人肝细胞癌组织中SOX基因家族的异常表达

我们对SOX家族在肝细胞癌(HCC)的转录水平进行研究 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.实验对象 :用于研究的 2 7对肝癌/癌旁组织标本来源于乙型肝炎病毒(HBV)阳性的原发性肝细胞癌的手术患者。癌和癌旁的诊断均以病理诊断为最终依据。2 .肝癌 /癌旁组织RNA的抽提 :取液氮冻存的组织 ,采用Trizol法抽取总RNA ,具体步骤参考产品说明。3 .半定量逆转录 聚合酶链反应(RT PCR) :15 μl体系里含 2 μgRNA、10pmolOligodT18、5×Buffer 5 μl、dNTP mix(10mmol/L ) 1.5 μl、二硫代苏糖醇(DTT ,0 .1mol/L) 2 μl、M MLV逆转录…     

肝细胞癌中APC基因启动子甲基化和mRNA表达检测

目的探讨肝细胞癌中APC基因启动子甲基化状态及其对mRNA表达的影响。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例肝细胞癌及相应的癌旁组织和10例正常对照肝组织中APC基因启动子甲基化状态和mRNA表达水平,分析甲基化与临床资料以及与mRNA表达的关系。结果在肝细胞癌、癌旁及正常对照肝组织中检测到APC基因启动子甲基化率分别是46.6%、16.6%、0%。肝细胞癌组织中APC基因启动子甲基化率明显高于相应的癌旁和对照组(P<0.05),并且与年龄和癌肿有无假包膜有相关性(P<0.05)。各组织中APC基因mRNA表达无显著差异。结论APC基因启动子甲基化与肝细胞癌形成和侵袭有关,但不影响癌组织中mRNA表达。     

c-met在人肝细胞癌中表达的研究

应用分子杂交法，研究c-met mRNA在人肝细胞癌中的表达及其意义。Northern blot结果表明，癌组织中有16例表达，癌周肝中有12例表达。c-met在肝细胞癌组织中的表达与癌周肝组织中的表达无显著差异(P>0．05)。经统计学处理发现c-met和HCC分化程度、分期、大小、HBsAg、AFP、门静脉癌栓间无显著相关(P>0.05)。研究结果表明．c-met基因可能在肝癌形成及转移过程中起调节作用。     

肝细胞癌survivin mRNA表达的临床病理意义

目的　研究凋亡抑制基因survivin mRNA表达与肝细胞癌(HCC)临床病理之间的关系;探讨其在评价HCC侵袭性和癌症进展中的价值。方法　用逆转录聚合酶链反应测定31例HCC癌组织及癌旁组织中survivin mRNA 的表达。分析其临床病理学资料,研究在HCC 中survivinmRNA阳性和阴性表达与其各项临床病理学指标间的关系。结果　31 例HCC病人的肝癌标本中,survivin mRNA表达阳性的有22 例,占71%;阴性表达9 例,占29%。癌旁组织中未见survivinmRNA表达。HCC组织的survivin mRNA表达与病人性别、年龄、HBsAg、肝硬化、肿瘤的大小、包膜、单发或多发瘤无显著关系(P>0 05),而与癌栓、病理学分级和TNM分期有显著关系。SurvivinmRNA表达阳性组有癌栓占9/22(40 91%),survivin mRNA表达阴性有癌栓占0/9(0%),两组比较P<0. 05;Survivin mRNA 表达阳性组病理学分级Ⅰ、Ⅱ级有7/22 (31 82%),Ⅲ和Ⅳ级有15/22(68. 18%),survivin mRNA表达阴性组Ⅰ、Ⅱ级有7/9(77. 78%),Ⅲ和Ⅳ级有2/9(22 .22%),两组比较P<0 05,有显著差异;survivin mRNA表达阳性组TNM分期Ⅰ、Ⅱ期有7/22(31. 82%),Ⅲ和Ⅳ期有15/22 ( 68 .18%), survivin mRNA 表达阴性组Ⅰ、Ⅱ期有7/9 ( 77 78%),Ⅲ和Ⅳ期有2/9(22 22%),两组比较P<0 .05,有显著差异。结论　肝细胞癌sur     

