全自动加样仪混匀参数对质控品检测结果的影响

目的 探讨在酶联免疫吸附试验(ELISA)加样过程中，全自动加样仪对室内质控品进行混匀处理的实验意义。方法 质控品在加样前均进行漩涡震荡混匀，后在相同的检测条件下经STAR全自动加样仪加至同1块酶免板中进行检测，比较质控品在加样针混匀与不混匀情况下S/CO值的差异以及2种情况下质控品检测值的频数分布，受混匀参数影响较大的质控品用同厂家不同批号试剂进行同样的试验并分析结果是否一致。结果 全自动加样仪不对质控品进行混匀处理时，抗-HCV质控品S/CO值明显低于混匀质控品的检测值(P<0.000 1)。部分检测系统所测不混匀抗-TP质控品以及抗-HIV质控品的S/CO值与该项目混匀质控品检测值也有差异(P<0.05)。未经加样针混匀的抗-HCV质控品有部分S/CO值分布在<2的区间。同厂家不同批号试剂分别检测抗-HCV质控品，混匀与不混匀处理的质控品检测值之间均存在差异(部分P<0.05)。结论 尽管加样前质控品均进行漩涡震荡混匀，如果STAR全自动加样仪不设置质控品混匀参数，部分质控品的检测结果依然会受到影响。     

青岛地区291782例无偿献血者艾滋病检测结果分析

目前,国家规定采供血机构对采集的所有血液,使用两种不同厂家ELISA试剂,进行艾滋病抗体初筛检测,以阻断艾滋病的输血传播。笔者对青岛地区2004~2007年的291782份无偿献血者血液的HIV检测结果进行了分析,ELISA实验结果阳性141例,上报确认实验室用确认实验方法确认,8例为阳性,抗体不确定19例,其余114例均为阴性。现分析报告如下:1材料与方法1.1标本来源2004年1月1日~2007年8月30日初复检291782份无偿献血者的标本。1.2检测仪器和试剂Freedom evo200和RSP150全自动加样仪(德国帝肯),FAME2430酶免系统(瑞士)。国产酶免抗-HIV试剂(珠海丽珠)、第四代进口酶免HIV检测试剂(生物梅里埃),WB确认试剂(美国MP生物医学),2NCU抗-HIV室内质控血清购自卫生部临床检验中心。1.3 HIV初筛检测严格按照各厂家提供的试剂说明书进行操作,试剂均经国家生物制品检定所批检合格,并且在试剂的有效期内使用。使用全自动加样仪和全自动酶免系统,用国产酶免抗-HIV试剂(珠海丽珠)和第四代进口酶免HIV检测试剂(生物梅里埃),同时对无偿献血者标本进行两遍抗-HIV检测...     

乳糜血对血液4项传染指标检测结果的影响分析

目的 探讨血液标本中甘油三酯含量及乳糜程度与HBV-Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP ELISA方法检测结果之间的关系.方法 甘油三酯含量不同且不同乳糜程度的血清以3:2比例稀释室内质控标准物质,稀释后甘油三酯含量在(0.87 ～ 10.43) mmoL/L范围内、肉眼观察乳糜程度为无、轻、中、重度的标本分组进行HBV-Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP ELISA方法检测并记录实验结果.结果 实验结果表明,血液标本中甘油三酯含量及乳糜程度对ELISA方法检测HBV-Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的结果无影响(P＞0.05).结论 体检合格的献血者生理现象产生乳糜血不会对血站酶免四项检测造成影响.     

对抗-HCV阳性标本的结果分析

目前血站对抗-HCV检测主要是用ELISA法[1]检测抗-HCV。由于在工作中存在着许多影响ELISA法检测结果的因素,从而经常导致检验结果出现误差。笔者从7860份无偿献血的标本中初检出现-HCV阳性标本86份,对每一份阳性标本用两种不同试剂做双孔复试,结果及分析报告如下:1资料方法1.1标本来源本市无偿献血者。1.2试剂丙肝病毒抗体酶联免疫疫试剂盒厂家:(1)北京万泰;(2)北京金豪。以上试剂均经中国药品生物制品检定所鉴定合格,并在有效期内使用。1.3仪器(1)“AT”全自动加样系统;(2)“FAME”全自动加样系统。1.4方法及操作“ELISA’’法,严格按照试剂操说明书在仪器上编辑工作程序。用“AT”加样器对标本进行加样处理,用“FAME”全自动酶免系统进行试验操作。初检试剂为万泰试剂,复检试剂为金豪试剂。用两种试剂各双孔进行检测。2结果初检:以临界值(CO)为界判定抗-HCV阳性标本86份。复检:以CO值为界值,两种试剂检测,只要有一种检测结果呈阳性反应判为阳性。结果判定阳性标本25份(OD值见附表),阴性标本61份,初筛和复检结果符合率为29.1%。经信反馈,电话随访,25份抗-HCV检测阳性献血...     

