重组质粒DNA在小鼠诱导产生保护性免疫力和预防乙型脑炎

构建含有乙脑病毒外膜蛋白前体 (Prm)和包膜蛋白 (E)基因的质粒载体 ,在巨细胞病毒的早期基因启动子的控制下 ,表达 Prm和 E蛋白。用这种质粒载体(JE- 4 B克隆 )转化的 COS- 1细胞在培养基中分泌乙型脑炎病毒 (JEV)特异性细胞外颗粒。对小鼠注射 1至 2针的重组质粒 DNA或 2针商用疫苗 JEVAX。所有接受注射 1针至 2针的 DNA疫苗的鼠 ,在初始免疫的 18个月中保持分泌 JEV特异抗体。JEVAX疫苗对于 3周龄鼠 10 0 %诱导血清转化 ,但是对于 3天龄鼠抗体检查ELISA滴度均不超过 1∶ 4 0 0。用这种 DNA疫苗免疫过的母鼠经空斑减少中…     

登革病毒2型NS1蛋白DNA疫苗的构建及其免疫效果观察

目的　以登革病毒 2型 (denguevirus2 ,DV2 )非结构蛋白 (non structrulprotein 1,NS1)为靶基因 ,构建DV2 NS1的候选DNA疫苗 ;并探讨其在小鼠体内诱导特异性体液免疫和细胞免疫的作用。方法　将登革病毒 2型NS1 NS2a基因片段克隆至含AG强启动子的真核表达载体pCXN2上 ,构建成重组体pCXN2 NS1 NS2a。在体外将重组质粒转染Cos 7细胞 ,间接免疫荧光检测其在真核细胞中的表达。大量提取空质粒和重组质粒 ,进行动物免疫实验。结果　重组质粒可在真核细胞中有效地表达NS1蛋白。免疫接种小鼠后可诱发机体产生针对NS1蛋白的特异性体液免疫和细胞免疫。末次免疫前已有抗体产生 ,4周后达高峰。抗体依赖补体介导的溶细胞作用 (antibody dependentcomple ment mediatedcytolysis,ADCC)试验结果显示产生的抗体在体外具有特异的杀细胞作用。淋巴细胞增殖实验结果显示 ,实验组小鼠的淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异有显著性。流式细胞计数仪(FACS)检测DNA免疫鼠CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞变化情况 ,与注射空载体pCXN2的阴性鼠相比 ,CD4 + 、CD8+ 细胞水平有较大升高 (P <0 .0 1)。动物保护性实验结果显示 ,当用致死剂量登革病毒攻击免疫鼠时 ,有 6 6 .6 %的免疫鼠受到保护。结论　NS1 NS2a基因重组质粒免疫小鼠可以诱     

乙脑病毒prME蛋白编码基因表达分析及不同DNA免疫方法比较

将构建的含流行性乙型脑炎病毒(Japaneseencephalitisvirus,JEV)prME蛋白编码基因的重组质粒 (pJME)以不同浓度 (10 μg、5 μg以及 3μg)分别转染于HepG2细胞中 ,Westernblot法分析重组质粒表达特点 ,肌肉与基因枪注射方式将pJME免疫BALB/c鼠 ,二次免疫后 3周 ,腹腔注射乙脑病毒JaGAr 0 1株 ,10 5PFU/10 0 μl作为病毒攻击观察 2 1d。比较分析所产生的中和抗体效价以及保护基金项目 :日本金泽医科大学High Tech nologycenterH2 0 0 0 2项目资助作者单位 :中国医科大学附属第二医院感染科 (冯国和 ,王玉梅 ,窦晓光 ,王占英 ,乔…     

