葛根素对3T3-L1前脂肪细胞分化及胰岛素抵抗模型糖代谢的影响

目的:研究葛根素(Pur)对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响,以及在胰岛素抵抗状态下对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖代谢的影响。方法:不同浓度Pur干预3T3-L1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响;油红O染色法检测其对前脂肪细胞分化过程及成脂的影响;地塞米松诱导3T3-L1细胞建立胰岛素抵抗模型,用不同浓度Pur进行干预,测定细胞的葡萄糖消耗量。结果:Pur(3～300μmol/L)对3T3-L1前脂肪细胞增殖无明显影响;Pur(30～300μmol/L)促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,且具有量效关系。结论:Pur能够促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,改善胰岛素抵抗。     

齐墩果酸对3T3-L1脂肪细胞分化及糖脂代谢的影响

目的:观察齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对脂肪细胞分化和糖脂代谢的影响并探讨其机制。方法:在诱导脂肪分化时用OA干预,油红O染色后,通过比色法分析脂肪细胞的分化程度。采用葡萄糖氧化酶法检测OA对脂肪细胞葡萄糖消耗的影响;采用酶联免疫吸附法检测上清液中的游离脂肪酸浓度;采用RT-PCR法检测脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 mRNA的表达。结果:与溶媒对照组比较,OA能显著增加脂肪细胞葡萄糖消耗量(P<0.05或P<0.01),在1~30μmol/L浓度范围时,其作用随着剂量增加显著增强;OA能促进前脂肪细胞的分化,在3~30μmol/L浓度范围内,OA组油红O染液光密度值均显著高于溶媒对照组(P<0.05或P<0.01)。同时,OA还能减少游离脂肪酸的产生,其30μmol/L剂量时游离脂肪酸的含量只有溶媒对照组的47.2%,显著低于溶媒对照组(P<0.01)。与溶媒对照组比较,30μmol/L OA能显著增加脂肪细胞PPAR-γ及GLUT-4 mRNA的表达(P<0.05)。结论:OA能促进脂肪细胞分化和葡萄糖的消耗,减少游离脂肪酸的产生,其机制可能与上调脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 ...     

雪菊不同提取部位对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响

目的：以3T3-L1前脂肪细胞为载体,考察雪菊总提物、正丁醇部位、黄酮单体CB-1及CB-2对该细胞增殖与分化的影响。方法：雪菊4个不同提取部位分别设3个剂量组。MTT法检测雪菊4个不同提取部位对3T3-L1细胞增殖的作用,油红O染色并通过比色分析细胞分化过程中胞浆脂质的形成与积累。结果：与对照组相比,雪菊总提取物100 μg·mL-1,正丁醇部位0.5、5、50 μg·mL-1,黄酮单体CB-1、CB-2在50 μg·mL-1浓度时对细胞增殖有显著抑制作用（P<0.01）;正丁醇部位的作用呈一定的量效关系（相关系数r=-0.903）。油红O染色结果表明,与对照组相比,雪菊总提取物1、10、100 μg·mL-1均可以显著抑制细胞分化,减少细胞中脂质的形成（P<0.01）;正丁醇部位能够剂量依赖性地抑制细胞分化（r=-0.779）;CB-1与CB-2在50 μg·mL-1浓度时对细胞分化有显著抑制作用（P<0.01）。结论：雪菊总提物、正丁醇部位、CB-1与CB-2均能够抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖与分化,减少细胞中脂质积累。     

柚皮苷对前脂肪细胞3T3-L1增殖和诱导分化的影响

目的观察柚皮苷对前脂肪细胞3T3-L1增殖和分化的影响,并探讨其影响3T3-L1分化的可能作用机制。方法培养3T3-L1细胞,并用不同浓度的柚皮苷进行干预,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,用油红O染色和染色比色法分析脂肪细胞的分化程度。逆转录多聚酶联反应(RT-PCR)检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA的表达。结果柚皮苷能抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化,并能抑制PPARγ2、C/EBPα基因的表达。结论柚皮苷可抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖,并能通过下调分化相关基因的表达抑制分化。     

