应用APAAP法检测T淋巴细胞亚群方法的改进

应用ＡＰＡＡＰ法检测Ｔ淋巴细胞亚群方法的改进马廷贤梁再赋＊董占双＊（中国医科大学组胚教研室＊微生物教研室沈阳１１０００１）；Ｔ淋巴细胞在维持机体正常免疫功能方面起着重要作用，而Ｔ淋巴细胞亚群间的正常比值又是维持机体正常免疫功能的重要保证，现研究表明［...     

APAAP技术检测大鼠淋巴细胞亚群

<正> 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物(简称APAAP)桥联酶标技术是最近几年发展起来的一种新兴组织化学染色技术;用于大鼠淋巴细胞亚群的检测,在国内尚未见报道。本文应用英国牛津大学创建的MRC W/OX McAbs初步建立了用AP AAP技术检测大鼠淋巴细胞亚群的方法,并与常规的间接免疫荧光法进行比较。     

用微量APAAP技术检测淋巴细胞亚群

检测淋巴细胞表面抗原常用间接免疫荧光法(IFA),但它对细胞的数量和活性要求较高,因检测前后标本难以长期保存,所以,很难大规模收检标本;此外,该法需用昂贵的荧光显微镜。免疫组化技术能弥补以上不足,其中硷性磷酸酶-抗硷性磷酸酶复合物(简称APAAP)技术因具有众多的优点而日益受到重视。但常规抽静脉血制备单个核细胞涂片进行染色,采集标本较困难,     

HIV阳性并发恶性肿瘤患者T细胞亚群检测及意义

目的:观察患有恶性肿瘤HIV阳性患者CD3+,CD3+ CD4+,CD3+ CD8+,CD3+ CD4+/CD3+ CD8+比值变化的临床意义。方法:回顾分析2008-01/2010-02在本院就诊的各类肿瘤并HIV阳性患者35例检测其T细胞亚群水平对疾病的诊断及预后判断的意义。结果:观察组患者T细胞亚群水平与健康对照组比较外周血CD3+,CD3+ CD4+细胞比例及CD3+ CD4+/CD3+ CD8+比值明显低于健康对照组水平(P0.01),而CD3+ CD8+细胞比例明显高于健康对照组(P0.01)。结论:检测肿瘤HIV阳性患者的细胞免疫T细胞亚群水平,有助于对疾病的诊断及预后判断。     

uPA阳性口腔颌面部恶性肿瘤T细胞亚群变化

本文用RT PCR方法测定了口腔颌面部恶性肿瘤患者组织中尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA )和纤溶酶原抑制剂 1、 2型 (PAI 1、PAI 2 )基因的表达 ;用MTT和流式细胞术对恶性肿瘤患者免疫细胞的应答反应进行了研究。结果显示 ,在恶性肿瘤组织中uPA、PAI 1、PAI 2的基因表达分别为 10 0 %、 66 %和 2 2 %。而在良性肿瘤和正常组织中PAI 1和PAI 2的表达为0 %。表明PAI 1、PAI 2基因的表达与组织中肿瘤的恶性变化有关。实验发现恶性颌面部肿瘤患者外周血CD4+T细胞数量明显增加 ,达到 5 0 1% ,但经超抗原SEB刺激以后这一比例却由最初的 41%降低到 17 1%。本文进一步讨论了上述变化的意义和可能的机制。     

组胺受体法检测小鼠脾脏T细胞亚群的初探

<正> 根据不同T淋巴细胞亚群具有不同的组胺受体,即T_H和T_S细胞分别具有组胺H_1和H_2受体,另外苯海拉明和甲氰咪胍分别是有效的H_1和H_2受体阻断剂,本文从受体的角度对T细胞亚群进行检测研究。     

影响T细胞亚群检测结果的因素

影响Ｔ细胞亚群检测结果的因素郭国侠（杭州铁路中心医院杭州３１０００９）本文报道了血标本在室温放置时间、温度以及肝素浓度对Ｔ细胞亚群检测结果的影响。１材料与方法抗致敏红细胞花环试剂（冻干）单克隆抗体Ｔ＿３和Ｔ＿４和Ｔ＿８；武汉生物制品研究所，直接法操作...     