柯萨奇B3病毒结构和非结构蛋白DNA 疫苗诱导小鼠产生免疫应答的研究

目的 制备4种柯萨奇B3病毒（CVB3）结构和非结构蛋白重组质粒DNA疫苗,并探讨其诱导机体产生体液和细胞免疫应答的效果。方法 用基因重组技术构建4种CVB3结构和非结构蛋白重组质粒,将各重组质粒体外转染真核细胞,用Western blot检测表达产物;于BALB／c小鼠后腿胫骨前肌注射免疫,于0、4、8周共免疫3次,100μg/次。免疫后不同时间检测体液和细胞免疫应答指标。结果 4种重组质粒酶切出相应大小的片段,经测序证实为CVB3序列,Western blot证实能够在体外真核细胞中表达。pcDNA3/vp2、pcDNA3/VP1、pcDNA3/2A和pcDNA3/3D均可诱导小鼠产生相应的特异性抗体、细胞毒性T淋巴细胞（CTL）和淋巴细胞增殖反应、迟发型超敏反应（DTH）,并对致死量的CVB3m、CVB5和CVB2攻击具有保护作用,表现为病毒攻击后第3天血中病毒滴度降低,第10天心肌病理变化比对照组明显减轻,且小鼠生存率显著提高。其中以pcDNA/VP1和pcDNA3／3D组保护作用最明显。结论 CVB3结构蛋白VP1和非结构蛋白3D质粒DNA有可能用作CVB DNA疫苗的候选基因,值得进一步深入研究。     

表达丙型肝炎病毒NS3和Core融合蛋白基因的DNA疫苗免疫方案优化

目的 本研究旨在构建一种包含丙型肝炎病毒(HCV)保守区基因的新型DNA疫苗,并在小鼠模型中使用电转技术优化其免疫原性.方法 首先,我们构建了包含HCV非结构蛋白NS3和核心蛋白Core部分基因序列的DNA疫苗,并证实了其表达;然后采用不同的体内电转方式于第0、4周分别免疫BALB/c小鼠,比较分析不同免疫方案的体液免疫(特异性IgG与抗体亚类)与细胞免疫应答(IFN-γ ELISPOT)的效果.结果 使用电转技术可显著增强新型DNA疫苗免疫原性,采用皮内注射加卡钳电极电转的方式产生最强NS3特异性T细胞免疫反应.结论 包含HCV保守区基因的新型DNA疫苗可通过优化电转技术增强免疫应答效果.这为我们下一步优化HCV DNA疫苗的免疫方案提供了依据.     

乙型脑炎病毒prM蛋白单克隆抗体的制备

目的 克隆日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)前膜蛋白(prM)编码基因,原核表达、纯化prM蛋白,以纯化产物为免疫原制备单克隆抗体(mAb);方法从感染JEV病毒的鼠脑中克隆编码JEV prM蛋白的基因并将其克隆入原核表达载体pET32a,转化大肠埃希菌BL21(DE3)LvsS后以IPTG诱导表达.表达产物经Ni-NTA纯化后进行SDS-PAGE分析.用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和亚克隆后筛选出能分泌识别prM蛋白的mAb的杂交瘤细胞株.用Western Blot和免疫组化方法检测单克隆抗体的特异性.结果 从鼠脑中克隆出约500 bp的JEV prM基因,将其克隆入原核表达载体中,在大肠埃希菌中获得了较好表达.纯化的prM蛋白免疫BALB/c小鼠,经传统细胞融合及筛选方法制备出单克隆抗体,抗体滴度为105.ELISA、Western Blot和免疫组化检测结果证实该株单抗具有较好的特异性.结论 成功的表达和纯化了日本乙型脑炎病毒的prM蛋白,并完成了单克隆抗体的制备,为乙型脑炎病毒感染的早期诊断及预防的研究奠定了良好的基础.     