中药复方益糖康对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中凋亡的影响

目的：探讨中药复方益糖康对3T3-L1前脂肪细胞凋亡的影响。方法：以分化的3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,给予含益糖康的大鼠血清,应用AO/EB染色的方法,确定对凋亡影响的含药血清浓度;用Western检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达,并用t检验进行统计分析;用电镜观察细胞凋亡的形态。结果：含益糖康的大鼠血清,对3T3-L1前脂肪细胞的凋亡有促进作用,其中5%含药大鼠血清作用4天效果最佳;含药血清组与正常组比较,凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达有差异（P〈0.05）;含药血清组电镜观察有线粒体溶解、细胞核固缩、伪足减少。结论：中药复方益糖康具有促进3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的凋亡的作用。     

芦丁对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用

目的探索芦丁对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。方法采用3T3-L1前脂肪细胞分化模型和油红O染色法,选用罗格列酮作为阳性对照药,观察芦丁对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用,于510 nm波长下测定芦丁对脂含量的影响。利用流式细胞仪测定芦丁对分化的脂肪细胞吸收葡萄糖的影响。结果芦丁在0.5μmol/L和1μmol/L两个浓度下均能促进3T3-L1前脂肪细胞分化过程,提高脂含量,并促进了葡萄糖吸收。结论芦丁能够促进3T3-L1前脂肪细胞分化,并促进了分化的脂肪细胞吸收葡萄糖。     

淫羊藿苷对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响

目的研究淫羊藿苷(ICA)不同作用浓度及不同作用时间对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的抑制作用。方法采用MTT法观察ICA对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;应用ICA诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化,油红O染色测定细胞内脂质含量,观察ICA对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。结果 67μg/m L ICA对细胞增殖起抑制作用,持续至96 h并达到最大;30μg/m L和15μg/m L ICA在72 h、96 h对细胞增殖起抑制作用。结论较高浓度ICA对3T3-L1前脂肪细胞的分化有抑制作用,而低浓度ICA对3T3-L1前脂肪细胞的分化作用不明显。     

齐墩果酸对分化后的3T3-L1脂肪细胞的作用

目的:探讨中药单体齐墩果酸(OA)对动物体内脂肪的作用。方法:选用前脂肪细胞3T3-L1作为模型细胞,在诱导3T3-L1分化12d后,分别加入30、10、3μg/mL OA和溶媒DMSO干预4d,然后使用MTT法和雌二醇(E2)的ELISA检测法,分别研究了OA对3T3-L1的增殖和E2分泌的影响,同时设有未分化的3T3-L1组作为对照。结果:30μg/mL的OA能显著抑制分化后的3T3-L1细胞的增殖(P<0.01),而同时明显增加分化后的3T3-L1细胞的E2总量(P<0.01),但是各浓度的OA对未分化的3T3-L1在上述两方面上影响不显著。结论:OA能降低脂肪细胞的总量,同时增加脂肪细胞的E2总量,说明OA能够影响脂肪的生长和部分功能。     

杜仲叶提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

研究了杜仲叶提取物对3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化的影响。     

五味清浊散对3T3-L1细胞TNF-α浓度和基因表达的影响

目的:观察五味清浊散(WQS)对脂肪细胞血糖浓度和TNF-α水平及其mRNA其表达的影响。方法:药物处理48h后,采用GOD-POD法检测3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型培养液中葡萄糖浓度,ELISA法检测TNF-α浓度,RT-PCR法检测TNF-α基因mRNA的表达。结果:WQS使脂肪细胞IR模型培养液葡萄糖、TNF-α浓度降低,并下调TNF-α基因mRNA的表达。结论:WQS有显著的降糖作用,并下调TNF-α水平。     

