Fabry病—家系临床调查及α-半乳糖苷酶A基因突变研究

目的 分析一个Fabry病家系先证者的临床表现,并进行该家系成员α半乳糖苷酶A(GLA)基因突变检测.方法 回顾性分析该家系先证者临床及病理资料,采用聚合酶链式反应(PCR)直接测序法检测先证者及家系成员GLA基因编码序列.结果 ①先证者表现为下肢皮肤色素沉着、神经性疼痛和肾脏损害,其弟死于尿毒症.肾活检提示继发性局灶节段性肾小球硬化,肾小球足细胞泡沫变性,电镜发现足细胞内大量同心圆排列的具有层状结构的包涵体,确诊Fabry病.②GLA基因测序检测发现1个无义突变,位于第2号外显子CAG119TAG(Q119T),终止密码提前出现致使形成一条截短的多肽链.家系发现2例杂合子,分别为先证者母亲及侄女.结论 本研究从生化、病理及基因水平3个层面诊断了一个Fabry病家系,确诊致病原因为GLA基因点突变[第2号外显子CAG119 TAG(Q119T)],该突变在中国人群中首次报道.     

Fabry病一家系临床调查及α-半乳糖苷酶A基因突变研究

【摘要】 目的 分析一个Fabry病家系先证者的临床表现,并进行该家系成员α-半乳糖苷酶A（GLA）基因突变检测。方法 回顾性分析该家系先证者临床及病理资料,采用聚合酶链式反应（PCR）直接测序法检测先证者及家系成员GLA基因编码序列。结果 ① 先证者表现为下肢皮肤色素沉着、神经性疼痛和肾脏损害,其弟死于尿毒症。肾活检提示继发性局灶节段性肾小球硬化,肾小球足细胞泡沫变性,电镜发现足细胞内大量同心圆排列的具有层状结构的包涵体,确诊Fabry病。② GLA基因测序检测发现1个无义突变,位于第2号外显子CAG119AG（Q119）,终止密码提前出现致使形成一条截短的多肽链。家系发现2例杂合子,分别为先证者母亲及侄女。结论 本研究从生化、病理及基因水平3个层面诊断了一个Fabry病家系,确诊致病原因为GLA基因点突变〔第2号外显子CAG119AG(Q119)〕,该突变在中国人群中首次报道。     

16例经典型Fabry病患者的临床表现和基因突变分析

目的 了解中国人经典型Fabry病患者的临床特征,并进行致病基因突变分析以提高国内对Fabry病的诊断水平.方法 对16例无血缘关系、经外周血白细胞α-半乳糖苷酶A活性检测确诊的Fabry病男性患者的临床表现进行总结分析;提取患者外周血DNA,对α-乳糖苷酶A基因(GLA基因)的每个外显子及旁侧内含子序列进行PCR产物直接测序;对所发现的新突变进行保守性分析及群体筛查以确定其致病性.结果 16例患者年龄为11-40岁,均具有Fabry病的典型特征,从发病到确诊拖延4～30年.在16例先证者中检测到14个突变,其中错义突变11个、无义突变1个、单碱基缺失1个、剪接位点突变1个,其中8个为新突变(c.119 C>A、c.275 A>T、c.520T>C、c.547G>C、c.647A>G、c.929T>G、c.1045T>A、IVS1-1G>A).群体酶切筛查均未发现有与患者相同的突变.新的错义突变在不同物种GLA基因中均具高度保守性.结论 Fabry病在国内的误诊率高;中国人GLA基因突变无突变热点;基因突变检测是诊断Fabry病的可靠方法.     

