下调IKKα表达能够抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力

目的:研究降低IKKα的表达对人胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:利用Western blot 检测胃癌细胞系中IKKα蛋白的表达水平,选择IKKα表达较高的细胞系MKN28,转染下调IKKα的慢病毒,建立稳定转染细胞株(标记为MKN28-LV-shcontrol和MKN28-LV-shIKKα),并利用Western blot、RT-PCR验证病毒转染效果。采用Transwell实验和划痕实验检测低表达IKKα对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:Western blot结果显示胃癌细胞系中MKN28细胞IKKα蛋白表达水平相对较高,转染慢病毒干扰载体成功后利用Western blot 及RT-PCR实验证实实验组MKN28-LV-shIKKα较对照组MKN28-LV-shcontrol中IKKα蛋白及mRNA水平明显降低。利用Transwell及划痕实验证实实验组MKN28-LV-shIKKα较对照组MKN28-LV-shcontrol细胞迁移及侵袭能力明显降低。结论:IKKα 与胃癌的迁移及侵袭密切相关,降低IKKα的表达水平能显著抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力,提示IKKα在胃癌的转移中可能发挥着重要作用。     

CDKL1对胃癌细胞迁移及侵袭的作用

目的:探讨细胞周期素依赖激酶样蛋白1(CDKL1)对胃癌细胞系SGC7901迁移及侵袭的作用.方法:将胃癌细胞系SGC7901分为实验组及对照组,采用慢病毒转染siRNA至胃癌细胞构成实验组,转染无意义序列作为对照组.通过细胞划痕实验检测胃癌SGC7901细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测其侵袭能力;Western blot检测CDKL1低表达后对胃癌细胞中AEG-1和MMP-9蛋白表达的影响.结果:与对照组相比,CDKL1低表达后实验组细胞迁移及侵袭能力明显降低(P＜0.05),实验组胃癌细胞中AEG-1和MMP-9蛋白的表达水平明显下降(P＜0.05).结论:特异性下调CDKL1基因可抑制胃癌细胞的迁移及侵袭能力,表明CDKL1基因可促进胃癌细胞的侵袭以及转移,并且与AEG-1和MMP-9密切相关.     

RNA干扰CTSL表达抑制卵巢癌细胞的侵袭和转移

目的：构建组织蛋白酶L基因(cathepsin L, CTSL)RNAi的真核表达载体,探讨干扰CTSL基因表达对卵巢癌细胞侵袭和转移的影响。方法：设计并合成4对CTSL小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染卵巢癌A2780细胞,RT-PCR检测各转染细胞CTSL的表达,筛选沉默效果最好的siRNA序列。设计并合成CTSL-shRNA序列,与psilence4.1-CMV-neo载体连接,构建psilence4.1-CTSL表达载体。psilence4.1-CTSL转染A2780细胞,获得稳定转染克隆A2780-CTSL。RT-PCR和Western blotting验证CTSL基因干扰效果,MTT法和集落形成实验检测A2780细胞的增殖,流式细胞术检测A2780细胞周期,Transwell侵袭小室实验检测A2780细胞体外侵袭和迁移能力。结果：筛选出干扰效果最好的siRNA-CTSL-1202序列,并成功构建相应的CTSL-shRNA表达载体psilence4.1-CTSL。稳定转染psilence4.1-CTSL能沉默A2780细胞中CTSL的表达。沉默CTSL基因后可抑制A2780细胞的侵袭和转移,但不影响A2780细胞的增殖、细胞周期和黏附活性。结论：成功构建CTSL基因siRNA的真核表达载体,RNA干扰CTSL基因表达可抑制卵巢癌细胞的侵袭和转移。     