乙脑病毒prME与E蛋白编码基因重组构建的DNA免疫试验研究

目的　研究乙脑病毒prME、E蛋白的体外表达特点 ,比较不同重组质粒所进行的DNA免疫效率。方法　分别将乙脑病毒 (JaGAr 0 1株 )prME、E蛋白编码基因 (2 0 0 1bp、15 0 0bp)构建于融合FLAG标记基因的真核表达载体pcDNA(FLAG) 3上 (pJME、pJE) ,脂质体法将二重组质粒转染于HepG2及COS 1细胞系 ;采用不同抗体系统 (anti FLAG、anti E) ,经Westernblot法检测乙脑病毒prME[相对分子质量 (Mr)约 72× 10 3]与E(Mr 约 5 4× 10 3)蛋白表达水平 ;将质粒肌注BALB c鼠 ,二次免疫后 3周 ,腹腔注射乙脑病毒 (10 5PFU 10 0 μl)作为病毒攻击并观察 2 1d。 80 %空斑减少中和实验法检测中和抗体滴度变化。结果　anti FLAG可检测到由质粒pJME、pJE编码的相应蛋白产物在转染细胞内表达 ,同时在pJME转染的细胞内检测到一个新的 11× 10 3的低Mr 蛋白。anti E仅在pJME转染的细胞内检测到E蛋白。肌注pJME可产生高水平中和抗体滴度以及诱导有效的保护性免疫 ,效果等同于普通灭活JE疫苗 ,但优于pJE。结论　pJME的体外表达水平优于pJE。DNA免疫实验结果与prME、E蛋白体外表达特点相一致     

基因工程杂交酵母艾滋病疫苗研究

目的 对以酵母为载体所制得的艾滋病候选疫苗进行研究。方法 构建表达Gag及IL-2的质粒载体，将表达载体分别转化入酵母细胞，通过酵母杂交获得同时表达两种基因的酵母杂交体，放大培养后经灭活、分装、冻干，制得细胞干粉作为试验的疫苗。用小鼠及食蟹猴对试验疫苗进行有效性及安全性研究。结果 杂交酵母可以稳定表达Gag及IL-2；经皮下注射可以分别在小鼠及食蟹猴体内诱导一定水平的细胞免疫反应；对小鼠肿瘤模型的研究表明，疫苗可以诱导有效的免疫保护反应；疫苗的安全性良好，没有明显的毒副作用，只在注射部位引起轻微的红肿，个别动物有低热反应，但均在一周左右恢复正常。结论杂交酵母艾滋病疫苗具有诱导细胞免疫反应的能力；杂交酵母载体疫苗在相关疾病的治疗方面有良好的应用前景。     

西尼罗病毒与乙脑病毒免疫交叉反应的实验研究

为明确西尼罗病毒(WNV)与乙型脑炎病毒(JEV)的免疫交叉反应,本文分别用WNV全抗原与JE减毒活疫苗免疫小鼠,采用间接免疫荧光试验检测血清中2种病毒IgG抗体水平及其交叉反应情况。结果表明:WNV组在第4次免疫后的14天和35天出现2个高峰,平均效价分别为6088和4305;JEV组第4次免疫后,小鼠血清JEV抗体呈现缓慢上升的趋势。无论是在WNV全抗原免疫小鼠血清中还是在JE减毒活疫苗免疫小鼠血清中,同一血清对WNV抗原和JEV抗原均有反应,且抗体效价差异有显著性。在抗WNV抗体阳性血清中,两者交叉反应相对较强,在抗JEV抗体阳性血清中,两者交叉反应较弱。WNV与JEV存在一定交叉反应,但是否有交叉保护作用则需要中和试验等进一步证实。     

HCV NS3蛋白单克隆抗体的制备及其识别区域的分析

目的 制备针对丙型肝炎病毒（HCV）非结构区NS3全长蛋白的单克隆抗体（MAb）,并分析获得的单抗识别表位所在区域,为建立以NS3蛋白为靶位的抗HCV研究提供抗体工具。方法 用原核表达的HCV非结构区NS3全长蛋白作为免疫原,采用小鼠腹股沟皮下NC膜包埋法免疫小鼠,按常规杂交瘤细胞的制备方法,经细胞融合、克隆化制备抗NS3蛋白的MAb。用间接免疫荧光法和Westem blot鉴定其特异性。分别构建NS3丝氨酸蛋白酶（NS3蛋白的N末端1／3）编码基因的真核表达质粒pcDNA3．1（-）-ns3p、NS3解旋酶（NS3蛋白的C末端2/3）编码基因的真核表达质粒pcDNA3．1（-）-ns3A,将其瞬时转染COS-7细胞后,以获得的单克隆抗体作为一抗,通过免疫荧光分析获得单抗识别表位所在的区域。结果 获得了2株抗NS3蛋白的单克隆抗体,这2株MAbs均特异识别NS3蛋白,并确定了它们的结合区域。结论 获得了针对NS3蛋白的单克隆抗体,并对其单抗识别表位所在的区域进行了分析,为下一步进行以NS3蛋白为靶位的抗HCV研究奠定了良好的基础。     

