睫状神经营养因子在大鼠脑干中的分布

睫状神经营养因子在大鼠脑干中的分布杨青峰＊伯音周长满＊＊万选才＊范明（军事医学科学院基础所＊＊解放军北京高等医学专科学校解剖教研室＊中国医学科学院基础所解剖教研室）本研究以重组表达并经纯化的人睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）免疫家兔，得到抗人ＣＮＴＦ的...     

睫状神经营养因子研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）分布于神经系统的非神经细胞，具有广泛的生物学活性，可以提高体内外各种类型外周神经元的存活。ＣＮＴＦ受体在神经系统和骨骼肌中广泛存在，在运动神经系统及与运动系统有关的部位大量表达。其对运动神经元的生理效应为临床应用于肌萎缩性脊髓侧索硬化及帕金森氏症开辟了前景。ＣＮＴＦ与造血生长因子在结构与功能上具有一定的相关性。     

睫状神经营养因子对大鼠去神经骨骼肌的营养作用

目的：通过测定SD大鼠坐骨神经离断后比目鱼肌（SOL）和趾长伸肌（EDL）肌纤维横截面积,观察持续给睫状神经营养因子（CNTF）对神经骨骼肌萎缩的影响。结果：SD大鼠坐骨神经离断后,持续给0．2mg/kg.d的CNTF20天后,损伤侧SOL和EDL肌纤维横截面积分别比实验对照组高27％（P＜0．01）和14％,SOL肌纤维横截面积比EDL增加的幅度大,而给予0．05mg/kg.d的CNTF20天后,动物肌纤维横截面积与实验对照组无明显差异。结论：CNTF可显著改善坐骨神经离断后SD大鼠骨骼肌的萎缩,并且CNTF效应的强弱与用药剂量和肌肉类型有关,0．2mg/kg.dCNTF作用明显强于0．05mg/kg.dCNTF,慢肌（SOL）比快肌（EDL）对CNTF更敏感。     

睫状神经节神经营养因子基因克隆

在构建了再生性外周神经组织cDNA文库的基础上，人工合成了睫状神经节神经营养因子（CNTF）阅读框架的引物，用PCR地高辛标记法标记了CNTF探针．筛选CDNA文库，得到了CNTF的阳性克隆，运用PCR法证实了克隆中存在着全长CNTF阅读框架，Sanger法测定了DNA序列，证实序列无误。CNTF基因克隆为从基因水平上研究CNTF的分子生物学作用机制打下基础．     

睫状神经营养因子受体研究进展

本文综述了睫状神经营养因子(CNTF)受体各个亚基的分子和基因结构,对CNTF受体信号转导机理进行概括,并探讨了CNTF与造血生长因子在信号转导上的相似性,以阐明CNTF对于造血系统的可能作用。     

睫状神经营养因子受体α亚单位在大鼠神经系统内表达的免疫组化定位

睫状神经营养因子受体α亚单位在大鼠神经系统内表达的免疫组化定位ＭａｃｌｅｎｎａｎＡＪ，ｅｔａｌ．ＪＮｅｕｒｏｓｃｉ．１９９６Ｊａｎ１５；１６（２）：６２１～６３０睫状神经营养因子受体α亚单位（ＣＮＴＦＲ┐α）是正常胚胎发育所必需的成分，还可能参与生后...     

睫状神经营养因子促进大鼠坐骨神经运动轴突再生

睫状神经营养因子(Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF)作为神经营养因子家族一员,在神经系统发育和神经损伤修复过程中具有重要作用.但在周围神经再生时,睫状神经营养因子的作用如何,尤其是其对运动轴突、感觉轴突的作用,目前未见研究报道.本实验采用160～200克雄性SD大鼠,一侧作手术侧,另一侧不手术作正常对照侧.睫状神经营养因子组6只,生理盐水组5只.暴露股后部坐骨神经,切除约2mm长的坐骨神经,用硅管(内径1mm,外径2mm)套接神经断端,断端间距约5mm.睫状神经营养因子组术时将重组人睫状神经营养因子(25μg)溶液注入硅管中.生理盐水组所给液体为生理盐水.术后分别皮下注射睫状神经营养因子(350μg/kg/天)和生理盐水.术后4周,多点注射30%辣根过氧化物酶于两侧腓总神经中.动物再存活48小时,灌注固定,取脊髓L_(3～6)节     

脑源性神经营养因子,神经营养因子3在猫脊髓中的免疫组化分布

脑源性神经营养因子，神经营养因子３在猫脊髓中的免疫组化分布王廷华吴良芳廖德阳（华西医科大学组织学研究室）已有大量证据表明，脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经营养因子（ＮＴ３）对某些特定类型神经元存活、神经突起生长有明显的促进作用。至今，已在诸多脑区...     

