雌鼠全氟辛烷磺酸暴露对仔鼠DNA甲基化影响

目的 探讨大鼠出生前暴露于全氟辛烷磺酸(PFOS)对其出生后肝脏可能发生的DNA甲基化修饰程度的改变。方法 在雌性SD大鼠受孕后2~21 d,给予不同剂量PFOS[0(对照),0.1,0.6,2.0 mg/kg]灌胃染毒,子鼠出生后21 d,收集肝脏,用总甲基化检测试剂盒进行DNA总甲基化水平检测,并用亚硫酸氢钠处理后测序法(BSP)产物纯化结合质粒克隆后测序法检测LINE-1的甲基化状态,以及用AP-PCR方法评估胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)岛的甲基化状态。结果 总甲基化水平在高剂量组明显降低(P<0.05),均值为对照组的(90.8±4.7)%;测序显示LINE-1的甲基化水平各组间差异无统计学意义(P>0.05);各剂量组CpG岛甲基化水平均与对照组有明显差异(P<0.05);DNA甲基转移酶(DNMT)DNMT 3 a在高剂量组表达明显升高。结论 总甲基化与出生前PFOS暴露水平相关,CpG岛甲基化状态也与出生前PFOS暴露水平相关。     

辐射诱发胸腺淋巴瘤c-mye基因启动子甲基化检测

目的 研究辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤c-mcy基因启动子CpG岛甲基化状态和mPNA表达的变化.方法 X射线照射BALB/c小鼠建立胸腺淋巴瘤模型,采用硫化测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BCP)法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测c-myc基因启动子CpG岛甲基化状态和mRNA的表达.结果 辐射诱发胸腺淋巴瘤c-myc基因启动子CpG岛与正常胸腺组织比较呈去甲基化状态,RT-PCR检测结果显示,胸腺淋巴瘤c-myc基因mPNA相对表达量(1.12±0.99)明显高于正常胸腺组织(0.89±0.08),2组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 c-myc基因启动子去甲基化可能与辐射诱发胸腺淋巴瘤密切有关.     

维吾尔族妇女子宫颈鳞癌MGMT基因甲基化检测

目的 检测O⁶-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子区甲基化与维吾尔族子宫颈鳞癌之间的相关性.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)对41例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织及32名正常维吾尔族妇女子宫颈组织进行甲基化检测.结果 32名正常子宫颈组织MGMT基因启动子区均未发生甲基化,为非甲基化状态;41例子宫颈鳞癌组织中共有13例发生MGMT基因启动子区甲基化(32%).结论 MGMT基因启动子区甲基化可能部分参与维吾尔族妇女子宫颈癌的发生发展过程,是维吾尔族子宫颈鳞癌发生过程中常见的分子事件,有可能作为维吾尔族妇女子宫颈癌诊断的肿瘤标志物.     

肝癌患者血浆RASSF1A及p16基因异常甲基化检测

目的探讨血浆RASSF1A基因(Ras association domain family 1 gene)和p16基因的启动子区异常甲基化与原发性肝癌关系。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法,对100例原发性肝癌(HCC)患者、30例乙肝患者、30例肝硬化患者和30名健康体检者血浆中RASSF1A和p16基因的启动子区异常甲基化状况进行检测。结果HCC患者血浆RASSF1A和p16基因异常甲基化检出率分别为38.0%(38/100)和65.0%(65/100),而乙肝患者、肝硬化患者和健康体检者均未检出,与HCC组比较,差异均有统计学意义(P=0.000);Logistic回归分析发现,患者年龄、性别、血浆甲胎蛋白(AFP)、HBsAg、p16基因(RASSF1A基因)甲基化状况等与血浆中RASSF1A基因(p16基因)异常甲基化检测结果无关(P>>0.05)。结论原发性肝癌患者血浆DNA中可检测到RASSF1A基因和p16基因的甲基化;RASSF1A基因和p16基因的甲基化检测对肝癌筛查有重要意义。     

