HBV血清标志物的定量检测及意义

近年来，由于分子生物学和免疫病理学的发展，人们对ＨＢＶ血清标志物有了新的认识。由于检测技术的提高，ＨＢＶ血清标志物由定性检测发展到定量检测。１　ＨＢＶ结构、血清学检测方法和注意事项１．１　ＨＢＶ结构　完整的ＨＢＶ颗粒又称为Ｄａｎｅ颗粒，它是由包膜（ＨＢｓＡｇ等）和核心（ＨＢＶ核壳体）组成。核壳体又由核壳（ＨＢｃＡｇ）和核酸（ＨＢＶ－ＤＮＡ等）组成。ＨＢＶ可分为４个以上的开放读码框架（ＯＲＦ），称为Ｓ、Ｃ、Ｐ和Ｘ等基因区，分别编码相应的抗原，如ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ等。另外，血液中还存…     

小儿乙型肝炎血清,病理及免疫病理分析

本文通过检测１５例小儿病毒性肝炎患者血清ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ标志及肝组织内ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ发现ＨＡＶ和ＨＣＶ标志全部阴性，ＨＢＶ标志全部阳性。１５例ＨＢＶ感染中，血清ＨＢＶＤＮＡ阳性１１例。其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）９例，ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｂ（＋）２例。综合血清其它的感染指标与肝脏病理及免疫病理的变化对１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病例作了重要分析。进一步证实ＨＢｅＡｇ为临     

乙型肝炎病毒父婴传播途径的初步研究

为了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的父婴传播途径是否存在，作者用三乙醇胺月桂基硫酸盐（ＴＬＳ）提取精子ＤＮＡ、以聚合酶链反应（ＦＣＲ）检测ＨＢＶＤＮＡ。检测了１９例慢性乙型肝炎患者的精液及其配偶与子女的血清ＨＢＶ标志（ＨＢＶＭ），结果精液ＨＢＶＤＮＡ阳性１３例（６８．４％），说明了精液的传染性。继而在３例母亲ＨＢＶＭ阴性（包括ＨＢＶＤＮＡ）而新生儿却符合ＨＢＶ宫内传播者，检测其父亲的精浆ＨＢＶＤＮＡ为阳性，提示了父婴传播途径的可能。     

乙型肝炎病毒感染经精子传播的可能性研究

目的研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染经精子传播的可能性。方法检测慢性乙型肝炎（乙肝）患者精子中的ＨＢＶＤＮＡ（地高辛配基标记探针原位杂交及３２Ｐ标记探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ吸印杂交法）；并用正常人精子进行ＨＢＶＤＮＡ俘获试验；对引产胎儿标本进行ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ（ＡＢＣ免疫组化法）及ＨＢＶＤＮＡ的检测。结果在２２例慢性乙肝患者精子标本中，３例检出ＨＢＶＤＮＡ，分布于精子的膜部和核心部。对母亲无ＨＢＶ感染、父亲为慢性ＨＢＶ感染者的４例胎儿的检测表明，在１例胎儿的肝、小肠、肾、肺、骨骼肌中检出了３．２ｋｂ的游离型ＨＢＶＤＮＡ及ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ的表达；该胎儿的父亲精子亦检出ＨＢＶＤＮＡ。体外试验表明正常人活精子能俘获ＨＢＶＤＮＡ，被俘获的ＨＢＶＤＮＡ在精子内的分布位置与乙肝患者精子相同。结论乙肝病毒可能通过感染精子垂直传播，精子被感染的机制涉及对ＨＢＶＤＮＡ的主动性捕获     

HBV 侵犯PBMC致线粒体功能改变

目的探讨ＨＢＶ侵犯外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）后对其线粒体功能的影响．方法ＨＢｓＡｇ阳性６个月以上，无肝炎症状及体征，肝功正常患者５８例．多聚酶链反应检测ＰＢＭＣ中ＨＢＶＤＮＡ，噻唑兰（ＭＴＴ）比色法测线粒体功能．ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ检测用固相放免法检测．结果慢性ＨＢＶ感染者５８例，ＰＢＭＣ中检出ＨＢＶＤＮＡ３１例（５３５％），ＰＢＭＣ中ＨＢＶＤＮＡ阳性组ＭＴＴ比色法查线粒体功能的Ａ（ＯＤ５００ｎｍ）值明显低于ＨＢＶＤＮＡ阴性组（００５±００３ｖｓ０２９±００７，Ｐ＜００１）．结论慢性ＨＢＶ感染时，ＨＢＶ常侵犯ＰＢＭＣ，并导致ＰＢＭＣ线粒体功能降低、能量代谢异常．这可为ＨＢＶ慢性感染免疫功能异常的原因之一．     