肝细胞生长因子受体在人肝细胞癌中表达的研究

作者应用分子杂交法，研究肝细胞生长因子受体（ｃ－ｍｅｔ）ｍＲＮＡ在人肝细胞癌中的表达及其意义。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析结果表明：在癌组织中有１６例ｃ－ｍｅｔ表达阳性，在癌周肝中有１２例ｃ－ｍｅｔ表达阳性。ｃ－ｍｅｔ在肝细胞癌组织中与癌周肝组织中的表达阳性的例数差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。经统计学处理发现ｃ－ｍｅｔ和肝细胞癌分化程度、分期、大小、ＨＢｓＡｇ、ＡＦＰ、门静脉癌栓间无显著相关（Ｐ＞０．０５）。作者认为ｃ－ｍｅｔ基因可能在肝癌形成及转移过程中起调节作用。     

人肝细胞癌中CD44表达的研究

目的 探讨ＣＤ４４在人肝细胞癌中的行为及价值。方法 应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ方法对３０例人肝细胞中ＣＤ４４表达进行研究。结果 Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果表明，３０例癌组织中有１１例阳性，３０列癌旁肝组织有５例阳性，ＣＤ４４在肝细胞癌组织中的表达与癌周肝组织中的表达无显著差异（Ｐ〉０．０５）。ＲＰ－ＰＣＲ研究表明，３０例癌组织中有１６例阳性，３０例癌旁肝组织中有１０例阳性，ＣＤ４     

HBV相关肝细胞癌的基因差异表达

目的　探讨癌基因、抑癌基因在HBV相关HCC中的表达。方法　提取 2 2例HBV相关HCC患者肝癌及癌旁组织的mRNA,逆转录合成含有 3 3p dATP标记的cDNA探针,与含有 3 1 7 0个基因或表达序列标签 (EST)的cDNA微阵列进行杂交,图像分析,基因数据库搜索,RT PCR验证。结果　 肝癌组织与癌旁组织间共有 1 3 6 9个差异表达基因或表达序列标签 (EST),其中有 1 2 1个基因或EST表达差异 > 2倍。肝癌组织与癌旁组织比较, 1 2 1个基因或EST中表达上调的有 8 8个,表达下调的有 3 3个。TM4SF1 基因在肝癌组织中阳性表达率为 8 6. 4% , 在癌旁组织中无表达 (P <0. 001 );ST1 4基因在癌旁组织中阳性表达率为 7 2. 8% ,在癌组织中无表达 (P < 0. 0 1 )。结论　TM4SF1基因的表达上调和ST1 4基因的表达下调参与了肝癌的发生。     

肝细胞癌中SFRP1和APC基因启动子甲基化与其mRNA的表达

目的探讨肝细胞癌（HCC）中SFRP1和APC基因启动子甲基化状态及其mRNA表达的关系。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术，检测30例肝细胞癌（HCC组）及相应的癌旁组织（癌旁组）和10例正常肝组织（正常对照组）中SFRP1及APC基因启动子甲基化状态和mRNA的表达水平，分析甲基化与某些临床参数与mRNA表达的关系。结果HCC组、癌旁组及正常对照组中的SFRP1和APC基因启动子甲基化率分别是11／30，4／30，0／10和14／30，5／30，0／10；HCC组明显高于其余两组（P〈0．05）。SFRP1基因启动子甲基化与临床资料无关（P〉0．05）；APC基因启动子甲基化与年龄（〈60）岁和癌肿无假包膜有关（P〈0．05）。HCC组SFRP1基因mRNA表达明显低于其余两组（P〈0．05），各组APC基因mRNA表达差异无显著性。两基因甲基化之间无相关性。结论SFRP1和APC基因启动子甲基化与HCC的形成和进展有关，但HCC组织中基因甲基化与mRNA表达的关系尚不明确。     

人肝细胞癌中nm23表达的研究

目的:研究转移抑制基因nm23mRNA在人肝细胞癌中的表达及其意义.方法:应用分子杂交及RT-PCR方法对30例人肝细胞癌中nm23表达进行研究.结果:Northern blot结果表明,阳性带位于0.8Kb处;癌组织、癌旁组织中nm23的表达结果显示:癌组织中有19例表达,癌周肝组织中有3例表达.nm23在肝细胞癌组织中的表达明显高于癌周肝组织(P0.05).结论:nm23基因可能在肝癌形成及转移过程中起调节作用.     

