超声分子成像对小鼠肾脏急性微血管炎症的可视性评价

目的 应用超声分子成像技术可视性评价小鼠肾脏急性微血管炎症.方法 缺血再灌注处理制备小鼠肾急性微血管炎症模型 (IR组,6只)及肾假手术处理模型(SH组,6只),所有实验小鼠均经静脉随机(间隔30 min)弹丸注射携带抗小鼠P-选择素单抗靶向超声微泡(MBp)、同型对照抗体超声微泡(MBc)及普通脂质超声微泡(MB),10 min后行肾对比超声(CEU)检查,测量肾脏显影的声强度(VI).并采用平行板流动腔技术在微血管生理血流条件下体外评价MBp的靶向黏附效能.结果 在缺血再灌注肾,MBp呈显著的超声显影,而MBc和MB呈轻度的超声显影;3种超声微泡在假手术肾均无明显的超声显影.MBp的VI值在缺血再灌注肾较假手术肾明显增大(P<0.05),同时较MBc和MB在缺血再灌注肾的VI值也都明显增大(P<0.05);而MBc及MB在缺血再灌注肾的VI值较各自假手术肾轻度增大(P<0.05).在微血管生理血流剪切应力环境下MBp可与小鼠P-选择素Fc段(PSFc)实现有效的靶向性特异结合.结论 超声分子成像技术可对肾脏急性微血管炎症进行有效的可视性评价,该技术将可用于可视性评价微血管炎症或相关的血管内皮反应.MBp在微血管生理血流条件下具有良好的靶向黏附效能.     

双靶向超声微泡造影剂评价小鼠缺血再灌注心肌

目的 制备同时携载P选择素和ICAM-1抗体的靶向超声微泡造影剂,以评估小鼠缺血再灌注损伤心肌声学造影显像效果.方法 采用生物素-亲和素方法制备靶向微泡,于激光共聚焦显微镜下观察微泡形态,流式细胞仪检测连接效率.将24只健康昆明小鼠随机分成3组:结合双抗体选择素微泡组(MBd组)10只、结合P选择素单抗组(MBp组)10只,空白微泡组(MBc组)4只.结扎冠状动脉左前降支近左主干分支,制作心肌缺血再灌注模型,60 min后经尾静脉分别注射MBd、MBp及MBc,采集心肌对比造影图像.所有图像均采用Sonomath超声影像分析仪处理.结果 MBd组和MBp组对缺氧内皮细胞的黏附力以及对缺血再灌注区心肌显像增强程度显著高于MBc组(P均＜0.05),MBd组对缺血再灌注区心肌显像延迟时间高于MBp组(P＜0.05).结论 双靶向微泡联合超声造影是检测和评估小鼠缺血再灌注心肌的无创性手段.     

携P-选择素单抗靶向超声微泡评价小鼠下肢缺血-再灌注损伤

目的 探讨自制的携P-选择素靶向微泡(MBp)结合对比超声在小鼠骨骼肌缺血-再灌注损伤(isehemia-reperfusion injury,I-R)中的诊断价值.方法 制备生物素化脂质微泡(MBb)及MBp.研究选用6只7～8周龄的昆明小鼠,以动脉夹夹闭-松开小鼠一侧股动脉制备下肢I-R模型,另一侧下肢作为对照组.分别注入等量(5×106)MBb及MBp后行对比超声检查,分析骨骼肌显影的声强度(video intensity,VI).结果 MBp的VI值在I-R组[(19.5±3.7)U]明显高于对照组[(4.1±0.7)U,P<0.053,MBb在I-R组的VI值[(8.5±2.1)U]较对照组有显著性差异[(3.7±0.7)U,P<0.053,但MBp在I-R组的VI值[(19.5±3.7)U]约为MBb组的2.3倍[(8.5±2.1)U,P<0.05].结论 MBp结合对比超声可有效评价骨骼肌I-R的炎症反应,将可用于评价微血管炎症或相关的血管内皮反应.     

携P选择素单抗靶向微泡在高剪切应力下体外血栓超声分子成像的效果

目的制备携P-选择素单抗的靶向超声微泡(MBp),通过体外流动腔模型评价其在高剪切应力下行血栓超声分子成像的效果。方法采用"亲和素-生物素"桥接法制备MBp和同型对照微泡(MB),应用自制琼脂糖流动腔模型模拟体内高剪切应力血流环境,将MBp和MB随机先后注入琼脂糖模型内,与小鼠血栓孵育30min后,PBS液15cm/s流速不间断冲洗血栓,分别在冲洗2、4、6、8和10min时行对比超声检查并测量声强度(VI)值。免疫组化评价小鼠血栓的P-选择素表达。结果冲洗前MBp组和MB组血栓VI值无明显差异(P0.05);冲洗后VI值在各时间点MBp组均较MB组大(P0.05)。冲洗10min后MBp组血栓仍有可视性对比增强,而MB组血栓在冲洗2min后已无可视性对比增强。免疫组化显示血栓表面有明显的P-选择素表达。结论以P-选择素为靶标的MBp在高血流剪切应力下与血栓的靶向结合稳定可靠,可用于动脉血栓的超声分子成像。     