5-氮杂胞苷对DKK3去甲基化及对SGC7901胃癌细胞增殖的影响

目的 研究5-氮杂胞苷对SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子去甲基化对细胞增殖及凋亡的影响。 方法 采用5-氮杂胞苷处理SGC7901胃癌细胞,以未行5-氮杂胞苷处理的SGC7901胃癌细胞为对照,比较DKK3基因启动子甲基化改变及细胞增殖曲线、细胞增殖及凋亡的差异。 结果 SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子在5-氮杂胞苷作用前呈甲基化状态,作用后呈未甲基化状态,表明5-氮杂胞苷对SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子具有去甲基化作用。5-氮杂胞苷作用后的SGC7901胃癌细胞G₀/G₁期比例、PI和凋亡率均显著高于作用前SGC7901胃癌细胞(均P<0.05),S期和G₂/M期显著低于作用前SGC7901胃癌细胞(均P<0.05)。 结论 DKK3基因可能具有抑癌基因作用,5-氮杂胞苷对SGC7901胃癌细胞DKK3基因启动子的去甲基化可促进细胞凋亡并抑制其增殖。     

NPR1基因启动子区甲基化水平与中国北方汉族孤独症谱系障碍的相关性研究

目的 检测北方汉族孤独症谱系障碍(ASD)患儿NPR1基因启动子区的甲基化水平,并探讨其与ASD的相关性。方法 应用焦磷酸测序法检测9对同卵双生ASD样本、30例ASD患儿和30例正常儿童在NPR1基因启动子区2个位点(Chr.1:153652122,Chr.1:153652129)的甲基化水平,并分析其与ASD患儿社交反应量表(SRS)评分之间的相关性。结果 2对同卵双生非共患同胞间在2个检测位点的甲基化水平差异均高于界限值,且ASD病例和对照间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,ASD患儿的甲基化水平与SRS量表中“孤独症行为方式”评分呈正相关(P<0.05)。结论 ASD患儿在NPR1基因启动子区的甲基化水平存在异常,且这种异常的甲基化水平与ASD的行为方式相关。     

维吾尔族宫颈鳞癌C/EBPα基因甲基化意义

目的 探讨维吾尔族宫颈鳞癌C/EBPα基因(CCAAT/enhancer-binding proteinαgene)启动子区甲基化的意义.方法 收集19例维吾尔族宫颈鳞癌组织和17例宫颈正常组织,提取基因组DNA,用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MALDI-TOF)检测C/EBPα基因启动子区CpG岛甲基化状态.结果(1)C/EBPα基因启动子区CpG岛甲基化程度在19例维吾尔族宫颈鳞癌病例组与17例对照组中各为(0.137 1±0.088 36)与(0.115 6±0.087 28),差异有统计学意义(Z=-2.840,P=0.005);(2)维吾尔族宫颈鳞癌病例组C/EBPα基因启动子区CpG₁、CpG₅和CpG₁4.15甲基化程度各为(0.095 9±0.053 16)、(0.072 1±0.025 07)和(0.261 3±0.050 83),明显高于对照组的(0.068 1±0.076 09)、(0.044 7±0.026 25)和(0.191 7±0.070 69),差异有统计学意义(P<0.05);(3)患者年龄、高危型人类乳头瘤病毒16(HPV16)感染与C/EBPα基因启动子区CpG岛高甲基化状态无关(P>0.05).结论 C/EBPα基因启动子区CpG岛、尤其是CpG₁、CpG₅和CpG₁4.15的高甲基化状态可能导致该基因沉默,从而促进维吾尔族宫颈鳞癌的发生发展.     

