IL-4诱导小鼠pDC产生IFN-γ

DC是骨髓来源白细胞的一个迁移群,鼠的脾脏中至少有3个DC亚型:CD8 DC,CD11b DC和B220 DC(PDC).其中pDC是未成熟DC,抗原提呈功能很弱,但病毒或细菌感染时分泌大量Ⅰ型干扰素,因此在天然免疫中发挥重要的作用.研究表明天然免疫反应影响Th分化,本文阐述了经典Th2型细胞因子IL-4诱导小鼠B220 pDC产生经典Th1型细胞因子IFN-γ的独特作用及可能机制.     

细胞因子IL-2和IL-6对胰腺癌细胞表达VEGF-D的调节

目的探讨细胞因子白细胞介素2（IL-2）和白细胞介素6（IL-6）对胰腺癌细胞表达VEGF-D的调节。方法以细胞因子IL-2或IL-6分别刺激胰腺癌细胞株SW1990和BXPC-3后用逆转录 聚合酶链式反应技术（RT-PCR）分析其VEGF-D基因的表达。结果IL-2使细胞株SW1990和BXPC-3产生VEGF-D mRNA减少;IL 6使细胞株SW1990产生VEGF-D mRNA增加,但对细胞株BXPC-3产生VEGF-D mRNA无明显影响。结论IL-2抑制胰腺癌细胞VEGF-D mRNA的表达,从而抑制胰腺癌淋巴结转移;IL-6促进某些胰腺癌细胞VEGF-D mRNA的表达,但对胰腺癌细胞生物学特性的影响有待于进一步深入研究。     

肺癌组织IL-10、IL-2、IFN-γ水平及其意义

白细胞介素 (ＩＬ) 1 0是一种由Ｔｈ2 细胞和癌细胞分泌的Ｍｒ为 1 8× 1 0 3的酸性蛋白 ,是具有多向生物活性 ,特别是具有抑制抗肿瘤免疫功能的细胞因子[1 ,2 ] 。肿瘤患者不但整个机体存在ＩＬ 2、ＩＦＮ γ的降低 ,并且在肿瘤局部也存在ＩＬ 2、ＩＦＮ γ降低的现象 ,但其原因尚不清楚[3 ,4] 。本实验在于了解ＩＬ 1 0与ＩＬ 2、ＩＦＮ γ的关系 ,探求ＩＬ 1 0在肺癌中的作用 ,为ＩＬ 1 0的临床应用提供实验依据。材料和方法一　肺癌标本　取自肺癌手术切除病人 ,术后皆得到病理证实的肺癌病人 6 3例 ;其中鳞癌 32例 ,腺癌 31例 ,取离肿…     

化疗对肝癌患者T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ的影响

目的探讨化疗对肝癌患者T淋巴细胞内的白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响.方法应用单克隆抗体和流式细胞术(FCM)分析31例肝癌患者化疗前后T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ水平的变化.结果肝癌患者化疗后T淋巴细跑内IL-2和IFN-γ均较化疗前降低(P＜0.05);静脉化疗组与介入化疗组化疗前后T淋巴细胞内IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05);不同临床分期化疗前后IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05).结论化疗药物可通过降低T淋巴细胞内的IL-2、IFN-γ水平而影响细胞免疫功能,导致机体免疫功能降低.     

高场强电磁脉冲对Jurkat细胞IFN-γ和IL-4蛋白表达的定量分析

目的 研究电磁脉冲（EMP）辐照对白血病肿瘤细胞株Jurkat细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的影响，探讨EMP对Jurkat细胞损伤机制。方法 Jurkat细胞经EMP辐照后即刻、1h、6h、12h、24h、48h、72h共7个时相点，细胞悬液甩片，4％多聚甲醛4℃固定，自然晾干，进行SP法的IFN-γ和IL-4蛋白免疫组化染色。在光镜10×40倍视野下，应用CMIAS-H图像分析仪对阳性细胞的图像学参数的积分光密度值（IOD）进行测量和统计分析。结果 免疫组化结果表明，场强6×10^4V／m的电磁脉冲能使Jurkat细胞IFN-γ表达持续性减少，差异非常显著（P〈0．01），而IL-4变化不明显（P〉0．05）。结论 EMP辐照后Th1型的细胞因子IFN-γ明显减少，而Th2型的细胞因子IL-4未见显著变化，提示EMP辐照后机体中受到影响的主要是细胞免疫，而体液免疫功能未受到明显影响。     

