化疗药物诱导胰腺癌细胞凋亡过程中p53和bcl—2基因表达量？…

目的 本文通过观察化疗药物话导胰腺癌细胞凋亡过程中,Ｐ５３和ＢＣＬ－２基因表达量的变化,探讨化疗药物诱导胰腺癌细胞发生凋亡过程与相关基因表达的关系。方法 采用斑点杂交及激光密度扫描技术对化疗药物配伍;５－氟尿嘧喧（５－ＦＵ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）和表柔比星（Ｅ－ＡＤＭ）诱导胰腺癌细胞株细胞发生凋亡过程中Ｐ５３和ＢＣＬ－２基因表达量的变化进行了检测分析。结果 化疗药物诱导胰腺癌细胞株细胞发生凋亡过程中     

化疗诱导人肝癌细胞凋亡中p53和bcl-2基因的调控

目的 建立化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡的模型,初步探讨在该凋亡过程 中重要凋亡相关基因ｐ５３和ｂｃｌ－２的调控作用。方法 用丝裂霉素诱导人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２凋亡,我显微镜和透射电镜观察肝癌细胞的形态学改变,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞ＤＮＡ片段的梯状条带,用流式细胞仪免疫荧光法检测凋亡不同时期Ｐ５３和Ｂｃｌ－２蛋白的表达量。结果 ８ｍｇ／ｍｌ丝裂霉素作用１２,２４,４８ｈ后,Ｐ５３蛋白表达量明显增高,尤以１２ｈ明显,而后逐渐下降。Ｂｃｌ－２蛋白在整个凋亡过程中无明显变化。结论 在化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡过程中,ｐ５３基因参与了调控,并为凋亡信号传导途径中的早期事件。丝裂霉素诱导的肝癌细胞凋亡途径为ｐ５３依赖方式,而在该凋亡过程中,ｂｃｌ－２基因的调控并不重要。     

胰腺癌细胞凋亡与bcl-2,bax基因的表达

目的探讨胰腺癌组织中的bcl-2和bax的表达及bcl-2/bax比值与胰腺癌细胞凋亡的关系.方法对30例胰腺癌标本应用免疫组化SP方法测定胰腺癌切片中的凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因bax的表达;同时应用TUNEL法测定胰腺癌细胞原位凋亡情况.结果高分化腺癌的凋亡指数(AI)为(5.70±1.21)%;中低分化腺癌为(6.80±2.01)%.AI与bcl-2/bax比值呈负相关关系(r=- 0.5583,P<0.05 ).结论 bcl-2和bax在胰腺癌细胞凋亡调节过程中起着重要作用.     

胰腺癌组织中细胞凋亡及相关基因bcl-2和bax表达的研究

为了探讨细胞凋亡及相关基因ｂａｘ和ｂｃｌ 2表达在胰腺癌形成和发展中的作用 ,我们对 31例胰腺癌和 14例慢性胰腺炎组织中细胞凋亡情况及ｂａｘ和ｂｃｌ 2基因表达产物进行检测 ,现报告如下。资料与方法1.一般资料 :收集 1990年 1月至 1998年 7月手术切除的胰腺癌标本 31例 ,其中男 2 1例 ,女 10例 ,平均年龄 5 4岁。其中高分化腺癌 15例 ,中度分化腺癌 6例 ,低分化腺癌 9例 ,未分化腺癌 1例。按ＴＮＭ进行临床分期 ,Ⅰ期 5例 ,Ⅱ期6例 ,Ⅲ期 11例 ,Ⅳ期 9例。选取同期 14例慢性胰腺炎标本作对照研究。2 .染色方法 :检测细胞凋亡采用ＩＳ…     

胰腺癌细胞系ASPC-1凋亡过程中bcl-2和bcl-xL的表达

本研究旨在探讨ｂｃｌ 2和ｂｃｌ ｘＬ 在干扰素 (ＩＦＮ) γ诱导的胰腺癌细胞系ＡＳＰＣ 1细胞凋亡过程中的表达情况。一、材料与方法ＡＳＰＣ 1细胞系于含体积分数为10 %胎牛血清ＤＭＥＭ培养基中传代培养。将细胞浓度调整至 1× 10 9个 /Ｌ ,无血清培养 2 4ｈ。向培养基内加入ＩＦＮ γ(终浓度 1× 10 6Ｕ/Ｌ)。继续培养 ,分别于 6、12和 2 4ｈ收集细胞进行检测。以不加ＩＦＮ γ的培养皿为对照组。收集的细胞洗涤后用荧光染料碘化丙啶 (ＰＩ)染色 ,然后进行流式细胞分析。细胞凋亡数量以凋亡细胞的百分数表示。ｂｃｌ 2和ｂｃｌ ｘＬ …     

