胰岛素对RF/6A细胞VEGF受体表达的影响

目的:探讨胰岛素对视网膜血管内皮细胞RF/6A血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)的表达及血管新生的影响.方法:分别用0、1和100 nmol/L的人胰岛素处理RF/6A细胞,采用MTS实验、细胞迁移实验、管腔形成实验分别检测胰岛素对RF/6A细胞增殖、迁移、管腔形成等生物学功能,RT-PCR、Western blot技术检测VEGFR的表达、磷酸化活性.结果:胰岛素可促进RF/6A的增殖、迁移、管腔形成(P＜0.05或P＜0.01),促进VEGFR2 mRNA的表达和VEGFR2蛋白的磷酸化(P＜0.05或P＜0.01).而对VEGFR1 mRNA表达的影响差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胰岛素可经VEGFR2信号促进RF/6A细胞血管新生,而VEGFR1信号可能不参与胰岛素诱导的RF/6A细胞血管新生.     

视网膜色素上皮细胞与近视关系的研究进展

视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞为眼内最重要的一种细胞,行使多样的生理功能,RPE细胞萎缩、增生或功能异常可导致多种视网膜病变.随着对近视眼基础研究的不断深入,人们发现RPE细胞在近视的形成发展中起着重要作用.现就RPE细胞与近视关系的研究进展综述如下.     

视网膜色素上皮细胞与近视关系的研究进展

视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞为眼内最重要的一种细胞,行使多样的生理功能,RPE细胞萎缩、增生或功能异常可导致多种视网膜病变.随着对近视眼基础研究的不断深入,人们发现RPE细胞在近视的形成发展中起着重要作用.现就RPE细胞与近视关系的研究进展综述如下.     

脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞分泌VEGF及PEDF的影响

目的研究脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮（hRPE）细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）的影响。方法hRPE细胞分为3组：①正常对照组;②高糖组;③高糖＋不同浓度的脂联素组（2.5,5,10,20μg/ml）,分别在48h后,用ELISA法测定上清液中VEGF及PEDF的含量。结果与正常对照组相比,高糖组VEGF水平明显升高,PEDF水平明显下降,加入2.5μg/ml脂联素对VEGF及PEDF水平影响不大,脂联素浓度达到5～20μg/ml时和高糖组相比,结果相反,VEGF水平显著降低、PEDF水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论5～20μg/ml脂联素可以使hRPE细胞VEGF分泌减少和PEDF分泌增多。提示脂联素可以纠正高糖诱导的hRPE细胞功能紊乱,通过调节VEGF与PEDF的平衡来抑制糖尿病视网膜病变（DR）中病理性新生血管的形成。     

树突状细胞的补体攻膜复合物C5b-9模型的建立

目的 建立树突状细胞(DC)的补体攻膜复合物C5b-9模型,为研究补体攻膜复合物对DC的影响奠定基础.方法 诱导人外周血单核细胞分化成为不成熟DC,C5b-9体外组装,激光共聚焦检测C5b-9在DC表面组装情况.结果 成功诱导出不成熟DC,激光共聚焦显示C5b-9完整组装于DC表面.结论 本研究成功建立了DC的补体攻膜复合物C5b-9模型,为将来进一步探讨C5b-9对DC的功能影响奠定了基础.     

人脐静脉内皮细胞的补体攻膜复合物C5b-9模型建立

目的 建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的补体攻膜复合物C5b-9模型并确定其亚溶破剂量.方法 通过体外培养HUVEC,在其表面组装攻膜复合物C5b-9,激光共聚焦检测其组装情况;增加补体浓度,通过激光共聚焦定性观察细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性定量检测,确定其亚溶破剂量.结果 激光共聚焦结果显示C5b-9成功组装于HUVEC表面;当C5b6的浓度达到1.6 mg·L-1时,LDH的分泌量骤增,激光共聚焦显示该剂量下部分细胞胞膜破裂.结论 成功建立人脐静脉内皮细胞的补体攻膜复合物C5b-9模型,为研究动脉粥样硬化药物防治奠定基础.     