高场强电磁脉冲对Jurkat细胞IFN-γ和IL-4蛋白表达的定量分析

目的 :研究电磁脉冲 (EMP)辐照对白血病肿瘤细胞株Jurkat细胞分泌细胞因子IFN -γ和IL - 4的影响 ,探讨EMP对Jurkat细胞损伤机制。方法 :Jurkat细胞经EMP照射后即刻、1h、 6h、 12h、 2 4h、 4 8h、 72h共 7个时相点 ,细胞悬液甩片 ,4 %多聚甲醛 4℃固定 ,自然晾干 ,进行SP法的IFN -γ和IL - 4蛋白免疫组化染色。在光镜 10× 4 0倍视野下 ,应用CMIAS-H图像分析仪对阳性细胞的图像分析参数积分光密度值 (IOD)进行统计分析。结果 :免疫组化结果表明 ,场强 6× 10 4 V/m的电磁脉冲能使Jurkat细胞IFN -r表达持续性减少 ,差异非常显著 (P <0 0 1) ,而IL - 4变化不明显 (P >0 0 5 )。结论 :EMP辐照后Th1型的细胞因子IFN-γ明显减少 ,而Th2型的细胞因子IL - 4未见显著变化 ,提示 :EMP辐照后机体中受到影响的主要是细胞免疫 ,而体液免疫功能未受到明显影响     

IL-27基因转染人食管癌细胞诱导PBMC产生IFN-γ和IL-12的研究

目的：探讨小鼠白介素（mIL-27）基因转染人食管癌细胞株诱导正常人外周血单个核细胞（PBMC）产生IFN-γ和IL-12的作用。方法：以逆转录病毒作为载体,将mIL-27基因转染入人食管癌细胞株Ecal09获得表达mIL-27的阳性细胞克隆（Eca109／mIL-27）,RT-PCR检测目的基因的表达,用MTT法检测转基因mIL-27对细胞增殖的影响,用EUSA法检测其诱导正常人PBMC产生IFN-γ和IL-12的能力。结果：建立了表达mIL-27基因的人食管癌细胞株,Eca109／mIL-27细胞中有mIL-27p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109／LXSN和Eca109细胞中未见表达,P〈0．01;Eca109／mIL-27与Eca109／LXSN和Eca109体外的体外增殖差异无统计学意义,P〉0．05;Eca109／mIL-27诱导正常人PB—MC产生IFN-γ和IL-12的含量高于Eca109／LXSN和Eca109,P〈0．01。结论：IL-27基因转染人食管癌细胞后可以诱导PBMC产生IFN-γ和IL-12的能力提高,提示可以用于肿瘤的免疫治疗。     

恶性胸腔积液来源的树突状细胞IFN-γ、IL-10的表达

目的检测恶性胸腔积液来源树突状细胞(DCs)及其培养上清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)的表达,评估对淋巴细胞的影响。方法收集15例肺癌患者的恶性胸腔积液,密度梯度离心后贴壁获取DCs前体,以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导培养DCs,流式细胞仪分析表型,ELISA法检测DCs培养上清中IL-10和IFN-γ的浓度。结果体外诱导培养后获得了典型形态的DCs,高表达CD83、HLA-DR和CD1a,成熟DCs上清中IFN-γ浓度明显增高,而IL-10浓度显著降低。结论恶性胸腔积液来源的DCs可能促进Th1反应。     

