前列腺素E1对大鼠肝移植肾功能的保护作用

目的探讨术中应用前列腺素E1（prostaglandin E1，PGE1）对大鼠肝移植肾功能的保护作用。方法大鼠原位肝移植术中经颈内静脉灌注PGE1为治疗组，生理盐水和空白为对照组，观察术后1周存活率、1h的尿量，测定血浆肌酐、尿素氮和肾组织中丙二醛（malondjaldehyde，MDA）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量，肾组织病理检查。结果PGE1治疗组术后1h尿量较对照组明显增加，肌酐和尿素氮水平均较对照组降低，PGE1治疗组肾组织中GSH含量显著高于两对照组，MDA含量低于两对照组。病理检查PGE1治疗组肾脏组织形态学损伤明显减轻。结论术中应用PGE1能显著改善大鼠肝移植后的肾功能，其机制可能与对抗氧自由基损伤作用有关。     

肝移植大鼠肝窦内皮细胞的损伤及PGE1对其的保护作用

目的　探讨肝移植大鼠术后早期肝窦内皮细胞功能的改变及前列腺素E1(PGE1)对其的保护作用。方法　用“两袖套法”建立大鼠原位肝移植模型 ,其中A组为正常大鼠空白对照组 ,B组为正常大鼠供体肝移植手术对照组 ,C组为休克性大鼠供体肝移植实验对照组 ,D组为PGE1保护的休克性大鼠供体肝移植实验组 ,每组各 8只。肝移植各组 (无特别说明均指受体 )于术后 6h取血 ,检测其血清中的肝脏酶学 (ALT、LDH )、丙二醛 (MDA)和一氧化氮 (NO) ,以及血浆内皮素 (ET)水平 ,并取肝组织作常规病理学检查 ,比较各组有无差异。结果　各移植组供肝冷保存时间及无肝期均接近 ,分别为 (2± 0 .5 )h和 (15± 3 )min ;B、D组术后 6h全部存活 ,存活率 10 0 % ;C组术后 6h存活 5只 ,存活率 62 .5 %。与C组比较 ,D组ALT、LDH、MDA、ET明显降低 (P<0 .0 5 ) ,NO明显升高 (P<0 .0 5 )。C组肝脏病理学检查发现有明显的组织学损害 ,而B、D组肝脏组织结构基本完好。结论　肝移植可造成肝窦内皮细胞明显损害 ,血清NO和血浆ET水平可较好地反映肝窦内皮细胞的功能状态。PGE1通过稳定血流动力学和稳定肝窦内皮细胞质膜 ,可减轻移植肝肝窦内皮细胞的损害。     

前列腺素E1对移植肝的保护作用

目的 探讨术中应用前列腺素E1（PGE1）对移植肝脏的保护作用。方法 大鼠原位肝移植术中经颈内静脉灌注PGE1,设盐水和空白对照,观察术后1周存活率和肝脏超微结构变化。结果 PGE1治疗组术后1周存活率较对照组明显提高,电镜证实PEG1治疗组肝细胞内溶酶体膜无鼓泡和破溃现象。结论 术中应用PEG1能显著提高大鼠肝移植后的1周存活率,其机制可能与PGE1稳定溶酶体膜的作用有关。     

大鼠原位肝移植后微循环障碍及前列腺素 E1对其保护作用的实验研究

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前列腺素E1对体外循环术后肺损伤的保护作用

体外循环 (ＣＰＢ)手术后肺损伤是目前临床上行心内直视手术后比较常见的严重并发症。我们通过建立犬体外循环模型 ,研究体外循环后肺功能的改变以及前列腺素Ｅ1(ＰＧＥ1)的保护作用 ,现报道如下。一、材料与方法1.实验动物及药品 :(1)健康杂种犬 (医院动物房提供 ) 12条 ,体重 18～2 0ｋｇ。 (2 )前列腺素Ｅ1(中国医科大学制药厂 10 0 μｇ/支 )。 (3)丙二醛(ＭＤＡ)测定试剂盒 (上海生化试剂厂 )。2 .实验过程 :固定犬于手术台麻醉。右侧腹股沟处股动脉插管测动脉压力 ,股静脉插入ｓｗａｎ ｇａｎｚ漂浮导管。开胸暴露心脏 ,常规建立体外…     