双色荧光法检测大鼠外周血T细胞亚群

本文用OX系列McAb结合荧光双标记技术(双色荧光法)对大鼠外周血T细胞亚群进行了检测,并与Ficoll分离法作了比较.     

人T细胞亚群研究进展

根据分化抗原不同,通常可以将人外周血淋巴细胞分成OKT4~+和OKT8~+两个亚群(简称T4~+和T8~+)。一般认为T4~+亚群具有辅助和诱导功能(T_H/T_i),T8~+亚群具有抑制和细胞毒功能(T_S/TC)。近年来,由于单克隆抗体技术的发展,已获得了一些新的人T细胞单克隆抗体(下称     

T细胞亚群和免疫耐受

无论采取什么样的方法,我们在耐受诱导研究中的最终目标大部分是建立在对T细胞的调控上,涉及到TCR、共刺激分子、T细胞生长因子及某些T细胞亚群的诱导增生等方面.这些靶T细胞的活化、无能、凋亡或存活均与耐受状态的建立存在某种关联.本文将对近年来T细胞亚群与免疫耐受关系的研究作一综述.     

T细胞亚群和免疫耐受

无论采取什么样的方法，我们在耐受诱导研究中的最终目标大部分是建立在对T细胞的调控上，涉及到TCR、共刺激分子、T细胞生长因子及某些T细胞亚群的诱导增生等方面。这些靶T细胞的活化、无能、凋亡或存活均与耐受状态的建立存在某种关联。本文将对近年来T细胞亚群与免疫耐受关系的研究作一综述。     

葡萄球菌免疫球蛋白花环法检测人外周血T细胞亚群的初步探讨

本文采用葡萄球菌免疫球蛋白花环法检测人外周血T淋巴细胞亚群,并与间接免疫荧光法进行了比较。结果表明,该法具有较好的特异性及重复性.两种方法检测结果基本一致。该法比荧光法更易客观地判断阳性细胞,玻片标本可长期保存,便于复查,设备简单.本文同时还对该法的影响因素进行了初步探讨.     

结核病T细胞亚群的研究进展

T淋巴细胞亚群的数量和功能变化与结核病的病情进展和转归密切相关,探讨结核杆菌感染机体时T淋巴细胞亚群免疫应答及其影响因素,对结核病预防、诊治有重要意义。     

肺癌患者DNT细胞、T细胞亚群检测及临床意义

近年来的研究表明,细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主要方式,而T淋巴细胞及其亚群是细胞免疫主要功能细胞,在一定程度上可反映患者的免疫状态。为了解肺癌患者机体免疫状态、免疫功能情况,探讨细胞免疫在肺癌患者发病过程中的作用。本文用流式细胞仪对43例肺癌患者DNT(double negative T cells)细胞及T淋巴细胞亚群进行了检测分析,现报告如下。     

乙型肝炎患者T细胞亚群和IL-6的检测

<正>本文对60例各种急、慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和血清中IL-6及ALT水平进行检测.结果报告如下.1 材料和方法1.1 研究对象 20例急性乙肝患者,年龄26～44岁,血清中,HBsAg和HBV-DNA阳性,病程在半年以内.40例HBsAg阳性的慢性乙肝患者,病程半年以上,年龄28～5l岁,其中HBV-DNA阳性和阴性各20例.健康对照20例,年龄25～35岁,乙型肝炎(以下简称乙肝)和丙型肝炎血清标志均阴性.1.2 主要试剂 T细胞亚群采用APAAP法测定,试剂购自华美公司,IL-6采用ELISA法定量测定,试剂购自SIGMA公司,HBV-DNA用套式PCR法,试剂购自复旦大学.1.3 统计学处理 组间比较采用t检验,相关性采用线性相关检验.ALT水平显著高于对照组(P<     