血液透析患者血液中丙型及乙型肝炎病毒的检测

为了解血液透析患者血液中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的感染情况，对２２例维持性血液透析患者应用逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附实验，检测了血清中ＨＣＶＲＮＡ及其抗体水平；同时采用斑点杂交及固相放射免疫法检测了血清中ＨＢＶＤＮＡ及其血清标志物。结果显示，２７％的血液透析患者血清ＨＣＶ抗体阳性，其中３３％的患者血清存在ＨＣＶＲＮＡ。在血清ＨＣＶ抗体阴性的１６例患者中，也有１例（６％）血清ＨＣＶＲＮＡ阳性。在２２例血液透析患者中，３例（１４％）血清ＨＢＶＤＮＡ阳性（ＨＢｅＡｇ也均阳性）。其余１９例ＨＢＶＤＮＡ阴性患者（ＨＢｅＡｇ均阴性），有１２例（６３％）血清抗－ＨＢｃ阳性。在７例血清ＨＣＶＲＮＡ或（和）抗－ＨＣＶ阳性者，５例有既往或现在ＨＢＶ感染的证据，但未见ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ同时存在者。提示在相当数量的血液透析患者体内存在肝炎病毒血症，应加强对血液透析患者肝炎病毒感染的监测及预防工作     

HBV DNA及HBxDNA亚片段在肝癌细胞内的整合及作用

为探讨ＨＢＶＤＮＡ及其亚基因片段ＨＢｘＤＮ在肝细胞肝癌（ＨＣＣ）中整合特点用机制，制备了地高辛标记的３．２ｋｂＨＢＶＤＮＡ全基因及０．５９ｋｂＨＢＶＤＮＡ／ＢａｍＨＩ，ＢｇｌⅡＢＨｘＤＮＡ亚基因探针。点杂交、原位杂交及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测ＨＢＶＤＮＡ的存在情况，筛选ＨＢＶＤＮＡ纯整合标本，以ＨＢｘＤＮＡ探针检测ＨＢｘＤＮＡ在ＨＣＣ染色体的整合。结果显示ＨＢＶＤＮＡ在肝细胞内以核型为主（７０％）     

输血后乙型和丙型肝炎病毒感染的前瞻性调查

目的 了解输血所致ＨＢＶ和ＨＣＶ感染现状及ＨＢｓＡｇ抗ＨＣＶ和ＡＬＴ筛检供血的效果。方法 对１３８例输血者输血前，后１，３，６，９个月血清标本及其供血检测ＨＢｓＡｇ，抗ＨＢｓ，抗ＨＢｃ，抗ＨＣＶ和ＡＬＴ，并对部分血清标本用ＰＣＲ及巢式ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果和结论 输血后ＨＢＶ和ＨＣＶ感染率分别为１．４％（２／１３８）和３４．８％（４８／１３８），输血后乙型和丙型肝炎发生     

乙型肝炎表面抗原阳性血吸虫病患者 HDV 感染的血清学及预后调查

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测１２３例乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性的各期血吸虫病患者及５０例ＨＢｓＡｇ阳性的非血吸虫病对照人群血清丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）标志物，用斑点杂交检测晚期血吸虫病（晚血，ＡＳ）患者ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果表明，ＨＢｓＡｇ阳性的晚血患者ＨＤＶ标志物（ＨＤＶ－Ｍ）检出率１４．５％，显著高于急性血吸虫病（急血）、慢性血吸虫病（慢血）患者（２．５％）及对照人群（２．０％）（Ｐ＜０．０５）。随访观察发现，ＨＢＶ／ＨＤＶ双重感染的晚血患者病死率４０％，显著高于单纯ＨＢＶ感染的晚血患者（８．５％，Ｐ＜０．０５），提示晚血患者是ＨＤＶ感染的易感人群，ＨＤＶ感染是ＨＢｓＡｇ阳性晚血患者病情加重或恶化的一个重要原因，ＨＢＶ／ＨＤＶ双重感染与晚血患者死亡密切相关。     