RNA干扰FAK表达抑制宫颈癌细胞侵袭、迁移能力的研究

目的 探讨黏着斑激酶(FAK)表达量降低对宫颈癌细胞侵袭、迁移能力的影响以及机制研究.方法以宫颈癌HeLa细胞为研究对象,转染RNA干扰载体,实验分3组:空白对照组(未做任何处理的细胞)、阴性对照组(细胞转染对照载体FAK-pGenesil-Ctrl)、干扰组(细胞转染重组质粒FAK-pGenesil-siRNA).Transwell法检测细胞的迁移、侵袭能力,Western blot法检测细胞中的FAK、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达量.结果 干扰组细胞中FAK蛋白的表达量低于空白对照组和阴性对照组(P﹤0.05);干扰组细胞的迁移、侵袭数少于空白对照组和阴性对照组(P﹤0.05);干扰组细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达量低于空白对照组和阴性对照组,但E-cadherin蛋白的表达量高于空白对照组和阴性对照组(P﹤0.05).结论 RNA干扰FAK的表达量可以降低宫颈癌HeLa细胞的侵袭、迁移能力,其作用机制可能是通过影响细胞上皮间质转化相关因子MMP-2、MMP-9、E-cadherin蛋白的表达量.     

小RNA干扰PDK1抑制乳腺肿瘤细胞侵袭

目的:在肿瘤侵袭转移的细胞和生物学机制中,包含有多种基因和信号传导通路的改变.PDK1是P13K分子通路上的一个重要分子,为了研究PDK1对乳腺肿瘤细胞侵袭能力的影响,我们以乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究模型,用小RNA干扰法特异下调PDK1的表达,研究其侵袭能力的变化,为乳腺癌临床治疗探索新的分子靶点.方法:通过构建PDK1特异的小RNA干扰质粒,利用脂质体介导的方法转染乳腺癌细胞MDA-MB-231,无限稀释法筛选单克隆细胞系,并通过Western Blot的方法检测各组细胞中PDK1蛋白的表达水平.细胞计数的方法观察各组细胞之间的增殖情况,并利用Matrigel Transwell的实验方法研究细胞在体外的侵袭能力差别.结果:MDA-MB-231细胞经小RNA干扰后PDK1蛋白表达水平明显下降,与对照组相比,细胞的生长增殖能力没有显著差异(P＞0.05),细胞的侵袭能力显著下降,并且差异有统计学意义(P＜0.05).结论:MDA-MB-231是一种侵袭能力高的乳腺癌细胞系,本研究利用小RNA干扰技术,特异性下调了乳腺癌MDA-MB-231细胞中的PDK1蛋白表达,结果表明,乳腺癌细胞的生长能力与对照组的细胞相比没有明显差别,但是,PDK1蛋白表达水平下降后乳腺癌细胞的侵袭能力明显下降,提示我们PDK1可能与乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭能力紧密相关.鉴于PDK1处于PDK1-Akt-PKC信号通路的上游,以PDK1为靶标的分子干预可能对乳腺癌细胞的侵袭转移起到有效的作用.     

FMNL2通过Rho信号通路促进胃癌细胞的侵袭和迁移

目的:研究同源形成素样蛋白2（FMNL2）是否通过Rho信号通路促进胃癌细胞的侵袭和迁移。方法:利用Oncomine数据库中的大数据分析FMNL2在胃癌及癌旁组织中的表达水平。运用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测胃癌细胞系中FMNL2 mRNA和蛋白的表达情况,使用shFMNL2质粒和空载质粒转染胃癌细胞系,并分为敲减组和对照组。采用 CCK8法、划痕实验、Transwell侵袭实验分析细胞的生物学功能,包括增殖、迁移及侵袭能力,利用Western blot方法检测两组细胞经Rho信号通路抑制剂Y27632处理后的E-cadherin、Vimentin及Rho信号通路相关蛋白的表达情况。结果:经生物信息学分析发现FMNL2在胃癌组织中高表达。同样FMNL2在胃癌细胞中表达水平升高。划痕实验和Transwell侵袭实验结果表明敲减组的迁移和侵袭能力显著下降。Western blot结果显示与对照组相比,E-cadherin在敲减组表达上调,Vimentin、RhoA、ROCK在敲减组表达下调。加入通路抑制剂Y27632后,EMT相关蛋白表达可被逆转。结论:下调FMNL2的表达可抑制胃癌细胞的侵袭迁移能力,并且可通过抑制Rho信号通路来实现。     