献血者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TPELISA检测阳性与确证试验的对比研究

目的评价ELISA两步法用于献血者血液HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP筛检阳性标本与确证试验结果的符合性,探讨确证试验结果用于献血者管理、酶免试剂选择和ELISA灰区范围设置的理论依据。方法 HB-sAg采用电化学发光(ECLIA)中和试验、抗-HCV采用重组免疫印迹试验(RIBA)、抗-HIV采用蛋白质印迹(WB)法、抗-TP采用凝集法(TPPA)确证试验对ELISA两步法检测阳性及灰区标本456份进行检测,将2者结果对比分析。结果 HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP确认阳性率分别为41.18%、38.00%、18.52%和48.82%;抗-HIV、抗-TP灰区(S/CO值0.5～1.0)标本确证试验无阳性,HBsAg灰区(S/CO值0.8～1.0)、抗-HCV灰区(S/CO值0.7～1.0)均有阳性和不确定标本检出。结论为ELISA两步法应用于献血者酶免4项检验效果进行了科学评价,为假阳性献血者检验结果的告知及ELISA灰区设立原则提供了实验依据。     

影响FAME全自动酶免分析系统检测因素探讨

目的　探讨 3种常见的影响全自动酶免分析系统检测结果的因素 ,提高 ELISA法检测结果的准确性。方法　 ( 1 )随机选择对照组和实验组各 44份无偿献血者血样 ,分别进行两种不同方式的抗凝 ,应用 FAME全自动酶免分析系统进行 HBs Ag、抗 -HCV、抗 -HIV、TP4个项目检测 ,比较两组检测结果。 ( 2 )在全自动加样仪的加样高度设置中 ,不断增加加样高度 ,观察 FAME对 4个质控血清平行孔的检测效果。( 3 )在不同温度的 FAME洗液下 ,对 88份正常的无偿献血者血样进行 4个项目检测 ,观察不同温度的洗液对检测结果的影响。结果　 ( 1 )除抗 -HCV外 ,实验组中其他 3项检测结果均有假阳性出现 ,且阴性标本的 S/CO值明显高于对照组 ( P<0 .0 0 1 )。( 2 )当加样高度低于 9.1 mm时 ,抗 -HCV有假阴性出现 ,4项检测的 CV值均较高 ,均一性差。 ( 3 )洗液温度低于 1 4℃时 ,除抗 -HCV外 ,其他 3项检测结果有假阳性出现 ,CV值较高 ,均一性差。结论　标本的抗凝效果、全自动加样仪的加样高度和洗液温度对全自动酶免检测结果均有影响 ,只有在血样充分抗凝、加样高度和洗液温度适当等条件下 ,才能获得准确的检测结果     

全自动酶免分析系统在血站筛选试验中应用的优越性

本中心自 2 0 0 0年起 ,采用全自动酶免分析系统对献血者进行 HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV检测 ,笔者将全自动酶免分析系统在实验过程中的稳定性、灵敏度、可靠性等与手工操作的方法做了分析和比较 ,结果报告如下。1　材料和方法1.1　标本　河南省红十字血液中心 2 0 0 1- 0 6 - 0 8献血者标本712 0份。1.2　仪器　 ML/ AT- plus2自动加样器 ,ML/ FAME全自动酶免分析仪 (瑞士 HAMIL TON)。芬兰 NL EY- MK- 2酶标仪、洗板机及国产恒温水浴箱。1.3　试剂　抗 - HCV、HBs Ag购自上海科华实业有限公司 ,抗 -HIV采用美中强生公…     

成都市136531名无偿献血者血液标本检测结果分析

目的了解本市献血者人群ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV的不合格率,分析所用两种酶免试剂检测的阳性率的差异。方法采用两种试剂检测成都市136 531名无偿献血者的血液标本ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV,对得到的不合格率进行统计学分析。结果本市献血者的5项指标不合格率为HBsAg>抗-HCV>ALT>抗-TP>抗-HIV;HBsAg、抗-HCV和抗-HIV采用两种试剂检出的阳性率差异有统计学意义(P<0.01),抗-TP的差异无统计学意义(P>0.01)。结论在灵敏度达到要求的情况下应尽量选择特异性高的试剂,减少血液浪费。     