桂皮醛对3T3-L1前脂肪细胞诱导分化的作用及其机制研究

目的:观察桂皮醛(Cinnamaldehyde,CA)对3T3-L1脂肪细胞的分化及脂肪细胞因子mRNA表达的影响。方法:对3T3-L1前脂肪细胞进行诱导分化,采用油红"O"染色法检测3T 3-L1脂肪细胞中甘油三酯(TG)及分化过程中胞浆脂质的堆积,并采用Real-time PCR测定脂肪细胞分化中关键基因及脂肪细胞因子mRNA的表达。结果:CA对脂肪细胞的分化均表现为促进趋势,且呈一定的量效关系,增加脂肪细胞分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)、CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT-enhancer-binding proteins,C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白2(Fatty acid binding protein,ap2)、CD36及脂肪细胞因子脂联素(Adiponectin)瘦素(Leptin)、抵抵抗素(Resistin)等mRNA的表达。结论:CA能促进3T3-L1脂肪细胞的分化,增加脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积,其机制可能与其促进PPARγ、C/EBPα的表达有关,因此,桂皮醛具有增加脂肪细胞胰岛素敏感性的作用。     

虎杖苷对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其作用机制

目的:探讨虎杖苷(polydatin,PD)对于小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其作用机制。方法:培养小鼠3T3-L1前脂肪细胞,添加不同剂量虎杖苷分别处理24、48 h,用MTT法检测细胞增殖;在诱导3T3-L1前脂肪细胞分化的过程中添加不同剂量虎杖苷处理48 h,继续培养6 d后油红O染色观察脂肪细胞的分化程度;采用荧光定量PCR技术检测各组过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白-α(C/EBPα)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和瘦素(Leptin)的mRNA表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)分析3T3-L1分化过程中虎杖苷对MCP-1蛋白分泌的影响。结果:PD显著促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,并呈现一定的时间、剂量依赖效应。与对照组相比,PD抑制3T3-L1细胞分化;低剂量PD(20μmol·L~(-1))导致脂肪细胞中分化相关基因PPARγmRNA表达水平下降,并且可以抑制3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化过程中炎症相关因子MCP-1的mRNA表达和蛋白分泌。高剂量PD(100μmol·L~(-1))对于PPARγmRNA表达水平影响不明显,不过可以使3T3-L1细胞分化过程中MCP-1的mRNA表达和蛋白分泌水平升高。添加低剂量和高剂量的PD导致成熟脂肪细胞中Leptin mRNA表达水平升高。结论:PD可以促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,抑制前脂肪细胞分化,其机制可能是通过抑制PPARγ的表达。在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,PD通过抑制脂肪细胞中炎症相关因子MCP-1的表达及分泌,及增加Leptin基因表达,可能可以通过调控炎症状态影响肥胖。     

芦丁促进3T3-L1前脂肪细胞棕色化及其机制

目的：观察芦丁对3T3-L1前脂肪细胞棕色化效应的影响,并探讨其机制。方法：细胞增殖与活性检测-8(CCK-8法检测不同浓度芦丁(3.125、6.25、12.5、25、50、100、200μmol·L^-1)对3T3-L1细胞活性影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度芦丁(12.5、25、50μmol·L^-1)对脂肪细胞产热相关蛋白解偶联蛋白1(UCP1)、PR结构域蛋白16(PRDM16)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)表达的影响。确定芦丁最佳浓度后,油红O染色观察芦丁对脂肪细胞中脂滴生成的影响,Western blot检测线粒体生物合成标志性蛋白核呼吸因子1(NRF1)、核呼吸因子2(NRF2)和线粒体转录因子A(TFAM)的表达。结果：与空白组比较,200μmol·L^-1芦丁显著抑制3T3-L1细胞活性(P<0.01);在12.5、25、50μmol·L^-1浓度下,50μmol·L^-1芦丁显著促进产热蛋白(UCP1...     

