针刺涌泉对肾虚小鼠组织红外吸收光谱影响的研究

利用微钻石衰减全反射傅立叶变换红外光谱法(ATR/FTIR)研究了惊恐肾虚与针刺补肾对小鼠组织的影响.结果表明:惊恐肾虚小鼠肾与足表面脂类化合物明显增高,而代表蛋白质与糖类的酰胺Ⅰ带与Ⅱ带、甲基与次甲基峰强度均减弱;针刺涌泉穴后,与正常对照组相比脂类化合物变化不明显,进而说明针刺对惊恐造成的组织损伤具有一定的调节作用.     

肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β1及骨代谢变化的实验研究

目的 研究肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β1及骨代谢的变化情况,探讨肾虚体质骨代谢紊乱的内在机理及补肾中药的干预作用.方法 采用惊恐加房劳的方法,建立复合型肾虚质动物模型,研究肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β1及骨代谢的变化及补肾中药的干预作用.结果 与空白对照组比较,肾虚质模型组小鼠表现出精神萎靡,头部下垂,四肢无力,眼神黯淡,目光呆滞,喜卧恶动,摄食减少,体质量明显下降,皮毛松弛无泽等一系列肾虚之象,并且伴有血清ALP、TNF-α水平明显升高(P＜0.01),血清BGP、TGF-β1水平明显降低(P＜0.01);用补肾中药桂附地黄丸干预后其血清ALP、TNF-α水平有所降低(P＜0.01或P＜0.05),血清BGP、TGF-β1水平有所升高(P＜0.05或P＜O.01).结论 建立惊恐加房劳的复合型肾虚质动物模型,具有中医理论特色和操作的可行性.肾虚质小鼠存在骨代谢失衡的状态,其内在机理可能与细胞因子TNF-α、TGF-β1的异常有关,而补肾中药可以改善肾虚质小鼠骨代谢稳态的失衡状态.     

DNA甲基化酶与中医抗衰老机理的关系

本文分别采用8.4％的益肾方剂和15.2％的健脾方剂处理生理性肾虚的小鼠;并用~3H-甲基掺入法测定了正常和生理性肾虚小鼠肝DNA甲基化酶的活力。结果证明益肾健脾方剂能明显提高生理性肾虚小鼠肝细胞DNA甲基化酶的活力,具有延缓衰老的作用,为从分子生物的角度探讨中医益肾健脾延缓衰老的机理提供了客观依据。     

双酚A对雄性小鼠生殖和睾丸GPER表达的影响及与肾虚不育的相关性研究

目的:探讨双酚A(Bisphenol-A,BPA)对雄性小鼠生殖和睾丸GPER表达的影响及与肾虚不育的相关性。方法:将6周龄雄性昆明小鼠随机分为正常、阴性对照、BPA、肾阳虚及肾阴虚组。高架十字迷宫和游泳力竭等实验评价小鼠惊恐程度、耐力等行为学改变;全自动精子分析仪检测精液质量,并计算平均育仔数;免疫组织化学和免疫荧光染色检测GPER在睾丸的定位和表达。结果:BPA与肾阳虚组小鼠均出现活动度和耐力下降及惊恐程度增加,精子数量与育仔数亦下降及精子畸形率增加及睾丸GPER的表达增加,且两组间无显著差异(P0.05)。结论:BPA致雄性小鼠生精障碍与肾阳虚不育具有相关性。     

肾虚证骨质疏松与β-Catenin信号传导通路的相关性研究

目的:探索肾虚证骨质疏松与β-Catenin信号传导通路之间的相关性。方法:去卵巢复制肾虚证骨质疏松动物模型,将Topgal转基因小鼠、野生型小鼠、Axin2基因敲除小鼠分别按随机数字表法分为假手术组和模型组,于造模1个月后分离相应组织进行X-gal染色和细胞β-gal活性检测以及Micro-CT扫描分析骨量。结果:与假手术组比较,肾虚证模型组Topgal转基因小鼠肾脏组织和骨髓间充质干细胞中β-Catenin信号传导通路的活性均被明显抑制。Micro-CT检测结果发现,通过Axin2基因敲除可明显抑制小鼠去卵巢所致的胫骨骨量减少。结论:肾虚型骨质疏松症的发病病理机制与β-Catenin信号传导通路失活密切有关,通过激活β-Catenin信号传导通路可明显抑制肾虚引起的骨质疏松。     

肾精亏虚小鼠骨骼肌组织形态学的实验研究

目的:观察肾精亏虚对小鼠骨骼肌组织形态学的影响.方法:采用惊恐加房劳的复合伤肾法制造肾精亏虚模型.补肝组每天给予一贯煎浓缩液灌胃,正常对照组及模型组予等量生理盐水灌胃,连续给药21天.观察各组小鼠骨骼肌组织在光镜下的显微结构的改变,并采用透射电镜技术观察骨骼肌组织的超微结构的变化.结果:光镜下模型组小鼠骨骼肌见明显的病理变化.补肝组基本正常,并有新生的肌细胞.电镜下,模型组小鼠线粒体明显变化,体积增大,呈肿胀状态.补肝组基本正常,线粒体变化不明显,可见少数空泡.结论:惊恐、房劳因素复制的肾精亏虚模型小鼠骨骼肌有明显的形态学改变,给予补肝治疗可以减轻这种病理变化.     

