肝细胞癌侵袭转移机制研究进展

原发性肝癌中最常见的是肝细胞癌（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ, ＨＣＣ）,对肝细胞癌侵袭转移机制的深入研究,有助于发现能准确估计肝癌原发灶转移能力的特异标记物、制定有效防止肿瘤转移的对策,为早期诊断、综合治疗和估计预后提供依据。 一、细胞外基质及基底膜降解系统与肝细胞癌局部侵袭 细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ）及基底膜（ｂａｓｅｍｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ,ＢＭｓ）的主要成分是结构蛋白和糖胺多糖（ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎｓ,ＧＡＧ）,前者包括胶…     

DLC-1基因表达与肝细胞癌复发转移的关系

目的已报道人类染色体8p缺失可能与肝癌转移有关,本文应用实时定量聚合酶链反应(RQ- PCR)研究位于8p的DLC-1基因mRNA表达与肝细胞癌侵袭转移的关系。方法收集51例复旦大学中山医院外科手术切除的肝细胞癌(HCC)及癌旁正常组织标本,根据临床病理学指标,分为高低侵袭性两组,用RQ-PCR对不同侵袭性HCC之间的DLC-1基因表达进行分析。对不同侵袭转移潜能MHCC97-L、MHCC97-H、HCCLM3、Hep3B及HepG2肝癌细胞系用同样方法分析DLC-1基因的表达差异。结果非转移细胞系Hep3B和HepG2与转移细胞系MHCC97-L、MHCC97-H和HCCLM3之间DLC—1基因表达差异有统计学意义(P相似文献   

nm23H1基因遗传不稳定性与肝细胞癌侵袭转移的关系

大量研究表明基因的遗传不稳定性,如基因的微卫星不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）可能是产生基因突变,导致抑癌基因功能失调,引起肿瘤发生和转移的重要因素。本实验采用PCR-SSCP与免疫组织化学染色技术,对HCC的nm23H1基因D17S396位点的MSI和LOH,     

外周血AFPmRNA表达与肝细胞癌侵袭转移的关系探讨

1998年9月至1999年5月，我们采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术对肝细胞癌患者外周血液中的甲胎球蛋白mRNA(AFP mRNA)进行了检测，旨在探讨其与肝癌侵袭转移的关系，及其在肝细胞癌辅助诊断中的价值。     

DLC-1基因在肝细胞癌组织中表达的研究

目的 研究肝癌缺失基因-1（DLC-1）在人原发性肝癌组织中的表达及与肝细胞癌侵袭转移的关系。方法收集51例复旦大学附属中山医院外科手术切除的肝细胞癌及癌旁正常组织标本,用荧光定量RT-PCR方法分析组织中DLC-1基因的表达。结果在51对配对的肝细胞癌与癌旁无瘤肝组织中,前者DLC-1基因表达水平明显低于后者（P〈0．01）,且高侵袭性肝细胞癌组明显低于低侵袭性肝细胞癌组（P〈0．05）。结论DLC-1基因在HCC组织中呈低表达,其表达水平与其侵袭性高低相关。     

MAGE-1基因在肝细胞性肝癌中的表达

目的探讨ＭＡＧＥ－１基因编码的肿瘤相关抗原作为肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）主动免疫治疗攻击靶点的可能性。方法用ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测了３９例ＨＣＣ及癌旁组织、３种人肝癌细胞株和５例非ＨＣＣ病例肝组织中ＭＡＧＥ－１基因的表达。结果ＨＣＣ癌组织中ＭＡＧＥ－１基因表达率明显高于癌分组织中的表达率,５８．９％（２／３９）对１０．３％（４／３９）,Ｐ＜００１。３种细胞株均为阳性表达。结论ＭＡＧＥ－１基因可作为主动免疫治疗的攻击靶点,以进一步研究设计新的ＨＣＣ免疫治疗策略。     

