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1.
目的:探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatoryTcells,CD4 CD25 Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25 细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4 CD25 Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25 细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4 CD25 T和CD4 CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4 CD25 Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25 细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4 CD25-T细胞增殖更强,CD4 CD25 Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25 细胞很有可能是CD4 CD25 Tr的前体。 相似文献
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目的探讨CD4^+CD25^+high调节性T细胞(Tr)在自身免疫性肝炎(AIH)发病中的作用。方法用流式细胞仪技术比较分析AIH患者16例、慢性乙型肝炎(CHB)22例及键康正常人20例外周血中的CD4^+CD25^+high细胞,同时用免疫组织化学法检测AIH和CHB患者肝组织Foxp3的表达情况。结果AIH组外周血中CD4^+CD25^+high/CD4^+百分比显著低于正常组(P〈0、05)和CHB组(P〈O.01),并且CHB组显著高于正常组(P〈0.05);同时AIH组外周血中CD4^+ T细胞也显著高于CHB组(P〈0.01));肝组织Foxp3^+细胞主要分布于肝小叶内窦周隙、汇管区,AIH组肝组织Foxp3^+表达显著低于CHB组(P〈0.01)。结论CD4^+CD25^+high Tr细胞下降可能是自身免疫性肝炎发病的原因之一。 相似文献
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5.
在以往的肿瘤免疫研究中,人们往往关注肿瘤特异性CD8+T细胞的抗肿瘤效应,并由此鉴定出许多CD8+T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入,CD4+T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCⅠ类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4+T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。 相似文献
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目的:通过对健康老年人与青年人外周血CD8+T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的比较性研究,探讨免疫衰老的细胞学机制。方法:采用三色免疫荧光标记流式细胞术分析青年组(20-35岁)与老年组(60-75岁)外周血CD8+CD28+、CD8+CD56+及CD8+CD57+T细胞水平。结果:老年组外周血CD8+CD28+T细胞明显低于青年组,阳性百分率分别为34.07±5.29和49.84±7.43(P<0.05);而老年组CD8+CD56+T细胞及CD8+CD57+T细胞均明显高于青年组,前者阳性百分率分别为6.60±2.40和2.10±0.35,后者阳性百分率分别为41.82±6.01和22.89±2.80(P<0.05)。结论:老年人CD8+T细胞CD28、CD56及CD57的表达率均随年龄增长有明显改变;CD28表达下降可能是引起免疫系统功能降低的重要原因,而CD56、CD57表达水平的增加则可能是机体对细胞免疫功能下降的一种代偿性适应。 相似文献
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目的 了解CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)与麻疹患者细胞免疫的关系.方法 采集34例成年麻疹患者和27例健康对照的外周血,采用流式细胞术进行CD4+CD25+细胞和FoxP3+细胞的检测.用免疫磁珠从外周血单个核细胞(PBMC)分选出CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞,分别用抗-CD3单克隆抗体、BCG和NV减毒株进行刺激培养,收集培养上清,用ELISA法检测培养上清中的IFN-γ和IL-10.结果 麻疹患者外周血白细胞、淋巴细胞及CD3+CC4·细胞比例明显降低,而CD4+CD25+细胞与FoxP3+细胞的比例则与对照无显著差别;CD4+CD25+细胞明显抑制抗CD3刺激下CD4+CD25-T细胞产生IFN-γ,且患者和对照没有差别,而IL-10的产生没有这种改变.结论 成人麻疹患者的的免疫抑制与Treg的抑制作用无关. 4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞,分别用抗-CD3单克隆抗体、BCG和NV减毒株进行刺激培养,收集培养上清,用ELISA法检测培养上清中的IFN-γ和IL-10.结果 麻疹患者外周血白细胞、淋巴细胞及CD3+CC4+细胞比例明显降低,而CD4+CD2 +细胞与FoxP3+细胞的比例则与对照无显著差别;CD4+CD25+细胞明显抑制抗CD3刺激下CD4+CD25-T细胞产生IFN-γ,且患者和对照没有差别,而IL-10的产生 相似文献
8.
目的:观察镁对分离培养的健康人和哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞凋亡及叉头框蛋白3(Foxp3)表达的影响。方法:经磁珠分离法分离出健康人和哮喘患者外周血CD4+CD25+T细胞,分镁剂干预组(10 mmol/L)及空白组培养72 h后,用流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞的凋亡率及Foxp3表达情况。结果:(1)健康人外周血CD4+CD25+T细胞的纯度为77.4%~92.3%,哮喘患者CD4+CD25+T细胞的纯度为75.2%~93.8%。(2)CD4+CD25+T细胞占外周血CD4+T细胞的比例在健康组为4.12%~7.98%,在哮喘组为4.51%~8.68%,两者没有显著差异(P>0.05)。(3)镁(10mmol/L)可以诱导健康组及哮喘组外周血CD4+CD25+T细胞凋亡率增加(P<0.05),但对Foxp3的表达无影响(P>0.05)。结论:镁促进CD4+CD25+T调节细胞凋亡增加可能为其治疗支气管哮喘的作用机制之一。 相似文献
9.