乙脑病毒prME蛋白与BALB/c鼠IgG Fc段编码基因联合构建DNA免疫研究

目的 研究IgG Fc编码基因对流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)DNA疫苗免疫增强效应的影响.方法 巢式RT-PCR法从BALB/c鼠脾组织获取IgG Fc段编码基因,用限制性内切酶从含流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白基因重组子获取prME蛋白基因,分别插入同-真核表达载体pcDNA3.1(+)不同酶切位点,构建蘑组子pJME/IgG Fc并经酶切及DNA测序分析.脂质体法将pJMrY/IgG Fc转染CHO细胞.免疫荧光、Western blot法检测转染的CHO细胞中融合蛋白分布与表达.将pJME/IgG Fc肌注免疫BALB/c鼠,检测小鼠脾特异性细胞毒T细胞(CTL)杀伤活性和中和抗体滴度.结果 pJME/IgG Fc经BamH Ⅰ/EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ/Not Ⅰ酶切释出的插入子大小,(2001 bp,2730 bp)分别与预期结果相符合.所编码的融合蛋白相对分子质量(Mr)为101×103,主要分布于胞浆,少最分布于胞膜,pJME/IgG Fc转染CHO细胞经32次传代仍可表达融合蛋白.pJME/IgGFc免疫组中和抗体滴度与CTL活性较pJME及灭活疫苗组均升高(P<0.05).结论 pJME/IgG Fc成功构建,转染的CHO细胞可稳定表达融合蛋白,IgG Fc段编码基因能够增强JEV DNA疫苗的细胞和体液免疫应答.     

鼠疫菌重组质粒pcDNATE/F1-V的构建及其免疫效果的研究

目的 获得含有鼠疫F1和V抗原编码基因的重组质粒pcDNATE／E1-V,并测定其诱导特异性免疫应答的能力。方法PCR扩增鼠疫菌F1和V编码基因,分别与pGEM-T连接测序,构建pcDNATE／F1-V融合重组质粒,转染COS-7细胞,用Western blot方法鉴定目的蛋白的表达,重组质粒pcDNATE／E1-V加集落刺激因子(GM-CSF)免疫Balb／c小鼠,观察免疫效果。结果pcDNATE／F11-V在COS-7细胞中表达,免疫鼠体内产生特异性抗体,抗体亚型分析、细胞因子等指标的测定结果表明所构建DNA疫苗以诱发Th1型免疫为主。结论成功构建重组真核表达质粒pcDNATE／F1-V,其具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力,为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础。     

香菇多糖联合丙肝核酸疫苗诱导抗原特异性免疫应答研究

目的：探讨香菇多糖（Lentinan,LNT）联合丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白NS3核酸疫苗诱导NS3抗原特异性免疫作用。方法：将不同剂量香菇多糖与等量HCVNS3质粒（100μg/只）,采用初次加强免疫法联合免疫BALB/c小鼠。第二次免疫10天后取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,与NS3抗原多肽共育作为效应细胞。另培养NS3抗原致敏的P815细胞作为靶细胞。采用MTT法分别检测NS3抗原特异性T细胞增殖反应和细胞毒T细胞特异性杀伤反应（CTL）。同时采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-4和IFN-γ分泌水平。结果：研究发现高剂量及中剂量香菇多糖与NS3质粒联合在效靶细胞比为50：1时,可明显加强NS3抗原特异性CTL反应,与单用NS3质粒相比有显著差异（P〈0.01和P〈0.05）;中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用明显增强NS3抗原特异性T细胞增殖反应（均为P〈0.01）;细胞因子分析显示中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用使IFN-γ分泌增加（均为P〈0.01）。结论：采用初次加强免疫法将中剂量香菇多糖（0.1ml/10g）与HCVNS3质粒联合免疫BALB/c小鼠,可激发明显增强的抗原特异性T细胞增殖和CTL反应,并伴有大量的IFN-γ分泌,提示香菇多糖可作为丙肝病毒NS3核酸疫苗的免疫佐剂,加强抗原特异性免疫应答效应。     