甲基化寡核苷酸灭活DKK3基因对肝癌细胞增殖的影响

目的 研究甲基化寡核苷酸灭活Dickkopf相关蛋白3(Dickkopf-related protein 3,DKK3)基因对HepG2肝癌细胞增殖的影响。 方法 采用甲基化特异性PCR法检测肝癌细胞DKK3基因启动子甲基化状态。将寡核苷酸(分别为MON组、UMON组、CON1组和CON2组)转染HepG2肝癌细胞,比较转染后DKK3基因启动子甲基化状态、细胞增殖和凋亡的差异。 结果 HepG2肝癌细胞DKK3基因启动子未检测到甲基化,Hep3B、SMMC-7721和HuH-7肝癌细胞DKK3基因启动子处于甲基化状态。MON可成功诱导其互补序列CG位点产生甲基化,而UMON、CON1和CON2寡核苷酸无法诱导甲基化。UMON组、CON1组和CON2组HepG2肝癌细胞在D0-D6吸光度、G₀/G₁期、S期、G₂/M期、增殖指数(proliferation index,PI)和凋亡率方面差异均无统计学意义(均P>0.05);MON组HepG2肝癌细胞G₀/G₁期比例和凋亡率均显著低于UMON组、CON1组和CON2组(均P<0.05),而D1-D6吸光度、S期、G₂/M期和PI均显著高于UMON组、CON1组和CON2组。 结论 甲基化寡核苷酸可成功诱导DKK3基因甲基化,导致HepG2肝癌细胞细胞增殖增加而凋亡下降。     

食管癌高发区LINE-1甲基化与食管癌临床特征的关系

目的  探讨长散在重复序列(long interspersed nucleotide element-1,LINE-1)启动子区DNA甲基化水平与食管癌发生的关系。 方法  采用甲基化特异性上述聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和焦磷酸测序法检测96例食管癌组织、癌旁组织和远癌组织标本中LINE-1基因甲基化水平,并用统计学方法分析LINE-1甲基化与食管癌临床特征及吸烟等生活习惯的关系。 结果  96例癌组织、癌旁组织和远癌组织中LINE-1甲基化水平差异均无统计学意义(均有P>0.05)。LINE-1启动子区甲基化与食管癌患者的年龄、饮酒、家族史、病理组织类型、肿瘤部位及临床病理分期之间差异均无统计学意义(均有P>0.05);与患者性别、吸烟和分化程度之间差异均有统计学意义(均有P < 0.05)。 结论  LINE-1启动子区甲基化在食管癌患者中较为普遍,LINE-1启动子区低甲基化常发生于食管癌低分化组织和TNM晚期,LINE-1基因甲基化有潜力在食管癌诊断和预后监测方面发挥重要作用。     

孤独症谱系障碍儿童外周血ENO2基因甲基化修饰水平的研究

目的 探讨孤独症谱系障碍(ASD)儿童外周血ENO2基因甲基化修饰的水平,为ASD的早期筛查提供理论依据。方法 2018年1-12月在上海市儿童医院儿童保健科收集5对性别和年龄分别匹配的ASD儿童和正常对照儿童的外周血,应用Medip-chip甲基化芯片分析,发现ASD儿童外周血均存在ENO2基因的高甲基化改变,本研究在此基础上进一步扩大样本至101对ASD与正常对照儿童,应用亚硫酸盐变性测序检测ENO2基因甲基化水平,并应用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法分别在mRNA和蛋白水平检测ENO2基因的表达。结果 与正常对照组儿童相比,ASD儿童中有16例外周血ENO2基因具有高甲基化改变,频率为15.8%(16/101)。对ENO2基因启动子16个CpG位点甲基化频率进行统计,发现越靠近转录的起始位点,甲基化的频率越高。在16例具有ENO2基因高甲基化改变的ASD儿童中,ENO2基因mRNA的平均水平约为正常对照组的30%。16例高甲基化的ASD儿童ENO2蛋白值为(15.15±3.52)μg/L,约为正常对照组儿童[(33.78±8.18) μg/L]的一半。结论 15.8%的ASD儿童外周血存在ENO2基因的高甲基化改变,ENO2表达的降低有可能成为一部分ASD筛查的标记物。     