流式细胞仪检测大鼠外周血T细胞亚群(微量全血法)

本实验利用MRC W/OX系列单克隆抗体和流式细胞仪(Epics C型)首次建立了微量全血检测大鼠外周血T细胞亚群的方法,并报告了正常成鼠外周血T细胞亚群分布(n=60):OX-19+细胞占65.45±5.98％(SD),W3/25~+细胞占47.17±6.45％,OX-8~+细胞占24.26±6.18％。W3/25~+亚群和OX-8~+亚群比值为2.12±0.11(SEM)。部分标本流式细胞仪分析结果和荧光显微镜的结果无明显差异(P>0.05)。在抗体染色条件方面,发现当温育温度过高(30℃)时,染色阳性细胞率有明显下降(P<0.001)。实验证实,用微量全血染色不仅简便、可靠、重复性好,且用血量少。同时避免了常规Ficoll分离法时种种弊病。因此用本法可动态观察大鼠外周血T细胞亚群的变化,为进一步研究在药理、病理和免疫学实验中的细胞免疫功能变化提供了方便。     

胸腺肽缓解更年期症状和T细胞亚群的检测

本文应用生物反应调节剂之一胸腺肽治疗更年期症状,共观察38例治疗前、后Kupperman Score(简称K分)和15例治疗前后T细胞亚群的分布。结果示洽疗前后K分值分别为25.58±6.15和9.52±3.43,经统计分析二者之间有非常显著差异(P<0.001),表明胸腺肽有缓解更年期症状的作用。更年期症状组T细胞亚群的分布为CD_3 78.34％、CD_4 43.11％、CD_8 36.40％和CD_4/CD_8 1.18,与正常对照组(4例)比较,表明更年期症状组有免疫功能紊乱,以CD_8细胞的上升占优势。应用胸腺肽1～2月后,T细胞亚群的分布为CD_3 73.60％、CD_4 46.32％、CD_8 27.76％和CD_4/CD_8 1.68,表明胸腺肽可纠正这种不平衡状态,使抑制了的免疫功能得到恢复。胸腺肽-免疫-内分泌系统之间的调节是临床治疗更年期症状的依据,很有实用价值,有待深入研究。     

间接免疫荧光法与间接免疫SPA法检测人外周血T细胞亚群的比较

<正> 目前,利用单克隆抗体检测T细胞亚群的方法很多,其中最常用的是间接和直接免疫荧光法。但此法需要荧光显微镜等特殊设备,最近,有人利用萄葡球菌A蛋白能与IgG-Fe段结合的原理,以免抗BALB/c小鼠抗体致敏,建立了间接免疫SPA法,以测定T细     

海洛因依赖者外周血T细胞亚群及NK细胞检测分析

目的:检测海洛因依赖者戒毒前、后不同时间段外周血中的T淋巴细胞亚群及NK细胞数目的改变状况并探讨其原因,为制定有效防治策略提供依据.方法:采集30例海洛因依赖者在戒毒前、戒毒7 d和14 d各不同时间段的静脉血抗凝,以本地区13例正常人外周血做参照,用流式细胞术(FCM)对其T淋巴细胞亚群和NK细胞进行测定.结果:海洛因依赖者淋巴细胞(Lymphocyte)百分比较正常对照组降低(P＜0.01);未戒断组CD4百分比较对照组下降(P＜0.05);戒断7 d组CD25与正常组相比明显升高(P＜0.05).按年龄及吸毒时间进行分组得出:不同年龄段或为同吸毒时间之间的CD4、CD25及NK有统计学意义(P＜0.05).结论:海洛因依赖者细胞免疫功能受损,短期戒断产生的应激可能是导致依赖者自身免疫疾病发生的诱因之一.