miR-638在胃癌中的表达及其对胃癌细胞侵袭和迁移的影响

目的:探讨miR-638在胃癌中的表达,并阐释miR-638 对胃癌细胞侵袭和迁移的影响。方法:收集2013年9月至2014年9月在上海交通大学医学院附属新华医院收治的68例胃癌患者对应的癌组织及癌旁组织的成对标本,通过定量PCR检测miR-638在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。调节胃癌细胞miR-638的表达,分为增强表达组、干扰表达组和空白对照组。通过细胞划痕实验及Transwell侵袭实验,比较三组胃癌细胞的迁移及侵袭能力。结果:胃癌组织中miR-638的表达水平显著低于癌旁组织［5.637±1.214 vs 11.220±3.148（P＜0.05）］;细胞划痕实验及Transwell侵袭实验显示miR-638增强表达组较空白对照组明显抑制胃癌细胞的侵袭和迁移,而干扰组则促进胃癌细胞的侵袭和迁移（P＜0.05）。结论:miR-638在胃癌组织中的表达水平较癌旁组织显著下降,提示miR-638在胃癌组织中可能发挥抑制肿瘤的作用;miR-638的过表达抑制胃癌细胞的迁移及侵袭能力,而miR-638的下调则促进胃癌细胞的迁移及侵袭能力。     

丹参酮ⅡA对胃癌细胞迁移和侵袭能力的抑制作用及机制

背景与目的：有研究证实,丹参酮ⅡA (tanshinone ⅡA)对肿瘤细胞具有抑制增殖、诱导分化和促凋亡的作用,并可抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭。但丹参酮ⅡA抑制胃癌侵袭和转移的机制尚不明确。本研究主要探讨丹参酮ⅡA对人胃癌SGC7901细胞体外迁移和侵袭的影响。方法：不同浓度(0.5、1、2、4 μg/mL)丹参酮ⅡA分别作用体外培养的胃癌SGC7901细胞24、48、72 h后,MTT比色法检测细胞增殖活力的改变;细胞划痕实验观察细胞的迁移能力的改变;3D侵袭实验观察细胞侵袭能力的改变;Real-time PCR和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA和蛋白的表达水平改变。结果：1、2、4 μg/mL丹参酮ⅡA对胃癌细胞株SGC7901有明显的抑制作用,且抑制作用存在时间-剂量依赖性(P<0.05);2 μg/mL丹参酮ⅡA呈时间依赖性抑制SGC7901细胞迁移;1、2、4 μg/mL丹参酮ⅡA呈浓度依赖性抑制SGC7901细胞侵袭;丹参酮ⅡA下调SGC7901细胞ICAM-1、MMP-2、MMP-9表达,同时可上调TIMP-2表达(P<0.05)。结论：丹参酮ⅡA可抑制胃癌SGC7901细胞的迁移和侵袭,上调TIMP-2的表达,下调ICAM-1、MMP-2、MMP-9的表达,可能是其作用机制之一。     

谷氨酸在调控胃癌细胞侵袭转移中的作用

目的:探讨谷氨酸受体NR1亚基在胃癌中的表达及谷氨酸对胃癌侵袭转移的调控作用。方法:运用Real-time PCR方法检测人胃癌高低转移细胞系中NR1亚基的表达情况;体外侵袭实验检测谷氨酸对胃癌细胞侵袭能力的影响及N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDA）的特异性阻断剂对胃癌细胞侵袭能力的阻断作用;全细胞膜片钳技术检测胃癌细胞上的谷氨酸受体诱发电流。结果:人胃癌细胞可表达NR1亚基,且NR1亚基在胃癌高转移细胞系中的表达量高于其在低转移细胞系中的表达量（P<0.05）;谷氨酸可增强胃癌细胞的侵袭能力,而阻断剂MK801可降低胃癌细胞的侵袭能力（P<0.05）;谷氨酸刺激后,胃癌细胞可产生谷氨酸受体诱发电流,MK801可部分有效阻断谷氨酸受体诱发电流。结论:谷氨酸受体NR1亚基在胃癌细胞中表达明显升高,谷氨酸与其结合可促进胃癌侵袭转移的发生,而特异性受体阻断剂可部分阻断其作用。     

