快速ELISA检测华支睾吸虫与粪检查虫卵结果分析

目的 探讨快速ELISA在华支睾吸虫病临床诊断中的价值。方法 应用快速ELISA诊断试剂盒检测华支睾吸虫抗体呈阳性的118份标本与粪便清水沉淀查虫卵比较。结果 快速ELISA检测华支睾吸虫抗体阳性118例中，粪便找到虫卵63例(53．3％)。结论 快速ELISA诊断试剂盒在华支睾吸虫病临床诊断中有一定应用价值，其方法操作简单、快速、无需特殊仪器设备，适合基层应用。     

华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究

目的 评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值，探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法 分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA)，以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG．比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果 共检测了112份华支睾吸虫感染血清，使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92．9％(104／112)及94．6％(106／112)；分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例．对于两种抗原，华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同．上述三类血清的阴性率分别为96．5％(54／56)、95％(19／20)及90％(9／10)。结论 华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性，与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近，有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。     

IHA和SPA-ELISA检测华支睾吸虫病效果的比较

本文报道了IHA和SPA-ELISA在实验室和现场同时检测华支睾吸虫病效果的比较。26份正常人和11份华支睾吸虫病人血清,IHA的阴性及阳性符合率分别为100％和90.9％;SPA—ELISA分别为92.3％和90.9％,两者符合率无显著差别。现场对比研究表明,IHA与粪检的阳性及阴性符合率分别为85.88％和70.58％;SPA-ELISA分别为90.6％和79.3％,两者阳性符合率无显著性差别,而阴性符合率的差别有高度显著性,提示SPA-ELISA现场诊断华支睾吸虫病比IHA更具有可信性。     

重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白用于检测特异抗体的研究

目的 评价重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白(rCs26GST)在华支睾吸虫病血清学诊断上的价值。方法使用rCs26GST抗原,以酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫增强化学发光法(immuno-enhanced chemilmninescence,immuno-ECL)检测华支睾吸虫病者、其它寄生虫感染者及健康人血清特异性IgG和IgE抗体,分析rCs26GST抗原用于检测的敏感性和特异性。结果使用rCs26GST抗原,ELISA法检测了30份华支睾吸虫感染者血清、肺吸虫病人血清15份、日本血吸虫病人血清20份、无寄生虫感染的健康人血清40份,华支睾吸虫感染者血清IgG的阳性检出率为73．3％(22／30),健康人、肺吸虫病和日本血吸虫病人的阴性率分别为92．5％(37／40)、80．0％(12／15)、85．0％(17／20)。hnmuno-ECL法检测华支睾吸虫感染者血清rCs26GST-特异性IgE的阳性检出率为867％(26／30),肺吸虫病为26．7％(4／15),日本血吸虫病人和阴性对照组的血清未测出,此法的特异度是95．5%。结论 rCs26GST蛋白用于血清特异性IgG和IgE抗体的检测具有较高的敏感性和特异性,可用于华支睾吸虫病的血清学诊断,组合成“鸡尾酒”式的复合诊断抗原之一。     

Dipstick法检测斯氏狸殖吸虫病血清抗体的建立及应用

目的 建立简便的斯氏狸殖吸虫病Dipstick快速诊断法。方法 以纯化的斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原22kD为诊断抗原，胶体金标记的羊抗人IgC为显色剂，建立Dipstick快速诊断方法；检测斯氏狸殖吸虫病患者血清58例，日本血吸虫病患者血清32例。华支睾吸虫病患者血清23例，健康者血清28例。结果 检测58例斯氏狸殖吸虫病患者血清IgG抗体．其阳性率为98、3％（57／58），分别检测健康者血清28例、日本血吸虫病患者血清32倒和华支睾吸虫病患者血清23例，前者均为阴性，后两者的交叉反应率分别为3.1％（1／32）和0％（0／23）。结论 斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原22kD Dipstick快速诊断法具有较高的敏感性和特异性，简便快捷，勿须特殊仪器设备，是一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IcG抗体较好的免疫诊断方法。     

IEST和快速ELISA诊断华支睾吸虫病的效果比较

应用成虫石蜡切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)和快速酶联免疫吸附试验(Q—ELISA)对比检测了52份华支睾吸虫病患者和50份健康人血清,两法的阳性率分别为96％和94％,假阳性率分别为4％和6％。应用IEST和Q—ELISA检测50份血吸虫病患者和20份卫氏并殖吸虫病患者血清,其交叉反应率分别为6％、8％和5％、5％。结果表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性。Q—ELISA更适台于现场应用。     

两个华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶的基因克隆、表达与定性

目的寻找对华支睾吸虫病诊断有效的抗原基因,以便生物合成并研究其应用价值.方法选取两个Genbank已报告的基因序列AF271091(CysA)及AF093242(CysB)分别克隆与表达融合蛋白,亲和层析纯化后进行免疫定性.结果CysA与CysB均获得成功克隆与表达,Western blot分析显示CysA与华支睾吸虫病阳性血清有强反应,与日本血吸虫病阳性血清只有很弱的交叉反应,而CysA与华支睾吸虫感染血清无反应.免疫组化显示,被表达的两个半胱氨酸蛋白酶在华支睾吸虫体内的免疫定位无显著不同,主要在成虫肠道及虫卵.结论成功表达的两个半胱氨酸蛋白酶中,CysB针对华支睾吸虫病血清有良好的抗原活性,值得视为诊断抗原候选做进一步的研究.     