婴儿胆汁淤积性肝病的治疗进展

  目的  探讨茵陈五苓散对胆汁淤积幼龄大鼠肝功能的保护作用及可能机制。  方法  幼龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、熊去氧胆酸组（UDCA, 0.10 g/kg）、茵陈五苓散高、中、低剂量组（100.0、200.0、400.0 g/kg）,每组12只,雌雄各半。给药6 d后,采用0.5 % α – 萘异硫氰酸酯（ANIT, 50 mg/kg）花生油溶液灌胃,建立胆汁淤积模型。造模后继续给药2 d,最后一次给药12 h后,收集大鼠胆汁,生化法检测血清碱性磷酸酶（ALP）、γ – 谷氨酰转移酶（γ-GT）、总胆汁酸（TBA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平和肝匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平;苏木精 – 伊红染色（HE）观察各组大鼠肝组织病理变化;Western blot检测肝组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、还原型辅酶/醌氧化还原酶（NQO1）和血红素加氧酶1（HO-1）蛋白表达。  结果  与对照组比较,模型组大鼠血清ALP、γ-GT、TBA、ALT、AST水平均显著升高（P < 0.05）;胆汁流量、肝组织中SOD、CAT、GSH-Px水平显著降低,MDA水平明显增加（P < 0.05）;肝细胞索排列紊乱,细胞肿大伴点状坏死,有空泡样改变,大量炎性细胞浸润;肝组织Keap1蛋白表达显著升高,Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达显著降低（P < 0.05）。与模型组比较,UDCA组、茵陈五苓散高、中剂量组大鼠血清ALP、γ-GT、TBA、ALT、AST水平均显著降低（P < 0.05）;胆汁流量、肝匀浆中SOD、CAT、GSH-Px水平均显著升高,MDA水平明显降低（P < 0.05）;肝组织病理损伤减轻,Keap1蛋白表达明显降低,Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达明显升高（P < 0.05）。  结论  茵陈五苓散对ANIT诱导幼龄大鼠胆汁淤积型肝损伤具有保护作用,其机制可能与抑制Keap1表达,上调Nrf2表达,提高机体的抗氧化能力,减轻氧化应激损伤有关。     

围产期PFOS暴露对幼鼠海马BDNF/TrkB/CREB信号通路影响

目的 探讨观察母孕鼠围产期全氟辛烷磺酸盐(perfluorooctane sulphonate,PFOS)暴露对幼鼠海马组织BDNF/TrkB/CREB信号通路关键基因表达的影响。 方法 20只昆明种雌性小鼠随机分为对照组和低、中、高剂量组,从孕鼠怀孕第2 d开始(gestation day2, GD2)到幼鼠出生后21 d(postnatal day21,PND21)分别给予低、中、高剂量组孕鼠PFOS剂量为 0.1、1.0、5.0 mg/(kg·bw)灌胃染毒,对照组给予等体积的0.05% Tween-20水溶液。灌胃量为0.1 ml/10 (g·bw)。PND 21 d处死幼鼠,收集脑组织,分离海马及皮层。HE染色观察脑组织常规病理改变,实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,QPCR)检测海马组织中BDNF、TrkB、CREB、Syn1及Syp的mRNA表达水平。 结果 与对照组相比较,低、中、高三个剂量组对幼鼠的死亡率和体质量的影响差异无统计学意义(P>0.05)。但是在高剂量组幼鼠海马组织出现空泡,海马BDNF、TrkB、CREB mRNA水平显著降低,分别由对照组的(0.98±0.11)、(1.03±0.09)、(1.08±0.12)下降到(0.22±0.21)、(0.71±0.14)、(0.37±0.26),并在中、高剂量组引起了幼鼠突触相关蛋白Syn1和Spy的mRNA水平显著降低,分别由对照组的(1.10±0.09)、(0.97±0.08)下降到中剂量的(0.41±0.23)、(0.71±0.17)和高剂量的(0.39±0.19)、(0.63±0.19),差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 PFOS损伤海马BDNF/TrkB/CREB信号通路可能是PFOS神经发育毒性之一。     