降钙素基因相关肽受体成分蛋白在肝细胞癌中的表达及其与预后的关系

目的 检测降钙素基因相关肽受体成分蛋白（CRCP）在肝细胞癌及癌旁组织中的表达水平,探究其与肝细胞癌临床病理和患者预后的相关性。方法 收集2003年6月—2009年9月在海军军医大学附属东方肝胆外科医院行手术切除治疗的79例肝细胞癌患者的肝癌组织及相应癌旁组织标本,制作组织芯片,免疫组化定量分析,提取蛋白进行Western Blot检测,比较CRCP在肝癌组织与癌旁组织中的表达差异。计数资料组间比较采用χ²检验,采用受试者工作特性曲线（ROC曲线）分析获得曲线下面积（AUC）,评估拟合优度,并使用Youden指数确定最佳截断值,利用Kaplan-Meier生存分析法分析CRCP表达与肝细胞癌预后的关系,两组间比较采用log-rank检验。结果 79例肝细胞癌患者中,男67例,女12例,年龄10～72岁;病理分级4级1例,3级61例,2级17例;20例合并门静脉癌栓;巴塞罗那分期0期5例,A期55例,B期11例,C期8例。免疫组化结果显示,75.9%的患者肝癌组织中CRCP表达水平明显低于癌旁组织。CRCP低表达肝细胞癌患者的CK19阳性、肿瘤包膜不完整、合并门静脉...     

整合素与肝细胞癌的侵袭与转移

整合素［１］家族为粘附分子中一类由一个ａｌｆａ亚单位与一个ｂｅｔａ亚单位以非共价键连接而成的异二聚体胯膜糖蛋白．目前已知的亚单位有２５种ａｌｆａ亚单位及１１种ｂｅｔａ亚单位,形成２０余种不同的整合素．ａｌｆａ,ｂｅｔａ亚单位氨基端的球形域相互连接构成整合素胞外配基结合区．Ａｌｆａ亚单位胞外域较长,含钙离子结合区,胞内域则较短．Ｂｅｔａ亚单位的特点是胞外域含有胱氨酸的重复序列,胞内域较长．可通过与纽带蛋白等结合完成细胞内外双向信号的传递．１　肿瘤细胞的侵袭与转移胞外基质配体相结合的识别位点已经确认…     

肝细胞癌中T淋巴瘤侵袭转移诱导基因1对肝细胞癌患者血管生成的作用

目的检测肝细胞癌中T淋巴瘤侵袭转移诱导基因(Tiam)1对血管生成的作用,探讨Tiam1、血管内皮生长因子(VEGF)及CD105表达的关系。方法以89例肝细胞癌患者术后存档蜡块为观察组,50例正常肝组织为对照组,采用免疫组织化学方法检测两组Tiam1、VEGF及CD105表达,探讨Tiam1、VEGF和MVD在不同临床病理特征的表达关系及相关性。结果观察组Tiam1、VEGF及MVD表达阳性率显著高于对照组;观察组Tiam1、VEGF及MVD均与肿瘤转移、体积及Ki67表达相关。肝癌Tiam1、VEGF及MVD表达呈正相关性。结论肝细胞癌中Tiam1、VEGF高表达,共同促进CD105阳性的血管形成,联合检测Tiam1、VEGF及CD105可能对判断肝细胞癌预后有重要意义。     

基质金属蛋白酶与肝细胞癌的侵袭转移

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是起源于肝细胞的上皮细胞癌，是肝脏最常见的恶性肿瘤，80％以上与肝纤维化有关。我们知道细胞的粘附、迁移和细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的蛋白水解与肿瘤的转移密切相关，而基质金属蛋白酶(matrix metaUoproteinase，MMP)是细胞外基质降解过程中必不可少的酶，正常稳定状态组织中MMP表达量极少，但在炎性因子、激素、生长因子和细胞转化过程中表达量明显升高，这一过程与肝细胞癌的侵袭转移的关系密切，逐渐引起人们的注意，现将近年来文献综述如下。     

骨桥蛋白基因沉默对肝癌侵袭转移的抑制作用

目的 探讨应用小于扰RNA(siRNA)沉默骨桥蛋白(OPN)基因的表达对人肝癌细胞株侵袭转移的抑制作用. 方法于体外化学合成针对OPN序列特异性的舣链RNA(dsRNA),转染人肝癌细胞株(HCC LM3),用实时定量PCR和Western blot检测OPN mRNA水平和蛋白表达.通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验,观察肝癌细胞生物学行为的指标.统计学方法采用SPSS11.5软件进行q检验,计数资料用χ<'2>检验. 结果与空白组相比,siRNA特异性转染HCC-LM3细胞OPN mRNA水平下降84.7%,蛋白水半下降81%(P<0.5);细胞克隆形成数目下降(1.91个对比5.40个,P<0.01);穿过人工基底膜的细胞数减少(13.5个对比33.4个,P<0.05),阴性对照组的OPN mRNA与空白对照组差异无统计学意义(29.7个对比33.4个,P>0.05).结论 沉默OPN基因表达-口J在体外阻遏肝癌侵袭.     