小檗碱对白介素-6诱导胰岛素抵抗 3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响

目的:观察小檗碱对白介素-6(IL-6)诱导胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响。方法:选用IL-6诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型。以20μg·L-1IL-6培养48 h,将3T3-L1脂肪细胞随机分为正常对照组、模型组、吡格列酮组(50μmol.L-1)和小檗碱高、中、低剂量组(10,20,50μmol.L-1),以葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖消耗量,观察小檗碱对脂肪细胞葡萄糖摄取的影响,鉴定IR模型;采用实时荧光定量PCR技术测定脂肪细胞脂联素基因mRNA水平。结果:模型组葡萄糖消耗量及脂联素基因表达水平与正常对照组比较,均显著降低(P<0.05);小檗碱高、中、低剂量组及吡格列酮组均能显著增加葡萄糖消耗量及脂联素基因表达水平(P<0.05)。结论:小檗碱可增加白介素-6诱导胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞脂联素基因mRNA的表达,改善胰岛素抵抗状态。     

羊栖菜提取物的降血糖作用研究

目的研究羊栖菜提取物对正常及四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影响。方法用四氧嘧啶糖尿病小鼠为模型,以血糖、糖耐量为指标研究羊栖菜提取物的降血糖作用。结果羊栖菜提取物对正常小鼠无降血糖作用;预防性给予羊栖菜粗多糖(350,700 mg.kg-1)后,四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖显著降低;羊栖菜粗多糖和醇提物(700 mg.kg-1)有治疗作用,能明显降低糖尿病小鼠血糖水平;对正常小鼠和糖尿病小鼠糖耐量无明显改善。结论羊栖菜提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠具有防治作用。     

Effect of mollugin on apoptosis and adipogenesis of 3T3-L1 preadipocytes

The effect of mollugin, isolated from the roots of Rubia cordifolia L., on cell viability, apoptosis and adipogenesis in 3T3‐L1 preadipocytes was investigated. The inhibitory effect of mollugin (40–60 µm ) on cell viability was more significant in differentiated adipocytes than in 3T3‐L1 preadipocytes. In 3T3‐L1 cells, the cytotoxicity of mollugin was accompanied by apoptotic events including mitochondrial membrane potential (Δψm) loss and activation of caspase‐9, ‐3 and ‐7, leading to PARP degradation. Although the presence of 20 µm mollugin during induced adipocytic differentiation of 3T3‐L1 cells for 6 days failed to affect the cell viability, it could almost completely abrogate the differentiation‐associated morphology change and intracellular lipid accumulation. A similar level of inhibition was observed, when 20 µm mollugin was present during the early stage (D0–D2) of the differentiation period. In addition, the expression of C/EBPα, PPARγ1 and PPARγ2 was significantly down‐regulated. The presence of 20 µm mollugin during either middle stage (D2–D4) or late stage (D4–D6) of the differentiation period, however, caused the inhibition to a lesser extent. These results indicated that mollugin at high concentrations (40–60 µm ) exerted cytotoxicity via inducing apoptosis, whereas mollugin at a low concentration (20 µm ) suppressed adipocytic differentiation without exerting cytotoxicity in 3T3‐L1 preadipocytes. Copyright © 2010 John Wiley & Sons, Ltd.     

小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞及其胰岛素抵抗模型的影响

目的:探查小檗碱的体外安全浓度及其对脂肪细胞的抗胰岛素抵抗(IR)活性。方法:3T3-L1前脂肪细胞分为空白组和小檗碱不同浓度(0.001~10μmol·L-1)组,48 h后MTT法测定各组的A值。成熟的3T3-L1脂肪细胞分为空白组和IR模型组,模型组细胞经10μmol·L-1胰岛素(Ins)诱导24,48 h。检测各组培养液和细胞葡萄糖含量。检测IR模型细胞经小檗碱不同浓度(0.000 1~1μmol·L-1)干预24,48 h后的培养液中葡萄糖含量。结果:小檗碱0.01~1μmol·L-13个浓度和10μmol·L-1作用的前脂肪细胞A值均显著升高或降低(P0.05,P0.01);经Ins诱导24,48 h的培养液和细胞葡萄糖含量均显著增加或减少(P0.01);作用24 h的小檗碱0.01~1μmol·L-1和作用48 h的0.000 1~1μmol·L-1各浓度组培养液中的葡萄糖量均显著减少(P0.01)。结论:小檗碱的体外细胞安全浓度较低,低浓度小檗碱对脂肪细胞即具有显著的抗IR活性。