献血者抗-HCV及HCV RNA的检测分析

目前,国内采供血机构筛查献血者HCV抗体是采用两种不同试剂进行检测,其中任何一种试剂检测阳性,就淘汰该献血者。为缩短抗HCV检测的“窗口期”,一些发达国家已将HCV核酸检测用于献血者筛选。我国虽未将HCV核酸检测列入献血者的强制筛查项目,但国内一些血站已尝试将HCV核酸检测用于抗HCV阴性的献血者[1]。为进一步探讨献血者抗-HCV及HCVRNA检测状况,笔者对4 912例血液标本进行了酶免疫学及荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,报告如下。1对象和方法1.1对象郑州市无偿献血标本。1.2试剂与仪器HCV PCR荧光定量试剂盒,中山医科大学达安基因诊断中心产;抗-HCV酶免试剂盒,分别购自A、B两家试剂公司;STAR-FAM E自动化酶免分析系统,瑞士H am ilton公司产,PE 570 PCR基因扩增仪,美国PE公司产。1.3方法1.3.1免疫学检测采用自动化酶免分析系统,利用两种酶免试剂检测无偿献血标本,并收集标本,其中两种试剂均阳性标本26份,及一种试剂阳性一种试剂阴性的标本20份,均阴性标本4 866份。1.3.2 HCV核酸检测将两种酶免试剂检测均阴性标本,24份混在一起进行检测[2],其余单份...     

2种核酸筛查系统对血清学阳性献血者检测结果的分析

目的比较2种核酸筛查系统对血清学阳性标本的检测结果,分析不同核酸筛查系统不同核酸试剂降低输血残余风险的情况。方法对2013年8月5日—2013年9月1日共计6 889人(次)无偿献血者的血液标本进行血清学检测,同时平行进行HBV/HCV/HIV的3项联合单标本核酸定性检测(美国诺华核酸检测平台,Procleix Ultrio试剂)。血清学HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV阳性标本用阴性血浆稀释6倍,模拟混合标本(美国罗氏核酸检测平台,cobas Taq Screen MPX试剂)检测核酸。血清学HBs Ag阳性标本完善血清学乙肝5项,同时用另1家公司HBs Ag酶联免疫吸附试剂重复试验;抗-HCV阳性标本应用重组免疫印迹试验(RIBA)确证;抗-HIV阳性标本采用HIV蛋白印迹法确证。分析不同核酸筛查平台使用不同核酸试剂检测血清学阳性献血者的结果。结果酶免阳性标本6倍稀释后,MPX试剂与Ultrio试剂阳性检测一致率100%。2种核酸试剂对HBV DNA检测结果一致性中等(K=0.640),检出率差异有统计学意义(P0.001);对HCV RNA及HIV RNA检测结果一致性非常好(K=1.000)。2种核酸试剂一致检出的HCV RNA反应性样品及HIV RNA反应性标本,确证试验均为阳性。45份HBs Ag阳性标本,Ultrio试剂检测阴性MPX试剂检测阳性标本共有7例,1例HBs Ag酶免S/CO值介于1.0-2.0,6例S/CO值1.8。另1种进口HBs Ag酶联免疫试剂盒检测,7例2种NAT结果不一致标本中6例阳性,1例阴性。其中2名在6个月后复检,酶免及2种核酸检测结果均为阳性。结论 HBs Ag阳性献血者中,MPX试剂HBV DNA检出率高于Ultrio试剂;抗-HCV与抗-HIV阳性献血者中,HCV RNA和HIV RNA检出率MPX试剂与Ultrio试剂差异不显著。血液筛查工作中,核酸检测与血清学检测结果存在不一致,应重视血清学检测试剂与核酸检测方法试剂的选择和质量控制,使二者互补,降低由于核酸检测灵敏度相对较低导致的漏检。     

建立血站检测抗-HCV ELISA试剂参考品方法初探

目的为保证输血安全,血站对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫吸附(EL ISA)试剂除注重特异性外,试剂的灵敏度要求更高,针对血站需求建立一套抗-HCV EL ISA试剂的参考品。方法收集一种或两种的抗-HCV EL ISA试剂检测阳性的血清,以抗-HCV确证试剂结果为准,选取抗-HCV抗体强阳性、非强阳性、单片断阳性血清组合建立阳性参考品,乙型肝炎病毒表面抗原(HB sA g)阳性、溶血、乳糜血及其它单或双抗-HCV EL ISA试剂阴性的标本,经确证试剂为阴性,以一定组合建立阴性参考品,检测试剂的灵敏度和特异性。结果建立参考品包括阳性参考品25份,阴性参考品25份。结论根据自身要求建立一套适合血站自身要求的抗-HCV EL ISA试剂质控品,严把试剂质量关。     