KAI1基因对肝癌MHCC97-H细胞生长及侵袭能力的影响

KAI1基因是从前列腺癌中克隆的肿瘤转移抑制基因。用基因转染技术研究KAI1基因对肝癌细胞生长及侵袭能力的影响。     

肝细胞癌组织中肿瘤相关基因的初步筛选

为寻找肝癌早期诊断标志物,本研究用基因芯片技术检测了肝细胞癌(HCC)和正常肝组织中基因群的表达情况,初步筛选出相关的基因群,并对其中的肿瘤相关基因进行验证,以进一步了解这些基因对肝癌诊断的价值.     

抑癌基因PTEN在原发性肝癌中的表达及意义

目的 研究抑癌基因PTEN在原发性肝癌发生过程中的作用及意义。方法 应用免疫组织化学和northern杂交分析60例原发性肝癌及对应癌旁组织中PTEN mRNA及PTEN蛋白表达情况,结合患者的临床病理资料分析PTEN在原发性肝肝癌中的意义。结果 PTEN蛋白明确定位于肝细胞胞浆内。60例HCC的癌组织中,PTEN蛋白阳性率为48.3％(29/60),明显低于癌旁肝组织的阳性率(100％)。PTEN蛋白在肝癌组织内的表达阳性率与肝癌的病理学分级、有无癌栓有关,PTEN蛋白在肝癌组织的Ⅰ～Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的阳性率分别为84.0％、23.8％、21.4％,无癌栓形成组PTEN蛋白表达的阳性率为55.56%,有癌栓形成组PTEN蛋白表达的阳性率为26.7％。Northern杂交显示,PIEN基因在肝癌细胞内存在四个转录子,其大小分别为5.5、4.4、2.4、1.8 kb。患者肝癌组织内PTEN mRNA的表达水平明显低于对应的癌旁肝组织。PTEN 5.5 kb和4.4 kb的转录子表达水平的降低与血清中AFP水平、有无癌栓、有无卫星灶及病理学分级有关;2.4 kb的转录子表达水平降低与患者有无癌栓、有无卫星灶有关;1.8 kb转录子表达水平的降低与临床病理学指标无关。结论 PTEN在肝癌的发生过程中可能起重要作用,其表达水平有可能作为反映肝癌进展和预后的病理学指标。     

Autotaxin mRNA在人肝细胞癌中的表达

目的了解自分泌运动因子Ａｕｔｏｔａｘｉｎ（ＡＴＸ）ｍＲＮＡ在肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征之间的关系。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）研究５例正常肝组织、３２例肝癌组织中ＡｕｔｏｔａｘｉｎｍＲＮＡ的表达，以βａｃｔｉｎ为内参照。结果５例正常肝组织及３２例肝癌中均有ＡｕｔｏｔａｘｉｎｍＲＮＡ表达；但Ａｕｔｏｔａｘｉｎ基因表达值（ｘ±ｓ）癌组织显著高于正常肝组织（６８．２３％±１５．３１％对３１．９７±８．０５％，Ｐ＜０．００１）。高表达ＡＴＸ肝癌与癌细胞肝内转移、门静脉癌栓形成、肿瘤的分化程度有关，而与年龄、性别、病因、肿瘤大小等无关。结论Ａｕｔｏｔａｘｉｎ基因过度表达与肝细胞癌的进展、转移有关。     