目的:通过小鼠体内外实验观察肿瘤细胞是否可以诱导CD4^+CD25^+Treg的分化增殖。方法:将小鼠的红白血病瘤细胞系FBL3接种于C57BL/6小鼠腹壁皮下,流式细胞仪检测小鼠外周血、脾脏及瘤组织CD4^+CD25^+Treg细胞含量,RT-PCR检测小鼠脾脏及瘤组织Foxp3 mRNA的表达;体外实验检测FBL3细胞培养上清液对小鼠脾脏CD4^+CD25^+Treg细胞的作用。结果:荷瘤鼠外周血CD4^+CD25^+Treg比例与正常鼠比较无统计学差异(P〉0.05),但荷瘤鼠脾脏CD4^+CD25^+Treg比例显著高于正常对照(P〈0.01),荷瘤小鼠脾脏组织Foxp3 mRNA的表达量明显增加;体外实验表明FBL3培养上清液促使CD4^+CD25^+Treg细胞比例增高,并诱导Foxp3 mRNA表达增加。结论:FBL3细胞及其分泌的可溶性物质能诱导CD4^+CD25^+Treg细胞的增殖,说明是肿瘤的发生促进了CD4^+CD25^+Treg增高。 相似文献
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CD4+/CD25+T细胞与哮喘发病关联性的实验研究 总被引:5,自引:0,他引:5
目的观察CD4 /CD25 调节T细胞及其他T细胞亚群与小鼠哮喘发病的相关性,旨在初步探讨调节T细胞参与哮喘发病的可能机制.方法应用流式细胞术检测小鼠正常对照组,哮喘模型/CD25 调节T细胞及T细胞亚群表达状况,同时应用放射免疫法测定各组TXB2和 组及治疗组CD4/CD25 的T细胞亚群显著低于正常对 、CD4 和CD4 SOD的含量.结果哮喘小鼠脾脏单个核中CD3/CD25 及CD4 均较哮喘组升高(P<0.05).而小鼠哮喘组TXB2水平异常 照组(P<0.01),治疗组CD4增高和SOD的减少均可被血栓素合成酶抑制剂特异性阻断.结论提示小鼠发病时免疫功能紊乱与T/CD25 参与调节性相关,而TXB2和氧自由基是哮喘发病的炎性介质,介导和参与 细胞亚群变化及CD4哮喘的发生和发展,用TXB2合成酶抑制剂不仅可抑制TXB2,同时也影响氧自由基的产生. 相似文献
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目的 观察慢性HBV感染患者免疫耐受期与免疫清除期肝组织中CD4+ CD25+调节性T细胞的表达及分布情况.方法 应用免疫组织化学法检测19例免疫耐受期及12例免疫清除期慢性乙型肝炎患者肝组织中FoxP3的表达,6例正常肝组织为对照.结果 FoxP3阳性信号位于淋巴细胞胞核内,阳性细胞主要聚集在汇管区,肝窦内亦可见散在单个淋巴细胞呈阳性.在免疫耐受期及免疫清除期患者肝组织中FoxP3较正常肝组织明显增加(P<0.01),免疫清除期患者肝组织内Fox P3明显高于免疫耐受期患者(P<0.01).免疫清除期患者肝组织中FoxP3阳性标记指数与ALT、HBeAg及HBV-DNA水平无明显相关性.免疫耐受期与免疫清除期两组相比,在年龄、ALT、TBIL、PTA、HBeAg及HBV-DNA水平方面差异均有统计学意义.结论 肝组织中CD4+ CD25+调节性T细胞在慢性HBV感染慢性化和抑制免疫,控制肝脏炎症反应方面可能起了重要作用. 相似文献
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CD4+CD25+调节性T细胞与系统性红斑狼疮病情活动性关系的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:检测系统性红斑狼疮患者外周血CD4^+CD25^+、CD4^+CD8^+调节性T细胞亚群,探讨其与疾病活动性、肾脏损伤、血清抗ds-DNA抗体及免疫球蛋白和补体C3含量的关系。方法:采用流式细胞术检测北京协和医院住院和门诊SLE患者(n=37)外周血CD4^+CD25^+T、CD4^+CD8^+T细胞群比例,以15例RA和15例SS组成自身免疫性疾病对照,30例健康体检者作为正常对照,观察调节性T细胞亚群与SLE患者疾病活动性指标SLEDAI、IgG、C3及血清抗ds-DNA抗体的关系。结果:①疾病活动期SLE患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞群比例显著低于正常对照组(P〈0.01),疾病稳定期和风湿性疾病对照组与正常对照组结果差异无统计学意义。疾病活动期和稳定期SLE患者CD4+CD8+T细胞群比例都略高于正常对照组,但未发现结果差异有统计学意义(P〉0.05)。②疾病活动期SLE患者外周血CD4^+CD25^+T细胞比例及CD4^+CD25^+/CD4^+值显著低于稳定期患者(P〈0.01)。SLE患者外周血CD4^+CD25^+/CD4^+值与SLEDAI、补体C3呈低度相关(r分别为-0.491、0.368,P〈0.05),CD4^+CD25^+T细胞数量与SLEDAI呈负相关(r=-0.578,P〈0.05)。③SLE并发肾病组外周血CD4^+CD25^+T细胞群比例及CD4^+CD25^+/CD4^+值显著低于非肾病组(P〈0.01;P〈0.05)。同一SLE患者治疗前后CD3^+CD4^-CD8^-细胞和NK细胞降低,CD4^+CD25^+细胞、CD4^+CD25^+/CD4^+值及CD8^+T细胞增加,但未发现这些结果差异有统计学意义。本次研究未发现NK细胞、CD4^+CD8+T细胞、CD4^+CD25^+T细胞群比例在ds-DNA+组与ds-DNA-组之间结果差异有统计学意义。结论:SLE患者外周血CD4^+CD25^+T细胞群比例与SLEDAI成负相关,与肾脏的损害也有密切关系,但与血清抗ds-DNA抗体产生的关系不明显。活动期SLE患者外周血CD4^+CD25^+T细胞减少,稳定期CD4^+CD25^+T细胞比例回升,因此推测CD4^+CD25^+T细胞的变化可能是导致疾病发生和病情发展及相关器官(如肾脏)损伤的关键环节之一。 相似文献
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The levels of CD4+CD25+ regulatory T cells in paediatric patients with allergic rhinitis and bronchial asthma 总被引:5,自引:0,他引:5