IL-2、IFN-α、IFN-γ对肾透明细胞癌786-0细胞中B7-H4表达的影响

目的：探究IL-2、IFN-α和IFN-γ对人肾透明细胞癌786-0细胞B7-H4表达的影响。方法：IL-2、IFN-α、IFN-γ处理786-0细胞24 h后,RT-PCR法检测 B7-H4 mRNA的表达,ELISA法、免疫细胞化学法、流式细胞术检测B7-H4蛋白的表达。结果：RT-PCR结果显示,IL-2组（0.75±0.06）、IFN-α组（0.68±0.05）、IFN-γ组（0.95±0.08）786-0细胞中B7-H4 mRNA的表达均明显高于未处理组细胞（0.30±0.03）（P<0.05）。免疫细胞化学染色结果显示,于786-0细胞膜与细胞质均可检测到B7-H4蛋白表达,IL-2、IFN-α、IFN-γ处理均可增加786-0细胞B7-H4蛋白的表达。ELISA结果显示,IL-2组\[（44.89±0.97）ng/ml\]、IFN-α组\[（46.74±2.25） ng/ml\]、IFN-γ组\[(47.31±1.12) ng/ml\] 786-0细胞上清液中分泌型B7-H4的表达明显高于未处理组\[（34.42±1.69）ng/ml\]（P<0.05）。流式细胞术检测结果表明,IL-2组\[（44.89±0.94）%\]、IFN-α组\[（46.41±0.55）%\]、IFN-γ组\[（54.18±1.42）%\] 786-0细胞表面B7-H4蛋白的阳性表达率明显高于未处理组\[（30.45±0.96）%\]（P<0.05）。结论：IL-2、IFN-α、IFN-γ在转录与翻译两个环节均可上调786-0细胞B7-H4的表达水平,其中以IFN-γ上调能力最强。     

IL-15对树突状细胞激活的T淋巴细胞免疫反应的作用观察

  目的  观察IL-15和IL-2对树突状细胞疫苗(dendritic cells, DC)激活的淋巴细胞免疫反应的作用。  方法  取健康小鼠的脾淋巴细胞, 在体外采用肿瘤抗原负载的DC疫苗与脾淋巴细胞混合后, 分别加入IL-15或IL-2培养7d。采用流式细胞术检测淋巴细胞免疫表型的变化; 使用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测分泌干扰素(interferon, IFN)-γ的细胞数量; 利用51Cr释放法检测淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。  结果  IL-15联合DC疫苗增强了T细胞反应, 包括淋巴细胞免疫表型和功能的改变。  结论  与IL-2相比, IL-15能更好的增强DC疫苗诱发的免疫反应, 为IL-15与DC疫苗的联合应用提供了一定的依据。      

EL_4瘤细胞产生的IL-2可诱导NK细胞和T细胞介导免疫

全身应用rIL-2治疗癌症患者,尽管具有明显的抗肿瘤作用,但由于严重的毒副作用,其疗效受到一定限制。为探讨一种避免全身毒副反应的IL-2免疫治疗方法,以逆转录病毒(PLJ)为载体,将IL-2cDNA转染小鼠胸腺瘤EL_4细胞,用IL-2依赖细胞株CTLL2筛选一株高分泌IL-2(500IU/ml/24h/5 ×10~5细胞)细胞株(EL_(4P)IL-2),另外以同样方法构建不分泌IL-2的EL_(4P)细胞株为对照株,体外大量扩增这两种细胞株。将多种剂量的EL_(4P)IL-2或EL_(4P)细胞分别皮下接种于C57BL/ 6小鼠,观察诱发肿瘤的情况,结果发现,小鼠对EL_(4P)IL-     

细胞因子IL-21在慢性感染和T细胞衰竭中的作用

HBV、HCV和HIV等病毒的慢性感染一直以来困扰着免疫学家，病毒特异性CTL细胞衰竭被认为是机体不能有效清除病毒的重要机制——即CTL细胞功能耗竭，处于一种不反应的状态，不能增殖和分泌细胞因子（IL-2、IFN-γ、TNF—α等）或杀伤感染细胞。在这过程中，如果缺失了CD4^＋T细胞将导致更加严重的CTL细胞衰竭，然而其具体机制还不清楚。论文作者发现，在慢性感染中，CD4^＋T细胞分泌的IL-21能够作用于CD8^＋T细胞，促进其增殖，从而维持长期有效的抗病毒免疫。     

细胞因子IL-21在慢性感染和T细胞衰竭中的作用

HBV、HCV和HIV等病毒的慢性感染长期困扰着免疫学家。病毒特异性CTL细胞（cytotoxic Tlymphocytes）的衰竭被认为是机体不能有效清除病毒的重要机制，即CTL细胞功能耗竭，处于一种不反应的状态，不能增殖，不能分泌细胞因子（IL-2、IFN-y、TNF—α等）和杀伤感染细胞。在这过程中，如果缺失了CD4＋T细胞将导致更加严重的CTL细胞衰竭，然而其具体机制还不清楚。论文作者研究发现，在慢性感染中，CD4＋T细胞分泌的IL-21能够作用于CD8＋T细胞，促进其增殖，从而维持长期有效的抗病毒免疫。     