AMD3100抑制胃癌细胞的增殖和侵袭能力及其机制研究

目的:探讨CXCR4特异性非肽类受体拮抗剂AMD3100对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其可能的分子机制。方法:Western blot方法检测不同转移潜能胃癌细胞系中CXCR4蛋白的表达水平。以不同浓度的AMD3100处理MKN28-M和MKN28-NM细胞后,采用CCK-8检测胃癌细胞的增殖情况,Transwell实验观察胃癌细胞侵袭能力的变化。Western blot检测AMD3100处理后MKN28-M细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:Western blot实验结果显示,高转移胃癌细胞MKN28-M中CXCR4的蛋白表达水平明显高于低转移胃癌细胞MKN28-NM,亲本细胞MKN28的CXCR4蛋白表达量很低。CCK-8和Transwell实验检测结果表明,AMD3100通过特异性阻断CXCR4的作用,显著抑制MKN28-M和MKN28-NM细胞的增殖能力(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01),且其抑制均呈剂量依赖性。经AMD3100处理后,MKN28-M细胞中MMP-9和VEGF的蛋白表达水平降低。结论:AMD3100可能通过下调MMP-9、VEGF等分子的表达抑制胃癌细胞的增殖,减弱胃癌细胞的侵袭及转移能力。     

siRNA沉默RhoC表达诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡

目的:研究siRNA沉默RhoC基因表达对人肝癌细胞BEL7402凋亡的影响及其机制,为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法:构建RhoC-siRNA真核表达载体pU6mRFPRhoC-siRNA,转染BEL7402细胞,激光共聚焦显微镜检测转染效率,RT-PCR和Western blotting鉴定RhoC基因沉默效果;流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和瑞氏染色检测BEL7402细胞凋亡,RT-PCR检测细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果:成功构建pU6mRFPRhoC-siRNA重组载体,转染BEL7402细胞的效率为70%,RT-PCR和Western blotting检测RhoC基因沉默效率分别为85%和82%。pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞凋亡显著高于未转染BEL7402细胞和pU6mRFP Scramble-siRNA转染组BEL7402细胞[(21.00±2.23)%vs(6.47±1.64)%、(4.63±0.47)%,P<0.01)],pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞DNA呈典型的梯状条带,瑞氏染色见转染组BEL7402细胞中有大量凋亡...     

siRNA沉默 CCL18 的表达抑制卵巢上皮癌SKOV3细胞的侵袭和迁移

目的:探讨体外沉默CCL18基因的表达对卵巢上皮癌SKOV3细胞侵袭和迁移的影响。方法:化学合成3对靶向CCL18的siRNA(CCL18-siRNA61、CCL18-siRNA127、CCL18-siRNA224),体外转染至CCL18阳性的SKOV3细胞,RT-PCR检测SKOV3细胞中CCL18 mRNA的表达,选取其中干扰效率最好的序列,构建靶向CCL18的干扰质粒pSilencer4.1-CCL18-siRNA61。pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染SKOV3细胞后,MTT法测定SKOV3细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的细胞周期,采用Transwell法、Migration法以及Fibronectin黏附法分别测定细胞的体外侵袭、迁移、黏附能力。结果:3对靶向CCL18的siRNA中CCL18-siRNA61干扰效果最好,进而成功构建靶向CCL18的pSilencer4.1-CCL18-siRNA61干扰质粒,pSi-lencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染可显著下调SKOV3细胞中CCL18 mRNA的表达。pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染不影响SKOV3细胞的增殖,但pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染组SKOV3细胞中(S+G2+M)期细胞比例明显低于对照质粒pSilencer4.1-Ctrl-siRNA转染组[(19.71±4.4)%vs(26.45±7.91)%,P<0.05];且与pSilencer4.1-Ctrl-siRNA质粒转染相比,pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染可有效抑制SKOV3细胞的侵袭、迁移和黏附能力[(9.91±3.41)%vs(23.75±6.81)%,(16.80±8.71)%vs(31.74±11.23)%,(6.73±4.33)%vs(17.53±6.54)%;均P<0.05]。结论:siRNA沉默CCL18的表达可抑制卵巢上皮癌细胞株SKOV3的侵袭、迁移和黏附能力。     