Fabry病1例并文献复习

目的了解遗传性疾病Fabry病的临床和病理特点。方法总结分析1例具有肾损害Fabry病患者的临床表现,并对其肾活检组织进行光镜、免疫荧光及超微结构观察,结合文献对Fabry病的临床病理、治疗和预后进行探讨。结果患者有皮疹、神经痛、听力下降、不完全性右束支传导阻滞等Fabry病肾外临床表现,同时有蛋白尿、镜下血尿及肾小球滤过率下降等肾脏受累表现。肾活检光镜下肾小球足细胞明显肿胀,空泡变性呈泡沫状,肾小管上皮细胞颗粒变性,小灶状萎缩。免疫荧光阴性。电镜下内皮细胞、足细胞、小管上皮细胞空泡变性,部分泡沫样改变。足突弥漫融合。泡沫状细胞胞浆内次级溶酶体增多,可见大量呈分层的环状的髓鞘样小体和斑马小体。结论 Fabry肾病患者可出现蛋白尿、血尿和肾功能损害,嗜锇性髓鞘样包涵小体是其特征性结构,早期α-Gal A酶替代治疗有望改善Fabry病患者的预后。     

儿童Fabry病的临床表现：来自Fabry病转归调查的数据

背景：Fabry病是一个罕见的由α-半乳糖苷酶A酶活性不足引起的X连锁性遗传病，可导致进行性的全身溶酶体N脂酰鞘氨醇三已糖苷的蓄积，引起器官衰竭和早死。目的：在此作介绍了人选Fabry病转归调查（FOS）的Fabry病患儿的临床表现以及应用α-半乳糖苷酶进行酶替代治疗的效果。FOS为一个Fabry病自然史欧洲数据库。方法：目前在FOS中有545例患，来自11个欧洲国家。作分析了这些患中年龄低于18岁的82例患（男性40名、女性42名）的基线人口统计学特征和临床特征。男女患儿在评估时的年龄中位数（定义为在进入FOS时的年龄中位数）分别为12．5岁和13．2岁。结果：     

以反复缺血性脑卒中为突出表现的法布雷病1例报道及家系分析

目的 对一个以反复脑卒中为主要临床表现的法布雷病(Fabry病)家系进行调查,分析其临床特点和基因突变情况.方法 收集该例先证者及其家族成员的临床表现、头颅MRI检查资料.对先证者行皮肤活检,检测α-半乳糖苷酶A(α-galA)的活性.提取先证者及其弟弟、母亲的血液,进行DNA测序.结果 家系中3例患者均出现反复发作脑卒中,伴有肢端疼痛、皮肤血管角质瘤及少汗等表现.影像学均表现为基底节、脑干多发性腔隙病变.皮肤组织电镜下可见血管内皮细胞及周细胞内大量次级溶酶体结构,次级溶酶体内似有指纹结构.先证者α-galA活性明显下降,GLA基因检测发现c.672T＞G,p.N224K半合子突变(男性X染色体纯合突变).结论 Fabry家系以基底节和脑干反复脑卒中为突出临床表现,具有典型的病理学和酶学证据,GLA基因检测发现c.672T＞G,p.N224K半合子突变,该突变未见文献报道.     

糖原累积病Ⅱ型七例的临床表现及基因突变分析

目的 报道7例糖原累积病Ⅱ型(GSDⅡ)的临床表现及α-1,4葡萄糖苷酶(GAA)基因突变特点.方法 2003-2011年在北京大学第一医院行肌肉活检的患者中有7例诊断为GSDⅡ.其中婴儿型1例,其主要症状为生后出现全身力弱、心脏扩大、呼吸困难和肝脏肿大;晚发型患者6例,发病年龄在1～29岁,主要表现为进展性肢体力弱,其中2例有呼吸肌受累.7例患者均伴随CK升高,5例肌电图呈肌源性损害,1例为神经源性损害.肌肉活检均发现肌纤维存在嗜碱性空泡,电镜检查发现大量膜性包裹的糖原.应用PCR产物直接测序法对患者进行GAA基因的所有外显子及其侧翼序列突变检测.对发现的新突变位点在100例正常对照中进行筛查.结果 7例GSDⅡ患者均存在GAA基因突变,共检测出11种点突变和1种缺失突变,其中p.P361L、p.P266S、p.R437C、p.R600C、p.W746S和p.W746*为文献已经报道的突变,p.R168Q、p.R168P、p.E521V、p.R594H和c.827_845del为尚未报道的新突变类型.除p.R168Q在2例正常对照中检测到外,其余新突变均未发现正常携带者.7例GSDⅡ患者携带的突变各不相同,仅p.P361L和p.W746 *出现在两例患者中.结论 我国GSDⅡ患者存在较多新发突变,提示该病可能具有较多个体化突变.p.P266S、p.P361L和p.R437C突变可能与临床晚发型的GSDⅡ有一定相关性.     

