扶正增效方放射增敏与肿瘤细胞内O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶的关系

目的探讨扶正增效方放射增敏与肿瘤细胞内 O~6-甲基鸟嘌呤 DNA 甲基转移酶(O~6-MT)关系。方法建立裸鼠人肺腺癌 PAa 模型,分为6组,从接种日始,Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ组裸鼠每天灌服0.6g 扶正增效方水煎剂,Ⅰ、Ⅲ组灌服等量无菌生理盐水,35天Ⅴ、Ⅵ组腹腔注射2mg STZ,36天予Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组瘤体10Gy X 线照射,测瘤体直径、O~6-MT 含量、MGMT 染色及细胞病理学镜检。结果 6组中O~6-MT 含量工组最高,Ⅵ组最少,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组与Ⅰ组相比差异显著,Ⅳ、Ⅵ组相比差异也显著;MGMT 染色强度变化与 O~6-MT 含量一致。瘤体生长Ⅰ、Ⅱ组瘤体放疗第4天起明显增大,Ⅲ组第6天明显增大,与Ⅰ、Ⅱ组相比增长减慢;Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组瘤体在第4天明显减少,以第Ⅵ组最明显;病理学镜检Ⅲ组见小的散在坏死灶,Ⅳ、Ⅴ组坏死区域较Ⅲ组增加,Ⅳ组与Ⅴ组相似;Ⅵ组坏死区域明显增多增大。通过对 O~6-MT 活性、MGMT 染色强度与病理学镜检、瘤体大小对比,细胞内 O~6-MT 含量与放射敏感性密切相关,O~6-MT 含量低组别放疗效果好。结论 O~6-MT含量决定其放射敏感性,据 O~6-MT 活性高低预测其放射敏感性;扶正增效方放射增敏一个重要途径是抑制 DNA 甲基转移酶活性而实现的。     

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶与肿瘤预见性化疗新策略

克服肿瘤细胞的耐药性是化疗需要解决的重大课题。本项目通过分析20株中国人肿瘤细胞中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(简写MGMT)的活性与对烷化剂亚硝脲耐药性的关系的实验；通过使用亚硝脲药物治疗移植高和低MGMT肿瘤细胞的荷瘤裸鼠实验；通过向对烷化剂亚硝脲敏感、耐药的细胞分别转导MGMT cDNA以及MGMT反义RNA的实验；证明肿瘤细胞中的MGMT水平决定了细胞对烷化剂、亚硝脲类药物的耐药性，MGMT高的肿瘤细胞耐药，MGMT低的细胞敏感。通过细胞和裸鼠实验证明链脲菌素(Streptozotoein，简写STZ)或O^6-苄基鸟嘌呤(简写O^6-BG)可以降低细胞内的MGMT活性，克服细胞对烷化剂亚硝脲的耐药性。     

PAa细胞内O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶与放射敏感性的关系

目的:探讨PAa细胞内O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O6-MT)与放射敏感性的关系.方法:建立裸鼠人肺腺癌PAa模型,分为4组,从接种日始,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组裸鼠每天灌服0.2 ml无菌生理盐水,35 dⅡ、Ⅳ组腹腔注射2 mg链脲菌素(STZ),36 d予Ⅲ、Ⅳ组瘤体10 GyX线照射,测瘤体直径、O6-MT含量、MGMT染色及细胞病理学镜检.结果:4组中O6-MT含量Ⅰ组最高,Ⅳ组最少,Ⅳ组与Ⅰ、Ⅱ组相比差异显著,Ⅳ组与Ⅲ组相比差异也显著(P＜0.05);MGMT染色强度变化与O6-MT含量一致.瘤体生长Ⅰ、Ⅱ组瘤体放疗后4 d后明显增大,Ⅲ组6 d后明显增大,与Ⅰ、Ⅱ组相比增长减慢,Ⅳ组瘤体在4 d后明显减少;病理学镜检Ⅲ组见小的散在坏死灶,Ⅳ组坏死区域增加.通过对O6-MT活性、MGMT染色强度与病理学镜检、瘤体大小对比,细胞内O6-MT含量与放射敏感性密切相关,O6-MT含量低组别放疗效果好.结论:O6-MT含量决定其放射敏感性,据O6-MT活性高低预测其放射敏感性,STZ可提高放疗疗效.     

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达与脑胶质瘤化疗的关系

胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤之一，目前临床多采取以手术治疗为主并辅以化学治疗和放射治疗。氯乙基亚硝脲类烷化剂（CNUs），以其高脂溶性，易于透过血脑屏障的特性，长期以来被视为治疗脑胶质瘤有效的化疗药物。但耐药性的产生使其临床有效率不足30％，而成为脑胶质瘤化疗失败的主要原因。     

O^6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶基因多态性与肿瘤易感性的关系

【目的】通过比较表达在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中野生型和突变型O^6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(AGT)对二氯乙基亚硝脲(BCNU)细胞毒性作用的反应差异，探测AGT错译突变体的功能意义。【方法】将野生型及不同突变型AGT cDNA分别转染CHO细胞，选择稳定表达AGT的细胞株，用BCNU作用细胞，以存活细胞簇的数量作为判断细胞毒性标准。【结果】表达AGT Leu84Phe和ku84Phe／Ilel43Val／Lys178Arg突变体的细胞对BCNU的毒性作用抵抗力显著减弱，与此不同的是，其余突变体Ile143Val、Lys178Arg、Ser184Asn以及Ile143Val／Lys178Arg对BCNU毒性作用的抵抗性较野生型AGT无明显差异。【结论】AGT Leu84Phe突变体在修复BCNU造成的DNA损伤过程中酶活性降低。提示AGT基因多态性可能与肿瘤易感性有关。     