Survivin基因在胰腺癌组织中的表达及与bcl-2和p53蛋白表达的关系

目的探讨Survivin基因在胰腺癌中的表达及与bcl 2、p5 3蛋白表达的相互关系。方法用RT PCR法检测 4 9例胰腺癌、5例慢性胰腺炎和 12例正常胰腺组织中SurvivinmRNA的表达 ,免疫组织化学法检测胰腺癌中bcl 2、p5 3蛋白表达。结果SurvivinmRNA在胰腺癌中表达率为76 % ,在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中不表达 (P <0 0 5 )。Survivin基因表达与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性 (P >0 0 5 )。Survivin基因表达与bcl 2蛋白表达不相关 ,与p5 3蛋白表达显著相关。结论Survivin基因在胰腺癌中过度表达 ,提示该基因对胰腺癌发生和发展起重要作用 ;抑癌基因p5 3的失活与Survivin基因的表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用。     

肾细胞癌中bcl-2、p53、增殖细胞核抗原表达与细胞增殖和凋亡

目的 探讨肾细胞癌(RCC)中bcl—2、p53、增殖细胞核抗原(PCNA)表达与细胞增殖、凋亡及病理参数之间的关系。方法 应用链霉亲和素辣根过氧化物酶(SABC)法分析34例RCC标本中bcl—2、p53和PCNA蛋白的表达，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷苦(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果 34例RCC标本中，15(44．1％)例bcl-2阳性表达，表达阳性率与增殖指数(PI)、凋亡指数(AI）及RCC病理学参数无关；仅有3例p53表达阳性；PI为6．0％--24．0％(平均为12．3％)，AI为2．0％--8．0％(平均为5．4％)；PI与肿瘤分级、分期密切关系，AI与肿瘤分级有明显关系。结论 明显增高的PI和AI与肿瘤恶性表型有关，提示在RCC中肿瘤细胞过度增殖伴有频繁的凋亡发生。     

大肠癌bcl-2和p53基因表达对预后评估的意义

我们采用免疫组化法对大肠癌组织中bcl 2和p5 3的异常表达进行研究 ,探讨其与预后意义。1.资料与方法 :结直肠癌根治切除标本 93例 ,按全国大肠癌病理研究规范分类及Dukes分期[1] 。所有病例均随访5年以上或直至死亡。标本取材后经10 %甲醛固定 ,石蜡包埋 ,4 μm连续切片 ,分别作HE染色、bcl 2和p5 3的免疫组化染色。方法采用链霉素 生物素(SP)免疫组化法 ,一抗及SP试剂盒为美国ZYMED公司产品。p5 3和bcl 2蛋白阳性反应为黄到棕黄色细颗粒 ,p5 3定位于细胞核内 (图 1)。p5 3阳性细胞数超过观察细胞数的 5 %为阳性 ,≤ 5 %为阴性。bcl 2…     

胰腺癌中bcl-2的表达与细胞凋亡及癌基因c-myc表达的关系

目的：探讨人胰腺癌中bcl-2的变化情况与细胞凋亡及c-myc表达的关系。方法：采用免疫组织化学（SP法）和分子原位杂交法检测bcl-2及c-myc在胰腺癌病人癌组织（50例）和胰腺癌转移灶组织（15例）中的表达。采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果：细胞凋亡的变化规律与胰腺癌的发生发展和临床病理特征有着内在联系。在mRNA和蛋白水平上bcl-2基因和c-myc基因分布一致。bcl-2蛋白的表达影响胰腺癌中细胞凋亡,并与c-myc蛋白在胰腺癌和胰腺癌转移灶组中的表达协同关系。结论：bcl-2和c-myc基因在胰腺癌发生和发展过程中发挥着重要作用。     

H_2O_2诱导肝细胞凋亡时p53、bcl-2mRNA的表达及其意义

目的　探讨H2 O2 诱导人类正常肝细胞系 (L0 2细胞 )凋亡时p5 3、bcl 2mRNA表达的意义及丹参有效成分Rxa对其表达的影响。方法　以正常L0 2细胞为对照 (L组 ) ,以 10 μmol/LH2 O2 诱导L0 2细胞凋亡为细胞模型 (LH组 ) ,观察Rxa处理 (LaH组 ,Rxa 2mmol/L)对 p5 3、bcl 2mRNA表达 (原位杂交结合图像分析处理 )的影响。结果　LH组 2～ 6hp5 3mRNA表达随凋亡细胞指数增高而增强 ,6～ 8h表达下降 ;bcl 2mRNA表达弱。相比较LaH组各时限检测点p5 3mRNA表达均低于LH组 ,bcl 2mRNA表达较强 (P <0 .0 1)。结论　Rxa可能通过 p5 3的细胞周期调控、DNA损伤修复作用和bcl 2的抗凋亡作用减轻L0 2细胞过氧化损伤。     

