N-乙酰半胱氨酸对大鼠脑出血后核因子-κB表达的影响

目的 探讨N-乙酰半胱氨（N-acetylcysteine,NAC）在大鼠脑出血（ICH）继发脑损伤中的作用机制。方法 采用立体定向技术注入自体不凝血制作实验性ICH模型,造模后即刻和6h后用NAC干预,行免疫组化染色观察血肿周围惦组织核因子κB（NF—κB）和细胞间黏附分子-l（ICAM-1）的表达变化。结果 ICH后6h血肿周围脑组织NF—κB开始表达,48h迭高峰,ICAM—l12h开始表迭,72h迭高峰。各组与假手术组之间有显著差异（均P〈0．05）;脑出血后NF—KB与ICAM—l呈正相关（r=0．868,P〈0．05）,NF—κB表达从开始到高峰均早于ICAM—l。NAC可明显降低ICH24h、72h亚组NF—κB、ICAM—l的表达（P〈0．05）。结论 ICH时,NAC可通过抑制NF—κB的活性,下调ICAM—l的表达,从而发挥脑保护作用。     

核因子κB及相关基因产物的表达

背景：川芎嗪延缓肝纤维化形成的机制尚不清楚。 目的：观察川芎嗪对肿瘤坏死因子α刺激的肝星状细胞增殖及结缔组织生长因子、核因子κB及其相关基因产物白细胞介素6表达的影响。 方法：体外培养HSC-T6细胞株,取对数生长期的细胞用于实验。实验分为4组：对照组仅加入细胞;TNF-α组加入10 μg/L TNF-α;川芎嗪干预组先加入终浓度为10 μg/L的TNF-α作用30 min后,分别加入川芎嗪50,100,200,400,600, 1 000 mg/L;PDTC组先加入终浓度为10 μg/L的TNF-α作用30 min后,再加入终浓度18 μmol/L的核因子κB阻断剂PDTC。 结果与结论：MTT结果显示100,200,400,600,1 000 mg/L的川芎嗪均能抑制HSC-T6增殖,且呈剂量依赖性。免疫细胞化学染色及Western blot检测发现10 μg/L的肿瘤坏死因子α刺激后,HSC-T6细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达明显增多(P < 0.01或P < 0.05),200,400,600 mg/L的川芎嗪及18 μmol/L的PDTC均可明显降低肿瘤坏死因子α刺激后HSC-T6细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达(P < 0.01),且随着川芎嗪质量浓度的增加,抑制作用增强,PDTC的抑制作用最明显。相关性分析结果显示HSC-T6细胞结缔组织生长因子和核因子κB的表达呈正相关(r=0.980,P < 0.01)。说明川芎嗪可以抑制肝星状细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达,抑制肝星状细胞的增殖。     

靶向核因子κB p65siRNA促人血管内皮细胞EAhy926的凋亡

背景：作者前期工作已经证实,子宫内膜异位症患者的在位、异位内膜中核因子κBmRNA和蛋白均表达升高,核因子κB参与了子宫内膜异位症细胞黏附、侵袭和血管形成的病理过程。 目的：观察RNA干扰技术(RNAi)靶向抑制核因子κB p65基因对人血管内皮细胞( EAhy926)增殖的影响。 方法：10 μg/L血管内皮生长因子刺激下培养EAhy926细胞,给予转染核因子κB p65 siRNA,同时设立对照组,分别是阴性对照siRNA转染组、空白脂质体组及正常对照组(不给予其他任何处理),48 h后分别采用Heochst 33342荧光检测法、MTT 法及流式细胞仪术检测细胞的增殖抑制与凋亡情况。 结果与结论：与正常对照组比较,核因子κB p65 siRNA组的细胞增殖抑制率及细胞凋亡率均明显升高(P < 0.05);而阴性对照siRNA转染组及空白脂质体组的细胞增殖抑制率及细胞凋亡率则差异无显著意义。结果证实,核因子κB p65 siRNA能显著抑制人血管内皮细胞增殖,促进内皮细胞的凋亡发生。     

大鼠脑出血后核因子-κB的表达及黄芪多糖的干预作用

目的研究黄芪多糖（astragalus polysaccharide，APS）对大鼠脑出血（ICH）后血肿周围核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）蛋白表达的影响，并探讨APS抗炎的脑保护机制。方法采用Ⅶ型胶原酶注射至大鼠右侧苍白球诱导ICH模型并于造模术后2h行APS腹腔注射，分别于6h和1、3、5d4个时间点进行大鼠神经行为学评分，采用免疫组化方法检测血肿周围组织NF-κB表达的动态变化，采用透射电镜观察术后3d血肿周围神经元超微结构的变化。结果与模型组比较，APS干预后3d和5d大鼠神经行为学评分明显减少（P〈0．05），干预6h及1、3、5d时NF-κB阳性细胞数明显减少（P〈0．05），神经元超微结构改变亦比模型组减轻。结论APS可抑制NF—κB激活，减轻炎症反应，改善神经功能缺损症状。     