睫状神经营养因子在脊髓损伤中的研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的修复是神经科学领域研究的热点问题."神经营养因子理论"认为,神经营养因子能促进神经元的存活、分化和修复.睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)是目前研究比较多的营养因子之一.它不仅对体内外多种神经元包括感觉、运动、交感、副交感神经元及神经胶质细胞的存活具有促进作用,而且在促进轴突再生、防止受损神经元退变、维持运动神经元功能及诱导神经元和胶质细胞的分化方面也具有重要作用.近年来,关于CNTF在脊髓损伤修复中的作用也有较多的研究,现将对CNTF及其在脊髓损伤中的研究进展做一概述.     

睫状神经营养因子及其受体的研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）是分子量为２０～２４ｋＤ的酸性蛋白，其分子结构和功能类似于ＩＬ－６、白血病抑制因子和抑瘤素Ｍ等。在神经系统中广泛存在ＣＮＴＦ和其受体．ＣＮＴＦ有广泛的生物活性，能促进多种神经元存活，抑制交感神经元增殖，诱导急性期反应蛋白和神经多肽ｍＲＮＡ高度表达。此外，ＣＮＴＦ亦能诱导胶质前体细胞和某些肿瘤细胞的分化，调节ｃ－ｆｏｓ和ｒａｓ基因表达。     

睫状神经营养在子研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）分布于神经系统的非神经细胞，具有广泛的生物学活性，可以提高体内外各种类型外周神经元的存活。ＣＮＴＦ受体在神经系统和骨骼肌中广泛存在，在运动神经系统及与运动系统有关的部位大量表达。其对运动神经元的生理效应为临床应用于肌萎缩性脊髓侧索硬化及帕金森氏症开辟了前景。ＣＮＴＦ与造血生长因子在结构与功能上具有一定的相关性。     

睫状神经营养因子对大鼠脑缺血后髓鞘再生的影响

目的:研究睫状神经营养因子(CTNF)对脑缺血大鼠胼胝体髓鞘再生的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、双侧颈总动脉结扎(2-VO)组和CTNF治疗组(CTNF)。利用2-VO法制备大鼠脑缺血损伤模型,在术后24 h内用0. 4μg/kg的CTNF或生理盐水分别给予CTNF治疗组、2-VO组和Sham组大鼠尾静脉注射。给药7 d后通过神经缺损功能评分(NSS)和转棒实验(Rota-Rod)检测各组大鼠神经功能,电镜观察胼胝体内髓鞘超微结构的变化,通过免疫荧光染色观察少突胶质细胞转录因子2(Olig-2)的表达,Western Blot检测髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达。结果:与Sham组相比,2-VO组大鼠神经功能显著受损(P 0. 05);电镜下可观察到大鼠胼胝体髓鞘变薄、完整性差;胼胝体部位Olig-2表达显著减少; MBP表达显著下降(P 0. 05)。经CTNF治疗后7 d的大鼠出现神经功能明显改善(P 0. 05),胼胝体髓鞘结构明显恢复,Olig-2表达明显增加,MBP表达明显增加(P 0. 05)。结论:CTNF处理能够改善脑缺血大鼠神经功能,促进髓鞘再生。     

运动训练对大鼠肾上腺睫状神经营养因子表达的影响

目的研究大鼠游泳运动训练对大鼠肾上腺睫状神经营养因子(CNTF)表达的影响。方法成年SD大鼠分四组,除正常组外,三个负重组分别给予占体重1%、3%、5%负重,进行6周游泳训练,每天1h,取各组大鼠肾上腺,用RT-PCR研究CNTF mRNA水平变化。结果肾上腺能检测到CNTF mRNA表达,与正常组比较,轻度和中度负重组肾上腺CNTF mRNA表达明显增加(P<0.05)。结论轻、中度负重游泳训练明显增加肾上腺CNTF基因水平,提示CNTF可能与游泳负重导致机体的神经内分泌调节有关。     

人睫状神经营养因子基因在大肠杆菌中的表达

目的克隆人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）基因，并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出具有生物活性的ｈＣＮＴＦ蛋白。方法从人外周神经组织总ＲＮＡ经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增得到编码人ＣＮＴＦ的全长ｃＤＮＡ片段，此片段经回收和纯化后克隆进ＰＧＥＭ－５Ｚｆ（＋）质粒载体，并进行了ＤＮＡ序列分析，然后进一步亚克隆进Ｔ７启动子表达载体，用ＩＰＴＧ在大肠杆菌宿主中诱导ｈＣＮＴＦ蛋白表达，并以体外培养的鸡胚背根神经节（ＤＲＧ）神经元测定了重组ｈＣＮＴＦ蛋白的神经营养活性。结果成功克隆了人ＣＮＴＦ基因，含重组ＣＮＴＦ质粒的大肠杆菌经０．４ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导３小时后，靶蛋白占细菌总蛋白的２５％以上。结论ｈＣＮＴＦ基因的克隆和高效表达为进一步研究其结构功能关系和临床应用打下了基础     

睫状神经营养因子对视神经损伤的修复作用

视神经损伤后,视网膜神经节细胞进行性损害,轴突变性坏死,再生困难。睫状神经营养因子是一种非靶源性神经营养因子,在视网膜神经节细胞的生长发育中起重要调控作用,主要表现在对损伤的视网膜神经节细胞有促进存活及轴突再生的作用。     