小鼠心肌缺血再灌注模型制备及其超声分子成像研究

目的以显微外科技术建立小鼠心肌缺血-再灌注模型,用其评价携抗P-选择素单抗靶向微泡(MBp)的"心肌炎症"超声分子成像效果。方法 30只昆明小鼠随机均分为缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,IR)和假手术(sham surgery,SH)组,手术组结扎冠脉前降支15min,再灌注1h。心电图、M型超声、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)和HE染色评价模型构建情况,分别将普通微泡和MBp经静脉注射到实验小鼠体内,评价MBp的超声分子成像效果。结果结扎前降支时前壁心肌呈明显充盈缺损,心电图ST段呈弓背向上抬高。再灌注后充盈缺损消失,ST段降至正常;M型超声检查显示,IR组左室短轴缩短率(LV-%FS)明显低于假手术组(P0.05);心脏TTC染色无坏死表现,而HE染色提示缺血区心肌存在炎症改变;MBp造影显示前壁心肌呈选择性显影增强,前壁视频强度(video intensity,Ⅵ)明显高于后壁(P0.01)。增强区域与结扎前降支时的充盈缺损区域高度相关(r=0.95)。结论 MBp可以有效评价心肌缺血再灌注"炎症"损伤,小鼠心肌缺血再灌注模型适宜于超声和其它显像方法的"炎症"分子成像研究。     

在生理血流条件下靶向超声微泡对P-选择素的靶向黏附效能

目的平行板流动腔评价在生理血流条件下携抗小鼠P-选择素单抗靶向超声微泡（MBp）的靶向黏附效能。方法采用＂亲和素-生物素＂桥接法构建MBp;在3种浓度（10、100和1000ng/ml）小鼠P-选择素Fc段（PSFc）包被的平行板流动腔和固定剪切应力下,以及最大包被浓度和不同剪切应力（0.2-1.7dyn/cm^2）下分别检测MBp的每分钟结合数量（结合率）,以抗小鼠P-选择素单抗封闭组和空白组为对照。在3种包被浓度下检测MBp达半数解离的剪切应力。所有分组样本数均为3。结果两对照组均未见有明显的MBp结合。实验组MBp结合率随包被浓度的增高而增加（P〈0.05）,然而与剪切应力呈现双向性（P〈0.05）。MBp达半数解离的剪切应力随包被浓度的增加而增大（P〈0.05）。结论MBp在生理条件下可与PSFc特异有效地结合,体外对靶向超声微泡的靶向黏附效能评价将有助于判定超声分子成像的效果和靶向微泡的在体应用环境条件。     

携带抗P-选择素单抗靶向微泡和对比超声评价肾缺血再灌注损伤

目的探讨携带抗小鼠P-选择素单抗的靶向超声微泡（MBp）和对比超声（CEU）评价肾缺血再灌注损伤的可行性。方法12只实验小鼠随机均分为2组：缺血再灌注（IR组）和假手术组（SH组）,应用＂亲和素-生物素＂桥连法构建MBp。所有小鼠分别随机（间隔30min）经静脉弹丸注射给予普通脂质微泡（MB）和MBp,10min后行肾CEU检查,测量肾显影的声强度（VI）,最后进行肾组织免疫组化检测。结果第一帧CEU图像显示MBp及MB在IR组缺血再灌注肾分别可见显著及轻度的超声显影,而两者在SH组假手术肾均无明显的超声显影。VI值在IR组MBp较IR组MB及SH组MBp均明显增大（P〈0.05）;而在IR组MB较SH组MB轻度增大（P〈0.05）。免疫组化检测显示缺血再灌注肾血管内皮P-选择素表达较假手术肾明显增加。结论应用MBp行CEU检查可有效评价小鼠肾缺血再灌注损伤,将可用于评价微血管炎症或相关的血管内皮反应。     

携Sialyl Lewis^X超声微泡靶向探查缺血心肌的炎症分子“印记”