不同缺血预处理方式对大鼠供肝的保护作用及其机制

目的 探讨不同方式的缺血预处理对大鼠供肝冷缺血—再灌注损伤的防护作用及其机制。方法 192只wistar大鼠做为供、受体行原位肝移植，供肝切取前给予不同方式的缺血预处理(C组为对照组，不行预处理；E1组在供肝冷灌注前行门静脉(PV)和肝动脉(HA)夹闭5min，再灌注10min；E2组PV、HA夹闭5min，再灌注5min，并重复上述过程1次；E3组PV、HA夹闭10min，再灌注15min)，移植完成后，于门静脉复流后0．5、2、6、24h检测血清肝脏酶学、血清肿瘤坏死因子—α(TNF—α)水平及肝组织中细胞凋亡情况。结果 与对照组相比，实验组大鼠在门静脉复流后0．5、2hTNF—α水平明显降低(P＜0．05)，实验组之间相比，E2组大鼠血清TNF—α水平明显低于E1、E3组(P＜0．05)；在24h E2组大鼠血清TNF—α水平明显低于C、E1、E3组(P＜0．05)。在2、6h实验组凋亡指数(AI)明显低于对照组(P＜0．05)，实验组之间相比，E2组AI明显低于EI、E3组(P＜0．05)；24h实验组AI明显低于对照组(P＜0．05)。结论 缺血预处理可能通过减少TNF—α释放，减轻细胞凋亡，从而减轻移植肝的损伤。5min缺血，5min再灌注，并重复1次的缺血预处理方式效果较好。     

二种大鼠供肝原位肝移植术后近期死因的分析

目的　分析大鼠正常心跳供体 (HBD)和心跳停搏供体 (NHBD)原位肝移植术后近期死因的异同。方法　雄性SD大鼠随机分成HBD和NHBD两组 ;NHBD组又分别设心跳停搏 30min(NHBD 30 )和 45min(NHBD 45 )两组。每组各行原位肝移植 5 0、30和 30次。结果　HBD和NHBD组冷缺血、无肝期、IVC阻断、受体手术时间分别为 6 9 76± 1 5 2和 70 32± 1 5 3min、16 46± 0 96和 16 40± 0 73min、2 2 5 6± 1 73和 2 2 75± 1 16min、89 38± 3 75和 90 5 8± 3 76min ;HBD组术后近期 (1周 )共有 5只受体分别死于原发性移植肝无功能 (1)、麻醉过深 (1)、肺部感染 (2 )和SVC吻合口漏 (1) ;而NHBD组术后近期共有 36只受体分别死于原发性移植肝无功能 (17)、麻醉过深 (4)、无肝期较长 (3)和供肝再灌注后渗血 (12 )。结论　二种供体原位肝移植术后的近期死因确实存在着差异。     

前列腺素E1和重组人生长激素对肝缺血-再灌注损伤的保护作用

我们用兔肝脏缺血 再灌注损伤及肝切除模型 ,采用前列腺素Ｅ1 (ＰＧＥ1 )和重组人生长激素 (ｒｈＧＨ)单独及联合用药的方法 ,探索减轻肝脏缺血 再灌注损伤的新方法。一、材料和方法1 .动物及分组 :健康大耳白兔 48只 ,3 %戊巴比妥钠 (30ｍｇ/ｋｇ体重 )静脉注入麻醉 ,阻断第一肝门 40ｍｉｎ时切除左肝外叶 ,45ｍｉｎ后解除阻断。实验动物随机等分为 4组 :Ａ组 (对照组 ,1 2只) ,缺血前后静脉滴注生理盐水 (ＮＳ)0 .5ｍｌ·ｋｇ- 1 ·ｍｉｎ- 1 ;Ｂ组 (ＰＧＥ1 组 ,1 2只) ,缺血前后静脉滴注ＰＧＥ1 0 .5μｇ·ｋｇ- 1 ·ｍｉｎ- 1 ;Ｃ组 (…     

前列腺素E1和肝素钠联合应用预防肝移植术后肝动脉栓塞

肝动脉栓塞(HAT)是肝移植术后严重的并发症之一。一旦发生,移植肝的存活将受到严重威胁,因此术后预防HAT发生尤为重要。我院2000年6月至2003年4月共进行4例肝移植,术后联合应用前列腺素E1和肝素钠,无一例发生HAT,现报告如下。临床资料1.受者一般情况4例均为男性,年龄33～45岁,体重为41～56kg。例1为原发性肝癌,影像学检查提示肿瘤(20×18×15)cm侵及第一、二肝门,肝功能ChildA级;例2为肝炎后肝硬化,终末期肝病,相继出现上消化道大出血、肝性脑病、急性肾功能衰竭、急性呼吸窘迫综合征、弥漫性血管内凝血、心功能衰竭,肝功能ChildC级;…     