VEGF及其受体与MMP-9在卵巢上皮性癌中的表达

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）及其受体、MMP-9的表达在卵巢上皮性癌侵袭转移方面的作用。方法：免疫组化SABC法检测VEGF及其受体、MMP-9蛋白的表达，并对VEGF、MMP-9蛋白表达及其相互关系进行秩和检验、Spearman等级分析，采用Kaplan-Meier分析进行生存分析。结果：VEGF广泛表达于卵巢上皮性癌的瘤细胞胞浆中，疾病晚期、分化差、腹水量多、残余瘤组织多的患者表达增强；VEGF受体表达于卵巢癌血管内皮细胞的胞浆．尤其是靠近癌巢处的内皮细胞；MMP-9表达于卵巢上皮性癌的间质细胞，疾病晚期、分化差的患者表达增强：VEGF与MMP-9在卵巢上皮性癌中的表达呈正相关。结论：VEGF与MMP-9在血管生长和局部侵袭及远处转移中可能有协同作用。     

叶酸对IUGR大鼠胎盘VEGF及其受体1表达的影响

摘要：目的　观察叶酸对宫内发育迟缓（IUGR）大鼠胎盘中血管内皮生长因子（VEGF）及其受体1（Flt1）表达的影响和对胎鼠发育迟缓的治疗效果。方法　将20只雌性Wistar大鼠随机均分成4组：正常对照（N）组,正常饮食;IUGR组,妊娠期给予低蛋白饮食;叶酸+IUGR（A+IUGR）组,交配前2周至妊娠期给予叶酸每日2.0 mg/kg灌胃处理,受孕成功后妊娠期给予低蛋白饮食;叶酸+正常对照（A+N）组,交配前2周至妊娠期给予叶酸每日2.0 mg/kg灌胃处理,正常饮食。各组孕鼠在孕20 d时剖宫产取胎鼠,观察每组胎鼠体质量、胎盘质量、胎盘系数的变化,采用免疫组化染色和Western blot检测胎盘VEGF和Flt1蛋白表达,qPCR检测胎盘VEGF和Flt1 mRNA表达。结果　与N组相比,IUGR组的胎鼠体质量、胎盘质量、胎盘系数均明显降低,且胎盘中VEGF和Flt1的表达明显降低（P＜0.05）。A+IUGR组较IUGR组胎盘质量、胎盘系数显著增加（P＜0.05）,A+IUGR组胎盘组织中VEGF和Flt1表达明显高于IUGR组（P＜0.05）。结论　叶酸可以通过上调IUGR大鼠胎盘中VEGF及Flt1的表达,进一步提高胎盘血管密度,从而促进胎盘和胎鼠发育,降低IUGR子代不良结局的发生风险。     

年龄对大鼠后肢缺血后血管新生的影响及与人抗原R的关系

目的 探讨年龄对大鼠后肢缺血后血管新生的影响及与人抗原R(HuR)的关系.方法 按鼠龄将雄性SD大鼠分为2组:老龄组(18月龄)和青年组(16周龄),每组6只.建立后肢缺血模型,于术后第14天取缺血后的后肢内收肌组织,免疫组织化学法检测CD31在缺血肌肉组织中表达及新生血管数量,用蛋白印迹法检测HuR蛋白表达及用酶联免疫吸附测定法测定血管内皮生长因子(VEGF)含量.结果 老龄组缺血肌肉组织中毛细血管计数明显低于青年组[(64±7)个/mm2比(144±21)个/mm2,P＜0.05],HuR 蛋白表达明显低于青年组[(1.1±0.1)比(1.5±0.4),P＜0.05],VEGF含量也明显低于青年组[(260±24) μg/L比(351±78) μg/L,P＜0.05].结论 年龄对缺血后血管新生有明显影响,年龄越大缺血后血管新生抑制作用越强,这一作用可能与年龄增加后HuR蛋白表达下降,导致VEGF表达下降有关.     