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Lee JH Yu HH Wang LC Yang YH Lin YT Chiang BL 《Clinical and experimental immunology》2007,148(1):53-63
Our purpose was to determine whether numbers of CD4(+)CD25(+) T [T regulatory (T(reg))] cells and mRNA expression of functional molecules of T(reg) are related to airway allergy and disease severity in 51 paediatric patients with allergic rhinitis or bronchial asthma and 47 healthy controls. Surface markers were evaluated with flow cytometry, and mRNA was determined with real-time polymerase chain reaction. Children with allergic disease had fewer CD4(+)CD25(+) T cells (8 x 49% +/- 2 x 41% versus 9 x 58% +/- 2 x 43%, P<0 x 05) and CD4(+)CD25(hi) T cells (1 x 32% +/- 0 x 68% versus 1 x 70% +/- 0 x 68%, P<0 x 01) than control subjects. Numbers of CD4(+)CD25(+) and CD4(+)CD25(hi) T lymphocytes were higher in children with persistent allergic rhinitis and/or moderate-severe bronchial asthma than in those with respective milder disease. The number of T(reg) cells was correlated positively with total immunoglobulin E level. The mRNA expression of forkhead box P3 (FoxP3) was increased in moderate-severe versus mild asthma (2 x 93 +/- 0 x 38 versus 1 x 60 +/- 0 x 31, P< 0 x 01). Patients with moderate-severe bronchial asthma also had increased mRNA expression of interleukin (IL)-10 compared with patients with mild asthma (15 x 24 +/- 4 x 07 versus 3 x 77 +/- 2 x 18, P<0 x 01). The suppressive function of T(reg) cells from patients with more severe asthma was competent in vitro. On average, decreased numbers of T(reg) cells in children with allergic airway disease might represent a defect of the T(reg) population. With increased expression of FoxP3 and IL-10 in T(reg) from patients with relatively severe allergic disease, adaptive and functional T(reg) might be generated in response to aggravated atopy and disease severity. 相似文献
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目的通过对支气管哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平变化和尘螨过敏状态的测定,探讨调节性T细胞在过敏性支气管哮喘发病中的作用。方法用流式细胞仪测定CD4+CD25+Tr占CD4+T细胞的比例,采用过敏原皮试点刺方法测定支气管哮喘患者的尘螨过敏状态。结果 25例正常对照组和支气管哮喘发作组患者外周血CD4+CD25+Tr水平分别为8.66%±1.61%和4.81%±2.76%,两组有显著差异(P<0.01)。14例粉尘螨或屋尘螨(+~++)阳性组和11例粉尘螨或屋尘螨(+++)及以上阳性组的CD4+CD25+Tr水平分别为6.45%±2.08%,和2.73%±2.03%,两组有显著差异。结论哮喘患者体内存在Tr细胞免疫功能平衡失调,CD4+CD25+Tr细胞处于低水平,CD4+CD25+Tr数量和抑制功能减弱或呈低反应性可能是导致支气管哮喘发病的原因之一。粉尘螨或屋尘螨重度过敏患者的外周血CD4+CD25+Tr水平明显低于轻度过敏者,提示CD4+CD25+Tr可能与支气管哮喘的过敏状态有关。 相似文献
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CD4+CD25+免疫调节性T细胞对CD4+T细胞介导的移植物抗宿主病预防作用的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的研究CD4+CD25+免疫调节性T(Treg)细胞在小鼠骨髓移植后,对移植物抗宿主病的预防作用及其作用机制.方法用C3H(H-2k)小鼠骨髓作为供体,提取C3H(H-2k)小鼠CD4+T及CD4+CD25+T细胞,C3H×B6(H-2k/b)F1小鼠为骨髓移植的受者.在受者接受致死量全身放射后,输注供者去除T细胞的骨髓(ATBM),使其造血功能重建(ATBM组).于不同的实验组给予CD4+(CD4组)T细胞,CD4+CD25+T(CD25组)或二者同时输注(CD4/CD25组).观察各组小鼠移植物抗宿主病(GVHD)的发生率.结果所有10只ATBM组小鼠至骨髓移植后60天仍全部存活,无GVHD发生;所有10只CD4组小鼠在骨髓移植10天内全部死于GVHD(P<0.01);所有5只CD25组小鼠于骨髓移植后60天仍全部存活,无明显GVHD发生(P>0.05);同样,所有6只CD4/CD25组小鼠至骨髓移植后仍全部存活,无明显GVHD发生(P>0.05).结论在同种异基因小鼠的骨髓移植模型中,CD4+CD25+T不诱导GVHD的发生,并有预防CD4+T细胞介导的GVHD发生的作用. 相似文献