目的探讨应用靶向超声分子成像探查心肌缺血再灌注损伤炎症“印记”的可行性。方法采用“亲和素-生物素”桥接法构建携唾液酸化路易斯（Sibyl Lewis^X）靶向超声微泡（MBsLex）和同型对照微泡（MBc）。10只心肌缺血再灌注小鼠随机先后注入MBsLex和MBc（间隔30min）,分别于注入5min后行心肌对比超声检查,测量心肌缺血区和非缺血区的声强度（Ⅵ）。结果对比超声图像显示MBsLex组缺血区心肌造影见显著增强,Ⅵ值高达23．52±1．08,而在MBc组缺血区心肌造影仅见轻度增强,Ⅵ缸为9．81±0．41,两者之间差异有统计学意义（P〈0．05）。但无论MBsLex组还是MBc组,缺血区心肌Ⅵ值均明显高于非缺血区心肌Ⅵ值（P〈0．05）。两组非缺血区心肌之间Ⅵ值未见明显差异。结论应用携sLex超声微泡行对比超声能够靶向探查心肌缺血再灌注损伤的炎症“印记”。     

携抗P-selectin靶向超声造影剂犬体内超声分子成像

目的 制备携抗P-selectin靶向超声造影剂,探讨其评价心肌缺血再灌注损伤的超声分子成像效果。方法 采用“生物素-亲和素”桥接法制备携抗P-selectin靶向超声造影剂,建立犬心肌缺血再灌注模型,分别注入携抗P-selectin靶向超声造影剂（MBp）和空白超声造影剂（MBc）,行心肌声学造影检查,采图、存盘。应用DFY型超声图像定量分析诊断仪中的彩色编码技术对存储的图像进行脱机处理,观察MBp体内超声分子成像效果。结果 成功制备携抗P-selectin靶向超声造影剂及建立犬心肌缺血再灌注模型。彩色编码图像示MBp行心肌声学造影可见缺血再灌注区心肌显著增强;MBc于缺血再灌注区心肌造影无明显增强。结论 应用携抗P-selectin靶向超声造影剂行心肌声学造影检查能准确检测再灌注治疗后犬心肌缺血再灌注损伤。     

靶向心肌声学造影监测兔心肌缺血或再灌注损伤中IL-8的表达

目的探讨靶向心肌声学造影(MCE)监测兔心肌缺血或再灌注损伤(MIRI)中IL-8表达的效果。方法经兔耳缘静脉注射SonoVue及携IL-8单抗超声微泡行MCE检查,实时荧光定量PCR(QPCR)检测IL-8的表达量。结果携IL-8单抗微泡组(靶向MCE组)随着再灌注时间延长心肌缺血区声强度(VI)逐渐增高,于再灌注180min达高峰;再灌注30~180min各时段靶向MCE组心肌缺血区VI值明显高于SonoVue微泡组(普通MCE组)。相关性分析得出靶向MCE结果与QPCR结果呈正相关(P0.05)。结论靶向MCE可无创性地监测MIRI中IL-8的表达量,提高对MIRI诊断的灵敏度,以及评价心肌再灌注情况。     

心肌超声造影评价兔心肌梗死与存活性

目的探讨心肌超声造影（myocardial contrast enhancement,MCE）评价兔心肌梗死及心肌存活的价值。方法采用冠状动脉左前降支（left anterior descending of coronary artery,LAD）结扎法建立兔心肌梗死模型。建模1周后心肌超声造影,左室乳头肌短轴观显示局部心肌血流灌注情况。梗死区心肌组织行Masson三色染色后与MCE进行对照。结果MCE显示模型兔左室前壁、前间隔灌注缺损与灌注不良或延迟的节段数分别为18、14,与邻近正常灌注区灰阶值比较,差异有十分显著的统计学意义（P〈0.05）。与病理染色判断梗死与存活节段对比,MCE预测心肌梗死的敏感性、特异性、阳性预测值分别为88.2%、80%和83.3%,对心肌存活的敏感性、特异性及阳性预测值分别为80%、88.2%和85.7%。结论MCE判断兔心肌梗死与心肌存活的敏感性、特异性及准确性较高。     

冠状动脉心肌桥与心肌缺血关系的研究

目的：探讨心肌桥（MB）与心肌缺血的关系。方法：回顾分析冠脉造影中检出的88例MB患者,把其中36例孤立性MB分为两组（A组：NobleI级;B组：NobleⅡ～Ⅲ级）,卡方检验分析：（1）壁冠状动脉及其前后冠脉的粥样硬化发生率差异;（2）A、B组的动态心电图的ST—T段改变发生率、运动平板阳性率、稳定性心绞痛发生率、不稳定性心绞痛发生率的差异。结果：MB检出率4．1％,B组与A组相比,运动平板阳性率、稳定性心绞痛发生率、不稳定性心绞痛发生率明显升高（P〈0．05）;MB近段冠脉的AS发生率高于壁冠状动脉及MB远段冠脉（P〈0．01）。结论：MB的狭窄程度越严重,引起的心肌缺血越重;MB促进近段冠脉粥样硬化的发生。     