TCDD暴露对小鼠在位子宫内膜hMLH1表达的影响及其甲基化程度的研究

目的 探讨自胚胎期至成年期氯代二恶英(TCDD)暴露后小鼠子宫内膜组织、hMLH1的表达及错配修复基因1(hMLH-1)基因启动子区CpG岛甲基化程度.方法 选60只C57BL/6雌性小鼠以2:1与30只C3H雄性小鼠随机合笼交配,见到阴道栓为受孕当日,60只已孕母鼠于受孕第8天(胎儿期)以鼻饲法暴露TCDD,且被随机分为对照组(TCDD:0μg/kg)及实验组(TCDD:3μg /kg),实验组所产雌性子鼠于出生后21天(青春期)再次分别暴露TCDD,每组均选12只雌性子鼠(体重6.40±0.20g),依据暴露剂量分为A组:0μg/kg,B组:3μg/kg,C组:10μg /kg.实验各组于出生后49天(成年期)再次暴露TCDD(3μg/kg),出生后70天再次给予TCDD 3μg/kg同时行子宫内膜移植术构建小鼠子宫内膜异位症模型,术后3、6、9周各组再次追加暴露TCDD(3μg/kg),术后12周脱臼处死雌性子鼠.免疫组化SP法检测在位内膜组织中hMLH1的表达.甲基化特异性PCR(MSP)方法检测各组hMLH1基因启动子区CpG岛的甲基化程度.结果 hMLH1在对照组中的表达与A组相比无显著性差异 (t=0.561,P>0.05),但其他各组间两两比较有显著性差异,其中A组表达高于B组(t=3.056,P<0.05),B组表达高于C组(t=2.228,P<0.05).各组hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化程度比较:对照组与A组比较无显著性差异(χ2=1.339,P>0.05),其他各组间两两比较有显著性差异,其中A组低于B组(χ2=4.444,P<0.05),而 B组低于C组(χ2=6.316,P<0.05).结论 自胚胎期至成年期持续暴露TCDD有可能使hMLH1基因启动子区CpG岛发生超甲基化改变,导致hMLH1在组织中表达下降,从而影响成熟期子宫内膜的错配修复基因的功能,这些可能促进了成年期子宫内膜异位症的发生与发展.     

Reproductive and developmental toxicity and bioconcentration of perfluorooctanesulfonate in a partial life-cycle test with the fathead minnow (Pimephales promelas)

Perfluorooctanesulfonate (PFOS) is a widespread environmental contaminant emanating from the production and/or metabolism of fluorinated chemicals with a variety of applications. The goal of this work was to assess the toxicity and bioconcentration of PFOS in the fathead minnow (Pimephales promelas). Sexually mature fish were exposed via the water for 21 d to 0 (control), 0.03, 0.1, 0.3, or 1 mg PFOS/L, and effects on reproductive capacity and endocrinology were assessed. To determine possible developmental effects, a subset of embryos from parental exposures at each test concentration were held for an additional 24 d in the same PFOS treatments. A concentration of I mg PFOS/L was lethal to adults within two weeks. The 21-d 50% effect concentration (95% confidence interval) for effects on fecundity of the fish was 0.23 (0.19-0.25) mg PFOS/L. Exposure to PFOS caused various histopathological alterations, most prominently in ovaries of adult females. Adult males exposed to 0.3 mg PFOS/L for 21 d exhibited decreased aromatase activity and elevated concentrations of plasma 11-ketotestosterone and testosterone. No significant adverse effects on survival or growth were observed in developing fathead minnows held for 24 d at PFOS concentrations up to 0.3 mg/L. Adult fathead minnows readily accumulated PFOS from the water. The largest concentrations of PFOS were in blood, followed by liver and then gonad; for all tissues, females accumulated higher concentrations than males. Water and tissue concentrations of PFOS associated with effects in this study exceeded those reported for samples collected from the field by two to three orders of magnitude, suggesting that the current risk of PFOS on aspects of fish reproduction and development assessed in this study would be small.     

