脱钙骨基质在脊柱融合中的临床应用进展

脊柱融合是脊柱外科中最常用的手术方式之一,在术中选择合适的植骨材料具有十分重要的意义。一种良好的骨移植材料需同时具备骨传导性、骨诱导性和成骨性三大特性。目前,临床上应用最广泛的骨移植材料为同种异体骨,包括新鲜冰冻骨、冻干骨和脱钙骨基质(demineralized bone matrix, DBM)三类,新鲜冰冻骨具有最高的机械稳定性,但存在免疫反应和疾病传播的危险性;冻干骨在其制备过程中,水分的丢失和辐照的电离破坏了其力学性能;DBM是一种由胶原蛋白(主要为Ⅰ型、Ⅳ型)、非胶原蛋白、生长因子、少量磷酸钙和细胞碎片等组成的天然骨移植材料,具有良好的骨诱导性及一定的骨传导性。目前,随着骨移植替代材料研究深入,DBM显示出了相当大的优势,同时在脊柱融合中发挥了重要作用。     

异体冻干脱钙骨基质隆鼻的实验研究及临床应用初步报告

为了研究异体冻干脱钙骨基质在隆鼻术中的应用效果，作者利用正常新鲜四肢骨干皮质骨经脱脂、脱钙、清毒、冷冻干燥等过程，制备成冻干脱钙骨基质。动物实验中观察到将该种材料植于骨膜下和皮下时均有成骨现象，且植于骨膜下的成骨量优于皮下。临床上利用冻干脱钙骨基质进行隆鼻术，将该材料植于鼻骨表面，对１５例受术者中的８例进行了５～１８个月的随访，取得了较满意的效果。作者认为冻干脱钙骨基质有良好的诱导成骨作用，同时该材料易于雕刻修整，不发生排斥反应，能够长期保存，因此作为隆鼻衬垫材料具有可行性     

异体冻干颗粒骨复合骨髓基质干细胞源性成骨细胞体外生物相容性研究

[目的]评价异体冻干颗粒骨体外生物相容性,为其作为骨组织工程支架材料的临床应用提供实验依据。[方法]4周龄SD大鼠,雌雄不限,采用全骨髓贴壁法体外培养骨髓基质干细胞(BMSCs),取生长状态良好的第3代BMSCs行成骨诱导培养并鉴定。制备异体冻干颗粒骨浸提液,将成骨诱导7d的BMSCs加入浸提液作为实验组,未加浸提液的为对照组,培养1、3、5d,采用MTT法检测异体冻干颗粒骨浸提液对细胞增殖的影响。成骨诱导7d的BMSCs按1×106/ml接种于异体冻干颗粒骨上,倒置相差显微镜、扫描电镜观察与其复合培养的细胞在材料上的生长情况;酶消化法消化复合于冻干颗粒骨上的成骨细胞,流式细胞仪检测细胞周期变化。[结果]BMSCs成骨诱导7d,ALP染色示胞浆内可见阳性蓝染颗粒,胞核呈红色。MTT法检测结果显示细胞在浸提液中生长与增殖状态良好,实验组与对照组差异无统计学意义(P0.05);倒置相差显微镜可见颗粒骨表面粘附多数成骨细胞;扫描电镜观察可见细胞在材料表面粘附、伸展并能增殖、分泌产生细胞外基质;流式细胞术检测显示,异体颗粒骨对细胞周期无影响,实验组细胞均为正常2倍体细胞。实验组与对照组差异无统计学意义(P0.05)。[结论]异体冻干颗粒骨无细胞毒性并具有良好的组织细胞相容性,为其临床应用提供了实验依据。     

压缩冲击对骨形成蛋白2基因修饰的组织工程骨的影响

目的观察直接压缩冲击对骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)基因修饰的组织工程骨细胞存活和成骨的影响,以探讨组织工程骨压缩植骨的可行性.方法体外培养扩增犬骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells,MSCs)转染腺病毒介导的人BMP-2(adenovirus mediated human BMP-2,Adv-hBMP-2)基因,与颗粒状的犬异体冻干松质骨复合.复合后4 d进行模拟压缩实验,分别于复合后24 h、4 d,压缩后即刻、1、4 d以扫描电镜观察细胞形态及数量.将单纯冻干骨、未经压缩的Adv-hBMP-2基因修饰的组织工程骨和压缩后4 d的Adv-hBMP 2基因修饰的组织工程骨植入裸鼠背部皮下,于术后6周行组织学观察新骨形成及冻干骨吸收情况.结果复合24 h冻干骨表面细胞展开,部分孔隙可见单层细胞生长;4 d后冻干骨表面细胞复层生长,胶原量多;压缩后即刻,冻干骨与冲击器接触的外表面基本无细胞存在,剖开面可见细胞片状掀起,碎片多;压缩后1 d,冻干骨表面细胞大部分脱落掀起,形成较多的细胞碎片;4 d后细胞数量明显减少,胶原分泌量增多.植入裸鼠背部皮下后,单纯冻干骨新骨形成极少,孔隙内主要为纤维组织,未经压缩的Adv-hBMP-2基因的组织工程骨组可见大量新骨形成,材料中心与周围新骨分布均匀,压缩后的Adv-hBMP-2基因的组织工程骨组新骨量明显减少,且主要在外周.结论体外模拟压缩植骨可明显减少基因修饰的组织工程骨中的细胞存活及体内成骨,但存活细胞的功能仍存在,可适用于压缩植骨重建假体周围骨缺损.     