以蛋白尿为首发症状的法布里病一例

法布里病是由于X染色体上编码α-半乳糖苷酶的基因突变,引起其编码的α-半乳糖苷酶A活性降低或完全丧失,使其代谢产物三己糖神经酰胺及相关鞘糖脂在全身多个器官内大量堆积导致各系统损伤的一种罕见疾病.本文报告1例以蛋白尿为首发症状的法布里病,通过肾脏活组织检查及基因检测以明确诊断,并进一步对法布里病的诊断及治疗进行探讨.     

α-半乳糖苷酶A基因敲除猪胎儿成纤维细胞系的建立

目的 基于CRISPR/Cas9技术构建α-半乳糖苷酶A (GLA)基因敲除的巴马公猪胎儿成纤维细胞(PFFs),为构建人类Fabry病猪模型提供实验材料。方法 利用生物信息学方法对人/猪GLA基因编码的α-Gal A的相似性进行分析,并鉴定出猪α-Gal A的催化残基位置。通过在线工具在编码催化残基之前的外显子区设计单链向导RNA,构建CRISPR/Cas9打靶载体。将打靶载体与抗性质粒共转染至巴马公猪胎儿PFFs,用G418药物筛选出单克隆细胞,并PCR测序鉴定。结果 人/猪α-Gal A的氨基酸序列一致性为81%,相似性为89%;三维结构的均方根偏差值为0.012。猪α-Gal A的催化残基是第174位和第235位的天冬氨酸。成功构建CRISPR/Cas9打靶载体,并筛选出单克隆细胞,PCR测序鉴定其基因型。结论 用生物信息学方法验证了人/猪α-Gal A具有高度的相似性。利用CRISPR/Cas9技术获得了GLA基因敲除的巴马公猪PFFs细胞系,为构建人类Fabry病猪模型奠定了基础。     

Anderson-Fabry病研究进展

Anderson-Fabry病(Anderson-Fabry Disease,AFD)又称为Fabry病,是X连锁隐性遗传的溶酶体病,患者因缺乏α-半乳糖苷酶A(α-Gal A),致使糖鞘脂成分如神经酰胺三己糖苷(CTH)或globotriaosylce-ramide(Gb3)、二乳糖苷神经酰胺等堆积于体内各器官,引起临床表现。典型表现见于半合子男性,杂合子女性可表现正常或异常。近年来国外对AFD的     

颈动脉斑块病理特点与临床表现的相关性

目的:探讨颈动脉斑块病理特点与临床表现的相关性。方法:488例患者(共562次CEA)术前分为3组:无症状组、症状组和卒中组。将颈动脉斑块按形态分为普通斑块、溃疡斑块、出血斑块和溃疡伴出血斑块,按分期分为4期、5期和6期斑块,统计不同形态和分期与临床症状的相关性。结果:普通斑块、溃疡斑块、溃疡伴出血斑块、4期、5期和6期斑块在无症状组和症状组的发生率均存在显著性差异(均P<0.01)。普通斑块、溃疡伴出血斑块、4期、5期和6期斑块在卒中组的发生率分别为10.3%、29.9%、11.3%、21.7%和67.0%,与无症状组、症状组比较均存在显著性差异(P<0.05,P<0.01)。溃疡和出血的发生率在重度狭窄中的比例高于中度狭窄。结论:颈动脉斑块病理形态是临床预后的重要因素,溃疡斑块或6期斑块与临床症状的发生密切相关。     