睫状神经营养因子的基因结构及受体

睫状神经营养因子最初由于能促进鸡胚胎睫状神经节副交感神经元存活而被发现,现已知道它对神经系统的细胞具有更广泛的作用。最近研究表明睫状神经营养因子与成血细胞因子的一个亚家族成员在结构上相似并共用受体成分。     

人睫状神经营养因子在基因在大肠杆菌中的表达

目的 克隆人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）基因，并大大肠杆菌宿主系统中高效表达出具有生物活性的ｈＣＮＴＦ蛋白。方法 从人外周神经组织总ＲＮＡ经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增得到编码人ＣＮＴＦ的全长ｃＤＮＡＡ片段，此片段经回收和纯化后克隆进ＰＧＥＭ－５Ｚｆ（＋）质粒载体，并进行了ＤＮＡ序列分析，然后进一步亚克隆进Ｔ７启动子表达载体，用ＩＰＴＧ在大肠杆菌主中诱导ｈＣＮＴＦ蛋白表达，并以体外培     

重组人睫状神经营养因子对大鼠坐骨神经再生长的影响

目的: 观察重组人睫状神经营养因子(CNTF)对大鼠坐骨神经再生长的影响,并与神经生长因子(NGF)的作用进行比较。方法: 随机将动物分成正常对照组、模型组、CNTF给药小剂量组(48 μg/kg)、中剂量组(216 μg/kg)、大剂量组(1 080 μg/kg)、NGF 给药组(20 μg/kg),每组各10只。模型组采用大鼠坐骨神经切断再缝合法造成坐骨神经损伤模型,给药组采用不同药物剂量对神经损伤部位肌肉注射给药45 d后,测定神经动作电位潜伏期和传导速度。结果: 与模型组相比较,CNTF各给药组神经动作电位潜伏期显著缩短(P<0.01),传导速度显著增快(P<0.01);同时,216 μg/kg、1 080 μg/kg CNTF组和NGF组对神经动作电位潜伏期的影响无显著差别(P>0.05),但是216 μg/kg、1 080 μg/kg CNTF组的神经动作电位传导速度比NGF组显著增快(P<0.01)。结论: CNTF对大鼠坐骨神经再生具有一定的促进作用,而且其作用可能优于NGF。     

脂肪源性干细胞促进大鼠受损坐骨神经传导及脊髓脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子的表达

目的:探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)对坐骨神经损伤大鼠神经传导功能以及脊髓脑源性神经营养因子(BDNF)和睫状神经营养因子(CNTF)表达的影响。方法:将第4代ADSCs移植入脱细胞神经移植物(ANA)中,构建组织工程神经。大鼠随机分为正常组、杜氏改良Eagle培养基营养混合物F12(DMEM)组和ADSC组。DMEM组和ADSC组均建立坐骨神经损伤模型,后用相应的组织工程神经桥接损伤神经的断端。术后6周采用神经电生理记录仪检测各组大鼠坐骨神经传导速度和波幅,采用免疫荧光和Real-time PCR检测各组大鼠脊髓脑源性神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)蛋白和mRNA的表达。结果:ADSC组大鼠坐骨神经传导速度、波幅和脊髓BDNF和CNTF蛋白及mRNA表达均显著高于DMEM组。结论:ADSCs可增加坐骨神经传导速度和波幅、上调脊髓BDNF和CNTF的表达。     

睫状神经营养因子缓释微囊的制备及表征

背景:睫状神经营养因子眼部给药非常困难且药物生物利用度较低,需要长期连续给药,为解决这一问题,可将其包封在选择性透过膜中形成微囊,利用膜的选择透过性释放囊内的生物活性物质或活体细胞分泌的生物活性分子和小分子代谢产物。目的:制备具有特殊结构的睫状神经营养因子缓释微囊。方法:将聚醚砜中空纤维膜的一端用医用胶紫外光固化封口,再将睫状神经因子从另一端注入聚醚砜微囊中,并用医用胶紫外光固化封口,制得睫状神经营养因子缓释微囊。将缓释微囊浸提液与小鼠成纤维细胞L929共培养,考察微囊的细胞毒性;将小鼠视网膜色素上皮细胞与缓释微囊共培养,考察细胞在缓释微囊表面的黏附性;将睫状神经营养因子缓释微囊浸泡在生理盐水中考察其降解性;同时考察在聚醚砜中空纤维囊中免疫球蛋白IgG和睫状神经营养因子的体外释放行为。结果与结论:睫状神经营养因子缓释微囊的内径约为398μm,壁厚约为145μm,囊壁的外层由疏松大孔构成,内层呈现许多微小的囊孔,孔径约10 nm,在生理盐水中4个月基本无降解,具有良好的细胞相容性。聚醚砜中空纤维囊对蛋白的释放具有选择透过性,能选择性释放睫状神经因子,有效阻隔球状抗体IgG。同时,缓释微囊改善了以往给药体系的突释行为,睫状神经营养因子只在中间阶段呈现较小程度的突释,然后呈现平稳释放。