反义bcl-2基因的表达诱导癌细胞凋亡致敏树突状细胞的研究

目的 探讨bcl-2基因与癌细胞的关系,建立反义bcl-2基因的逆转录病毒表达载体诱导癌细胞凋亡致每从人外周血诱导扩增的树突状细胞（DC s)的方法。方法 从正常人外周血分离获得单核细胞,加入50μg/L、1000U/L白细胞介素（IL）－4,隔日1次,共4次,培养第3天,加入反义bcl-2表达诱导凋亡的胆管癌细胞,再继续体外培养4d后,用树突细胞富集柱收集DCs。结果DCs高表达共刺激分子B7和CD1a,表面具有典型不规则突起,反义bcl-2表达诱导癌细胞凋亡形态的凋亡小体被DCs捕捉、吞噬,负载抗原的DCs其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论 反义bcl-2表达诱导癌细胞凋亡可以致敏rhGM-CSF加rhIL-4 从人外周血单核细胞诱导、扩增出的DCs,DCs可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原,可望成为有效的肿瘤抗原致敏DC的新途径。     

SUMO-1对p53基因诱导HepG2细胞凋亡的增强作用

目的研究小分子泛素样修饰体1(smallubiquitin likemodifier1,SUMO1)在野生型p53基因诱导HepG2细胞凋亡中的作用。方法用含人野生型p53基因质粒pcDNA3wtp53(pwtp53)、含人双微粒体基因2〔(humandoubleminutegene2(HDM2);鼠同源基因为MDM2〕质粒pCMV HDM1B(pMDM2)、含人SUMO1基因质粒pcDNA3His6SUMO1(pSUMO1)和空质粒pcDNA3分别或同时转染HepG2细胞,获得各转染细胞系,应用Westernblot检测转染后细胞中质粒蛋白的表达及流式细胞技术检测细胞凋亡比例。结果转染pwtp53和pMDM2质粒的HepG2细胞均可见p53及MDM2蛋白条带,同时转染pSUMO1质粒的细胞分别可见被SUMO1修饰的相对分子量较大的p53和MDM2蛋白条带,在未转染任何质粒、仅转染空质粒和pSUMO1质粒的细胞中只检测到少量p53蛋白表达。转染pwtp53及pwtp53+pSUMO1质粒的HepG2细胞凋亡比例分别为(16.79±1.62)%和(18.15±1.36)%,转染pwtp53+pMDM2+pSUMO1质粒的细胞凋亡比例为(14.06±1.84)%,转染pwtp53+pMDM2质粒的细胞凋亡比例则下降至(5.17±1.23)%,与前三者比较差异有显著性意义(P<0.01);其他转染系细胞中的细胞凋亡比例均≤2%,差异无显著性意义。结论SUMO1通过与p53蛋白的结合或翻译后修饰,抑制MDM2等癌基因蛋白对p53蛋白的降解,可增强p53抑癌基因诱导的细胞凋亡。     

喉鳞癌组织中p53和bcl-2的表达及临床意义

目的探讨基因p53与bcl-2在喉鳞癌中的表达及它们的关系,以及它们在喉癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化法测定110例喉鳞癌标本及20例正常黏膜中p53和bcl-2的表达。结果正常黏膜几乎不表达p53及bcl-2,它们在喉鳞癌标本中表达率分别为62.7%和47.3%,p53表达和淋巴结转移情况相关,bcl-2和病理分级、淋巴结转移情况相关;p53和bcl-2表达呈正相关。结论p53和bcl-2关系密切,在喉癌的发生、发展中起重要作用,有望作为早期诊断的指标基因治疗靶点。     