核因子κB在低氧诱导因子1α基因修饰神经干细胞上调血管内皮生长因子表达中的桥接作用**

背景：很多研究发现,在脑缺氧损伤区域核因子κB与血管内皮生长因子表达呈正相关。因此,作者大胆假设,核因子κB是否处于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子作用通路上并起桥接作用。 目的：以低氧诱导因子1α修饰的神经干细胞为载体,观察核因子κB 在低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达通路中的作用。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-03/12在佳木斯大学神经科学研究所完成。 材料：新生24 h内的Wistar大鼠,雌雄不拘。 方法：扩增腺病毒载体低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后转染神经干细胞,荧光检测神经干细胞中低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白及空载体Ad-绿色荧光蛋白表达,分别提取基因转染后神经干细胞、空载体转染神经干细胞、正常神经干细胞蛋白。然后低氧诱导因子1α基因修饰的神经干细胞中按50,150,300 μmol/L浓度梯度加入核因子κB特异性抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷,Western Blot法检测其中血管内皮生长因子的表达变化。 主要观察指标：各组神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB 的表达;给予梯浓度核因子κB 特异性抑制剂后神经干细胞中血管内皮生长因子的表达。 结果：腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白转染神经干细胞后基因表达强弱与MOI及转染时间有关;转染低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后的神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB的表达呈正相关;给予梯浓度核因子κB 特异性抑制剂后腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白修饰的神经干细胞中血管内皮生长因子的表达呈抑制剂浓度依赖性下调,各浓度组之间血管内皮生长因子表达差异有显著性意义(P < 0.05~0.01)。 结论：核因子κB位于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达的信号通路上并起桥接作用。     

七氟醚预处理对脑缺血再灌注损伤后含核转录因子κB反应元件相关蛋白的影响

目的 探讨七氟醚预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后含核转录因子κB（NF-κB）反应元件的蛋白细胞黏附分子[细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）]、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血组和七氟醚预处理组.采用线栓法制备大脑中动脉栓塞大鼠模型.Western blot检测缺血再灌注6、24、48和72 h后缺血侧ICAM-1、VCAM-1、MMP-2和MMP-9表达.伊文思蓝（EB）染色观察血脑屏障的通透性.结果 七氟醚预处理组缺血侧脑组织中EB含量显著低于缺血组（P＜0.01）.缺血组各再灌注时间点ICAM-1、VCAM-1、MMP-2和MMP-9表达均显著高于七氟醚预处理组.结论 七氟醚预处理可能通过抑制再灌注损伤后含NF-κB反应元件的ICAM-1、VCAM-1、MMP-2和MMP-9的上调起神经保护作用.     

MG63和MG63/ADR骨肉瘤裸鼠模型血管内皮生长因子和核因子κB1的表达

背景：恶性肿瘤耐药研究中发现核因子κB1及血管内皮生长因子基因可能与肿瘤耐药密切相关。 目的：观察MG63和MG63/ADR骨肉瘤裸鼠模型中血管内皮生长因子和核因子κB1表达的差异。 方法：对数期生长的MG63细胞采用阿霉素浓度递增培养法冲击诱导建立MG63/ADR细胞株。BALB/C裸鼠随机分为2组,分别将含5.0×106个MG63和MG63/ADR细胞的0.2 mL细胞悬液采用皮下接种法注入裸鼠的一侧腋部皮下。第6周处死裸鼠取材。 结果与结论：注射MG63和MG63/ADR细胞的2组裸鼠成瘤率均为100%;免疫组织化学及RT-PCR方法检测发现MG63/ADR组瘤灶中血管内皮生长因子和核因子κB1基因和蛋白的表达均明显高于MG63组(P < 0.05)。说明血管内皮生长因子和核因子κB1表达的上调可能是导致骨肉瘤耐药的重要原因。     

