血清基质金属蛋白酶-9对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的检测具有不同性质颈动脉粥样硬化斑块的脑梗死患者的血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平,探讨颈动脉粥样硬化斑块稳定性与相关炎性标志物MMP-9水平的关系。方法采用彩色多普勒超声检查66例急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块,同时检测患者血清MMP-9水平,根据斑块性质将脑梗死患者分为不稳定斑块组、稳定斑块组及无斑块组3个亚组,并进行比较。结果血清MMP-9水平依次为不稳定斑块组、稳定斑块组、无斑块组（P〈0．01）。结论MMP-9可能是不稳定性粥样硬化斑块的一个潜在的血清标志物。     

罗格列酮对冠心病患者巨噬细胞表达核因子-κB和金属蛋白酶-9的影响

目的 探讨罗格列酮(Ros)干预在调节冠心病患者外周血单核细胞源性巨噬细胞(MDMs)表达核因子-κB(NF-κB)、金属蛋白酶-9(MMP-19)中的作用及可能机制.方法 本研究为临床病例对照研究.于2007年3月至4月间,从湘雅二医院心内科行冠脉造影患者中,选取急性冠脉综合征患者48例(ACS组)、稳定型心绞痛(SA)患者20例(对照组)为研究对象,排除脑血管意外、急性感染和创伤、肝肾功能不全、肿瘤等患者.提取外周血单个核细胞,用巨噬细胞集落刺激因子刺激,转化为MDMs;随机分亚组后,分别用0μmol/L1μmol/L,10 μmol/L,20 μmol浓度Ros干预48h;RT-PCR检测各亚组MDMs表达过氧化物酶增殖体激活受体-γ([PPAR-γ)和MMP-9 mRNA,免疫组化法检测NF-κB P65表达强度.用ANOVA检验比较组间及亚组内MDMs在表达PPAR-γ,MMP-9,NF-κB P65的差异.结果 干预前,ACS组MDMs表达PPAR-γmRNA水平低于对照组,表达NF-κB P65及MMP-9mRNA水平高于对照组;Ros干预后,ACS组及对照组PPAR-γmRNA表达明显上调,ACS组PPAR-γ的表达量与Ros浓度呈正变关系;MMP-9 mRNA表达下调,在ACs组其下调程度与Ros浓度呈反变关系;两组NF-κB P65表达量均呈现非剂量依赖性降低.结论 ACS患者外周血MDMs的PPAR-γRNA表达被抑制、NF-γB活性及MMP-9 mRNA表达增强.Ros干预可通过增加PPAR-γ的表达,从而抑制NF-κB活性和MMP-9的表达.     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与动脉粥样硬化斑块稳定性的关系研究进展

基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases,MMPs）是降解细胞外基质的重要酶类,几乎能降解细胞外基质的所有成分。组织金属蛋白酶抑制剂（tissueinhibitorsofmetalloproteinases,TIMPs）是金属蛋白酶的主要内源性特异性抑制剂,是一组能够抑制MMP活性的多功能因子。细胞外基质是血管壁的主要成分,正常情况下,MMPs和TIMPs保持平衡,维持细胞外基质的稳定状态。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ与动脉粥样硬化

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是核转录因子中的超家族成员,它调控靶基因的转录,参与体内的许多病理生理过程。PPARγ通过改善胰岛素抵抗,糖代谢、脂代谢紊乱,发挥抗动脉粥样硬化作用;还可通过对巨噬细胞及核因子κB的影响,通过抑制炎症反应,抑制平滑肌细胞增殖、迁移,通过对血管内皮功能的影响,调节血管张力,阻止动脉粥样硬化的形成。     

基质金属蛋白酶与动脉粥样硬化及斑块破裂的关系

动脉粥样硬化是冠心病、脑梗死、外周血管病的主要原因,严重威胁到人类的健康和生命。尤其是冠心病,动脉粥样硬化是其最重要因素之一,主要是由于各种原因引起血管内皮细胞损伤,破坏屏障功能,血液中各种巨噬细胞广泛侵入内膜,形成以脂质为主的粥样斑块,引起血管重构,进一步发展,可引起斑块破裂。基质金属蛋白酶是一组几乎能降解血管外细胞基质所有成分的一组酶,在动脉硬化斑块的区域可过度表达,降解基质,引起斑块破裂、出血,形成继发血栓,引发急性冠状动脉综合征。本文着重从基质金属蛋白酶与动脉粥样硬化及斑块破裂的关系作一综述。     