献血者血液样本手工检测与全自动酶免分析系统操作结果比较

目的：献血者血液样本手工检测与全自动酶免分析系统操作结果分析比较。方法：对全自动酶免分析系统测定HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP抗体结果为阳性的样本进行留样。再次分别用全自动酶免分析系统和手工法同种试剂双孔检测，确认结果后进行分析比较。结果：全自动酶免分析系统FAME（24／20）测定结果：HBsAg阳性率99．8％；HCV抗体阳性率99．5％；HIV抗体阳性率100％；TP抗体阳性率98．8％，手工法测定结果HB8鲰阳性率90．8％；抗-HCV阳性率93．1％；抗-HIV阳性率97．3％；TP阳性率92％。全自动酶免分析系统以其高灵敏度和精密度更加适合采供血机构大批量样本的检测。结论：全自动酶免分析系统检测结果符合预期值，避免了手工操作的误差，实验重复性好。但因全自动酶免分析系统灵敏度较高，假阳性出现频率略高于手工法。     

全自动酶免后处理在酶联免疫吸附试验中的应用评价

目的比较全自动酶免后处理分析系统与手工操作法的差异。方法 2013年于湖北省中医院随机收集的人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)阴性血清标本及梅毒螺旋体抗体(抗-TP)阴性血清标本各240份。1套珠海丽珠公司抗-HIV血清盘和1套北京康彻斯坦公司抗-HIV国家标准物质,以及1套珠海丽珠公司抗-TP血清盘和1套北京康彻斯坦公司抗-TP国家标准物质分别使用BEP-3酶免后处理与手工操作平行试验,测定其吸光度值,计算两种方法的变异系数、符合率、特异度,并使用SPSS19.0软件对两种方法相关数据进行比较。结果 0.5NCU/mL抗-HIV标准物质用手工操作和BEP-3酶免后处理试验CV分别为12.5%、7.4%,6mIU/mL抗-TP标准物质用手工操作和BEP-3酶免后处理试验CV分别为13.8%、6.5%,EP-3酶免后处理的CV明显低于手工操作法CV,比较差异有统计学意义(P<0.05);两种方法对抗-HIV、抗-TP血清盘阳性、阴性参考品检测符合率100.0%,两种方法对抗-HIV、抗-TP系列稀释参考品的最低检出率分别为66.7%、77.5%。两种方法对240份阴性标本的特异度均为100.0%。结论 BEP-3酶免后处理与手工操作相比,重复性更好,符合率、特异度一致,可以替代手工操作用于临床常规标本检测。     

97835例献血者传染性指标检测结果的不重合性分析

目的分析和探讨无偿献血者标本中传染性指标的2次ELISA法检测结果不重合的情况,为试剂选择及献血者筛选策略的制定提供依据。方法选取本血站2013年1月~2015年11月97 835例无偿献血者标本,采用ELISA法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV(1+2)和抗-TP四项传染性指标,对2次检测不合格标本中由单试剂检测不合格的结果进行统计分析。结果 97 835例标本中,抗-HIV(1+2)和抗-HCV的不重合率最高,抗-TP的不重合率最低。结论试剂选择应进行筛选与组合,将不同试剂间不重合率的比对纳入试剂筛选的重要指标。     

ORTHO抗-HCV酶联免疫试剂2种孵育试验程序在血液筛查中的比较研究

目的确定1种3代抗-HCV酶免试剂(ORTHO HCV 3.0 ELISA试剂)2种孵育试验过程在血液筛查中是否存在差异。方法随机留取常规献血者血液筛查中检出的抗-HCV反应性的血液标本180(人)份作HCVRNA检测,并用RIBA和不同于血站常规抗-HCV筛查的酶免试剂作抗-HCV复测;依据ORTHO HCV 3.0 ELISA检测试剂说明书中的长、短2种孵育检测程序,同时作对比检测。结果 180份初筛抗-HCV阳性标本中,有16份ORTHO HCV 3.0 ELISA 2种检测程序的检测结果不一致,其中5份为短孵育试验反应性、11份为长孵育试验反应性,短孵育试验漏检2份被确证抗-HCV阳性标本。ORTHO HCV 3.0 ELISA试剂的长孵育检测程序灵敏度高于短孵育试验程序,2种试验程序的S/CO值分布没有差别,但RIBA不确定标本其S/CO值分布在一定的灰区范围内。结论在献血人群血液筛查中,采用具有更高灵敏度的长孵育酶免程序和设定合理的结果判定灰区,有助于预防输血传播HCV,提高血液的安全。     