血管性痴呆大鼠海马区核因子-κB、环氧合酶-2的表达变化

目的通过检测血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马CA1区核因子-κBp65(nuclear factor-κB p65,NF-κBp65)与环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,探讨NF-κB、COX-2对VD大鼠的损伤作用。方法28只大鼠随机分为两组,假手术(SOG)组(n=13)和模型(VD)组(n=15),采用HE染色,光镜下观察海马CA1区锥体细胞的改变,免疫组化方法检测海马CA1区NF-κBp65、COX-2蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组组海马CA1区锥体细胞损伤、丧失明显,NF-κBp65、COX-2蛋白表达高于假手术组,与假手术组相比有统计学意义(P(0.01)。结论血管性痴呆大鼠海马CA1区NF-κBp65、COX-2蛋白的表达增加,NF-κBp65、COX-2蛋白的高表达可能是学习记忆障碍的原因之一。     

甲基强的松龙抑制颅脑外伤后核因子κB的表达

目的探讨核因子κB(NF-κB)在人创伤性脑损伤(TBI)后挫伤皮层中的表达情况,同时观察甲基强的松龙对其表达的影响。方法挫伤区皮层的标本来自于24位TBI患者,分为两组,一组为TBI组,一组为甲基强的松龙治疗组,取样时间从伤后5h到24h。采用凝胶电泳迁移分析法(EMSA)测定NF-κB的活性,采用免疫组化技术检测NF-κBp65的表达情况。结果在人TBI后的挫伤区皮层中,NF-κB活性和表达强度明显上调,接受甲基强的松龙治疗的患者,其NF-κB活性和表达强度明显下降。结论NF-κB在人TBI后的挫伤区皮层中表达上调,提示其可能在TBI后的病理生理过程中起着重要作用,甲基强的松龙能抑制人TBI后挫伤区皮层中NF-κB的表达。     

急性肺损伤模型大鼠核因子κB和细胞间黏附分子1表达与川芎嗪的干预**

背景：研究表明,川芎嗪在抗肺纤维化方面发挥重要作用,但对川芎嗪抗急性肺损伤作用及其机制的研究较少。 目的：观察大鼠油酸性急性肺损伤时,核因子κB和细胞间黏附分子1在肺组织中的表达及其变化。 方法：采用静脉注射油酸的方法建立大鼠急性肺损伤模型,建模后并分别用川芎嗪和地塞米松进行干预。 结果与结论：建模成功后,模型组大鼠肺系数明显升高(P < 0.05)。免疫组织化学染色结果显示,模型组肺组织核因子κB和细胞间黏附分子1的表达明显增强(P < 0.05);应用川芎嗪和地塞米松干预后上述变化明显减轻(P < 0.05)。证实川芎嗪对急性肺损伤时的肺组织起到明显的保护作用,其保护机制与川芎嗪抑制核因子κB和细胞间黏附分子1的表达有关。     

羟基喜树碱抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应：与环孢素A的比较

背景：近期研究表明羟基喜树碱在一些器官移植过程中具有免疫抑制作用,但在角膜移植中的免疫抑制作用却未见报道。 目的：观察羟基喜树碱对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的影响,并与经典抗排斥药环孢素A进行比较。 方法：18只成年雌性Wistar大鼠为供体,36只成年雄性SD大鼠为受体,建立大鼠穿透性角膜移植动物模型。受体大鼠随机分为3组,羟基喜树碱组、环孢素A组和对照组,每组12只。羟基喜树碱组和环孢素A组分别在术后腹腔注射羟基喜树碱2.0 mg/(kg•d)和环孢素A 10 mg/(kg•d),连续用药12 d。对角膜植片进行临床观察,以混浊、水肿和新生血管3 项指标作为临床评估标准,记录角膜植片存活时间。 结果与结论：羟基喜树碱组、环孢素A组和对照组角膜植片的存活时间分别为(21±2),(19±2)和(11±2) d,各用药组与对照组比较角膜植片存活时间显著延长(P < 0.01),羟基喜树碱组比环孢素A组植片存活时间明显延长(P < 0.05)。实验结果提示羟基喜树碱能对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应具有明显的抑制作用,可延长植片存活时间,抑制新生血管,其作用优于环孢素A。 关键词：角膜移植;大鼠;免疫排斥;羟基喜树碱;免疫抑制剂     