泌乳素诱导蛋白表达下调对乳腺癌MDA-MB-453细胞迁移、粘附和侵袭的影响

目的 探讨泌乳素诱导蛋白（PIP）表达下调对乳腺癌MDA-MB-453细胞迁移、粘附和侵袭能力的影响。方法 采用脂质体法转染PIP-siRNA至乳腺癌MDA-MB-453细胞作为实验组,同时设阴性对照组（转染control-siRNA）和空白对照组（未转染）,荧光显微镜观察转染效率,逆转录PCR和免疫细胞化学技术检测转染48h各组的PIP表达。通过细胞实验分别检测转染PIP-siRNA 48h乳腺癌细胞的迁移、粘附和侵袭能力。结果 乳腺癌MDA-MB-453细胞的转染效率为90％。转染PIP-siRNA 48h,实验组乳腺癌细胞PIP-mRNA和蛋白表达分别为0.035±0.003和483.3±59.8,均低于阴性对照组和空白对照组（P＜0.05）。转染PIP-siRNA 48h,实验组迁移细胞数量为21.0±5.3,低于阴性对照组（124.0±15.4）和空白对照组（118.0±12.5）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;实验组接种30min和60min的细胞粘附率较阴性对照组分别降低（42.6±2.7）％、（48.5±3.1）％,差异均有统计学意义（P＜0.05）;实验组穿过基质膜的细胞数为31.0±4.2,低于阴性对照组（119.0±12.5）和空白对照组（127.0±13.7）,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 下调PIP基因表达可明显抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞的迁移、粘附和侵袭能力,提示PIP在乳腺癌细胞的转移潜能中发挥重要作用。     

RhoC and ROCKs regulate cancer cell interactions with endothelial cells

RhoC is a member of the Rho GTPase family that is implicated in cancer progression by stimulating cancer cell invasiveness. Here we report that RhoC regulates the interaction of cancer cells with vascular endothelial cells (ECs), a crucial step in the metastatic process. RhoC depletion by RNAi reduces PC3 prostate cancer cell adhesion to ECs, intercalation between ECs as well as transendothelial migration in vitro. Depletion of the kinases ROCK1 and ROCK2, two known RhoC downstream effectors, similarly decreases cancer interaction with ECs. RhoC also regulates the extension of protrusions made by cancer cells on vascular ECs in vivo. Transient RhoC depletion is sufficient to reduce both early PC3 cell retention in the lungs and experimental metastasis formation in vivo. Our results indicate RhoC plays a central role in cancer cell interaction with vascular ECs, which is a critical event for cancer progression.     

RhoC表达与体外乳腺癌细胞系侵袭行为的相关性

目的研究RhoC在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达及其与乳腺癌侵袭行为的相关性。方法利用逆转录-聚合酶链反应、Western blot、细胞爬片免疫组织化学和免疫荧光组织化学染色检测乳腺癌低转移细胞系MCF-7和高转移细胞系MDA-MB-231中RhoC mRNA和蛋白表达水平。构建RhoC真核表达载体,并转染乳腺癌低转移细胞系MCF-7;利用Matrigel穿膜侵袭实验检测转染后细胞的体外侵袭能力,划痕修复实验检测运动迁移能力,组织化学染色检测微丝骨架结构的变化,并利用Western blot检测Akt磷酸化水平变化。结果RhoC在不同转移能力的乳腺癌细胞系中呈不同程度表达,在高转移细胞系MDA-MB-231中高表达,在低转移细胞系MCF-7中低表达,差异有统计学意义(P<0.01)。基因转染过表达RhoC后,乳腺癌细胞的体外侵袭能力明显增强,正义转染组穿膜细胞数(56.88±4.18)与其相应空载体组(23.77±3.64)、反义组(23.12±3.22)和未转染对照组(28.44±2.48)比较,明显增多(P<0.01);运动迁移能力明显增强,正义转染组24 h划痕修复率(58.28%±2.14%)明显高于转染空载体组(28.23%±2.62%)、反义组(22.36%±2.73%)和未转染对照组(30.18%±2.86%),差异有统计学意义(P<0.01);组织化学染色显示,正义转染组细胞内肌动蛋白多聚体减少,微丝骨架重构;此外,RhoC正义转染组细胞p-Akt水平升高。结论RhoC过表达促进乳腺癌细胞的体外侵袭能力,并与乳腺癌细胞系转移潜能正相关,有望成为阻断乳腺癌转移的新靶点。     