前列腺素E1对大鼠睾丸缺血再灌注后的影响

目的初步探讨前列腺素E1（PGE1）对睾丸缺血再灌注后的功能保护作用及其可能的分子机制。方法建立大鼠睾丸缺血再灌注的病理模型（以扭转后复位为例）。随机分成A、B、C3组，每组12只。A、B、C组分别为对照、治疗和非治疗组。所有大鼠在手术45d后处死，取睾丸组织，肉眼观察其形态，称其重量（计算脏器系数），放入固定液以备行常规HE染色后镜下观察睾丸的病理改变，并在图像分析系统下测量精曲小管的直径，并对所有结果利用SPSS软件系统进行统计学处理。结果（1）肉眼观察形态：B组与A组相比差别不明显，B组与C组比较差别显著;（2）镜下观察形态：B组与A组相比差别不明显，B组与C组比较差别显著;（3）脏器系数比较：B组与A组差别无显著性（P〉0.05）B组与C组差别显著（P〈0.05）;（4）精曲小管直径比较：B组与A组差别无显著性（P〉0.05）B组与C组差别显著（P〈0.05）。结论PGE1有减轻缺血再灌注导致的病理改变，可以运用于临床上治疗睾丸扭转复位后和睾丸移植术后，对睾丸功能恢复有明显促进作用。     

内皮素-1单克隆抗体对肝移植缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的: 探讨内皮素-1(ET-1)抗体对移植肝缺血再灌注损伤的保护作用.方法: 选用雄性SD大鼠108只,分为对照组、肝移植组与ET-1抗体组,观察应用抗ET-1单抗前后移植肝热缺血15 min,冷缺血40 min再灌注后第4小时血浆ET-1、丙氨酸转移酶(ALT)、透明质酸(HA)以及肝组织中ET-1和丙二醛(MDA)含量及肝组织病理学变化;同时,在移植肝再灌注后的第1,4,12,24小时观察ET-1的变化规律.结果: 移植肝缺血再灌注后,血浆和肝组织中ET-1,血浆HA,ALT和肝组织中MDA显著升高,而ET-1抗体组血浆和肝组织中ET-1,血浆HA,ALT和肝组织中MDA与肝移植组相比显著降低(P<0.01,P<0.05 ),且肝组织的淤血程度和损伤程度显著改善.结论: ET-1单克隆抗体对移植肝缺血再灌注损伤有保护作用.     

Hepatic reperfusion injury following orthotopic liver transplantation in the rat

At 24 hr following orthotopic transplantation, rat liver grafts were perfused in situ for 7 min with trypan blue, a vital dye that provides information on hepatic microcirculation and stains nuclei of nonviable cells. Spotty and uneven dye distribution was observed indicating that hepatic microcirculation was disturbed 24 hr following transplantation surgery. Under these conditions, 15-20% of the hepatocytes were nonviable as assessed from trypan blue staining and frank necrosis. In contrast, perfusion of livers from untransplanted rats or liver explants exposed to cold ischemia for 60 min were judged normal by the criteria of uniform distribution of dye in the organ and absence of necrosis and nuclear dye uptake. Thus the observed damage was associated with reintroduction of blood and can therefore be classified as a reperfusion injury. The altered microcirculation and cell death following the operation was reduced markedly by perfusion of the cold, ischemic explant with nitrogen-saturated but not with oxygen-saturated buffer for 5 min prior to the implantation operation. Protection was even greater if the perfusion medium contained verapamil (20 micrograms/ml), a Ca++ channel blocker. We conclude that reperfusion of the stored liver causes an oxygen-dependent alteration in hepatic microcirculation that leads to hypoxia and scattered hepatocellular necrosis in the implanted graft. Brief perfusion of the hypoxic implant under anaerobic conditions may remove substrates involved in oxygen radical generation and prevent reperfusion injury upon introduction of oxygen into the graft via the blood. Taken together, these results suggest that removal of Euro-Collins' solution under anaerobic conditions may be beneficial clinically in preventing injury of surgical explants.     