DNA疫苗及其免疫途径的研究进展

<正>DNA疫苗(DNA vaccine)又称为核酸疫苗、基因疫苗,是指将含有编码某种抗原蛋白基因序列的质粒载体作为疫苗,采用某种方法直接导入动物细胞内,然后通过宿主细胞的转录翻译系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,从而使被接种动物获得相应的免疫保护,以达     

肠道病毒71型手足口病的疫苗筛选和观察

目的 筛选安全有效新型EV71候选疫苗,为将来EV71疫苗开发应用奠定基础.方法 以重组蛋白VP1为疫苗设计靶点,不同候选疫苗包括灭活疫苗、DNA疫苗、VP1蛋白疫苗在0、2周、4周分别按照不同剂量和肌内注射途径免疫BALB/c雌性小鼠,在0、2周、4周、6周、8周、10周、16周分别采集小鼠尾静脉血,16周处死小鼠,收集小鼠脾脏细胞,检测小鼠体液免疫和细胞免疫功能,筛选评价候选疫苗的疗效和安全性.结果 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗免疫小鼠2周后IgG抗体滴度即开始升高,4周后明显升高,8周后达高峰,至少维持16周以上;IgG亚类以IgG2a和IgG1为主.三种疫苗能诱导以γ-IFN和IL-4为主的细胞免疫反应.灭活疫苗疗效优于其他候选疫苗,未发现疫苗相关不良反应.结论 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗均能诱导持久的特异性细胞免疫和中和抗体反应,以灭活病毒疫苗疗效较好,需要将来攻毒实验可进一步验证其免疫力.     

重组甲型流感病毒NS2蛋白抑制感染小鼠肺组织干扰素的产生

目的用大肠杆菌表达获得甲型流感病毒(IAV)非结构蛋白2(NS2),并观察NS2蛋白对小鼠肺组织γ干扰素(IFN-γ)产生的影响。方法构建p ET22b(+)/NS2原核表达质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),通过诱导表达、纯化获得NS2。将40只BALB/c小鼠,随机分8组,分别为正常对照组、200μg/kg NS2联合病毒组、200μg/kg NS2联合RNA组、100μg/kg灭活病毒、0.2×半数致死量(LD50)病毒组、50μg/kg病毒RNA组、200μg/kg NS2组和100μg/kg NS2组,各组滴鼻给予小鼠处理。通过反转录PCR、Western blot法分别检测肺组织IFN-γ的mRNA和蛋白表达。结果在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达并纯化获得重组NS2;将NS2或/和IAV滴鼻给小鼠后,反转录PCR和Western blot法检测表明NS2联合病毒组的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白水平较病毒组均降低。结论 NS2抑制IAV所诱导的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白的水平。     

人巨细胞病毒pp65核酸疫苗的构建、表达与动物免疫效应

构建真核重组表达质粒PVAX1-pp65,通过对其表达产物的鉴定和免疫小鼠实验,探讨PVAX1-pp65载体对诱导免疫应答的效果及方式。用已构建的原核表达载体pp65-pet32a,经酶切后与DNA疫苗载体PVAX1连接,构建HCMVpp65核酸疫苗(PVAX1-pp65)。用脂质体法将其转染293细胞,经间接免疫荧光、免疫印迹试验来验证其表达的产物。同时,免疫小鼠后取其脾脏细胞,经流式细胞仪检测其CD4+和CD8+T细胞;并利用MTT法测定免疫小鼠的T细胞对ConA和重组pp65蛋白刺激后的增殖活性。结果显示构建的真核表达载体PVAX1-pp65,经测序验证其序列正确。体外转染实验结果表明转染重组质粒的细胞胞浆内呈现与特异性pp65单克隆抗体反应的颗粒状荧光产物,免疫印迹试验也显示重组质粒转染的细胞裂解物中有pp65蛋白条带。另外,免疫小鼠脾CD8+T细胞的含量明显高于对照组;免疫鼠脾细胞对重组pp65抗原蛋白的刺激后增殖反应明显。综上结果证实,成功地构建了HCMVpp65核酸疫苗,并能有效地表达,表达的蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性。HCMVpp65DNA疫苗可诱导小鼠产生针对HCMV的特异性细胞免疫应答,可作为一种有应用前景的核酸疫苗进一步深入研究。     