儿童肝豆状核变性患者脑部磁共振与临床表现的相关性

目的探讨儿童肝豆状核变性患者治疗前后的脑部MRI表现及其与临床表现的相关性。方法分析50例初诊儿童肝豆状核变性患者,其中20例随访复查脑部MRI,15例经青霉胺治疗后回顾性分析,然后把MRI资料与临床表现作相关分析。结果根据首次脑部MRI表现将患者分成3组:第1组(n=23):脑部MRI正常;第2组(n=15):脑部MRI表现双基底节区T1高信号;第3组(n=12):脑部MRI表现基底节区T2高信号。3组患者在中位年龄、神经系统表现和Child-Pugh肝功能分级方面差异有统计学意义(P<0.01)。驱铜治疗后,随访复查脑部MRI发现,临床治疗效果与脑部MRI的影像变化之间密切相关(P<0.01)。结论3组肝豆状核变性患者的脑部MRI表现与临床表现呈明显相关性,治疗后也呈密切相关,故脑部MRI检查对肝豆状核变性的诊断与疗效评价具有重要价值。     

海南地区角膜营养不良患者临床分型与TGFBI基因突变的相关性研究

目的 本研究收集海南省各地市医院门诊及眼科收治的不同类型角膜营养不良患者,进行临床分型及基因突变检测等一系列研究,并分析海南地区角膜营养不良患者临床分型与转化生长因子-β诱导基因(TGFBI)基因突变的相关性,以期了解海南地区角膜营养不良患者TGFBI基因突变的类型及突变热点。 方法 2012年8月—2019年2月收集海南省各地市医院门诊及眼科收治的不同类型角膜营养不良患者32例并进行临床分析,调查其家系情况,检测家系人群的血液TGFBI基因突变情况并进行相关性分析。 结果 在32例患者中,上皮细胞层状角膜营养不良6例,基质层角膜营养不良22例,后部角膜营养不良4例。共追溯调查家系成员88人,TGFBI基因突变40例,突变率为45.5%;其中角膜营养不良患者中TGFBI基因突变24例,突变率为75.0%。在32例患者中,上皮细胞层状角膜营养不良、基质层角膜营养不良、后部角膜营养不良的TGFBI基因突变分别为83.3%、68.2%和100.0%,对比差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 海南地区角膜营养不良患者临床分型多为基质层角膜营养不良,TGFBI基因突变的发生率比较高,多发生于第4位外显子,两者无显著相关性。      

结核杆菌利福平耐药与rpoB基因突变的相关性研究

目的：分析西安地区耐利福平（RIF）结核杆菌临床分离株rpoB基因突变的特点,探讨快速检测结核杆菌耐RIF基因型的方法．方法：对120株西安地区收集的结核杆菌临床分离株（药敏结果为耐RIF81株,对RIF敏感39株）,分别采用聚合酶链反应一单链构象多态性（PCR-ssce）和等位基因特异性多重聚合酶链反应（MAS—PCR）检测rpoB基因突变情况．结果：PCR—SSCP检测,耐RIF菌株中rpoB基因突变发生率为85％（69／81）,39株敏感株中仅有1株发生突变,突变率为2％（1／39）．MAS—PCR检测,耐RIF菌株中rpoB基因突变发生率为93％（75／81）,39株敏感株中未发现rpoB基因突变;531,516和526位点突变的比例分别为45％（34／75）,24％（18／75）和20％（15／75）．结论：西安地区结核杆菌临床分离株耐RIF与rpoB基因突变相关,MAS-PCR检测rpoB基因可作为临床耐RIF结核杆菌的简单快速准确的早期诊断方法．     

肝豆状核变性的临床表型与ATP7B基因第8外显子突变的关系

目的探讨WD患者临床分型和ATP7B基因8号外显子基因突变类型之间的关系。方法对60例首次住院的WD患者进行临床分型,用PCR-酶切法检测60例住院病人和20例健康对照者的ATP7B基因第8外显子的突变率和突变类型。结果典型肝豆状核变性型15例,突变率40%;扭转痉挛型13例,突变率30.8%;假性硬化型19例,突变率31.6%;内脏型与脑-内脏混合型13例,突变率61.5%。各患者组间第8号外显子的突变率无显著性差异,患者各组与正常组间有极显著性差异。结论8号外显子突变是WD的发病原因之一。     