急性白血病在不同分期IFN-γ、IL-4、IL-10水平测定及其临床意义

目的:探讨急性白血病在不同阶段的免疫微环境的改变.方法:采用ELISA方法检测急性白血病患者不同阶段IFN-γ、IL-10的水平,采用放射免疫方法检测IL-4的水平.结果:急性白血病初诊组IFN-γ降低,IL-4、IL-10增高,与正常对照组比较有显著性差异(P＜0.05);完全缓解组与正常对照组无显著性差异(P＞0.05),而与初诊组有显著性差异(P＜0.05)短期、中期、长期缓解组的IFN-γ依次增高,IL-4、IL-10依次降低.短期缓解组IFN-γ降低,IL-4、IL-10增高,与正常对照组有显著性差异(P＜0.05),中期缓解组、长期缓解组与正常对照组无显著性差异(P＞0.05).结论:急性白血病在不同阶段IFN-γ、IL-4、IL-10的水平不同,随着不同免疫微环境的改变而改变,因此检测IFN-γ、IL-10、IL-4的水平有助于评价机体的免疫功能,判断病情.     

体内IL-2基因和IFN-γ基因转染巨噬细胞抗肿瘤作用的研究

白细胞介素17是来源于活化T淋巴细胞的细胞因子.研究发现白细胞介素17能维持纤维母细胞对CD34~ 造血祖细胞的支持作用,并能介导它们向中性粒细胞增殖分化.目前也认为IL-17是最新发现的T淋巴细胞来源的作用于造血系统的细胞因子.本文对IL-17的来源、结构和功能等方面作一综述.     

IFN-γ和IL-4对乳腺癌细胞MCF-7生长及雌激素受体亚型影响的观察

目的:探讨干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)对人乳腺癌细胞株MCF-7的生长特性及雌激素受体(ER)亚型表达的影响。方法:以不同浓度IFN-γ(50、100和150μg/L)或IL-4(5、10和25μg/L)分别作用MCF-7细胞24、48、72和96h,MTT法检测细胞的增殖水平。选择100μg/L IFN-γ或10μg/L IL-4作用细胞96h(M/IFN-γ或M/IL-4),蛋白质印迹法检测ERα和ERβ的蛋白表达,流式细胞术分析细胞周期,RT-PCR检测凋亡抑制基因mRNA表达。结果:与对照组相比,IFN-γ作用96h后,细胞增殖活性受到抑制(100μg/L组P=0.000,150μg/L组P=0.003),G0～G1期细胞比例增多(P=0.003),S期减少(P=0.005),ERβ蛋白表达水平增加,P=0.038。IL-4作用96h后,细胞增殖活性增强(10μg/L组P=0.006,25μg/L组P=0.002),G0～G1期细胞比例减少(P=0.008),S期增多(P=0.007),ERβ蛋白表达水平减少(P=0.021),凋亡抑制基因的表达水平增加,P值分别为0.002、0.000和0.004。结论:辅助性T淋巴细胞1型(Th1)类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4可分别促进或抑制ERβ表达,进而抑制或促进肿瘤细胞生长;Th1/Th2偏移对乳腺癌细胞生长特性的作用,可能与改变ER亚型表达比例有关。     