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CD4+CD25+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究 总被引:2,自引:1,他引:2
目的初步探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatory T cells,CD4 CD25 Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4 CD25 T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4 CD25 T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4 CD25 T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4 CD25 T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4 CD25 T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4 CD25 Foxp3 Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4 CD25 T细胞转化为CD4 CD25 Treg,提示CD4 CD25 Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。 相似文献
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目的 研究HIV AIDS患者外周血CD4 、CD8 淋巴细胞数在不同条件下 (时间、温度和处理过程 )的变化。方法 选取HIV AIDS患者 34例 ,用流式细胞术检测在 4℃条件下放置不同时间(2、2 4、4 8、72h)的外周血CD4 、CD8 细胞数的变化 ,对经过处理的外周血 (处理过的血样 )CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较 ;对室温条件下放置不同时间 (2、2 4、4 8、72h)处理过的血样CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较。结果 在 4℃时 ,全血放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义(P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数放置 72h时则差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;处理过的样品放置 72hCD4 细胞计数差异才有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 2 4h时差异就有显著意义 (P <0 0 5 )。在室温时 ,处理过血样放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 4 8h则差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论 抗凝全血在 4℃放置 4 8h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。处理过血样在室温放置 2 4h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。 2 4~4 8h虽然CD4 淋巴细胞没有变化 ,但CD8 淋巴细胞却发生明显的变化 ,两者比例必然发生变化。 相似文献
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目的:探讨胃癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的CD4+CD25+T细胞体外增殖及对CD4+CD25-T细胞增殖的影响。 方法:以免疫磁性分离方法 (MACS)分选出胃癌患者外周血单个核细胞中的CD4+CD25+T及CD4+CD25-T细胞后,用流式细胞仪分析细胞的纯度及活力;再以小鼠抗人CD3单抗、小鼠抗人CD28单抗及rh IL-2作为共刺激因子,观察与CD4+CD25-T细胞共培养时,CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制效应。 结果:(1)分选后健康对照组及胃癌患者PBMC 中CD4+CD25+ T细胞纯度分别为83.8%±1.84%、84.13%±2.77%,两者相比,无显著差异(P>0.05);(2)经MACS 分选后正常对照组与胃癌患者CD4+CD25+ T细胞活力分别为98.52%±0.72%、97.80%±0.95%,两者相比,无显著差异(P>0.05);(3)无论是健康对照还是胃癌患者的CD4+CD25+T均具有明显抑制效应性T细胞如CD4+CD25-T细胞的增殖,随着CD4+CD25+T细胞数的增加,这种抑制增殖的能力也相应增加,当CD4+CD25+∶〖KG-*2〗CD4+CD25-T达 1∶〖KG-*2〗1时,抑制率最大达到50%。 结论:MACS分选法能够分选出高纯度及活力的CD4+CD25+T细胞,分选后CD4+CD25+T细胞在体外均能抑制CD4+CD25-T细胞增殖,且这种抑制效应呈一定效靶比关系。 相似文献