自主神经功能与功能性便秘患者临床症状的相关性分析

目的：根据功能性便秘（functional constipation,FC）患者临床资料分析内脏自主神经功能与便秘症状特征、心理状态及生活质量的相关性。方法：评估102例FC患者和42例健康对照者的一般资料、精神心理状态和心率变异性（heart rate variability,HRV）检测结果,再根据HRV检测结果将FC患者分为自主神经张力偏向正常组、严重偏向交感神经张力组和严重偏向副交感神经张力组;比较各组间Zung’s焦虑自评量表（self-rating anxiety scale,SAS）和抑郁自评量表（self-rating depression scale,SDS）、便秘评分系统（constipation scoring system,CSS）和便秘患者症状自评量表（patient assessment of constipation symptoms, PAC-SYM）、便秘患者生活质量自评问卷（patient assessment of constipation quality of life,PAC-QOL）分值差异,同时比较不同 HRV分组间肛直肠测压参数、肠电图参数差异,分析便秘患者生活质量与自主神经功能、精神心理状态、便秘症状之间的相关性。结果：与健康对照组相比,FC患者焦虑抑郁水平显著升高,HRV检测结果显示自主神经功能异常率高。不同HRV分组的 FC患者间肛直肠测压参数、肠电图参数差异无统计学意义;与交感-副交感神经张力偏向正常组相比,严重偏向交感神经张力组患者明显存在明显的焦虑抑郁情绪、PAC-SYM较高、生活质量降低（主要是躯体不适和担心焦虑两个维度）。严重偏向副交感神经张力组患者CSS评分最高,可能与抑郁情绪为主导有关。多重线性回归显示,患者的焦虑抑郁情绪、自主神经功能显著影响便秘患者生活质量。结论：自主神经功能紊乱的便秘患者存在明显的焦虑抑郁情绪,与便秘严重程度相比,自主神经功能紊乱、焦虑抑郁情绪对便秘患者的生活质量具有更明显的负面影响。调节自主神经功能、心理干预或中枢神经药物等治疗可能具有重要临床意义。     

腰椎间盘突出症髓核的超微结构与临床对照研究

目的探讨腰椎间盘突出症髓核组织的超微结构与临床的关系。方法应用电子显微镜对56例腰椎间盘突出症患者手术中取出的髓核组织进行观察。评价退变程度与病程、发病年龄、疼痛视觉模拟评分（VAS）以及术后日本矫形外科协会（JOA）评分改善的关系。结果①胶原原纤维发生不同程度的变性、融合、扭结或钙化,胶原纤维束间裂隙增大。斑块状扭结的数量与胶原原纤维的退变程度成正比。②软骨样细胞减少,多呈不同程度的退变、死亡,细胞外周致密颗粒增多,并与其退变程度呈正相关。③弹力纤维数量减少且变性。④髓核退变程度与患者的发病时间、年龄呈正相关,与疼痛视觉模拟评分以及术后JOA评分改善率无相关性。结论胶原原纤维的扭结和致密颗粒的数量是判断髓核退变程度的重要指标,影响髓核的超微因素为发病时间和患者年龄。     

狼疮性肾炎病理类型与临床表现及实验室指标的相关性

目的探讨狼疮性肾炎(LN)病理与临床表现及实验室指标的相关性。方法对99例LN患者病理类型、临床表现、实验室指标进行回顾性分析,总结病理类型、临床表现、实验室指标之间的相关性。结果 LN病理类型以Ⅳ+Ⅴ型最为常见,占38.10%,其次为Ⅳ型26.30%,Ⅴ型为16.20%,Ⅱ型最少,占3.03%;临床肾损害主要以肾病综合征型(51.52%)、肾炎综合征型(36.36%)为主。最常见的肾外临床表现为血液系统损伤(80.81%),其次为浆膜炎(56.57%),而神经系统损伤少见(5例)。Ⅳ+Ⅴ型血肌酐最高,Ⅲ+Ⅴ型24 h尿蛋白定量最高,Ⅳ型血红蛋白最低,Ⅱ型24 h尿蛋白定量明显比其他各病理类型低(P0.05)。SLEDAI评分Ⅳ型最高,Ⅱ型最低,且Ⅳ型、Ⅳ+Ⅴ型评分明显高于Ⅱ型(P0.05)。结论狼疮性肾炎的病理类型与临床表现、实验室指标存在一定相关性,肾活检术对于判断肾脏病变程度、活动性,指导进一步诊治及判断预后具有重要意义。