基质金属蛋白酶

基质金属蛋白酶是一组具有许多共同生化性质的可降解细胞外基质的酶。目前至少已发现余种基质蛋白酶。它们的细胞来源不同，所降解的底物亦不同。它们生物合成与活性的调节与其基因转录率的变化、分泌酶原的活化、活化酶的特异性抑制物及酶原的稳定性有关。     

通心络下调基质金属蛋白酶稳定动脉粥样硬化斑块的作用研究

目的 通过观察通心络调节基质金属蛋白酶-2/9(MMP-2/9)的活性及稳定动脉粥样硬化(AS)斑块的效应,探讨通心络治疗急性冠脉综合征(ACS)的有效机制.方法 应用球囊损伤腹主动脉加高脂饮食建立兔AS模型.将38只新西兰兔按数据列表法分为手术对照组(A组,6只),AS模型组(B组,8只)、通心络治疗组(C组,8只)、辛伐他汀治疗组(D组,8只)和通心络+辛伐他汀治疗组(E组,8只).给药8周后检测血脂,用多普勒检测腹主动脉血流速度;用免疫组化染色检测MMP-2/9的表达.结果 B组MMP-2/9表达、血脂水平较A组明显升高;与B组比较,C,D,E组MMP-2/9阳性表达(A值)明显减少,以E组表达水平最低(MMP-2:25 651.7±2 185.8比846 907.8±32 285.6,MMP-9:24 258.1±1 499.5比942 219.5±21 857.9,均P<0.05);C,D,E组血清总胆固醇(TC,mmol/L)、三酰甘油(TG,mmol/L)、低密度脂蛋白(LDL,mmol/L)均有不同程度降低,以E组降低最显著(TC:32.51±0.88比38.56±1.91,TG:7.15±1.87比8.07±1.68,LDL:25.47±3.56比32.58±2.14,均P<0.05);B,C,D,E组较A组腹主动脉血流速度下降,以E组下降趋势最缓慢(m/s:21.55±0.78比35.95±1.34,P<0.05).结论 通心络有加快血流速度及减少AS斑块形成的作用,其机制可能与下调MMP-2/9及其相关因子表达、稳定斑块有关.     

隔药饼灸对兔动脉粥样硬化斑块中基质金属蛋白酶-2,9 mRNA表达的影响

目的观察隔药饼灸对兔动脉粥样硬化(AS)中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)表达的影响,探讨隔药饼灸对兔动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法将75只新西兰大耳白兔,通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型。然后随机分为5组,每组15只,即：空白组(空白对照组);模型组(AS模型组);直接灸组(AS模型+艾炷直接灸);隔药饼灸组(AS模型+隔药饼灸);西药组(AS模型＋阿托伐他汀)。运用原位杂交法检测兔动脉粥样硬化斑块中MMP-2,9 mRNA的表达。结果隔药饼灸、直接灸和西药均能抑制兔动脉粥样硬化斑块中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达(P<0.01或P<0.05);隔药饼灸组和西药组MMP-2和MMP-9 mRNA的表达低于直接灸组(P<0.01或P<0.05)。结论隔药饼灸、直接灸和西药通过抑制兔动脉粥样硬化斑块中MMPs的表达,起到稳定动脉粥样硬化斑块的作用,且隔药饼灸和西药抑制MMPs表达的作用优于直接灸。     

基质金属蛋白酶

基质金属蛋白酶是一组具有许多共同生化性质的可降解细胞外基质的酶。目前至少已发现八种基质金属蛋白酶。它们的细胞来源不同,所降解的底物亦不同。它们生物合成与活性的调节与其基因转录率的变化、分泌酶原的活化、活化酶的特异性抑制物及酶原的稳定性有关。     

基质金属蛋白酶对心血管疾病的作用

基质金属蛋白酶(MMPs)是一类能降解多种细胞外基质分子的酶家族。其活性能被金属蛋白酶内源组织型抑制剂(TIMPs)所抑制，在组织内的净蛋白溶解活性取决于MMPs／TIMPs的平衡。大量研究表明在动脉粥样硬化、再狭窄及动脉瘤形成等病理状态下血管重构过程中均有MMPs及TIMPs的表达。但我们对MMP／TIMP)在心血管疾病中的发病机制仍不甚了解。     