Low lead exposure during foetal and early postnatal life impairs passive avoidance learning in adulthood in rats

This follow-up study investigated the effects of low-level lead exposure during prenatal and early postnatal period on learning and memory in rats immediately after exposure has ceased at weaning and later in their adulthood. Male Wistar-derived rats were exposed to lead (as 0.2 % lead acetate solution) through their mothers during pregnancy and lactation until they were weaned. Mothers of control rats were given tap water during pregnancy and lactation. All pups were weaned on tap water at 21 days of age and were followed up until 120 days old. Low-level lead exposure did not affect their body weight at any time during the experiment. Blood lead in the exposed rats was significantly higher on postnatal day 22 and dropped to control values by day 120. Passive avoidance test showed impaired memory retention in the exposed rats on postnatal days 25 and 120. This suggests that exposure to low-lead levels during foetal and early postnatal development of brain tissue can cause memory impairment that lasts into adulthood.     

铅对仔鼠脑Brn-3a蛋白及神经丝蛋白表达影响

目的 探讨铅对中枢神经系统神经细胞内转录因子Brn-3a及神经丝蛋白(NF)表达的影响。方法 雌性大鼠在围产期经饮水染醋酸铅(对照组蒸馏水、低0.5,中1.0,高2.0g/L染毒后,取其21d龄仔鼠脑组织,采用免疫组织化学方法对Brn-3a蛋白及神经丝蛋白进行检测,以了解其表达水平。结果 免疫组织化学图像分析表明,各染铅组脑组织皮层、海马及小脑的Brn-3a蛋白表达的阳性面积比[Aa(%)]、平均灰度与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖关系。染铅组Brn-3a蛋白表达低于对照组。与对照组比较,低铅组、中铅组NF蛋白阳性细胞无明显改变,而高铅组大脑皮层、海马和小脑NF蛋白阳性细胞普遍数量减少,着色变浅,神经丝蛋白表达减少。结论 在染铅后,大鼠脑组织Brn-3a和NF蛋白表达水平有所下降,提示铅干扰了Brn-3a蛋白的正常表达模式,Brn-3a作为转录调节因子进而影响下游NF蛋白的正常表达。     

叶酸和维生素B12对宫内生长受限大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶表达的影响

目的 探讨母鼠哺乳期补充叶酸和维生素B12对宫内生长受限(IUGR)仔鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶的蛋白激酶B(PI3K/AKT)胰岛素信号通路中关键分子磷脂酰肌醇3激酶( PI3K)表达的影响,并分析PI3K分子表达的改变与胰岛素抵抗的关系。方法 1)采用孕中晚期低蛋白及限制饮食的方法建立IUGR大鼠模型,将新生IUGR仔鼠随机分为IUGR干预组和IUGR未干预组,其中IUGR干预组的哺乳期母鼠饲以高叶酸和维生素B12的饲料(叶酸和维生素B12含量比普通饲料提高4倍),IUGR未干预组和对照组的哺乳期母鼠饲以正常标准饲料。三组仔鼠均于生后21 d断奶,饲以正常标准饲料至生后120 d。2)测定对照组、IUGR未干预组及IUGR干预组(每组各8只,雌雄各半)在生后21、60 d及120 d空腹血浆血糖(FPG)、空腹血清胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(IRI)。3)在生后21、60 d和120 d分别留取3组仔鼠的骨骼肌组织,采用Real-Time PCR和Western Blotting法检测三组仔鼠骨骼肌组织中PI3K mRNA和蛋白表达情况。结果 1)低蛋白组仔鼠平均出生体重[(4.44±0.58)g]低于对照组[(7.03±0.56) g],差异有统计学意义(t=15.75,P<0.05),低蛋白组仔鼠中IUGR发生率为93.3%。2)生后21 d,三组仔鼠FPG、FINS和IRI差异均无统计学意义(P>0.05);生后60 d和120 d,IUGR干预组仔鼠的FPG、FINS和IRI均显著低于IUGR未干预组,但均高于对照组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。3)生后21 d、60 d和120 d,三组仔鼠PI3K mRNA和蛋白表达水平均在对照组最高,IUGR干预组次之,IUGR未干预组最低,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。4)生后60 d和120 d,IUGR未干预和干预组仔鼠IRI与PI3K蛋白表达均呈负相关(P值均<0.05)。结论 母鼠哺乳期补充叶酸和维生素B12,影响了IUGR仔鼠骨骼肌PI3K/AKT胰岛素信号通路中关键分子PI3K的蛋白表达,且这些变化与胰岛素抵抗密切相关。     