鼠疫耶尔森菌重组质粒pVAX1/Fl-V的构建及其免疫效果的研究

目的获得含有鼠疫F1和V抗原编码基因的重组真核表达质粒pVAX1／F1-V，并测定其诱导特异性免疫应答的能力。方法PCR扩增鼠疫菌Fl和V编码基因，分别与pGEM-T连接测序，构建pVAX1／F1-V融合重组质粒，转染Cos-7细胞，用Western blot方法鉴定目的蛋白的表达，重组质粒pVAXI／F1．V加GM．CSF佐剂免疫BALB／c小鼠，观察免疫效果，400个半数致死量（uk）强毒鼠疫菌皮下攻毒观察保护率。结果pVAX1／F1-V在Cos-7细胞中表达，免疫鼠体内产生特异性抗体，通过抗体亚型分析、细胞因子等指标的测定表明所构建DNA疫苗以诱发TH1型免疫为主，攻毒保护率达60％。结论成功构建F1-V融合蛋白真核表达载体，具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力，对强毒鼠疫菌皮下攻毒有一定的保护效力，为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础。     

西尼罗病毒NS1单克隆抗体的制备及鉴定

目的以西尼罗病毒非结构蛋白(nonstructural protein1,NS1)为免疫原制备西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体,并鉴定其特异性。方法在表达具有良好抗原性的重组西尼罗病毒NS1蛋白基础上免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,用间接ELISA法筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合免疫荧光(IFA)和免疫印迹对所获得单克隆抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制试验对m Ab识别的抗原位点进行分析。结果获得39株特异性针对西尼罗病毒NS1蛋白的单克隆抗体,Ig亚类测定结果Ig G3和Ig G2a单抗各2株,Ig G2b单抗5株,Ig G单抗1株,另外29株均为Ig G1。结论成功获得了特异性针对西尼罗病毒NS1蛋白的单克隆抗体,将为进一步建立西尼罗病毒NS1抗原检测方法及探讨NS1蛋白及抗体在西尼罗病毒发病机制中提供依据。     

HCV结构区DNA疫苗诱发小鼠特异性细胞免疫反应的研究

目的 :通过HCV结构区DNA疫苗直接免疫小鼠 ,诱发其体内特异性细胞介导的免疫反应的研究 ,为HCVDNA疫苗的研制打下基础。方法 :用重组的pBK CMV质粒体外转染小鼠骨髓瘤细胞SP2 0 ,建立了能体外表达HCV结构区蛋白的SP2 0D细胞系 ,分别用SP2 0和SP2 0D细胞攻击用空质粒或pBK CMV质粒免疫过的Balb c小鼠 ,通过肿瘤形成、肿瘤重量、肿瘤组织淋巴细胞的浸润以及不同免疫组小鼠血清中IL 2和IFN γ含量来观察小鼠体内T淋巴细胞的活性。结果 :用SP2 0和SP2 0D攻击空质粒或pBK CMV质粒免疫过的小鼠 15d后 ,SP2 0D攻击的pBK CMV质粒免疫鼠肿瘤重量〔(0 9± 0 12 )g〕明显低于空白质粒免疫组和SP2 0接种组 (P <0 0 0 1) ,且该免疫组小鼠血清中IL 2和IFN γ的浓度明显高于其它免疫组 ;此外 ,用SP2 0D攻击的pBK CMV免疫鼠 ,肿瘤病理切片中可见明显的T淋巴细胞浸润。结论 :重组的HCV结构区DNA疫苗 (pBK CMV)能诱导小鼠体内特异性T淋巴细胞反应 ,HCVDNA疫苗可能为临床疾病的治疗和预防提供一种新的途径