不同剂量瑞舒伐他汀对兔颈动脉粥样硬化斑块内CD147表达的影响

目的探讨不同剂量瑞舒伐他汀对兔颈动脉粥样硬化斑块内的CD147表达水平以及斑块稳定性的影响。方法将40只新西兰雄性大白兔随机分为五组:空白对照组、模型对照组(液氮损伤+高脂饲料建立动脉硬化模型)、低中高浓度药物干预三组(造模后分别予以瑞舒伐他汀1 mg·kg-1·d-1干预、2.5 mg·kg-1·d-1干预和5 mg·kg-1·d-1干预),15周后对兔颈总动脉血管进行病理形态学检查,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测斑块内CD147 mRNA表达水平及蛋白质印迹法(Western blot)检测斑块内CD147蛋白表达水平。结果第15周末,模型对照组斑块内CD147 mRNA、CD147蛋白表达水平明显高于空白对照组(P<0.05)。病理显示模型对照组颈动脉内可见大量的不稳定斑块,模型对照组的8只兔中5只出现明显斑块破裂及血栓形成,而空白对照组的8只兔血管内膜光滑。瑞舒伐他汀干预,斑块内CD147 mRNA、CD147蛋白表达水平与模型对照组相比明显降低(P<0.05),且具有剂量依赖性,表现为高浓度药物干预组表达水平最低。病理显示瑞舒伐他汀干预后颈动脉动脉硬化斑块均较为稳定,动脉粥样斑块的面积明显减小,斑块纤维帽增厚,且具有剂量依赖性。结论兔颈动脉不稳定斑块内CD147的表达增多;瑞舒伐他汀能通过抑制CD147表达从而发挥其稳定动脉硬化斑块的作用,具有剂量依赖性。     

Serum matrix metalloproteinases in patients resuscitated from cardiac arrest. The association with therapeutic hypothermia

Aim

To study the systemic levels of matrix metalloproteinases (MMP) -7, -8 and -9 and their inhibitor TIMP-1 in cardiac arrest patients and the association with mild therapeutic hypothermia treatment on the serum concentration of these enzymes.

Methods

MMP-7, -8 and -9 and tissue inhibitor of metalloproteinases-1 (TIMP-1) were analysed in blood samples obtained from 51 patients resuscitated from cardiac arrest. The samples were taken at 24 and 48 h from restoration of spontaneous circulation (ROSC). The biomarker levels were compared between patients (N = 51) and healthy controls (N = 10) and between patients who did (N = 30) and patients who did not (N = 21) receive mild therapeutic hypothermia.

Results

MMP-7 (median 0.47 ng/ml), MMP-8 (median 31.16 ng/ml) and MMP-9 (median 253.00 ng/ml) levels were elevated and TIMP-1 levels suppressed (median 78.50 ng/ml) in cardiac arrest patients as compared with healthy controls at 24 h from ROSC. Hypothermia treatment associated with attenuated elevation of MMP-9 (p = 0.001) but not MMP-8 (p = 0.02) or MMP-7 (p = 0.69). Concentrations of MMPs -7, -8 and -9 correlated with the leukocyte count but not with C-reactive protein (CRP) or neurone-specific enolase (NSE) levels.

Conclusion

We demonstrated that the systemic levels of MMP-7, -8 and -9 but not TIMP-1 are elevated in cardiac arrest patients in the 48 h post-resuscitation period relative to the healthy controls. Patients who received therapeutic hypothermia had lower MMP-9 levels compared to non-hypothermia treated patients, which generates hypothesis about attenuation of inflammatory response by hypothermia treatment.     