微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对大鼠损伤脊髓核因子κB表达的影响

BACKGROUND： It has been reported that nuclear factor-kappa B （NF- κB）, activated after spinal cord injury in rats, plays a key role in inflammatory responses in the central nervous system. OBJECTIVE： To investigate the effects of transplantation of microencapsulated rabbit sciatic nerve on NF- κB expression and motor function after spinal cord injury in rats, and to compare the results with the transplantation of rabbit sciatic nerve alone. DESIGN, TIME AND SETTING： This completely randomized, controlled study was performed at the Department of Neurobiology, Medical College of Nanchang University between December 2007 and July 2008. MATERIALS： A rabbit anti-NF- κB P65 monoclonal antibody was made by the Santa Cruz Company, USA and a streptavidin peroxidase immunohistochemical kit was provided by the Sequoia Company, China. METHODS： Eight rabbits were used to prepare a sciatic nerve cell suspension that was divided into two parts： one stored for transplantation, and the other mixed with a 1.5% sodium alginate solution. One hundred and twenty adult Sprague Dawley rats weighing 220-250 g were randomly divided into four groups： the microencapsulated cell group （n = 36）, the non-encapsulated cell group （n = 36）, the saline group （n = 36） and the sham operation group （n = 12）. The first three groups underwent a right hemisection injury of the spinal cord at the T10 level, into which was transplanted a gelatin sponge soaked with 10 μL of a microencapsulated nerve tissue/cell suspension （microencapsulated cell group）, a tissue/cell suspension （non-encapsulated cell group） or physiological saline （saline group）. In the sham operation group the vertebrae were exposed, but the spinal cord was not injured, and no implantation was given. MAIN OUTCOME MEASURES： Pathological changes were detected using hematoxylin-eosin staining; NF- κB expression was quantified using immunohistochemical staining; motor function was assessed using the Basso, Beattie and Bresnahan （BBB） scale. RESULTS： Spinal cord injuries, such as neuronal death and inflammatory cell infiltration, were found in the microencapsulated cell group, the non-encapsulated cell group and the saline group. However, the damage in the microencapsulated cell group was milder than in the non-encapsulated cell or saline groups. NF- κB expression in the microencapsulated cell group, the non-encapsulated cell group and the saline group was increased after spinal cord injury; it reached a peak after 24 hours, gradually decreased after 3 days, and was close to normal levels after 7 days. NF- κB expression in the microencapsulated cell group was significantly lower than in the saline group and the non-encapsulated cell group （P 〈 0.05）. With time, the motor function of the animals in each group improved to a certain extent, but did not reach normal levels. There were no significant differences in BBB scores between the different groups on post-operative day 3; however, the BBB scores for the microencapsulated cell group and the non-encapsulated cell group were significantly higher than the saline group on post-operative day 7 （P 〈 0.05）. In addition, the motor function recovered better in the microencapsulated cell group than in the non-encapsulated cell group （P 〈 0.05）. CONCLUSION： The transplantation of microencapsulated rabbit sciatic nerve can inhibit NF- κB expression and inflammatory reactions and promote recovery of motor function after spinal cord injury in rats. The effects of microencapsulated cell transplantation are superior to those of transplantation of cells alone.     

生物波调控因子对实验性脑梗死大鼠脑组织NF-κB表达的影响

目的:探讨生物波调控因子(BRF)对实验性脑梗死大鼠脑组织NF-κB表达的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠90只随机假手术组、生理盐水组、BRF治疗组。制备大脑中动脉梗死(MCAO)模型,术后1h以1ml/100g的剂量分别腹腔注射1.25%BRF溶液和生理盐水,此后1次/d。进行行为学评分、干湿重法测定脑组织含水量、HE染色观察组织病理学改变、免疫组织化学方法测定脑组织NF-κB的表达。结果:(1)MCAO模型大鼠术后各时间点BRF治疗组的行为学评分较生理盐水组降低。(2)与假手术组比较,BRF治疗组和生理盐水组缺血脑组织含水量于24h开始明显升高,48h达高峰,持续至72h,7d明显下降。除6h外在各时间点均有显著性差异。BRF治疗组脑组织水肿程度减轻,48h脑含水量明显低于生理盐水组。(3)缺血区炎细胞浸润和NF-κB阳性细胞表达于梗死后6h开始增多,48h达高峰,持续至7d。假手术组未见明显炎细胞浸润,可见少量散在的NF-κB阳性细胞。BRF治疗组病理损伤减轻,术后48h、72h脑组织NF-κB阳性细胞表达明显低于生理盐水组。结论:生物波调控因子可以减轻梗死后脑水肿,降低脑组织NF-κB的表达,对大鼠脑组织的缺血损伤产生保护作用。     