同种异体骨制备保存研究进展

同种异体骨已成为临床上治疗创伤、肿瘤、感染、骨吸收等原因所致骨缺损移植的重要材料.同种异体骨的制备保存一直是骨移植研究的重点.目前主要有低温、深冻或冻干等保存方法,再经灭菌和消除免疫原性等处理,制备出清洁、无菌、无病毒、保留一定生物活性和生物力学特性的同种异体骨.该文就同种异体骨制备保存的研究进展作一综述.     

不同保存方法对生物衍生骨支架材料细胞相容性的影响

目的了解不同保存方法对生物衍生骨支架材料细胞相容性的影响.方法冻干生物衍生骨用两种不同保存液同等条件4℃冷藏保存3个月,以保存相同时间冻干生物衍生骨为对照.实验分为A组:成骨细胞复合 1号保存液处理材料培养;B组:成骨细胞复合 2号保存液处理材料培养;C组:成骨细胞复合冻干骨培养;D组:单纯成骨细胞培养.以2×106个/ml密度的成骨细胞悬液复合材料培养1、3、5和7天.用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附和生长情况、检测细胞活力、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及流式细胞仪分析细胞周期.结果成骨细胞与三种不同方法保存的材料均可黏附,并在材料孔隙内生长、分化和增殖.复合培养1和3天,各组间无显著差异;复合培养5和7天,黏附于材料的细胞活力大小依次为 A组>C组>B组 (P＜0.01,P＜0.05).复合培养7天,黏附于材料的细胞ALP活性大小依次为 A组>C组>B组(P＜0.01) .各组细胞周期未见明显变化,未见异倍体细胞.结论选择适宜的保存液对生物衍生骨支架材料的细胞相容性有一定优化作用.     

骨缺损修复材料的研究进展

在骨缺损修复治疗中,需要植入骨支架材料以恢复损伤处相应的组织结构.目前,用于骨缺损的修复材料主要有自体骨、同种异体骨、金属材料、生物陶瓷、高分子材料及各种复合材料.不同材料在骨修复中均展示出强大的重建能力,然而临床中理想的骨植入物依然较少,水平参差不齐,除自体骨外,其他材料用于骨缺损修复中尚无法同时具备良好的生物相容性...     

冻干骨和PLGA材料表面软骨细胞增殖的形态学观察比较

目的了解两种材料表面软骨细胞的增殖特性预测形成组织工程化关节软骨的可能性。方法获取幼兔关节软骨细胞,种植于两种材料表面,培养观察细胞生长情况。结果冻干骨和聚羟基乙酸聚乳酸共聚物(PLGA)材料表面细胞均有粘附增殖及基质分泌,但后者明显优于前者。结论冻干骨表面粘合PLGA材料种植软骨细胞有可能形成组织工程化关节软骨。     

脱钙冻干异体骨移植对骨缺损的修复作用

目的应用脱钙冻干异体骨（DFDBA）修复骨缺损，解决种植区的骨量不足问题。方法在种植外科中，将脱钙冻干异体骨用于19例种植区骨缺损患者，观察种植体动度、牙齿指数（GI）及x线改变等临床指标，评价其临床应用效果。结果19例植骨手术均获成功，无一例种植体周围炎发生，种植体初期稳定性良好。结论脱钙冻干异体骨既有一定的力学支持能力，又有骨诱导作用，且可塑性强。     

生物玻璃生物学性能及其临床应用

生物玻璃是一类性能优良的骨替代修复材料,具有良好的骨传导、骨诱导活性及生物相容性,可在材料与骨组织界面之间形成化学键合,诱导骨修复与再生。生物玻璃复合其他材料,有助于材料性能互补,满足不同临床需要。目前生物玻璃已作为良好的骨修复替代材料应用于临床,并取得了可靠的临床效果。该文就生物玻璃材料表面反应、生物活性和生物相容性、材料复合及临床应用等研究进展作一综述。     

