大鼠行肝叶部分切除术后枯否氏细胞功能受抑制，其启动时间的推迟和再生周期的延长是造成术后肝细胞再生能力低下和肝细胞功能衰竭的一个重要原因。     

微生物酵素对部分肝切除大鼠肝再生的作用

目的观察微生物酵素能否促进大鼠部分肝切除后肝再生。方法采用大鼠部分肝切除（Partial Hepatectomy,PH）模型,通过与对照组和促肝细胞生长素（Hepatocyte Growth-Promoting Factor,pHGF）组比较,在pH后12小时、24小时、48小时、72小时、120小时和168小时,留取相应肝组织,检测反映肝再生的指标肝再生率（Hepatic Regeneration Rate。HRR）、增殖指数（Proliferation Index,PI）和细胞增殖核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA）。结果在pH后12小时和24小时、微生物酵素组同促肝细胞生长素组一样与对照组相比,肝再生率高,差异有统计学意义（P〈0．05）;pH后12、24、72、120小时,微生物酵素组的PI高于对照组,差异有统计学意义（分别为P〈0．05、P〈0．01、P〈0．05和P〈0．05）。在pH后72小时和168小时PCNA出现高峰,微生物酵素组与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论微生物酵素同促肝细胞生长素一样具有早期促进肝再生的作用。     

冷保存对大鼠部分移植肝再生的影响

目的探讨冷保存对大鼠部分肝移植术后肝再生的影响。方法健康SD大鼠分为Ⅰ组（肝切除组）、Ⅱ组（冷保存1h部分肝移植组）和Ⅲ组（冷保存8h部分肝移植组）。观察各实验组生存率，比较各组术后1、6、12、24、48、72、168h肝质量／体质量比率、肝再生率、有丝分裂指数及增殖细胞核抗原表达。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组7d存活率分别为100％、90％、40％；Ⅲ组术后2～3d大鼠肝质量／体质量比率、肝再生率、有丝分裂指数较Ⅰ、Ⅱ组明显偏低（P〈0．05）；Ⅲ组术后12h内增殖细胞核抗原表达较其余两组明显偏低（P〈0．05），48h才达高峰，至第7天阳性表达仍处高水平。结论长时间冷保存降低了部分肝移植术后的肝再生能力和大鼠术后生存率。     

肝部分切除后肝再生中Notch/Jagged信号及TNF和IL-1的表达

目的 研究Notch/Jagged信号传导通路及TNF和IL-1在大鼠肝部分切除术后肝再生中所起的作用.方法 取Wister大鼠行肝部分切除术,术后0,5,15,30 min和1,3,6,12 h及1,2,4,7 d留取再生肝组织,检测Notch-1、Jagged-1和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,RT-PCR检测Notch-1和Jagged-1的mRNA的表达,ELASA法测血清中TNF-α和IL-6的浓度.结果 肝部分切除后Notch-1蛋白在肝血窦内皮及门脉周围细胞表达增强,Jagged-1蛋白在胆管及门脉周围肝细胞上较强地表达.Noteh-1的mRNA表达量在6～48 h下调,Jagged-1的mRNA表达星在3～6 h上调,12～24 h下调.PCNA表达在术后12 h明显增加,1～2 d达到高峰.IL-6血清浓度在术后24 h达到高峰.TNF-α血清浓度高峰在3 h左右出现.结论 在肝脏被部分切除后,Notch/Jagged信号通路可以促进胆管的形成和结构维持,有助于新生血管的形成及肝细胞的增殖.TNF-α可以激活IL-6的表达,而IL-6参与肝细胞增殖过程中的启动、调控、终止等多个环节.     

胃选择性迷走神经切断对大鼠部分肝切除术后残肝再生的影响

目的 探讨胃选择性迷走神经切断术对肝再生的影响。方法 建立肝部分切除术及加胃选择性迷走神经切断术两组动物模型，检测术后７天大鼠血清胃泌素，谷丙转氨酶，碱性磷酸酶，总胆红素，白蛋白水平，并观察残肝再生率，再生肝与体重比值及肝细胞有丝分裂指数的变化。结果 胃选择性迷走神经切断术可使血清胃泌素，残肝再生率，再生肝重与体重比值，肝细胞有丝分裂指数升高，对肝功能无明显损害。结论 胃选择性迷走神经切断术可促进     