微囊化异种坐骨神经组织细胞移植脊髓损伤大鼠核因子κB的表达

背景：核因子κB是一种重要的转录因子,在炎症反应中起重要作用。 目的：观察微囊化异种坐骨神经组织细胞移植于脊髓损伤大鼠后核因子κB的表达及活性变化。 方法：家兔用于制备异种坐骨神经组织细胞悬液。SD大鼠120只随机被分为4组。假手术组,建立大鼠脊髓半横断伤模型后分微囊组、细胞组、单损组。于损伤处分别植入明胶海绵吸附的10 μL 微囊化异种坐骨神经组织细胞、明胶海绵吸附的10 μL 异种坐骨神经组织细胞以及明胶海绵吸附的10 μL生理盐水。术后6,12,24 h,3,7,14 d,苏木精-伊红染色观察脊髓组织的病理学改变及免疫组织化学染色观察核因子κB的表达情况。 结果与结论：脊髓损伤大鼠神经元细胞浆及细胞核内核因子κB表达增加,24 h达高峰水平,3 d后开始逐渐降低,7 d基本降至正常。微囊组脊髓核因子κB阳性细胞的体积密度和表面积密度值均少于单损组、细胞组(P < 0.05)。 结果提示,微囊化异种坐骨神经组织细胞移植对脊髓损伤后核因子κB的活性表达起抑制作用,有益于减轻核因子κB介导的炎性反应。 关键词：微囊;核因子-κB;脊髓损伤;异种移植;SD大鼠 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.015     

长春西汀对大鼠脑缺血再灌注损伤炎性反应机制的影响

目的探讨长春西汀对大鼠脑缺血再灌注损伤炎性反应机制的影响。方法将Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注损伤组和长春西汀干预组,应用线栓法制备大脑中动脉闭塞2h后再灌注模型,分别于再灌注6h、24h、3d、7d采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死灶大小,采用干、湿重法检测脑组织含水量以评价脑水肿的程度,采用免疫组织化学和原位杂交的方法检测大鼠核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果与假手术组比较,模型组NF-κB的表达于再灌注6h即增高(P<0.05),TNF-α的表达于24h增高(P<0.05),3d时均达高峰(均P<0.05),7d时仍高于假手术组(均P<0.05);与模型组比较,长春西汀干预组于再灌注后24h、3d、7d时NF-κB和TNF-α表达降低。长春西汀干预组NF-κB各时点组内比较未见统计学差异(F=2.324,P>0.05)。与假手术组比较,模型组和长春西汀干预组脑组织水含量于脑缺血再灌注损伤6h即增高,3d时达到高峰(均P<0.05),7d时仍高于假手术组(均P<0.05)。结论长春西汀对大鼠脑缺血再灌注损伤炎性反应有明显的抑制作用。     

深板层角膜移植与穿透性角膜移植视力恢复的差异

背景：角膜移植可主要分为以恢复角膜透明性和提高视力为主要原因的光学性角膜移植和以修补及重建角膜完整性为主要原因的治疗性或结构性角膜移植。 目的：对比分析深板层角膜移植与穿透性角膜移植成功率和降低并发症发生率的临床效果。 方法：分析深板层角膜移植和穿透性角膜移植患者43例43眼,26例26眼行深板层角膜移植,17例17眼行穿透性角膜移植,供体角膜均来自死亡后的捐献,24 h内4 ℃湿房保存,移植后用药常规抗炎抗排斥反应,随访3~37个月,观察两组移植前后的裸眼视力和矫正视力,对比疗效、排斥反应、并发症。 结果与结论：与移植前比较,两组患者移植后裸眼视力和矫正视力均有提高(P < 0.05)。深板层角膜移植后并发症为后弹力膜穿孔1例,移植排斥反应2例,穿透性角膜移植后青光眼1例,虹膜前粘连1例,排斥反应4例。深板层角膜移植可以减少排斥反应的发生率和并发症,移植后视力恢复与穿透性角膜移植无明显差异,但建议内皮功能正常的角膜基质病变可尽量选择深板层角膜移植。 关键词：深板层角膜移植;穿透性角膜移植;角膜移植;修补;重建;内皮细胞     

核因子-κB对癫痫大鼠脑 P-糖蛋白表达的调控作用

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)对癫痫大鼠脑P-糖蛋白(P-gP)表达的影响.方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=9)、癫痫组(EP组,n=14)、NF-κB活性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)干预组(PDTC组,n=14).采用大鼠海马注射海人酸方法制作癫痫模型,PDTC组于癫痫造模前30 min给予腹腔注射PDTC(按体质量150 mg/kg).于造模后24 h处死各组大鼠,采用免疫组织化学方法检测并比较各组大鼠海马CA3区、齿状回、嗅周皮层、杏仁核复合体区P-gp和NF-κB亚基p65(NF-κBp65)表达情况.结果 与假手术组相比,EP组海马CA3区、齿状回、杏仁核复合体区P-gP和NF-κBp65表达显著增强(PO.05).结论 抑制NF-κB活化可以降低癫痫相关脑区P-gp过表达,癫痫发作所致脑内P-gp表达上调可能与NF-κB活化有关.