转移消失蛋白B基因表达对MHCC97H细胞侵袭和转移潜能的影响

目的 观察慢病毒载体携带靶向人源性MTSS1(转移消失蛋白B基因,MIM-B基因)小干扰RNA对人肝癌细胞株MHCC97H细胞侵袭和转移潜能的影响.方法 构建靶向MTSS1基因的慢病毒载体-siMTSS1,转染MHCC97H细胞.实时荧光定量PCR和Western blot用于测定MIM-B mRNA和蛋白表达;侵袭实验用于评估侵袭潜能;明胶酶谱用于检测基质金属蛋白酶2(MMP2)活性.以MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,第14天将24只成模裸鼠随机分成空白对照组、空载体组及治疗组(每组8只),在超声引导下瘤周及瘤内多点注射硼酸盐缓冲液、Lenti-GFP及Lenti-siMTSS1,第35天检测肺转移情况.采用SPSS13.0统计软件对计量资料进行方差分析.结果 成功构建慢病毒载体携带的针对MTSS1基因小干扰RNA,Lenti-siMTSS1感染效率为97.0%,显著抑制MIM-B蛋白表达,下调MMP2活性.体外实验结果显示空白对照组、空载体组和干扰组细胞穿膜数分别为37.9±4.4、37.4±5.3和26.6±4.6(F=26.695,P＜0.01).体内实验结果显示空白对照组、空载体组及治疗组肺转移结节数分别为6.5±2.6、6.4±2.7和3.8±1.3(F=3.637,P＜0.05);肿瘤组织MIM-B mRNA相对表达量分别为0.39±0.19、0.38±0.10和0.16±0.11(F=11.644,P＜0.01).结论 慢病毒介导小干扰RNA抑制MIM-B mRNA和蛋白表达进而抑制HCC侵袭、转移潜能可能与下调MMP2活性相关,为肝癌患者提供一条新的分子靶向治疗思路.     

肿瘤拒绝抗原1在肝硬化和肝癌组织中的表达及其与肝癌临床病理学特征的关系

目的 探讨肿瘤拒绝抗原1(TRA1)在肝细胞癌(HCC)和肝硬化组织中的表达水平及其与HCC临床病理学特征的关系.方法 采用RT-PCR法、Western blot和免疫组织化学法分别检测了HCC和肝硬化组织中TRA1 mRNA和蛋白的表达水平,并与HCC临床病理学特征进行相关分析.RT-PCR和Western blot结果采用单因素方差分析;免疫组织化学结果分析采用Fisher's确切概率法;相关性分析采用Spearman等级相关.结果 经对RT-PCR结果分析,HCC和肝硬化组织中TRA1 mRNA表达水平高于正常肝组织水平(F值分别为20.821和12.311,P值均＜0.05).Western blot检测结果显示,HCC和肝硬化组织中TRA1蛋白表达水平也高于正常肝组织(F值分别为21.231和20.125,P值均＜0.05).经免疫组织化学分析,TRA1蛋白在正常对照组、肝硬化组和HCC组的表达逐渐增强,阳性表达率分别为57.14%、78.95%和93.75%.其表达水平与HCC分化程度呈负相关(r=-0.4655,P＜0.01);与HCC患者TNM分期呈正相关(r=0.5157,P＜0.01).结论 TRA1在肝硬化和HCC中的过表达可能与肝癌的发生和发展有关,并有可能成为一个潜在的HCC早期诊断标志物;TRA1的检测有助于判断HCC的分化程度,与HBV的感染有一定关系,同时可作为判断预后的指标.     

白细胞介素-2对人肝癌细胞侵袭力及转移力的调节作用

目的 研究白细胞介素－2（IL－2）对肝癌细胞侵袭力及转移力相关因素的调节作用。方法 用IL－2处理肝癌细胞,采用流式细胞仪分析肝癌细胞表面抗原分子的表达水平,用附壁试验检测肝癌细胞对细胞外基质的亲和力,用细胞聚集试验检测肝癌细胞的聚集能力以研究IL－2对肝癌细胞侵袭力及转移力相关因素的调节作用。结果 经高浓度和低浓度IL－2处理后,肝癌细胞表面ICAM－1及HLA－I表达均增加,CD44表达减少,肝癌细胞对细胞外基质的亲和力及肝癌细胞聚集程度均降低。结论 IL－2可明显增加肝癌细胞ICAM－1及HLA－I的表达,抑制D44表达,抑制肝癌细胞对细胞外基质的亲和力及肝癌细胞的聚集作用。因此可抑制肝癌细胞的侵袭力和转移力。