利胆排石汤对胆结石小鼠脂类代谢及肝组织B-UGT活性的影响

目的：通过利胆排石汤对实验性胆结石小鼠脂类代谢及肝组织尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（B—UGT）活性的影响，观察其对胆结石的抑制作用。方法：将C57BL／6J小鼠随机分为空白对照组、模型对照组和利胆排石汤给药组，8周后处死并取材，检测血脂水平，结石中胆固醇沉淀量及肝组织中B—UGT活性。结果：利胆排石汤组和模型对照组小鼠血清TC和非HDL—C含量差异不显著；利胆排石汤组小鼠结石中胆固醇的沉淀量显著低于模型对照组（P〈0．05）；利胆排石汤组小鼠肝组织B—UGT的活性明显高于模型对照组（P〈0．05）。结论：利胆排石汤可能是通过提高B—UGT活性，影响脂类物质在体内的代谢，实现其治疗胆结石的作用。     

轴向负载诱导肾虚小鼠椎间盘退变的实验研究

目的:探究采用自制的热板鼠笼诱导的间断轴向力学负载环境对肾虚小鼠腰椎间盘退变的影响。方法:选择16个月龄老年小鼠36只,随机分为对照组、模型组及肾虚模型组,每组12只。每日于固定时间段将肾虚模型组及模型组小鼠放入自制的热板鼠笼,开始跳跃后计时10 min,对照组小鼠不予处理。分别在造模1个月和3个月后,通过HE、ABH染色分别比较三组小鼠腰椎间盘组织学差异,通过免疫组化测定Ⅱ型胶原来说明三组小鼠椎间盘退变的不同情况。结果:染色结果表明模型组和肾虚模型组小鼠椎间盘高度明显小于对照组,模型组与肾虚模型组样本软骨终板都存在更严重的骨化,模型组较对照组明显。模型组与肾虚模型组椎间盘内软骨老化较对照组明显升高,且肾虚模型组髓核的软骨细胞退变作用更为严重,其阳性染色较模型组有明显的升高。结论:间断的轴向力学负载能够促进小鼠椎间盘内软骨细胞退变和基质分解酶的表达,从而诱导小鼠腰椎间盘退变的发生和发展,且其对肾虚小鼠腰椎间盘能造成更为严重的椎间盘退变。     

切除卵巢所致肾虚对Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠IL-2和IL-6含量的影响

目的探讨卵巢切除所致肾虚对Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎（ＣＩＡ）的影响及细胞因子的作用。方法于ＤＢＡ／１小鼠皮下注射Ⅱ型胶原制作关节炎模型；以依赖株细胞增殖反应法测定ＩＬ－２、ＩＬ－６含量。结果卵巢切除可使关节炎小鼠脾单个核细胞的ＩＬ－２和ＩＬ－６含量显著增加；同时小鼠关节肿胀程度、滑膜组织增生、软骨损伤及软骨下骨的破坏均明显加重。结论ＩＬ－２、ＩＬ－６与ＣＩＡ发病过程密切相关，卵巢切除所致肾虚可使ＣＩＡ病变进一步加重，在一定程度上反映了此法所致肾虚与ＩＬ－２、ＩＬ－６之间的内在联系     