肺结核合并HBV感染患者血清HBV－DNA的检测及其意义

采用分子斑点杂交和酶连免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法检测２６８例肺结核患者血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）及其它乙肝病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ），观察肺结核患者抗结核化疗中肝功能变化与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的关系。结果，２６８例肺结核患者血清ＨＢＶ－Ｍ阳性率为１９．０％，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性２０例（７．５％）；化疗中，肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组、肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性其它ＨＢＶ－Ｍ阳性组、单纯肺结核组，肝功能受损率分别为９５％、１０％及５．１％。肺结核合并ＨＢＶ感染组、单纯ＨＢＶ－Ｍ携带者组、单纯肺结核组，肝功能受损率分别为４９％、１０％及５．１％。肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组死亡４例（１５％），且死亡与肝病直接相关（肝衰竭），３．５年后发生肝硬化２例。结果提示，检测肺结核患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ有重要意义。抗乙型肝炎病毒治疗对改善存在ＨＢＶ复制的肺结核患者的预后可能有重要作用，化疗前常规检查并有ＨＢＶ感染的肺结核患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，可指导用药。     

乙型用丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌

为探讨乙型和丙型肝炎病毒（ＨＧＢＶ和ＨＣＶ）感染与肝细胞癌（肝癌）发生的关系采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对沈阳地区１１７例肝癌、１０７便肝硬化和４５ 析患者血清进行了ＨＢＶ和ＨＣＶ血清标志及ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ检测，并采用性片段长度多态性对其中７３便ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清进行了ＨＣＶ基因分型。结果，肝癌组ＨＢＶ感染率（６０．７％）显著高于ＨＣＶ感染率（３３．５％，Ｐ〈０．０１），     

中老年乙型肝炎病毒DNA的动态变化

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）动态检测了中老年乙型肝炎病人不同时期的血清标志。结果表明，ＨＢｅＡｇ阳性的血清其ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ均阳性，两者呈平行关系，１～４ｗ后有２０％病人血清ＨＢＶＤＮＡ转阴，同时伴有部分病人ＨＢｅＡｇ消失或ＨＢｅＡｂ出现，其他ＨＢＶ血清学标志物阳性的病人血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率明显低于ＨＢｅＡｇ阳性血清，且ＨＢＶＤＮＡ暂转阴率高于ＨＢｅＡｇ阳性血清，ＨＢＶＤＮＡ转阴的时间也短（１～４ｗ）。动态检测ＨＢＶＤＮＡ可以动态观察ＨＢＶＤＡＮ的复制，对指导临床治疗具有很大的意义。     

肺结核合并HBV感染患者血清HBV—DNA的检测及其意义

采用分子斑点杂交和酶连免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法检测２６８例肺结核患者血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）及其它乙肝病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ），观察肺结核患者抗结核化疗中肝功能变化与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的关系。结果，２６８例肺结核患者血清ＨＢＶ－Ｍ阳性率为１９．０％，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性２０例（７．５％）；化疗中，肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组、肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性其它ＨＢＶ－Ｍ阳性组、     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的临床意义

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对２７３７例乙肝患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，结果发现各组ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率：①ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为９９．２７％；②ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｅ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４４．７７％；③ＨＢｓＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４２．８６％；④ＨＢＶ标志物均阴性为１５．９２％。结果表明ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检出先于其它乙肝病毒标志物，可早期发现乙肝。ＰＣＲ法直接检测ＨＢＶ－ＤＮＡ更有利于临床对乙肝的诊断和治疗。     

宫内HBV感染接种乙型肝炎疫苗小儿的细胞免疫功能的研究

为了探讨宫内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染接种乙型肝炎（ＨＢ）疫苗失败的原因，采用体外淋巴细胞培养方法对４２例宫内ＨＢＶ感染接种ＨＢＶ疫苗小儿进行了非特异性及特异性淋巴细胞增殖试验的检测，同时应用间接免疫荧光技术对其中３２例进行外周血Ｔ淋业群的测定。结果非特异性及特异性淋巴细胞增殖试验宫内ＨＢＶ感染接种ＨＢＶ疫苗无反应组ＳＩ值均低于有反应组及正常免疫儿童，ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８值在宫内ＨＢＶ感染接种Ｈ     