脱钙冻干骨修复种植周骨缺损的扫描电镜观察

目的比较脱钙冻干骨(DFDB)、脱钙冻干骨复合人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)、脱钙冻干骨联合钛膜的骨修复能力。方法 3条犬股骨种植体周形成4 mm×3 mm×3 mm的骨缺损,分别植入上述3种不同材料。术后4、8、12周分期处死动物,取含种植体的骨段进行扫描电镜观察,观察新骨形成情况及其与种植体之间的缝隙。结果 DFDB可单独用于修复种植体周骨缺损,但成骨作用较慢;DFDB+rhBMP-2和DFDB+钛膜能较早诱导新骨形成,加速骨整合过程。结论DFDB是一种较理想的骨修复材料,复合rhBMP-2或与钛膜联用时效果更佳。     

种植体周骨缺损修复的研究

目的 比较脱钙冻干骨(DFDB)、脱钙冻干骨复合人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)、脱钙冻干骨联合钛膜的骨修复能力。方法 3条犬股骨种植体周形成 4 mm×3 mm×3 mm的骨缺损,分别植入上述3种不同材料。术后4、8、12周分期处死动物,取含种植体的骨段进行影象学研究。结果 DFDB可单独用于修复种植体周骨缺损,但成骨作用较慢;DFDB+rhBMP-2能较早诱导新骨形成,加速骨整合过程;DFDB+钛膜成骨作用晚于 DFDB+rhBMP-2,但成骨作用较持久、成骨量大、骨密度高。结论 DFDB是一种较理想的骨修复材料,复合rhBMP-2或与钛膜联用时效果更佳。     

冷冻、冻干、辐照对骨诱导活性的影响

[目的]研究冻干、冷冻、辐照对骨诱导活性的影响。[方法]收取胫骨上段松质骨,加工成大小约0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm的骨块,随机分为五组:新鲜骨组、冷冻组、冻干组、冻干+辐照组以及冷冻+辐照组,用免疫组化法测定骨细胞因子BMP、bFGF、β-TGF含量的变化。[结果]新鲜骨及冷冻骨、冻干骨均有细胞因子表达,但冻干骨表达的程度着色较深,表达阳性的细胞位于骨小梁的表面。辐照后,BMP、bFGF、β-TGF表达减少。[结论]辐照可减少骨的诱导活性,但仍保留部分骨诱导成分。     

不同方法保存生物衍生骨修复节段性桡骨缺损的实验研究

目的　探讨不同方法保存的生物衍生骨修复节段性桡骨缺损的效果。　方法　冻干生物衍生骨用两种不同保存液保存 3个月 ,以保存相同时间的冻干生物衍生骨为对照。选择 6 0只新西兰大白兔 ,制作 15 mm长的双侧桡骨节段性骨缺损模型 ,实验根据植入不同方法保存的材料分为 A、 B和 C组。A组植入 1号保存液处理材料 ,B组植入2号保存液处理材料 ,A、B组再根据材料是否复合成骨细胞培养分为 A1 和 A2 、B1 和 B2 组 ,A1 和 B1 组于动物左侧桡骨缺损区植入组织工程生物衍生骨 ,A2 和 B2 组于右侧植入单纯材料。C组分为 C1 和 C2 组 ,于动物左侧桡骨缺损区植入冻干材料 ,右侧为空白对照。术后 4、8和 16周取材 ,摄 X线片、组织学观察、计算机图像分析和生物力学测定。　结果　术后 4、8和 16周各组骨缺损区均有新骨生成 ,成骨量随时间的推移而增加。经 X线片、组织学和生物力学评估 ,各组的成骨能力依次为 :A1 >A2 >C1 >B1 >B2 >C2 有统计学意义 (P<0 .0 0 1,P<0 .0 5 ) ,其中 A1 组成骨能力最强 ,术后 16周骨缺损完全修复 ,骨髓腔再通 ,生物力学性能接近正常骨。　结论　选择适宜的保存液对生物衍生骨支架材料的骨修复能力有一定的促进作用。     

兔冷冻与脱钙冻干异体骨修复骨缺损的比较

[目的]比较冷冻与脱钙冻干异体骨移植物修复兔桡骨缺损的成骨能力和生物力学特性。[方法]制备冷冻和脱钙冻干异体骨移植物,分别植入各16只新西兰白兔的双侧桡骨中段1.5cm缺损处。于术后2、4、8、12周处死动物,行大体观察、X线及HE染色组织学观察评分,形态计量新生骨量;取静脉血检测BGP;术后12周对移植骨段进行生物力学测试。[结果]移植骨大体形态学观察可见各组移植骨位置良好,术后12周均可与宿主骨形成牢固愈合。术后4周和8周,脱钙冻干组的X线评分、组织学评分及成骨计量均显著优于冷冻组(P0.05),但术后12周两组无显著差别(P0.05)。术后4周和8周,脱钙冻干组血浆BGP水平显著高于冷冻组(P0.05);术后12周两组间差异已无统计学意义(P0.05)。术后12周生物力学测试,脱钙冻干组在三点弯曲试验的最大弯曲力和抗压强度,以及扭转试验的最大扭矩和抗扭强度均显著不及冷冻组(P0.05)。[结论]与冷冻骨相比,脱钙冻干异体骨具有优良的成骨活性,但力学强度下降。     