2032例华支睾吸虫病B超检查肝胆的临床分析

目的：探讨B超在华支睾吸虫病诊断中的应用价值。方法：采用B超检查2032例华支睾吸虫病患者肝胆有无异常。结果：2032例华支睾吸虫病患者B超检查，发现肝胆异常征象1613例，符合疾病的病理生理改变。结论：B超诊断华支睾吸虫病具有重要的价值。     

华支睾吸虫病免疫学诊断方法的研究进展

华支睾吸虫寄生于人和犬、猫等动物的肝胆管内，造成肝胆的一系列疾病，是一种重要的人兽共患寄生虫病。选择快速、准确的诊断方法对防治该病十分重要，免疫学检测方法现已广泛用于华支睾吸虫病的诊断，本文就目前华支睾吸虫病免疫学检测方法的研究进展作一概述。     

布鲁氏菌病抗体快速检测新方法—胶体金技术的应用研究

目的:研制一种敏感、特异、快速并适用于非专业人员快速诊断布鲁氏菌病抗体的胶体金法试剂盒。方法:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记金黄色葡萄球菌 A 蛋白作为探针,同时用布鲁氏菌病可溶性蛋白多糖抗原致敏硝酸纤维素膜,共同组装成基于免疫层析原理的胶体金法快速诊断盒。结果:试管法检测正常阴性血清150份,胶体金法阴性149份,符合率99.34％。试管法检测1:100、1:200、1:400的阳性血清150份,胶体金法阳性141份,符合率分别为92.00％、94.00％及96.00％。两者阴性和阳性血清总符合率为95.50％。结论:布鲁氏菌胶体金法快速诊断试剂盒具有较好的特异性和敏感性,并且具有更简便快速的优点,适用基层单位现场使用。     

应用丝虫特异性IgG4检测试剂盒在湖南省消除丝虫病地区的监测

目的探讨丝虫特异性IgG4抗体ELISA检测试剂盒的敏感性和特异性,评价其在消除丝虫病地区监测的应用价值。方法应用山东省寄生虫病防治研究所和深圳市康百得生物科技有限公司联合研制的丝虫特异性IgG4抗体ELISA检测试剂盒,盲法检测滤纸干血样本共521份,并与病原学检查方法进行平行对照。结果检测原班氏微丝蚴血症转阴者76人,丝虫特异性IgG4抗体全部阴性,病原学血检亦未发现微丝蚴血症者;检测消除丝虫病地区居民69人,丝虫特异性IgG4抗体阳性2例,阳性率为2.90%,病原学血检未发现微丝蚴血症者。检测基本消除丝虫病后地区出生儿童143人和非流行区儿童200人,丝虫特异性IgG4抗体均为阴性;检测慢性丝虫病及其他寄生虫病病人33例,未检出丝虫特异性IgG4抗体阳性者;对血吸虫病、并殖吸虫病、华支睾吸虫病等未见交叉反应。结论丝虫特异性IgG4检测试剂盒敏感性和特异性较高,可以用于消除丝虫病地区监测的筛查和防治效果评价。     

CGIA和ELISA诊断肝吸虫病的比较分析

目的 比较胶体金免疫层析法（CGIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）诊断肝吸虫病的特异性和准确性，探讨其在肝吸虫病诊断中的应用。方法 采用CGIA和ELISA检测36例大便检出虫卵的肝吸虫病患者血清中的肝吸虫抗体。并设立健康人对照组和其它疾病患者作为阴性对照。结果 CGIA和ELISA对阳性标本检测的准确性分别为94．44％和97．22％；对阴性病例检测的特异性分别为98．06％和96．12％；对正常标本检测的特异性分别为97．78％和93．33％。结论 CGIA和ELISA对肝吸虫病患者血清抗体检测的准确性和特异性无显著性差异，两种方法的准确性和特异性均高，且操作简便，均可作为肝吸虫病的初诊及普查筛选方法。     

应用单克隆抗体检测华支睾吸虫病人的循环抗原

本文应用抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体建立了Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，以检测华支睾吸虫病人血清中的循环抗原。被检的６１例中５１例（８３％）呈阳性反应，而肺吸虫、血吸虫、旋毛虫、猪囊虫病人以及健康人均为阴性。     

两种血吸虫病诊断试剂盒在云南大山区应用效果的比较

目的对NP30诊断试剂盒和SEA/ELISA法试剂盒在云南大山区应用的效果进行比较.方法用NP30诊断试剂盒和SEA/ELISA法分别检测取自云南大山区血吸虫病流行社区的506份血清,并对两者结果进行比较.结果NP30诊断试剂盒和SEA/ELISA法的阳性符合率分别为87.88%(144/164)、84.71%(139/164),两者无显著性差异;在粪孵阴性血清样本中,两者的检出率分别为44.15%(151/342)、70.47%(241/342),存在显著性差异.结论NP30诊断试剂盒在云南大山区血吸虫病流行社区应用效果要好于SEA/ELISA法.     