p14ARF蛋白在人肝细胞癌中的表达缺失及其临床意义

目的研究人肝细胞癌中p14ARF蛋白的表达缺失情况及其与临床病理的关系。方法采用链霉菌素-生物素（SP）免疫组织化学法及免疫印记反应（Western blot）对45例肝细胞癌组织、39例癌旁组织及37例非肿瘤肝组织标本进行检测分析。结果p14ARF蛋白在肝癌肿瘤组织中表达缺失率为84．496（38／45），p14ARF蛋白Ⅰ级-Ⅱ级（高分化）病例p14ARF蛋白缺失率为44．496，Ⅲ级-Ⅳ级（低分化）病例p14ARF蛋白缺失率为94．496（P〈0．05）。结论p14ARF蛋白表达缺失与肝细胞癌的发生、发展有一定相关性。提示p14ARF基因的失活可能是肝细胞癌恶性演变的重要因素。     

原发性肝细胞癌组织中kruppel样因子6基因mRNA突变的测定

目的　探讨kruppel样因子 (KLF) 6基因与原发性肝细胞肝癌发生、发展的关系。方法分别用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术和聚合酶链单链构象多态分析 (PCR SSCP)技术、DNA序列测定方法 ,检测 2 7例肝细胞癌患者的癌组织与癌旁组织、5例肝转移癌患者的正常肝组织中KLF6基因mRNA的表达及突变情况。结果　正常肝组织及癌旁组织中 ,只有 1例KLF6mRNA无表达 ,阳性率 97% (31/ 32 ) ;肝细胞癌组织中 ,有 4例无表达 ,阳性率 85 % (2 3/ 2 7) ,两者表达率间差异无显著性(χ2 =2 5 8,P >0 0 5 )。 2 7例肝细胞癌组织中 ,6例出现DNA片段异常泳动带 ,突变率为 2 2 % (6 / 2 7) ;14例出现信息个体 ,其中 5例 (5 / 14 ,36 % )为杂合子缺失 ,这 5例中有 3例出现DNA片段异常泳动带 ,突变比例为 3/ 5。在 2 7例癌旁组织中 1例检测出突变 ,但在检测出突变的肝癌组织的配对癌旁组织中无一例检测出突变。结论　肝细胞肿瘤存在KLF6基因突变 ,突变的起源是体细胞性的     

肝细胞癌中SEMA3B基因的表达及其意义

目的 通过对SEMA3B基因在原发性肝细胞癌（HCC）组织中表达的检测，探讨该基因与HCC发生机制的关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测35例HCC组织及癌旁肝组织SEMA3BmRNA表达水平。结果 （1）在所有受检的癌旁肝组织中，SEMA3BmRNA表达率为85．7％（30／35），明显高于癌组织的表达率20．0％（7／35），差异有统计学意义（P〈0．01）；（2）合并有肝硬化（20／28）或者乙肝（19／28）的患者，其癌组织中SEMA3B基因的表达缺失率显著高于无肝硬化（8／28）或乙肝阴性（9／28）患者（P〈0．05）；（3）SEMA3B基因的异常表达情况与年龄、性别的差异无统计学意义（P〉0．05），与HCC患者术前肝功能Child—Pugh分级评价和血清AFP的检测值高低无相关（P〉0．05）；（4）SEMA3B的表达缺失率与TNM分期关系无统计学差异，低分化型癌组织中SEMA3B基因缺失率高于中、高分化型，但差异无统计学意义（P〉0．05）。此外，该基因的缺失与肿瘤大小无关（P〉0．05）。结论 SEMA3B基因在HCC组织中的高频表达缺失说明该基因的失活与HCC的发生密切相关。SEMA3B基因是定位于染色体3p21．3区域的与HCC相关的抑癌基因，并且可能在HCC的发生发展方面起重要作用。     

肝细胞癌组织RASSFIA基因的表达及临床意义

RASSF1A是2000年报道从3号染色体短臂克隆出来的肺癌新型候抑癌基因，有关其在人肝细胞癌组织标本中的转录表达以及与临床病理关系的研究报道甚少，为此我们就34例肝细胞癌病人癌与癌旁组织中RASSF1A mRNA的表达情况进行了观察，并与临床资料进行比较分析。[第一段]     

IGF-Ⅱ基因在肝细胞癌组织中表达的研究

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是各种癌症中恶性程度很高的一种癌瘤之一,本研究应用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测IGF-Ⅱ基因在肝癌、癌旁和正常组织中的表达情况,分析其在肝癌发生中的作用,探讨肝癌的发生机制并探索可用于肝癌早期诊断及筛选的分子标志物。     

人肝癌和癌旁肝组织中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究

人肝癌和癌旁肝组织中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究罗运权，吴孟超，丛文铭，陈汉作者采用肝细胞生长因子（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃ－ｔｏｒ，ＨＧＦ）及其受体基因的ＮＤＡ探针，对人原发性肝癌及癌旁肝组织进行自身对照研究，从转录水平观察基...     