前列腺素E1在重症急性胰腺炎脏器功能保护中临床疗效观察

目的　观察前列地尔在重症急性胰腺炎脏器功能保护中临床疗效并探讨其作用机理。方法　对 3 0例重症急性胰腺炎患者给予前列地尔 (LipoPGE1) 40 μg/d治疗 ,观察临床症状及体征 ,肝、肾功能 ,动脉血气分析及血清TNF α水平的变化。结果　前列地尔可明显抑制重症急性胰腺炎血清TNF α的表达 ,阻止发病早期全身性炎性反应综合征 (SIRS)的发展 ,有效地缓解急性胰腺炎的临床症状 ,减轻胰腺及其他重要器官的损伤。结论　前列地尔在重症急性胰腺炎SIRS期脏器功能保护中有较好的临床应用价值。     

Leukocyte adhesion and cell death following orthotopic liver transplantation in the rat

The purpose of these experiments was to employ video microscopy to identify early pathological changes after orthotopic liver transplantation in the rat. Liver transplantation was performed using the cuff technique. Survival was greater than 90% when livers were stored for 1 hr in Ringer's solution prior to transplantation (survival conditions), whereas all rats died following storage of grafts for 4 hr in cold Euro-Collins solution (nonsurvival conditions). Postoperatively, each recipient animal was anesthetized, the abdomen was opened, and the liver was placed on the stage of an inverted fluorescence microscope equipped with a low-light ISIT video camera. Precautions were taken to prevent the liver surface from drying. The fluorescent dyes fluorescein sodium (1.0 mumol/kg), acridine orange (2.5 mumol/kg), and propidium iodide (1 mumol/kg) were injected intravenously to label hepatocytes, polymorphonuclear leukocytes, and the nuclei of irreversibly damaged cells, respectively. In livers from untransplanted rats, movement of labeled leukocytes through the hepatic sinusoids was smooth and rapid (velocity, 500-550 microns/sec) and margination (adhesion) of cells was minimal (less than 1%). After transplantation, however, velocity was diminished 2-3-fold, and margination was increased to 10% of leukocytes in survival groups and to 40% in nonsurvival groups 4 hr postoperatively. In the nonsurvival groups, irreversible cell death detected by propidium iodide fluorescence was minimal 15 min after transplantation--however, massive cell damage was detected 4 hr postoperatively. In addition, serum transaminases and necrosis were higher at 4 hr than 15 min postoperatively. Taken together, these data demonstrate that leukocyte margination increases following orthotopic liver transplantation and is followed rapidly by cell death. These events likely play a role in the mechanism of early graft failure following transplantation.     

不同预处理对大鼠肝移植供肝保护作用的探讨

目的 通过应用缺血、加热等多种手段对大鼠供肝进行移植术前的预处理,比较各种预处理方法对大鼠肝移植供肝缺血再灌注损伤的保护作用. 方法 将SD大鼠50只,随机分为5组:半肝缺血预处理组、脾脏缺血预处理组、热休克预处理组、热休克+缺血预处理组及手术对照组,分别进行肝脏预处理后行模拟原位肝移植术,术后检测胆汁流量,术后24 h检测血清ALT,AST,ALP水平并观察肝脏形态学变化. 结果 半肝缺血预处理组、热休克预处理组移植后胆汁分泌量多于对照组,血清ALT,AST水平明显低于对照组(P<0.05);热休克+缺血预处理组的血清ALT水平低于对照组(P<0.05),胆汁分泌量及血清AST与对照组没有显著差异;脾脏缺血预处理组的胆汁分泌量多于对照组,血清ALT水平低于对照组(P<0.05). 结论 肝脏缺血预处理初始阶段保护作用最明显,将缺血及热休克预处理两种方法联合处理大鼠时,其保护作用弱于单独缺血或单独热休克的预处理方法;脾脏缺血预处理也具有保护肝脏的作用.     

大黄素对大鼠肝移植排斥反应的抑制作用

目的探讨大黄素预防大鼠肝移植后排斥反应的效果。方法以Wistar大鼠为供者, SD大鼠为受者,建立大鼠原位肝移植模型。(1)将肝移植大鼠模型随机分为5组,其中3组分别腹腔注射大黄素2.0、10.0和50.0mg·kg-1·d-1,另外2组分别给予CsA(10.0mg·kg-1·d-1)和生理盐水(0.5 ml/d)作为对照,观察各组大鼠的存活时间。(2)另取肝移植大鼠模型,按给予大黄素时间的不同随机分为4组,分别于术前8 d至手术当天、术前4 d至术后4 d、术后第1～8天及术后第8～16天腹腔注射大黄素50.0 mg·kg-1·d-1,观察各组大鼠的存活时间。(3)另取肝移植大鼠模型,随机分为4组,分别给予CsA、大黄素以及CsA 大黄素,CsA的用量为10.0mg·kg-1·d-1,大黄素的用量为50.0mg·kg-1·d-1,各组于手术当天至术后第8天连续给药,停药后1周处死大鼠,观察各组大鼠移植肝组织病理学变化,根据Banff分级方案确定排斥活动指数。结果接受大黄素10.0和50.0 mg·kg-1·d-1腹腔注射的大鼠,术后存活时间分别为(25.1±2.1)d、(27.1±7.3)d,明显长于生理盐水对照组(P<0.01),使用50.0mg·kg-1·d-1者的存活时间与CsA对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。术前8 d至手术当天、术前4 d至术后4 d用药者,术后受者存活时间分别为(15.3±1.6)d、(15.8±1.9)d,二者的存活时间明显短于术后第1～8天用药者的(25.3±3.7)d和术后第8～16天用药者的(23.1±3.8)d(P<0.01)。采用CsA与大黄素联合用药者,移植肝的排斥活动指数为2.11±0.78,明显低于单用CsA或大黄素者(P<0.05),单用CsA者(6.56±0.88)与单用大黄素者(6.33±1.00)比较,排斥活动指数的差异无统计学意义。结论大黄素对大鼠肝移植后的排斥反应有抑制作用。     