多重聚合酶链反应检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

在同一反应体系中同时快速检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ），探讨多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）在临床中的应用价值。方法自行设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，应用多重ＰＣＲ对临床标本进行检测。结果５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶＤＮＡ阳性；１０例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢ）抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶＲＮＡ阳性，１例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ阳性。结论多重ＰＣＲ一次反应即可完成多次常规ＰＣＲ检测，是一种值得临床应用的方法。     

晚期血吸虫病患者乙型肝炎病毒DNA的检测及其意义

３１例晚期血吸虫病患者血清及肝组织乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）阳性率分别为９．７％及１９．４％低于血清及肝组织乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）检出率（分别为２９％及４８．４％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者病死率高（６６．６％），且死亡与肝病直接相关（肝衰竭及原发性肝癌）。ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性患者病死率较低（１２％），其死亡与肝病无直接关系。结果提示，检测晚期血吸虫病患者ＨＢＶ－ＤＮＡ有重要意义。抗乙型肝炎病毒治疗对改善存在ＨＢＶ复制的晚期血吸虫病患者预后可能有重要作用，在血吸虫病疫区普及乙肝疫苗接种将对血吸虫病防治工作产生重大效益。     

聚合酶链反应检测HBV DNA的临床意义

应用ＰＣＲ对１７１例肝病血清检测结果，ＨＢＶＤＮＡ阳性率５９．１％，ＥｌｉＳＡ检测ＨＢｓＡｇ阳性率４３．２７％，二者比较有显著性差异（Ｐ〈０．０１），ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（＋）组ＨＢＶＤＮＡ阳性率７９．５％，而ＨＢｓＡｇ（＋）抗－ＨＢｅ（＋）组主５７．９％，ＨＢｓＡｇ（－）／抗－ＨＢｓ（＋）组，ＨＢＶＤＮＡ阳性率３６．８％。     

慢性丙肝RIBA与RIA-2检测抗HCV的价值

目的探讨重组免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）在慢性ＨＣＶ感染中的应用价值．方法１９９３年１月～１９９５年３月采用含ＨＣＶ不同编码区三种重组抗原（Ｃ２２，Ｃ３３ｃ，Ｃ１００３）的ＲＩＢＡ，对８５例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者血清进行检测并将其结果与第二代放免法（ＲＩＡ２）检测抗ＨＣＶ及逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ结果进行比较分析．结果慢性ＮＡＮＢＨ患者血清ＲＩＢＡ阳性（７８８％，６７／８５）结果与ＨＣＶＲＮＡ阳性（７５３％，６４／８５）结果之间有良好相关性和高的符合率；ＲＩＢＡ可检出ＲＩＡ２阴性的ＨＣＶ感染者；单项抗体阳性时仅见一定比例的单项抗Ｃ２２或抗Ｃ３３ｃ阳性血清可检出ＨＣＶＲＮＡ，而单一抗Ｃ１００３阳性者ＨＣＶＲＮＡ均阴性．结论ＲＩＢＡ可提高慢性ＨＣＶ感染的诊断率，ＲＩＢＡ阳性为ＨＣＶ感染及病毒血症存在的标志，可作为ＲＩＡ２检测抗ＨＣＶ的确证实验．     

单纯TTV感染的临床病理

１．资料与方法：原因不明性急慢性肝炎患者２７例，血清病毒学标记甲－戊、ＣＭＶ、ＥＢＶ（酶联免疫吸附法）及肝活检组织免疫组织化学检测ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、 ＨＣＶ ＮＳ５Ａｇ、 ＥＢＶＡｇ、原位杂交检测ＨＧＶ ＲＮＡ均阴性。所有患者均无饮酒（或偶尔少量饮酒）、损肝药物、自身免疫性疾病及输血史。肝组织行ＴＴＶ ＤＮＡ原位杂交检测，对其阳性病例的血清采用ＰＣＲ及斑点杂交检查ＴＴＶ核酸。肝小叶内炎症及纤维化评估采用组织学活动指数（ＨＡＩ，Ｋｎｏｄｅｌｌ计分法）。肝功能主要包括ＡＬＴ、ＴＢｉｌ等，采取自动化…