急性百草枯中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达变化的研究

目的观察急性百草枯中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）及其组织抑制因子1（TIMP-1）的表达变化，探讨其在百草枯（PQ）所致肺损伤中的作用。方法80只SD大鼠，随机分为染毒组和对照组。对照组用生理盐水灌胃；染毒组用PQ按50mg/kg灌胃染毒；分别于灌药后1、3、7、14、21、28、35d观察两组肺组织病理变化，同时采用RT—PCR检测肺组织MMP-2mRNA、MMP-9mRNA及TIMP-1mRNA的表达。结果与对照组相比，染毒组大鼠肺组织中MMP-2 mRNA的表达从1d就明显增强，7d达高峰，此后开始缓慢下降，14d至28d仍高于对照组，35d与对照组相比无统计学差异；MMP-9mRNA的表达1d至7d高于对照组，14d降至对照组水平；而TIMP-mRNA的表达从1d开始增强，14d迭高峰，以后维持在高水平，至35d仍明显高于对照组。结论MMP-2、MMP-9及TIMP—1在PQ中毒大鼠肺损伤中起重要的调节作用，大鼠肺纤维化与MMPs／TIMP比例的失衡有关。     

基质金属蛋白酶在钙化主动脉瓣中的表达及意义

目的 研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制物(TIMP-2)在退行性钙化主动脉瓣中的表达及意义.方法 对15例钙化主动脉瓣膜及10例非钙化瓣膜进行免疫组化染色(SP法)及光镜电镜观察.观察MMP-2及TIMP-2的表达情况及瓣膜形态学改变.结果 钙化组MMP-2及TIMP-2表达均明显高于非钙化组(均P<0.01),细胞外基质及内皮下可见大量棕黄色颗粒,非钙化瓣膜仅可见散在的棕黄色颗粒分散在细胞外基质中.电镜下钙化瓣膜内皮损伤,间质钙化明显.结论 MMP-2及TIMP-2的表达在瓣膜钙化中起重要作用,其不仅影响基质退变还参与基质的重构,但其在钙化瓣膜中的活化和调节机制尚不清楚,有待更进一步研究.     

The role of matrix metalloproteinases in the pathogenesis of abdominal wall hernias

Surgical treatment of abdominal wall hernia has been based for many decades on observational evidence, as the disease physiopathology was ambiguous. The long-standing hypothesis of abnormal collagen metabolism as a causative factor of hernia disease seems to become substantiated by modern investigations, demonstrating a link between abnormal matrix metalloproteinase (MMP) expression and abdominal wall hernia. Current evidence suggests a strong correlation between MMP-2 and direct inguinal hernia, while the role of this MMP in indirect, incisional and recurrent hernias has not been completely elucidated yet. Furthermore, MMP-1 and MMP-13 seem to be implicated in the physiopathology of recurrent hernia, while limited data link MMP-1 also with incisional hernia formation. Despite the importance of MMP-9 in wound healing mechanisms, its role in hernia pathogenesis has not been adequately investigated. Future research is expected to decipher the complex physiopathological mechanisms of hernia development and provide a basis for potential therapeutic applications.     

新生大鼠脑缺血后血清基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶组织抑制物1水平的变化

目的观察新生大鼠脑组织缺血后血清基质金属蛋白酶-9(MMP9)、基质金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)表达水平的变化。方法 75只7日龄Wistar大鼠分为正常对照组、缺血组、假手术组。采用左侧大脑中动脉结扎术建立脑缺血模型;对照组不做任何处理;假手术组只做一侧颈部正中切口,分离颈总动脉,不结扎。24小时后用酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组大鼠血清MMP9、TIMP1表达水平。结果①脑缺血组血清MMP9水平(1.058±0.081)ng/ml,较对照组(0.993±0.090)ng/ml、假手术组(0.989±0.084)ng/ml明显升高,差异有显著的统计学意义(P<0.01);缺血组血清TIMP1水平(1.373±0.097)ng/ml,较对照组(1.294±0.074)ng/ml及假手术组(1.319±0.070)ng/ml亦明显升高,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。②缺血组MMP9与TIMP1水平呈显著正相关(r=0.429,P<0.05);正常对照组和假手术组MMP9与TIMP之间无显著相关性(P>0.05)。结论 MMP9/TIMP1表达失调可能参与新生鼠缺血脑组织损伤。     