以生物衍生材料为支架的组织工程骨移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的检测体外构建的组织工程骨移植后兔外周血T细胞亚群的变化，对移植组织进行组织学观察，探讨以生物衍生材料作为骨组织工程支架材料的可行性。方法组织工程骨以兔骨膜来源的成骨细胞为种子细胞，经抗原自消化、部分脱钙、冻干后的异体骨为支架材料于体外构建。将健康新西兰白兔48只制成1cm长桡骨缺损模型后，随机分成A～D4组，每组12只，分别用部分脱钙冻干骨（partial demineralized freeze—dried bone，PDFDB）、组织工程骨、自体骨、同种异体骨植入兔桡骨节段性缺损。术后1、2、4周取材，用流式细胞仪检测4种材料移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化；通过常规组织学检测观察2、4、8、12周时4种材料的成骨作用。结果B组术后2周材料孔隙内有成骨细胞和成软骨细胞，可见骨、软骨混合性新生物形成，周边分布有破骨细胞，部分网架呈蚕食状被破坏吸收。术后4周，形成的新生骨过渡为编织骨。A、B组材料植入后1、2周外周血CD4^＋和CD8^＋T细胞较术前明显升高（P〈0．05）；术后4周CD4^＋T细胞较术前轻度偏高，但无统计学差异（P〉0．05）。C组术后CD4^＋和CD8^＋T细胞升高不明显（P〉0．05）。D组术后1、2、4周外周血CD4^＋和CD8^＋T细胞较术前及其他各组同期均明显增高（P〈.．05）。结论PDFDB为支架材料构建的细胞一材料复合物移植后外周血T淋巴细胞增高，但不影响其良好的修复骨缺损能力，生物衍生骨可作为支架材料应用于骨组织工程研究。     

同种异体骨移植生物学

同种异体骨移植生物学孙磊综述胡蕴玉，宁志杰审校同种异体骨是临床上常用的替代自体骨移植材料，但同种异体骨移植可诱发宿主产生免疫排异反应，且目前临床上多采用经冷冻、冻干或化学处理的同种异体骨，其细胞成份多已坏死，因此同种异体骨移植在与宿主愈合过程中的表现...     

同种异体骨板覆盖预防椎板切除术后硬膜外粘连临床应用

目的探讨同种异体骨板覆盖在预防椎板切除术后硬膜外粘连方面的疗效。方法对58例腰椎间盘突出或腰椎管狭窄患者,行全椎板切除,“H”形同种异体冻干辐照骨板覆盖。观察临床症状及CT、MR I表现。结果术后随访6个月~2.5年,CT、MR I椎管扩大,骨板无倾斜、移位,脊髓无压迫,无排异反应;术后椎管内容物形态良好,骨板两侧已与相邻接触骨组织融合,密度相等。结论同种异体冻干辐照骨板具有良好的生物相容性、生物力学性能和诱导成骨作用,是一种良好的硬膜外覆盖材料,能有效阻止硬膜外粘连,防止椎管术后再狭窄,可用于节段性椎管覆盖成型术。     

丝素蛋白/羟基磷灰石细胞相容性及异位成骨作用

目的 观察两种丝素蛋白/羟基磷灰石(SF/HA)的细胞相容性及异位成骨作用.方法 相差显微镜及扫描电镜观察兔骨髓基质细胞(BMSCs)在两种SF/HA上的生长;测定ALP活性及噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖;材料浸提液的细胞毒性试验.将成骨诱导的兔BMSCs与材料复合培养3 d后植入兔背部肌肉中,进行异位成骨观察.结果 BMSCs在两种材料上能够良好地黏附和增殖,细胞活性及成骨性能不受材料影响,与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);材料浸提液对细胞生长无毒性作用.异位成骨实验组随时间延长,新骨生成量增多;对照组则均无新骨形成.结论 两种丝素蛋白/羟基磷灰石具有良好的细胞相容性,构建的组织工程化骨具有良好的异位成骨作用.     

脊柱结核前路病灶清除支撑植骨材料选择的现状

骨与关节结核最好发于脊柱,目前治疗脊柱结核主要采用经前路病灶清除支撑植骨内固定术.自体骨目前仍是脊柱结核患者前路重建材料选择的"金标准",同种异体骨、人工骨以及钛网、生物材料等人工椎间支撑体也在临床上有着较为广泛的应用,但仍存在着各自的不足,目前尚不能完全取代自体骨.内固定方面,前方内同定由于可以提供良好的前路支撑,已...