扶正增效方对肺腺癌细胞放射增敏的基因表达谱分析

目的：采用基因芯片研究扶正增效方对肺腺癌细胞放射增敏作用的具体靶点。方法：将10只裸鼠皮下接种PAa细胞，并随机分为单纯放射组（Ⅰ组，5只）、放射加增效方组（Ⅱ组，5只）。自接种之日起，Ⅱ组给予扶正增效方汤剂灌胃，Ⅰ组灌服等容积生理盐水。瘤体乍长至直径约1cm时，给予瘤体单次β电子线照射。照射后23h处死裸鼠，快速取瘤体，提取组织总RNA，分离mRNA。采用Affymetrix Human Genome U133 2．0Array基因芯片分析两组之间基因表达谱的差异。结果：两组的基因表达谱显示，差异基因共有857条．上调349条．下调508条，其中39条在GeneBank中登录；按照功能分为细胞周期、凋产、信号转导、代谢等类。结论：扶正增效方对肺腺癌细胞的放射增敏作用是复杂的，涉及多个基因表达的变化．还有大量未知靶点有待于进一步研究。     

O6-甲基鸟嘌呤DNA转移酶在神经胶质瘤中的表达及其与亚硝脲耐药的关系

目的 :探讨O6 甲基鸟嘌呤DNA转移酶 (MGMT)在人脑神经胶质瘤中的表达情况及其与亚硝脲耐药之间的关系。方法 :采用免疫组化法对人脑神经胶质瘤石蜡标本中MGMT进行了检测 ,并与临床应用亚硝脲的疗效评价结果进行了比较。结果 :116例神经胶质瘤中MGMT阳性表达率为 6 7.2 %。MGMT阳性表达率最高者为髓母细胞瘤 (10 0 % ) ,表达率最低者为少枝胶质细胞瘤 (35 .7% )。在使用亚硝脲治疗的患者中 ,MGMT阳性表达与亚硝脲化疗效果呈显著负相关 (P <0 .0 5 )。肿瘤细胞的耐药程度与MGMT表达强度无关 ,只与其是否阳性有关。结论 :不同病理类型的神经胶质瘤对亚硝脲的耐药和敏感性明显不同。化疗前检测神经胶质瘤MGMT的表达情况 ,对预测化疗敏感性、指导临床使用亚硝脲化疗具有重要意义。     

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因表达与胃癌发生的关系

目的 研究人胃癌组织O^6-甲鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（MGMT）基因的表达特点及其与胃癌发生的关系。方法 应用加强型原位杂交方法及寡核苷酸探针高效标记技术对76例胃癌组织，73例癌旁组织20例正常胃组织进行MGMT基因标记检测，同时应用自动图像分析系统进行定量分析。结果 胃癌组织MGMT基因阳性表达率为40.8%（37/76），低于正常胃组织的60.0%（12/20）MGMT表达强阻性率为32.3%（10/31），也明显低于正常组织的83.3%（10/12），差异均有显著性意义（P＜0.01或P＜0.05）； 癌旁组织MGMT基因阳性表达率为46.6%（31/73）。MGMT表达强阳性率为41.1%（14/34），与胃癌组织差异无显著性意义。定量分析示，胃癌组织MGMT阳性表达的积分吸光度，阳性单位值明显低于正常组织（P＜0.05）。胃癌组织与癌旁组织，早期胃癌与进展期胃癌组织，癌旁不同程度不典型增生之间MGMT表达无明显差异。结论 人体胃组织存在高度表达的MGMT基因，胃癌发生与MGMT基因表达水平降低有关，MGMT基因异常表达是胃癌形态学改变出现之前的早期行为。     

食管鳞癌组织中缺氧诱导因子-1α和6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶蛋白的表达与预后的关系

目的 研究食管鳞状细胞癌(ESCC)中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)蛋白的表达及其与食管癌病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学(SP)法检测58例食管鳞癌组织中HIF-1α、MGMT蛋白的表达,并分析其与临床病理各因素之间的关系.结果 58例患者的ESCC组织中HIF-1α、MGMT蛋白均有表达,阳性表达率分别为51.4%、39.6%,MGMT 蛋白的表达与食管鳞癌的分化程度密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、分期及淋巴结转移无关.HIF-1α蛋白的表达与性别、年龄、分期、分化程度以及淋巴结转移均无关(P均>0.05).HIF-1α与MGMT 蛋白表达无明显相关关系(P>0.05).MGMT阳性表达患者生存时间(OS)较阴性组明显延长(P<0.05),而HIF-1α蛋白表达与OS无明显相关(P>0.05).结论 HIF-1α蛋白在食管鳞癌组织中呈高表达,MGMT与其分化程度相关,两者检测对判断预后有重要意义. Abstract： Objective To investigate the expression of hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) and O~6-methylguanine DNA methytransferase(MGMT) in esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) tissue and its relation with the clinicopathalogy features. Methods The expression of HIF-1α, MGMT in 58 cases of ESCC were detected by immnohistochemical staining. Results The positive rates of HIF-1α,MGMT in ESCC tissue were 51.4%,39.6%, respectively. The positive expression rates of HIF-1α and MGMT were not correlated with the degree of sex,age,clinical stage and differentiation(P>0.05), but MGMT expression was correlated with differentiation and overall survival time (P<0.05). The expression of HIF-1α was not correlated with that of MGMT (P>0.05), and HIF-1α was not correlated with overall survival time. Conclusions HIF-1α, MGMT play important roles in esophageal carcinoma,MGMT was correlated with the differentiation of esophageal carcinoma, respectively, which may be used as important indexes to evaluate the prognosis of esophageal carcinoma.