肾虚对雄性小鼠及其雄性仔鼠精子DNA损伤的影响

目的：观察肾虚对雄性小鼠及其雄性仔鼠精子DNA损伤的影响。方法：将30只雄性昆明小鼠用计算机取随机数法随机分为正常对照组、模型组和补肾组3组。其中模型组和补肾组采用房劳加惊恐的复合伤肾法制造肾精亏虚模型。从造模结束次日起,所有小鼠与正常发情雌鼠配对饲养5天后,处死,取附睾精子,同时进行精子单细胞凝胶电泳（Single cell gel electropherosis,SCGE）、精子染色体结构分析（sperm chromosome structure analysis,SCSA）检测其精子DNA损伤。取出雌鼠待其分娩。仔鼠饲养至6周龄时每组随机取出10只雄性仔鼠,用SCGE和SCSA检测其精子DNA损伤。结果：模型组小鼠与正常组相比精子细胞拖尾率（40.51±11.21vs23.64±9.86,P〈0.01）和DFI（37.42±7.19vs17.11±4.98,P〈0.01）均明显升高,补肾组（拖尾细胞率25.31±8.59,DFI24.31±7.99,P〉0.05）虽然存在DNA损伤,但与正常组相比没有明显差异。模型组仔鼠精子细胞拖尾率（24.59±9.45vs18.53±8.51P〈0.05）及DFI（32.18±9.90vs17.29±5.14,P〈0.01）亦明显较正常组高,但补肾组仔鼠精子DNA损伤程度较轻（拖尾细胞率20.61±6.34,DFI15.22±7.49,P〉0.05）,与正常组相比没有明显差异。结论：经＂惊恐、房劳＂方法造模后,模型组小鼠精子DNA损伤程度明显上升,而补肾疗法则能较好地保护精子DNA完整性。肾虚雄性仔鼠精子DNA完整性有类似于父代的改变,但程度较轻。说明肾虚造成的生殖系统损害,可能通过DNA损伤影响了其仔鼠的生殖健康。     

卵巢切除所致肾虚对免疫性关节炎小鼠血清骨钙素和肿瘤坏死因子的影响

目的：探讨卵巢切除所致肾虚影响免疫性关节炎（痹证）中骨代谢的机制。方法：切除小鼠卵巢后，Ⅱ型胶原皮下注射以诱导关节炎（ＣＩＡ）；每周１次观察小鼠的关节肿胀程度；组织切片光镜下观察小鼠滑膜、关节软骨及骨的改变；放射免疫法检测小鼠血清雌二醇、骨钙素、肿瘤坏死因子的变化。结果：切除卵巢的小鼠，血中雌二醇水平明显下降，而血清骨钙素和肿瘤坏死因子的含量则显著增加；同时，滑膜组织炎症加重，软骨损伤及骨的破坏均更为严重。结论：卵巢切除所致肾虚可使ＣＩＡ的病变程度加重。     

从肾论治惊恐障碍辨析

惊恐障碍临床表现及中医病机复杂,涉及多个脏腑。肾与本病的关系密切,生理上,神志活动产生之根在肾,病理上,肾虚不能制恐、肾精不足造成神失所养、髓海空虚。肾虚累及其他脏腑如肾虚肝旺、心肾不交等都可导致惊恐障碍的产生,惊恐障碍病久亦会累及肾,造成肾虚,从肾论治惊恐障碍具有临床意义,可采用益肾填精、益肾平肝、交通心肾等法治疗,方选左归饮、滋水清肝饮、黄连阿胶汤合交泰丸加减等。临床治疗时应结合患者的个体因素,做到因人制宜,辨证施治。     

针刺对肾虚证血浆性激素影响的初步研究

在针刺治疗肾虚证疗效观察中，对部分患者进行了针刺前后血浆性激素水平的测定，结果表明：针刺对性激素内环境起着良性的双向调节作用。在以正常人为对照组的血浆性激素含量的测定中还发现：正常老年男女性均显示出类似于肾虚患者的血浆性激素含量的异常变化，这种“生理性肾虚”现象，与祖国医学关于肾气盛衰和年龄相关的认识相一致。     

针刺“足三里”、“关元”穴对致衰小鼠睾丸组织抗氧化影响的实验研究

目的：通过针刺“足三里”、“关元”穴对致衰小鼠睾丸组织NOS、CAT、MDA含量的测定,来探讨针刺抗氧化方面影响的实验研究。方法：取小鼠睾丸组织,采用考马斯亮兰法测定蛋白含量;分光光度计法测定NOS含量;钼酸铵显色法测定CAT活力;硫代巴比妥酸染色法测定MDA含量。通过电镜测定组织超微结构的变化。结果：针刺能调节致衰小鼠睾丸内NOS含量,升高CAT含量、降低MDA含量。结论：针刺“足三里”、“关元”穴能提高致衰小鼠睾丸组织抗氧化能力,明显改善小鼠睾丸组织的超微结构。     

肾精亏虚对小鼠视网膜组织形态学的影响

目的:观察肾精亏虚对小鼠视网膜组织形态学的影响。方法:将30只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组和补肝组3组。采用惊恐加房劳的复合伤肾法制造肾精亏虚模型。补肝组每天给予一贯煎方剂浓缩液灌胃,光、电镜观察各组视网膜组织形态学变化。结果:光镜下模型组小鼠视网膜各层结构严重疏松、水肿,内核层和外核层细胞排列紊乱,间隙增宽,视网膜明显增厚;补肝组小鼠视网膜水肿明显减轻。电镜下模型组小鼠视网膜外节膜盘肿胀,不规则,排列紊乱疏松,严重扭曲变形,断裂,空泡形成。补肝组小鼠视网膜视杆、视锥细胞外节膜盘结构较疏松。结论:"惊恐、房劳"因素复制的肾精亏虚模型小鼠视网膜有明显形态学改变,给予补肝治疗可以减轻这种病理变化。     