γc家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响

[摘要] 目的：探讨γc 家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响,为过继免疫治疗体外细胞制备提供实验依据。方法：采用健康人外周静脉血单个核细胞（PBMC）,应用尼龙毛柱法、CD3 磁珠阳性分选法、CD3 磁珠阴性分选法和自然沉降法等4 种方法分选T细胞,比较各种方法获取的T细胞纯度、回收率和细胞增殖。用CD3/CD28 免疫磁珠激活CD3+T细胞,γc 家族细胞因子分为IL-2 组和IL-7、IL-15、IL-21 混合组,比较两组T细胞扩增倍数和表型的差异。结果：CD3 磁珠阴性分选的T细胞纯度显著高于尼龙毛柱分选、CD3 磁珠阳性分选、自然沉降分选[ （94.06±1.07）% vs（86.74±1.06）%、（89.61±1.40）%、（88.48±1.86）%,P<0.05],自然沉降分选的T 细胞回收率显著高于其余3 种分选法[ （60.29±1.53）% vs（45.03±2.79）%、（20.15±3.41）%、（42.98±2.82）%,P<0.05),综合比较效果以自然沉降法为最优选择。IL-2 组T 细胞扩增倍数显著高于混合组[ （262.6±143.2）vs（73.0±25.8）倍,P<0.05]。混合组的早期记忆T细胞占总T细胞的比例、Tscm和Tscm-like、Tcm所占比例均显著高于IL-2 组[ （55.6±1.82）% vs（39.6±1.52）%,（16.6±1.82）% vs（9.8±1.30）%,（39.0±1.58）% vs（29.2±1.79）%;均P<0.05]。结论：自然沉降法从PBMC中分选T 细胞具有低成本、高纯度、高回收率的优势。IL-7、IL-15 和IL-21 混合培养有利于早期记忆T细胞的生成,为肿瘤过继免疫治疗的体外细胞制备提供了实验依据。     

PD-L1抑制剂对非小细胞肺癌小鼠血清IL-4、IFN-γ及生存率的影响

目的:分析程序性细胞死亡蛋白配体-1（PD-L1）抑制剂对非小细胞肺癌（NSCLC）小鼠血清白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ(IFN-γ)及生存的影响。方法:将20只重量16～20 g小鼠随机分为对照组、实验组各10只,对照组在制备NSCLC荷瘤鼠模型后注射0.9%氯化钠溶液,实验组在制备NSCLC荷瘤鼠模型后注射PD-L1抑制剂尼伏单抗,均连续注射4周,测定其体积大小、肿瘤抑制率与血清IL-4、IFN-γ变化,并记录小鼠生存率、生存时间。结果:注射前、注射3 d两组小鼠肿瘤体积比较差异无统计学意义（P>0.05）,注射1周、2周、3周、4周实验组肿瘤体积均低于对照组（P<0.05）,尤其在注射2～3周时实验组肿瘤体积抑制率基本达最大值;注射1周、2周、3周、4周实验组血清IL-4、IFN-γ水平明显高于对照组（P<0.05）;注射4周实验组生存率高于对照组,实验组平均生存时间较对照组长（P<0.05）,注射1周、2周、3周两组生存率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:PD-L1抑制剂能抑制NSCLC小鼠生长,可能通过上调其血清IL-4、IFN-γ水平而延长小鼠生存时间。     

IL-2、IFN-α和IFN-γ上调肾透明细胞癌786-0细胞B7-H1的表达

目的： 研究IL-2、IFN-α和IFN-γ对人肾透明细胞癌786-0细胞上B7-H1表达的影响。 方法： IL-2、IFN-α和IFN-γ刺激786-0细胞,RT-PCR检测刺激后786-0细胞B7-H1 mRNA的表达,免疫细胞化学、免疫荧光染色和流式细胞术检测刺激后786-0细胞中B7-H1蛋白的表达。 结果： RT-PCR检测结果显示,IL-2、IFN-α和IFN-γ组786-0细胞的B7-H1 mRNA表达量明显高于未经刺激的786-0细胞（0.75±0.06、0.68±0.05、0.95±0.08 vs 0.30±0.03,P﹤0.05或P<0.01）;免疫细胞化学和免疫荧光检测结果显示,B7-H1蛋白主要表达在786-0细胞的细胞膜上,IL-2、IFN-α和IFN-γ刺激后B7-H1表达明显上调;流式细胞术检测结果显示,IL-2、IFN-α和IFN-γ组786-0细胞的B7-H1分子表达阳性率明显高于未经刺激的786-0细胞\[（6570±326）%、（56.52±1.75）%、（84.05±3.52）% vs（20.49±1.03）%,P<0.01\]。 结论： IL-2、IFN-α和IFN-γ均上调786-0细胞B7-H1 mRNA和蛋白的表达,其中IFN-γ上调程度最高,IFN-α上调程度最低。