缺血预处理对大鼠肝移植受体的保护性作用

目的:观察缺血预处理对肝移植后早期C-X-C类趋化因子的表达和中性粒细胞浸润的影响,以探讨其保护作用的机制.方法:建立大鼠肝移植模型,供肝于UW液保存24 h.实验分大鼠肝移植组(未处理组)和缺血预处理组,后者于供肝切取前夹闭第一肝门10 min然后开放10 min取肝.于移植后1 h、2 h、4 h、6 h分别测定肝内髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性和血清肝酶学指标、巨噬细胞炎性蛋白(macrophage inflammatory protein,MIP)-2、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平.分别取术后4 h肝组织行常规病理切片.结果:肝酶学指标改变显示缺血预处理组肝功能得到有效改善.缺血预处理组较未处理组肝MPO水平在各时点均有降低,并在移植后4 h(0.48±0.18 U/g组织和0.85±0.11 U/g组织)和6 h(0.63±0.04 U/g组织和0.77±0.05 U/g组织)出现显著性差异(P<0.05).血清MIP-2水平亦在4 h和6 h显著下降(2546.59±707.78 pg/ml和3488.82±785.15 pg/ml,1023.72±656.86 pg/ml和1852.04±1108.89 pg/ml).血清TNF-α水平仅在2 h变化显著(370.77±146.82 pg/ml和517.41±57.30 pg/ml).结论:本研究认为缺血预处理可能通过下调肝细胞对趋化因子的表达,减少移植肝内中性粒细胞的浸润,从而对供肝起保护作用.     

Variables influencing the outcome following orthotopic liver transplantation

Seventy-two patients who underwent orthotopic liver transplantation (OLT) were studied to identify perioperative variables that would predict survival and intraoperative blood loss. Survival and intraoperative blood loss were not affected by encephalopathy, length of donor liver ischemia, or any of the preoperative laboratory values studied. Survival was significantly decreased in patients requiring postoperative dialysis (41%) and in patients who had severe rejection requiring retransplantation (33%). Intraoperative blood loss was significantly greater in patients over 50 years of age (11.6 blood volumes) and patients with biliary atresia (8.7 blood volumes). These results may aid in choosing future recipients for orthotopic liver transplantation and in anticipating the postoperative support needed.     

乌司他丁对大鼠原位肝脏移植供肝的保护作用

目的：探讨乌司他丁对大鼠原位肝脏移植供肝的保护作用及机制。 方法：分别用单纯UW液（模型组）或含乌司他丁（乌司他丁组）、HO-1诱导剂CoPP（CoPP组）、HO-1抑制剂ZnPP（ZnPP组）的UW液灌注切取的供体大鼠肝脏并保留灌注液1 h后,原位移植受体大鼠。移植后24 h取移植肝脏与受体大鼠血标本,行肝脏病理学检查及评分;分别用real-time PCR和Western bolt法检测肝组织HO-1 mRNA与蛋白的表达;用Elisa法检测大鼠血清中IL-2和IL-10的含量。 结果：与模型组比较,乌司他丁组与CoPP组供肝的损伤明显减轻、Suzuki评分降低,而ZnPP组损伤加重、Suzuki评分升高（均P<0.05）;乌司他丁组与CoPP组HO-1 mRNA与蛋白的表达明显上调,而ZnPP组明显下调（均P<0.05）;乌司他丁组与CoPP组大鼠血清中IL-2水平明显降低、IL-10水平明显升高,而ZnPP组IL-2水平明显升高、IL-10水平明显降低（均P<0.05）。 结论：乌司他丁可能通过上调移植大鼠肝脏的HO-1水平,减轻再灌注损伤、抑制排斥反应而发挥保护作用。