肝再生增强因子促进肝再生的细胞信号途径研究

目的探讨肝再生增强因子（ALR）促进肝部分切除（PH）后再生的机制。方法采用肝再生率评价ALR对PH后肝再生的作用；MTT检测ALR协同肝再生大鼠血清对肝细胞增殖和ALR对TGF-β1抑制肝细胞增殖的作用；免疫组化观察再生肝中ALR的表达；免疫细胞化学和Western blot检测经ALR刺激后肝细胞中ALR表达变化。结果ALR明显促进PH后的肝再生，可协同肝再生大鼠血清促进肝细胞增殖；ALR能拮抗TGF-β1对肝细胞增殖的抑制；ALR主要表达于正常肝细胞浆内；PH后2～3d肝细胞ALR减少甚至消失，第6天随着肝再生的完成，ALR含量又恢复正常；ALR刺激后肝细胞内源性ALR表达增高。结论ALR能以自主分泌方式从肝细胞中释放，与间质细胞产生的肝再生调控因子相互作用，如抑制TGF-β1生物活性，间接促进PH后的肝再生过程。     

部分肝切除后表皮生长因子受体及Ki—67的研究

目的 探讨表皮生长因子受体及Ｋｉ－６７在肝再生中的作用。方法 制备大鼠部分肝切除后肝再生模型，应用免疫组织化学染色检测表皮生长因子受体及Ｋｉ－６７。结果 肝细胞表皮生长因子受体及Ｋｉ－６７在肝切除后６小时开始增加，１２小时达高峰（４６％），而Ｋｉ－６７则在１２小时开始增加，２４小时达高峰（４７％）。结论 ＥＧＦＲ及Ｋｉ－６７是细胞增殖的重要标志，ＥＧＦＲ及Ｋｉ－６７在肝再生中起作重要的作用。     

hGH对肝部分切除术后促进肝再生的动物实验研究

目的 寻求促进肝细胞再生的有效药物。方法 采用形态计量技术,^3H-TdR活体掺入实验以及动脉血酮体比率的变化来观察重组生长激素（hGH)对肝再生的作用。结果 实验组肝切除术后肝细胞核分裂指数、肝细胞核体积密度、新生肝细胞数目密度、动脉血酮体比率及^3H-TdR活体掺入实验结果均显著高于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。结论 hGH以大鼠肝部分切除术后残肝有促进其再生的作用。     

肝脏类器官构建及其对小鼠部分肝切除术后肝再生的作用#br#

目的 观察肝脏类器官对小鼠部分肝切除术后肝再生的作用。方法 体外构建肝脏类器官，通过形态学、PCR和免疫荧光对类器官进行初步鉴定。C57BL/6小鼠随机等分为对照组和治疗组，每组18只。对照组进行肝左叶、中叶切除术+肝包膜注射200 μL PBS；治疗组进行肝左叶、中叶切除术+肝包膜移植200 μL类器官悬液。建模成功后分别于术后第1、4、7天收集标本。通过血清生化检测、免疫组化和Western blotting评估肝脏类器官对小鼠肝部分切除术后肝再生的作用。结果 类器官体外培养3 d，从直径20 μm的囊性结构扩增到约125 μm的细胞团（P＜0.05），直径扩增近6 倍。肝脏干细胞标志基因EPCAM、SOX9和CK19明显上调（P＜0.05），传代前后基因保持稳定。免疫荧光显示CK8、Desmin、AFP和PCNA呈阳性。HE显示术后第4天，治疗组肝细胞形态大小基本恢复正常，形态较清晰，无炎症细胞浸润，无脂肪或气球样变。对照组小鼠肝细胞核仁染色加深，仍有炎性细胞浸润，部分区域存在肝细胞坏死区。免疫组化Ki67和Western blotting对增殖水平进行检测，结果显示治疗组增殖能力是对照组的3 倍。肝功能检测发现治疗组在术后第4天ALT、AST、TBIL和DBIL明显下降，ALB合成增加（P＜0.05）。结论 具有肝脏干细胞属性和增殖能力的肝脏类器官，能通过保护肝细胞、改善部分肝切除术后小鼠肝功能，发挥促进肝再生作用。     

阻塞性黄疸大鼠术前胆道内、外引流对肝细胞再生能力的影响

目的　探讨阻塞性黄疸大鼠肝叶切除术前胆道内、外引流对肝细胞再生能力的影响和机制。方法　将大鼠胆总管结扎 5d后 ,分别行胆道内、外引流 5d ,再行 70 %肝叶切除术。结果　胆道外引流组与内引流组和对照组大鼠相比 ,反映肝细胞再生能力的肝细胞核DNA含量、增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)指数、有丝核分裂指数 (mitoticindexMI)明显减低 (P <0 0 5 )。胆道外引流组肝细胞C met/HGF R基因表达也减低 (P <0 0 1)。结论　阻塞性黄疸大鼠肝叶切除术前胆道外引流对肝细胞再生能力有明显抑制作用 ;胆道外引流组肝细胞C met/HGF R基因表达减弱可能是该组肝细胞再生能力下降的重要因素。