补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型小鼠海马脑红蛋白表达的影响

目的探讨补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型快速老化小鼠P8(SAMP8)学习记忆能力的影响及作用机制。方法将20只5月龄雄性SAMP8小鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组各10只,另设5月龄雄性抗快速老化小鼠(SAMR1)10只作为正常对照组。针刺治疗组予以补肾活血针刺法干预,选穴百会、血海、肾俞、膈俞,采用捻转补泻手法。模型对照组及正常对照组未予特殊处理。干预4周后,取各组小鼠海马组织,采用免疫组化法检测脑红蛋白(Ngb)的表达情况。结果模型对照组小鼠海马组织Ngb的表达水平较正常对照组减弱(P<0.01);与模型对照组相比,针刺治疗组小鼠海马组织Ngb的表达水平明显升高(P<0.01)。结论补肾活血针刺干预能够明显增强SAMP8小鼠海马组织Ngb的表达,这可能是其改善SAMP8小鼠学习记忆能力的潜在分子机制之一。     

健骨宝胶囊对羟基脲肾虚小鼠动物模型的影响

目的 :实验观察健骨宝胶囊对肾虚动物模型的影响。方法 :采用羟基脲法造成肾虚模型[1 ] ,连续给药 9d。观察羟基脲肾虚模型小鼠体重、自主活动、性器官发育、肾上腺发育等肾虚相关指标。结论 :健骨宝胶囊能够明显增加肾虚证小鼠的自主活动次数 ,抑制羟基脲所致肾虚模型动物体重下降 ,并对肾虚模型动物的性器官痿缩和肾上腺重量下降有明显的改善作用。     

电针对功能性便秘小鼠肠道神经元自噬水平的影响

目的：基于肠道神经元自噬探讨电针大肠合募配穴治疗功能性便秘（FC）的作用机制。方法：将40只SPF级昆明小鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、3-甲基腺嘌呤（3-MA）组以及3-MA+针刺组5组，每组8只。除对照组外，其余4组小鼠采用复方地芬诺酯混悬液灌胃14 d制备FC模型。造模成功后，针刺组、3-MA+针刺组电针双侧“天枢”“上巨虚”，予疏密波，频率3 Hz/15 Hz，电流强度1 mA，每次30 min，每日1次，5 d为一疗程，疗程之间休息2 d，共治疗2个疗程。3-MA组及3-MA+针刺组于电针前30 min予3-MA溶液腹腔注射（15 mg/kg），每日1次。分别于干预前后观察各组小鼠首粒黑便排出时间和6 h排便情况。干预后计算各组小鼠小肠推进率；HE染色法观察小鼠结肠组织形态；透射电镜观察小鼠肠道神经元自噬情况；免疫组化法检测小鼠结肠肌层神经元微管相关蛋白1轻链3 (LC3)、Beclin-1、神经元核抗原蛋白（NeuN）表达。结果：干预前，与对照组比较，模型组、针刺组、3-MA组及3-MA+针刺组小鼠首粒黑便排出时间延长（P<0.01,P<0.05）,6 h排...     

针刺筋会穴阳陵泉对帕金森模型小鼠黑质TH表达的影响研究

目的:观察比较1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森小鼠模型及其接受针刺治疗后黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化。方法:以腹腔注射(30 mg/kg)MPTP诱导7 d形成帕金森小鼠模型,针刺双侧筋会穴"阳陵泉"及"舞蹈震颤区",1次/d,共治疗21 d。针刺结束后,采用免疫荧光组化检测小鼠脑黑质TH的表达变化。结果:在7 d造模后,模型组和针刺组TH阳性细胞显著丢失;治疗结束后,与模型组比较,针刺组TH阳性细胞数量增加。结论:MPTP可促进帕金森模型小鼠表达;针刺筋会穴阳陵泉可对MPTP诱导小鼠黑质多巴胺能神经有保护作用,能明显地减弱MPTP伤害性刺激引起的行为反应。     

针刺正常大鼠肺组织SAGE标签数据库的基因分类研究

目的阐释生理状态下针刺对大鼠肺组织基因表达谱的影响。方法利用正常组和针刺组的大鼠肺组织基因表达连续分析（SAGE）标签数据库,对差异表达标签进行基因系统分类和分析。结果正常组和针刺组相比共获得144个差异表达标签,分属于细胞生物合成过程、细胞脂类代谢过程、物质转运等6个DAVID基因分类。结论生理状态下针刺基础背景作用是一个包含蛋白、酶、RNA、脂类等生物大分子合成和代谢以及物质转运的生物过程。