肾癌组织中bcl-2和p53蛋白的表达及临床意义

我们采用免疫组化方法,观测ｂｃｌ2和ｐ53蛋白在肾癌中的表达,以探讨其与预后的关系。材料和方法　1992年1月至1997年2月,113例经手术切除并经组织学诊断的肾癌标本被纳入本实验。年龄32～81岁,平均57.7岁。男性84例,女性29例(2.9:1),平均随访35.3(3～72)个月。免疫组织化学染色采用ＬＳＡＢ方法,微波炉法修复抗原,ｐ53和ｂｃｌ2特异性鼠抗人单克隆抗体(ＤＡＫＯ,ＣｌｏｎｅＤＯ7和Ｃｌｏｎｅ124),1∶200稀释,ＤＡＢ作为发色剂,已知阳性肺癌标本作为阳性对照,非免疫血清替代一抗作为阴性对照。10%或以上的细胞核染色或胞浆染色分别作为ｐ53…     

胰腺癌细胞凋亡相关基因的表达

我们采用免疫组化方法检测ｂｃｌ２、ｐ５３、ｃｍｙｃ等３种细胞凋亡相关基因在胰腺癌、胰腺癌转移组织和胰腺良性病变中的表达,旨在探讨这些基因产物的表达及相互关系。１．材料和方法：本院病理科存档的石蜡标本,取胰腺癌４８例,Ⅰ期１４例,Ⅱ期２０例,Ⅲ期８...     

肾癌组织中细胞凋亡及相关基因bcl-2和bax表达的研究

目的探讨肾癌的发病机制。方法采用原位ＤＮＡ片断末端标记和免疫组织化学方法,检测４８例肾癌组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因ｂｃｌ２和ｂａｘ蛋白的表达。结果４８例肾癌组织中ｂｃｌ２蛋白低表达２２例,凋亡指数（ＡＩ）均值为１３５;高表达２６例,ＡＩ均值为１０４。两组ＡＩ均值间统计学分析差异有显著意义（Ｐ＜００５）。ｂａｘ蛋白低表达３４例,ＡＩ均值为１０３;高表达１４例,ＡＩ均值为１６３。两组ＡＩ均值间统计学分析差异有非常显著意义（Ｐ＜００１）。ｂｃｌ２蛋白表达越强,ｂａｘ蛋白表达越弱,凋亡细胞数就越少。结论ｂｃｌ２和ｂａｘ蛋白均参与了肾癌组织中细胞凋亡的调节,并在肾癌的发生和发展中发挥着重要作用     

肝癌bcl-2基因异常及与p53蛋白表达的关系

为探讨bcl-2和p53基因与肝细胞癌的关系，采用半套式原位聚台酶链反应和免疫组化技术原位检测40例肝细胞癌中bcl-2／JH融合基因、bcl-2蛋白及突变型p53蛋白的表达。结果显示40例肝细胞癌中6例bcl-2蛋白阳性，发生bcl-2基因重排10例，25例p53蛋白阳性，bcl-2蛋白表达与bcl-2／JH融合基因间无相互相对应关系。p53蛋白与bcl-2蛋白表达及bcl-2基因重排间无明显关系。结果说明，bcl-2和p53基因均与肝细胞癌的发生有一定关系。bcl-2／JH融合基因不是引起bcl-2蛋白表达的唯一原因。bcl-2和p53基因在肝细胞癌变过程中无协同作用。     

凋亡抑制基因Sunvivin在非小细胞肺癌中的表达及与p53、bcl-2基因表达的关系

survivin是新近发现的一种凋亡抑制蛋白，其组织分布具有明显的细胞选择性，在正常成人已分化的组织(胸腺、生殖腺除外)不表达，而在多种肿瘤组织中表达，且其表达与预后密切相关^[1，2]。我们采用免疫组织化学(免疫组化)方法检测肺癌组织和病灶旁正常肺组织中survivin蛋白的表达，探讨其与临床病理特征及p53、bcl－2表达的相关性。     

凋亡抑制基因Survivin在非小细胞肺癌中的表达及与p53、bcl-2基因表达的关系

Survivin是新近发现的一种凋亡抑制蛋白 ,其组织分布具有明显的细胞选择性 ,在正常成人已分化的组织 (胸腺、生殖腺除外 )不表达 ,而在多种肿瘤组织中表达 ,且其表达与预后密切相关[1,2 ] 。我们采用免疫组织化学 (免疫组化 )方法检测肺癌组织和病灶旁正常肺组织中Survivin蛋白的表达 ,探讨其与临床病理特征及p5 3、bcl 2表达的相关性。1.资料与方法 :(1)标本来源及检测方法 :肺癌组织标本76份 ,病灶旁正常肺组织标本 30份 ,来源于我科 2 0 0 1年 12月～ 2 0 0 2年 4月行手术治疗的 76例患者 ,其中男 4 8例、女2 8例 ,年龄 37～ 76岁 ,平均…