Feeding pregnant rats a protein-restricted diet persistently alters the methylation of specific cytosines in the hepatic PPAR alpha promoter of the offspring

Induction of an altered phenotype by prenatal under-nutrition involves changes in the epigenetic regulation of specific genes. We investigated the effect of feeding pregnant rats a protein-restricted (PR) diet with different amounts of folic acid on the methylation of individual CpG dinucleotides in the hepatic PPAR alpha promoter in juvenile offspring, and the effect of the maternal PR diet on CpG methylation in adult offspring. Pregnant rats (five per group) were fed 180 g/kg casein (control) or 90 g/kg casein with 1 mg/kg folic acid (PR), or 90 g/kg casein and 5 mg/kg folic acid (PRF). Offspring were killed on postnatal day 34 (five males and females per group) and day 80 (five males per group). Methylation of sixteen CpG dinucleotides in the PPAR alpha promoter was measured by pyrosequencing. Mean PPAR alpha promoter methylation in the PR offspring (4.5 %) was 26 % lower than controls (6.1 %) due to specific reduction at CpG dinucleotides 2 (40 %), 3 (43 %), 4 (33 %) and 16 (48 %) (P < 0.05). There was no significant difference in methylation at these CpG between control and PRF offspring. Methylation of CpG 5 and 8 was higher (47 and 63 %, respectively, P < 0.05) in the PRF offspring than control or PR offspring. The methylation pattern in day 80 PR offspring was comparable to day 34 PR offspring. These data show for the first time that prenatal nutrition induces differential changes to the methylation of individual CpG dinucleotides in juvenile rats which persist in adults.     

PFOS致大鼠肝脏氧化损伤及对脂褐质含量影响

目的探讨全氟辛烷磺酸(Perfluorooctane,sulfonate,PFOS)经口亚慢性染毒致大鼠肝脏氧人损伤及对脂褐质(Lipofuscin,LF)含量的影响。方法24只雄性SD大鼠按体重随机分为4组,各染毒组饮水中PFOS浓度分别为1.7,5.0,15.0 mg/L。连续染毒90 d后,观察大鼠肝脏脏器系数;测定大鼠血清PFOS浓度、肝脏丙二醛(MDA)、LF含量和总抗氧化能力(T-AOC)。结果各染毒组与对照组大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05);各染毒组血清PFOS浓度均显著高于对照值(P<0.05);5.0和15.0 mg/L染毒大鼠肝脏重量分别为(19.5±1.3),(20.4±4.8)g,显著高于对照值(14.2±3.4)g(P<0.05)。肝脏脏器系数分别为(4.20±0.18)%,(4.95±0.56)%,显著高于对照值(3.54±0.41)%(P<0.05)。肝脏MDA含量分别(2.38±0.92),(1.82±0.48)nmol/(mg·prot),显著高于对照值(0.87±0.11)nmol/(mg·prot)(P<0.05)。T-AOC分别为(1.33±0.20),(1.35±0.18)U/(mg·prot),显著高于对照值(1.08±0.17)U/(mg·prot)(P<0.05);15.0 mg/L染毒组大鼠肝脏LF含量为(2.89±0.15)μg/ml,显著高于对照值(2.68±0.09)μg/ml(P<0.05)。结论PFOS可致大鼠肝脏氧化损伤并增加肝脏脂褐质含量。