丝裂霉素C与年龄相关性黄斑变性的药物治疗

<正>年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)根据临床表现和病理的不同分为两型:干性型(或非渗出性或萎缩型)主要表现为硬性玻璃膜疣、软性玻璃膜疣和视网膜色素上皮的地图状萎缩,视功能不同程度受损;湿性型(或渗出性)主要表现为视网膜下脉络膜新生血管和黄斑部的出血或渗出,常造成严重视力下降、中心暗点甚至中心视功能完全丧失。AMD是西方国家50岁以上首要致盲眼病,在全世界范围内约有3～5亿患者,由于日趋老龄化,我国AMD患者日益增多,已成为眼科防盲研究的重点课题之一。近年来,随     

地塞米松对人眼小梁细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的 :观察地塞米松对人眼小梁细胞水通道蛋白 -1(AQP -1)表达的影响。方法 :通过RT -PCR方法 ,半定量检测原代培养的人眼小梁细胞AQP -1的mRNA水平及不同浓度地塞米松的作用。结果 :正常人眼小梁细胞AQP -1的mRNA(灰度比 )为1 643±0 354,10-8mol、5×10-8mol、10-7mol、5×10-7mol地塞米松作用3d为1 577±0 405、1 117±0 443、0 458±0 301、0 267±0 243。地塞米松浓度≥5×10 -8mol出现抑制作用 (P<0 05)。结论 :地塞米松使培养的正常人眼小梁细胞AQP -1的mRNA减少 ,可能是皮质类固醇性青光眼房水流出阻力增加的原因之一。     

血小板微颗粒对人脐静脉内皮细胞黏附因子表达的影响

目的:探讨血小板微颗粒(PMPs)对人脐静脉内皮细胞黏附因子表达的影响及PMPs在冠心病中的可能作用机制。方法:分离制备血小板微颗粒,与人脐静脉内皮细胞CRL-1730共培养,应用半定量逆转录聚合酶链反应技术测定不同浓度PMPs作用不同时间的内皮细胞黏附因子E-选择素、细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞间黏附分子(VCAM)-1的表达。结果:当PMPs达到一定浓度,可促使内皮细胞(CRL-1730)表达E-选择素、ICAM-1和VCAM-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);而PMPs刺激内皮细胞(CRL-1730)不同时间,E-选择素、ICAM-1的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:PMPs可促使体外培养的人脐静脉内皮细胞(CRL-1730)表达E-选择素、ICAM-1和VCAM-1升高,从一方面解释了PMPs在冠心病中的可能的作用机制。     

Effect of Various Polybrominated Biphenyls on Cell-Cell Communication in Cultured Human Teratocarcinoma Cells

Effect of Various Polybrominated Biphenyls on Cell–CellCommunication in Cultured Human Teratocarcinoma Cells. KAVANAGH,T. J., CHANG, C.-C, and TROSKO, J. E. (1987). Fundam. Appl.Toxicol. 8, 127–131. Firemaster BP-6 (FM), a mixture ofpolybrominated biphenyls (PBB), and the congeners 2,2',4,4',5,5'-hexabromobiphenyl(245-HBB), 3,3',4,4',5,5'-hexabro-mobiphenyl (345-HBB), and3,3',4,4'-tetrabromobiphenyl (34-TBB) were tested for theirability to inhibit cell-cell communication between human teratocarcinomacells in culture. Both FM and 245-HBB were capable of inhibitingcell-cell communication in these cells, with only slight effectson cell survival. 345-HBB was highly cytotoxic, but did notshow the ability to interrupt cell-cell communication. 34-TBBwas moderately cytotoxic and was also ineffective at blockingcell-cell communication. The results agree with previously publishedfindings in Chinese hamster V79 cells, and are in accordancewith proposed structure–activity relationships for thesecompounds. Inhibition of cell–cell communication, eitherdirectly (FM and 245-HBB) or indirectly through necrosis-inducedcompensatory hyperplasia (345-HBB), may be involved in the promotionof hepatocellular neoplasms by these compounds.     

C肽对高糖状态下人脐静脉内皮细胞体外表达eNOS的影响

目的 :探讨在高糖状态下C肽对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)体外表达内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)的影响。方法 :将培养成功的HUVEC在不同浓度的C肽和葡萄糖环境下孵育72h ,提取细胞总RNA ,应用半定量逆转录聚合酶链反应 (SQ -RT -PCR)法 ,检测eNOSmRNA表达的情况。结果 :生理浓度葡萄糖 (5 5mmol/L)状态下 ,低浓度的C肽 (0 3nmol/L)使HUVECeNOSmRNA表达减弱(P<0.01) ,生理浓度 (3nmol/L)和高浓度(30nmol/L)的C肽可使eNOSmRNA的表达明显增强(P<0.01) ;高浓度葡萄糖(33.3mmol/L)状态使HU VECeNOSmRNA表达减弱(P<0.01) ,加入生理浓度或高浓度C肽后 ,eNOSmRNA表达增强(P<0.01)。结论 :HUVEC体外eNOSmRNA表达可受C肽浓度影响 ;高浓度或生理浓度C肽可缓解高糖对HUVECeNOS表达的抑制作用。提示C肽可能对防治糖尿病大血管病变具有重要作用     