Knockdown of Hop downregulates RhoC expression,and decreases pseudopodia formation and migration in cancer cell lines

The Hsp90/Hsp70 organising protein (Hop) is a co-chaperone that mediates the interaction of Hsp90 and Hsp70 molecular chaperones during assembly of Hsp90 complexes in cells. Formation of Hsp90 complexes is a key intermediate step in the maturation and homeostasis of oncoproteins and several hormone receptors. In this paper, we demonstrate that knockdown of Hop decreased migration of Hs578T and MDA-MB-231 breast cancer cells. Hop was identified in isolated pseudopodia fractions; it colocalised with actin in lamellipodia, and co-sedimented with purified actin in vitro. Knockdown of Hop caused a decrease in the level of RhoC GTPase, and significantly inhibited pseudopodia formation in Hs578T cells. Our data suggest that Hop regulates directional cell migration by multiple unknown mechanisms.     

靶向干扰Glypican-3基因表达对鼻咽癌细胞增殖及侵袭迁移的影响

目的:探讨Glypican-3(GPC3)基因在鼻咽癌细胞系CNE中的表达情况,并研究靶向抑制GPC3基因表达对鼻咽癌细胞增殖及侵袭迁移的影响.方法:应用Western blotting和QRT-PCR检测人正常永生化鼻咽上皮细胞株NP69、鼻咽癌细胞株CNE中GPC3的表达,采用siRNA干扰技术沉默CNE细胞中GPC3基因的表达,分别采用Western blotting和QRT-PCR检测siRNA的靶向沉默效果.MTT增殖实验与Transwell实验观察GPC3抑制对CNE细胞增殖及侵袭迁移的影响.结果:GPC3在CNE细胞中高表达,用siRNA干扰技术沉默鼻咽癌细胞CNE的GPC3后可以抑制癌细胞的增殖、侵袭和迁移(P＜0.05).结论:下调GPC3的表达可以抑制鼻咽癌细胞的增值、侵袭及迁移.     

siRNA对胃癌AGS细胞中血管生成相关分子表达的影响

目的： 研究小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）抑制Rac1b表达后对胃癌AGS细胞血管生成相关分子表达的影响。 方法： 体外合成针对 Rac1b 基因的siRNA序列（ Rac1b siRNA）,脂质体法转染AGS细胞,RT-PCR和Western blotting观察 Rac1b siRNA 对AGS细胞 Rac1b mRNA和蛋白水平表达的影响,ELISA和Western blotting检测缺氧条件下转染 Rac1b siRNA后AGS细胞培养上清中VEGF表达水平以及细胞中血管生成相关分子P53、VHL和HIF-1α表达水平的变化。 结果： 测序证实体外合成的 Rac1b siRNA序列正确。 Rac1b siRNA转染AGS细胞后,可在mRNA和蛋白水平特异性抑制Rac1b的表达,对其同源分子Rac1的mRNA和蛋白表达水平无影响。 Rac1b siRNA可显著抑制AGS细胞培养上清中VEGF的分泌,这种抑制作用在缺氧情况下更为明显。同时, Rac1b siRNA在缺氧情况下可抑制AGS细胞内HIF-1α蛋白的表达、上调p53和VHL蛋白的表达。 结论： Rac1b siRNA可抑制胃癌AGS细胞中 Rac1b 在mRNA和蛋白水平的表达,可能通过调节血管生成相关分子HIF-1α、P53及VHL的表达抑制缺氧情况下AGS细胞VEGF的分泌。