不同容量规格一次性加样针对抗-HCV酶联免疫吸附实验的影响

目的 评估帝肯Freedom EVO 150全自动加样仪使用1 000与200 μL两种不同容量规格的一次性加样针对抗-HCV酶联免疫吸附实验的影响.方法 选1份抗-HCV弱阳性标本和稀释后血清标准物质作为待检样本,用两种酶免试剂在全自动加样仪上使用不同规格的一次性加样针进行加样检测,并对检测结果进行灵敏度、孔间精密度和符合性对比分析.结果 应用200与1 000 μL两种不同容量规格一次性加样针加样后,在两种抗-HCV酶免试剂检测各孔间S/CO值统计结果CV值差异有统计学意义(P<0.05).结论 应用全自动加样仪进行加样时,应选用满足微量样本移取精度要求的一次性加样针,避免因使用不当容量规格的一次性加样针而导致血液检测质量事故的发生.     

FAME全自动酶免分析系统常见故障分析与处理

随着血站实验室检测工作标准化,现在实验室的各项检测工作已全面实现从标本加样到检测结果的读取过程自动化.免疫检测工作[乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、艾滋病毒抗体(抗-HIV)、梅毒等四大项]由AT/STAR全自动加样系统进行样本加样,由FAME(费米)全自动酶免分析系统来完成酶标板加样后的孵育直至最终读板.但这并不意味着全自动设备能完成一切工作,相反,只有用智慧和经验去熟练掌控它才能更好更准确地利用它完成各项工作.     

应用室间质评进行实验室设备比对的可行性探讨

目的探讨利用室间质评标本及其结果,进行血液检测实验室设备间比对的可行性。方法收集2018-2019年的室间质评标本,其中酶免标本15份,丙氨酸氨基转移酶标本30份,采用不同型号的全自动标本处理、全自动酶免分析系统和全自动生化仪检测,以室间质评反馈结果为标准,1)应用Kappa检验,比较2台全自动标本处理系统和2台全自动酶免检测系统不同组合检测结果的一致性;2)应用配对设计两样本比较的秩和检验分别比较2台加样系统和后处理系统检测值之间的差异是否具有统计学意义;3)应用回归分析比较2台全自动生化仪检测结果一致性。结果 1)2台标本处理系统和2台全自动酶免检测系统检测结果之间的差异不具统计学意义(P0.05);2)除了乙肝项目C组外,其他性能与标准的一致性均为优;3)2台全自动生化仪的检测结果经回归分析证明两者相关性良好(r0.975)。结论在中小型采供血机构使用室间质评标本系统和结果进行设备的比对,存在一定的局限性,但经过适当的优化改良后应该具备一定的可行性。     

HAMILTON FAME16/20罕见通讯故障1例报道

故障设备名称:HAMILTON FAME 16/20(全自动酶免后处理分析系统),生产商:瑞士哈美顿公司,以下简称为FAME,主要功能:全自动完成血站血液检测传染病标志物ELISA法加样完毕后孵育、洗板、酶标仪读数及部分试剂分配的整个过程.     

加样针污染致不同项目拖带情况分析

目的探讨不同项目、不同值域的拖带规律,为制订拖带克服措施和献血者(血液)保留淘汰策略提供依据。方法各个项目均用RSP100(4针型)全自动加样仪加样,用同样的冲洗程序和冲洗量进行加样针冲洗,用FAME16/20全自动酶免分析仪进行后处理,从第2列开始,以列为序,阳性孔后每间隔3孔有1孔有反应,取原标本和重采标本经手工加样复检阴性即纳入拖带污染统计。将阳性孔按S/CO值进行分组,对不同阈值造成拖带的情况进行评价。结果不同项目的拖带程度和频率有明显差异,抗-HIV项拖带最为严重,抗-HCV项次之,TP和HBsAg最低,拖带率随着S/CO值的升高而升高,当样本测定值在Cut off值的20倍以上时,抗-HIV项可有80%的样本发生拖带,抗-HCV项可有40%的样本发生拖带。结论加样针老化是造成拖带率逐年上升的主要原因,各项目拖带情况不一与样本的阳性程度、试剂灵敏度、加样量有关,拖带的预防应从做好仪器维护保养、加大加样针的洗涤时间和洗涤量、推广使用一次性加样针、献血前进行快速检测筛除阳性程度较高的标本等方面进行考虑。