白介素-18对人脐动脉平滑肌细胞组织因子表达的影响

目的观察白介素-18(IL-18)对诱导体外培养的人脐动脉平滑肌细胞组织因子(TF)表达的作用.方法在培养的人脐动脉平滑肌细胞中加入IL-18(浓度为100 μg/L),用酶联免疫吸附分析法(ELISA)及细胞发色底物法分别测定培养基中TF抗原及细胞冻融液的TF活性.结果培养基中TF抗原含量在4、6、8 h组均高于24 h组和对照组(P＜0.05),且4h组最高(P＜0.05),4 h与6 h 2组间差别无统计学意义(P＞0.05),8 h组均低于4 h组和6 h组(P＜0.05),24 h组与对照组差别无统计学意义(P＞0.05).细胞冻融液中总TF活性在6、8、24 h组均高于对照组(P＜0.05),6h组和8 h组均高于24 h组(P＜0.05),6h与8h组间差别无统计学意义(P＞0.05).结论IL-18可以很快诱导体外培养的人脐动脉平滑肌细胞表达TF,使动脉血管平滑肌细胞呈现一过性促凝状态.     

MMP-9 VEGF及MVD在胃癌中的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)微血管密度(MVD)与胃癌病理分级的关系.方法 应用免疫组化方法检测65例胃癌组织标本中MMP-9、VEGF及MVD的表达.结果 随着胃癌病理级别的升高,MMP-9、VEGF及MVD的表达率逐渐升高,各级之间差异有统计学意义.MMP-9的表达与VEGF及MVD的表达均呈正相关.结论 MMP-9过度表达可能与胃癌的发生和生长关系密切;联合检测MMP-9、VEGF和MVD能更准确评价胃癌的病理特征.     

Toxicity of Methoxyacetic Acid in Cultured Human Luteal Cells

Ethylene glycol monomethyl ether (EGME) and its proximate metabolite,2-methoxyacetic acid (MAA), increase ovarian luteal cell progesteroneproduction in the female rat in vivo and in cultured rat lutealcells in vitro, respectively. In order to better assess thepotential hazard of EGME and MAA to women, these studies wereconducted to determine whether the same concentrations of MAAincrease progesterone in human luteinized granulosa cells asin rat luteal cells. Human cells were collected from healthyanonymous oocyte donors, washed, plated 25,000 viable cellsper well, and treated with 10 IU hCG and 0–5 mM MAA for6–48 hr. Progesterone in media was significantly elevatedafter 24 hr incubation at 1 mM MAA. MAA had no effect on ATPlevels at 6 or 24 hr. Thus, MAA increased progesterone productionin cultured human luteal cells at the same concentration asMAA increased progesterone in rat luteal cells. The implicationis that EGME has the potential to alter ovarian luteal functionin women. These data should be useful for determining the realhealth hazards and potential risks of EGME exposure.     

Effect of a Chymotrypsin-like Inhibitor,TPCK, on Histamine Release from Cultured Human Mast Cells

The involvement of endogenous proteases in the secretory process from human mast cells remains to be clarified. A chymotrypsin-like protease inhibitor, N-tosyl-l-phenylalanylchloromethyl ketone (TPCK), blocked both FcεRI- and A23187-mediated histamine release from cultured human mast cells at concentrations above 1 μm. At 10 μm, the concentration that completely inhibited FcεI-mediated histamine release, TPCK did not inhibit the chymase activity of the lysate or that in intact cells. The addition of TPCK to cells 30 min before challenge did not affect FcεRI- or A23187-mediated Ca²⁺ mobilization. These findings suggest that a TPCK-sensitive molecule distinct from chymase is involved in a late stage of the process of histamine release from mast cells in man.