人TRAIL基因在COS-7细胞中的表达及在治疗肝细胞癌中的作用

目的　探讨TRAIL以及联合应用亚毒性剂量的化疗药对肝细胞癌的治疗作用。方法　用人TRAIL重组表达质粒pcDNA 3 0 hTRAIL瞬时转染COS 7细胞 ,利用其表达的活性蛋白 ,并联合应用亚毒性剂量的化疗药 ,观察其对于肝癌细胞株 (HepG2、SMMC 772 1)的胞毒作用。　结果瞬时转染COS 7细胞能够表达有活性的人TRAIL蛋白 ,对两种肝癌细胞株均有弱的杀伤作用 ,杀伤率为 9 2 %、9 5 % ;联合应用亚毒性剂量的化疗药丝裂霉素 (M)、5氟尿嘧啶 (5 FU)、放线菌素D(AcD)能够大幅度提高TRAIL的细胞毒活性 ,杀伤率分别为TRAIL +M(6 0 1%、32 6 % ) ,TRAIL +5 FU(6 8 1%、2 9 2 % ) ,TRAIL +AcD(72 9%、5 8 6 % )联合用药前后有显著差异性 (P <0 0 5 )。　结论TRAIL与化疗药物丝裂霉素、5氟尿嘧啶、放线菌素D具有很强的协同杀伤肝癌细胞株的作用 ,对于肝细胞癌的生物治疗具有一定的应用前景。     

肝细胞癌和癌周肝硬化组织中VEGF不同表达的比较

1998年EL-Assal等发现VEGF在癌周肝硬化组织中的表达明显高于肝癌组织和非肝硬化组织，指出肝硬化组织中的肝细胞长期处于机械性的血流减少的环境中，组织中氧压力的降低强烈刺激VEGF的产生，得出结论：VEGF引起的血管发生是在肝硬化组织中而非肝癌组织中。我们在对肝细胞癌组织切片进行免疫组化的实验过程中也发现了同样的现象，因此想通过本研究进一步证实VEGF在肝硬化组织中表达较肝细胞癌组织中明显。     

肝细胞癌中nm-23H1的表达及临床意义

利用免疫组织化学 (免疫组化 )法检测肝细胞癌组织中nm 2 3H1 的表达情况 ,探讨其临床意义。结果显示 :89例肝细胞癌组织中nm 2 3H1 阳性表达 3 4例 (3 4/ 89,3 8.2 0 % ) ,阴性表达 5 5例(5 5 / 89,61.80 % ) ;有直接浸润或远处转移的 49例病例中 12例nm 2 3H1 表达阳性 (12 / 49,2 4.49% ) ,无直接浸润或转移的 40例病人中 2 2例表达阳性 (2 2 / 40 ,5 5 .0 0 % ) ;5 1例能手术切除的肝癌中 2 8例nm 2 3H1 表达阳性 (5 4.90 % ) ,3 8例未能手术切除的病例中 6例表达阳性 (15 .79% )。提示有转移浸润的肝细胞癌组织nm 2 3H1 基因阳性表达远低于无浸润转移者 ,说明nm 2 3H1 基因与肝细胞癌的转移浸润有着一定的关系 ;病灶能手术切除者其nm 2 3H1 基因阳性表达率显著地高于不能手术切除者 (P <0 .0 1) ,因此认为肝细胞癌的nm 2 3H1 表达可作为术前判断肝癌能否切除的参考指标。     

蛋白酶ICH-1在肝细胞癌中的表达及与bax表达的关系

蛋白酶ICE家族是近年来发现的一种与细胞凋亡有关的基因，已发现该家族包括CED-3、ICE、ICH-1等成员。其与肿瘤关系的研究尚很少。本研究应用免疫组化方法对40例原发性肝细胞癌中蛋白酶ICE家族中ICH-1(ICH-IL和ICH-1S)及凋亡基因bax的表达进行观察，以探讨ICH-1和bax的关系及与肝细胞癌发病的关系。