基因芯片法鉴定血培养标本中致病菌的临床评价

目的 探讨应用基因芯片技术检测常规血培养标本中致病菌的可行性.方法 临床血培养标本经全自动血培养仪培养后.同时进行常规分离鉴定和血液重要致病菌基因芯片检测试剂盒检测鉴定,后者包括靶基因的提取、扩增、杂交和结果分析4个步骤,统计分析两者的符合率.结果 86份临床标本中,常规分离鉴定阳性74例,阴性12例,基因芯片检测阳性48例,阴性38例,两种方法比较有显著性差异(P<0.05),其符合率仅为69.77%.结论 基因芯片检测系统的符合率偏低,试剂盒有待完善,但为快速检测和鉴定血液致病菌提供了新思路.

Abstract：

Objective To explore the feasibility of using gene chip method to identify pathogens in blood cultures. Methods Clinical blood samples were obtained and cultured using an automated blood culture system. A gene chip diagnostic kit was used to detect the pathogenic bacteria in these blood cultures following the procedures of target gene extraction and amplification, hybridization and result analysis. The conventional method was also used to isolate and identify the bacteria from the clinical blood cultures, and the results of the two methods were compared. Results In the 86 clinical blood samples, 74 were positive and 12 negative according to the conventional method, while 48 were positive and 38 negative as found by the gene chip method, showing significant differences in the results (P<0.05). The two methods only had a concordance rate of 69.77%. Conclusion The gene chip diagnostic kit has low concordance rate with the conventional method for detecting pathogens in clinical blood cultures and awaits further improvement.     

山东省华支睾吸虫病分布及流行趋势分析

目的了解山东省华支睾吸虫病分布范围及流行趋势，为制定下一步防治策略提供科学依据。方法采用改良加滕厚涂片（Kato—Katz）法粪检华支睾吸虫卵。收集既往资料与现场调查数据作统计分析。结果1987年前全省107个县有华支睾吸虫病流行，受威胁的县为77％（107／139）。人群平均感染率1．5％，感染人数约113万。经40余年的综合防治，至2003年华支睾吸虫人群平均感染率下降为0．06％，下降了96．0％。流行县由原来的107降为51个，受威胁的县下降为36，7％，较前下降了52．3％。感染者由113万下降为5万人左右。轻度感染者由原来的63．7％上升为88．2％。结论山东省华支睾吸虫病流行范围呈逐渐缩小，受威胁人口数逐年下降；人群平均感染率降到历史最低水平，88．2％的感染者为轻度感染，基本达到控制传播流行。     

SARS-CoV寡核苷酸基因芯片在SARS病例咽拭或咽漱液检测中的应用

目的采用SARS-CoV寡核苷酸基因芯片对200份临床确诊SARS病例的咽拭或咽漱液、401例非SARS感染的呼吸道患者的咽拭或咽漱液样品进行检测,评价该方法用于SARS-CoV核酸检测的灵敏度、特异性及其应用于早期诊断的可能性。方法200例临床确诊SARS患者样品,401阴性对照样品采用双盲法进行测定,抽提可能存在的病毒RNA,采用限制性荧光标记法标记,在同等条件下,进行基因芯片杂交、清洗和芯片扫描检测。通过对杂交结果的数据分析,比照临床诊断和血清学的检测结果,对该方法的灵敏度和特异性及应用于SARS早期诊断的可能性进行评价。结果对601份标本检测的结果,灵敏度为71.50%,特异度为92.01%。对发病10 d内采集临床确诊SARS病例的标本,检测的灵敏度为81.08%。结论利用SARS-CoV寡核苷酸基因芯片检测SARS患者发病早期的咽漱液或咽拭子中的SARS-CoV核酸,灵敏度较高,可作为早期基因诊断。     

斑点免疫金银染色法诊断华支睾吸虫病的研究

应用斑点免疫银染色法检测35例华支睾吸虫病人血清中抗体，同时检测35例正常人血清。血清稀释度1：20、1：40和1：80，35例病人血清阳性率100％，正常人血清均为阴性。10例血吸虫病人血清检测无交叉反应，但10例肺吸虫病人血清中4例为阳性反应。