家兔实验性心肌梗塞时心肌细胞凋亡研究

目的：探讨急性心肌梗塞时心肌细胞凋亡情况。方法：采用ＤＮＡ缺口末端标记法（ＮＥＬＭ）、透射电镜和琼脂糖凝胶电泳对家兔实验性心肌梗塞时不同损伤区心肌细胞凋亡情况进行研究。结果：在梗塞交界区心肌组织中可见散在大量ＭＥＬＭ染色阳性细胞；电镜检查细胞呈凋亡特征。在坏死区和正常心肌组织中均未发现ＮＥＬＭ染色阳性细胞。梗塞交界区ＤＮＡ电泳呈梯状，符合细胞凋亡图谱。坏死区心肌ＤＮＡ电泳图谱呈均匀弥散状态，正常心     

实时心肌造影超声心动图再充盈参数评估心肌梗死后心肌存活性

目的 探讨实时心肌造影超声心动图(myocardial contrast echocardiography,RT-MCE)评价血运重建术前心肌灌注情况和再充盈参数评估心肌梗死后心肌存活性.方法 18例准备进行血运重建术心肌梗死患者,于术前1～5 d行RT-MCE检查,并于术后3个月再次进行常规超声心动图检查.室壁运动分析采用18节段分析法,分为运动正常、运动减弱、无运动和反常运动.心肌存活定义为术后3个月超声检查室壁运动明显改善.分析造影图像,根据灌注的函数公式Y(t)=A[1-e-kt] B,得出A值、k值、A×k值.利用接受者操作特征(receiver operator characteristics,ROC)曲线定义RT-MCE再充盈参数预测心肌梗死后心肌存活性的截断值以及敏感性、特异性.结果 (1)在18例患者中共109个室壁发生明显运动异常,运动减弱为47个,无运动为56个,反常运动为6个,术后3个月室壁运动改善分别为16个,22个,0个;(2)术后3个月室壁运动改善节段的术前心肌造影各参数A值、k值、AXk值[分别为(5.48±1. 73)dB、(0.34±0.09)S-1、(2.12±1.71)dB/s],明显大于3个月功能未恢复心肌的A值、k值、A×k值[分别为(4.41±1.45)dB、(0.26±0.06)S-1、(1.15±0.76)dB/s],差异有统计学意义(P均＜0.01);(3)以术前A值＞3.75 dB为截断值预计心肌存活性的敏感性为80.0%,特异性为79.2%,以术前k值＞0.28 S-1预计心肌存活性的敏感性为85.0%,特异性为81.1%,以术前A×k值＞1.32 dB/s预计心肌存活性的敏感性为85.0%,特异性为84.9%. 结论 RT-MCE再充盈参数可以较准确地检测心肌梗死后室壁运动异常节段的心肌灌注情况,评价心肌梗死后心肌存活性.     

Determinants of Myocardial Strain in Experimental Chronic Myocardial Infarction

We evaluated the relationships between regional myocardial strain measured by speckle tracking echocardiography and viability, fibrosis, hypertrophy and oxygen consumption in the infarcted or remote myocardium in a pig model of chronic myocardial infarction (MI). Thirteen farm pigs with surgical occlusion of the left anterior descending coronary artery and five sham-operated pigs were studied 3 mo post-MI. Computed tomography revealed significant left ventricle remodeling. Reduced radial or circumferential strain identified areas of transmural infarction (area under the curve: 0.82 and 0.79, respectively). In the remote non-infarcted area, radial strain correlated inversely with the amount of fibrosis (r?=?–0.66, p?=?0.04) and myocyte hypertrophy (r?=?–0.68, p?=?0.03). Radial strain rate inversely correlated with myocardial resting oxygen consumption assessed with ¹¹C-labeled acetate positron emission tomography (r?=?–0.71, p?=?0.006). In conclusion, myocardial strain and strain rate reflect fibrosis, hypertrophy and oxygen consumption of the remote areas after MI.     

声学密度定量技术在急性心肌梗塞早期预测再灌注心肌的存活

目的：本试验是利用声学密度定量技术（ＡＤ－ＩＢＳ）预测再灌注心肌存活。方法：在发病当天,发病后第３天,第２１天分别对２０例急性心肌梗塞患者进行ＡＤ－ＩＢＳ检查。结果：标化ＣＶＩＢ在发病后第３天有所恢复（不依赖于室壁运动的恢复）的梗塞区心肌,其在发病后第２１天的室壁增厚率可达到与正常心肌区无明显差异。结论：帮可认为心肌梗塞后标化ＣＶＩＢ可早期预测再灌注心肌的存活。