双液体垫对压疮患者MMP-2,9含量的影响及其疗效观察

目的 观察双液体垫对压疮患者伤口渗液及组织中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)表达的影响,同时探讨MMP-2,9在压疮不同时期的表达及其与压疮愈合间的关系.方法 将32例压疮患者分为观察组及对照组,各16例.其中观察组患者在双液体垫上进行翻身治疗,而对照组患者则在普通标准床垫上进行翻身治疗.采用push Tool工具评定2组患者压疮愈合情况,选用明胶酶普法检测压疮伤口渗液中MMP-2,9蛋白含量水平.结果 两组患者push Tool评分结果随治疗进展呈逐渐下降趋势,观察组第21天时push Tool评分较对照组显著降低.进一步分析后发现,患者压疮伤口渗液中MMP-2,9活性与push Tool评分呈高度正相关;2组患者MMP-2,9均呈下降趋势,观察组患者MMP-2,9水平在7-21 d时均较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MMP-2,9可作为评定压疮愈合状况的生化标志物之一,同时本研究结果也进一步证实了双液体垫疗法对压疮患者有显著疗效.     

3.0T MRI观察兔腹主动脉粥样硬化斑块演变过程

目的 探讨MRI在识别兔动脉粥样硬化斑块中的诊断价值.方法 20只新西兰白兔,随机设置实验组16只,对照组4只,结合球囊拉伤腹主动脉和间断高脂饲料喂养,建立动脉粥样硬化模型;在建模后2、3、4个月分别行高分辨MR成像.通过测量腹主动脉管壁厚度和面积、管腔面积、管壁信号增强程度等指标,观察腹主动脉壁的重构过程,并对模型最终的斑块成分进行MRI和组织病理结果对照研究.结果 对17只兔(实验组14只,对照组3只)完成3次MR检查,并获得组织病理学结果.MRI显示,实验组腹主动脉管壁厚度和面积逐渐增厚,且与同期对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01);实验组腹主动脉管腔进行性扩张,管壁强化程度较对照组增加明显,但演变过程不明显.另外,MRI对兔腹主动脉硬化斑块的成分判别限制在纤维、脂质和钙化斑块,对纤维斑块、脂质斑块识别率较高.结论 高分辨MRI可以无创性地观察动脉粥样硬化动物模型腹主动脉管壁重构的演变过程,有助于对动脉硬化斑块的预后和药物干预进行探索.     

强直性脊柱炎患者血清基质金属蛋白酶-1、3、9水平及意义

目的探讨强直性脊柱炎（AS）患者血清基质金属蛋白酶-1、3、9（MMP-1、3、9）水平及意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定45例AS患者和31例正常对照者的血清MMP-1、3、9及白细胞介素15（IL-15）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、C-反应蛋白（CRP）水平,比较各个指标在AS组与对照组之间的差异,并分析AS组患者各指标间的相关性。结果AS组血清MMP-3、TNF-α、CRP、IL-15水平高于对照组（P〈0．001,P〈0．05）;AS组血清MMP-1、9水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;在AS组中仅MMP-3与IL-15之间存在相关性。结论MMP-3和IL-15在AS发病机制中起着重要作用,有可能作为评估AS病情的有价值的血清学指标。     

瑞舒伐他汀干预ox-LDL诱导的THP-1细胞株中MMP-2、MMP-9的表达研究

目的 瑞舒伐他汀是目前经临床试验证实能够稳定并逆转动脉粥样硬化病变进展的他汀类药物,本实验主要探讨药物干预后基质金属蛋白酶(MMP)-2,9在动脉粥样硬化斑块稳定中的机制.方法 人单核细胞株(THP-1)经佛波酯(PMA)诱导贴壁为巨噬细胞后,利用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)80 mg/L与巨噬细胞共同孵育,分别给予不同药量(0,2,4,7和10 ng/ml)的瑞舒伐他汀进行干预,应用RT-PCR法检测上述组细胞中MMP-2,MMP-9 mRNA表达结果;应用ELISA的方法检测各实验组的上清液中MMP-2、MMP-9的表达.结果 7、10 ng/ml瑞舒伐他汀可以使MMP-2和MMP-9的蛋白表达量和mRNA的表达与其对照组相比均有显著性差异(P<0.01),无论是蛋白表达还是mRNA的表达均具有随药物浓度的增加而降低的趋势.结论 瑞舒伐他汀可以降低MMP-2和MMP-9在THP-1源性巨噬细胞中的表达,这有利于动脉粥样硬化斑块的稳定.