眼眶横纹肌肉瘤rasp21,p53蛋白表达及其与预后的关系

目的 研究ｒａｓｐ２１，ｐ５３癌基因蛋白产物在眼眶横纹肌肉瘤中的表达及其与预后的关系。方法 对确诊的２１例眼眶ＲＭＳ用免疫组化ＡＢＣ法标记ｒａｓｐ２１，ｐ５３蛋白。结果 发现ｒａｓｐ２１，ｐ５３在眼眶ＲＭＳ的阳性率分别为４２．９％和７６．２％。随访的１３例患者中，ｐ５３阳性表达组１００％预后不好，ｒａｓｐ２１／ｐ５３阳性表达组８０％预后不好，ｒａｓｐ２１／ｐ５３阴性组２５％预后不好。     

8—Br—cAMP对人视网膜母细胞瘤HXO—Rb44细胞癌基因的表达效应

目的 研究８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对培养的人视网膜母细胞瘤ＨＸＯ－Ｒｂ４４细胞癌基因表达的效应及其与该细胞生长的关系。方法 ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ,Ｎ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ及ｐ２１ｒａｓ ｍＲＮＡ均以原位杂交ＲＮＡ斑点印迹技术检测,对繁殖细胞核抗原,ｖ－Ｆｏｓ,Ｎ－Ｍｙｃ和Ｐ＾２１ｒａｓ蛋白表达的免疫反应性则采用免疫组化及收白质斑点印迹技术检测。     

人黑色素瘤细胞侵袭转移恶性表型获得的分子学基础

目的 探讨具有不同潜在转移能力的黑色素瘤细胞恶性表型的演进及其侵袭转移的机制。方法 采用细胞培养,ｐ５３蛋白免疫组化染色,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测,流式细胞术（ＰＣＭ）,蛋白酶活性分析（Ｚｙｍｏｇｒａｐｈｙ）及裸鼠体内异种接种实验。结果 人黑色素瘤细胞中存在有ｐ５３基因的突变瘤细胞表面６７ＫＤ ＬＮ－Ｒ的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度大小顺序为ＷＭ４５１〉ＷＭ９８３Ａ〉ＷＭ１３４１Ｂ〉ＷＭ３５。金     

MsrB1对ONOO－诱导的人晶状体上皮细胞周期的影响

目的　探讨蛋氨酸亚砜还原酶Ｂ１（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅｓｕｌｆｏｘｉｄｅｒｅｄｕｃｔａｓｅＢ１,ＭｓｒＢ１）基因沉默对过氧亚硝酸根（ＯＮＯＯ－）诱导的人晶状体上皮细胞（ｈｕｍａｎｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＨＬＥＣ）细胞周期的影响和ＥＲＫ信号通路在其中的调节作用。方法　将培养的ＨＬＥＣ分为两组:正常组和ＭｓｒＢ１基因沉默组,分别用０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１和３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理２０ｍｉｎ后,继续培养１２ｈ。用ＲＴ-ＰＣＲ法检测ＭｓｒＢ１基因表达水平变化,流式细胞仪检测细胞周期水平变化,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＭｓｒＢ１基因沉默和ＯＮＯＯ－对ｐＥＲＫ表达水平的影响。结果　３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理ＨＬＥＣ会导致ＭｓｒＢ１表达水平显著下降（Ｐ＜０．０１）,当ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理后,ＭｓｒＢ１表达水平进一步显著下调（Ｐ＜０．０５）。经２００μｍｏｌ·Ｌ－１或３００μｍｏｌ·Ｌ－１ ＯＮＯＯ－处理,ＨＬＥＣ细胞周期分别阻滞在Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期,当ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经２００μｍｏｌ·Ｌ－１或３００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理后,更多的细胞阻滞在Ｇ２／Ｍ期或Ｓ期（Ｐ＜０．０５）。ｐＥＲＫ检测结果表明,ＭｓｒＢ１基因沉默前后经ＯＮＯＯ－处理导致的细胞周期阻滞和ｐＥＲＫ表达水平显著下降有关（Ｐ＜０．０１）。结论　ＯＮＯＯ－可以下调ＨＬＥＣＭｓｒＢ１表达水平,ＭｓｒＢ１基因沉默细胞经ＯＮＯＯ－处理,ｐＥＲＫ表达水平显著下降,导致更多细胞阻滞在Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期。     

糖尿病视网膜病变与红细胞变形能力和膜磷脂及收缩蛋白变化的关系

目的　探讨糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）与红细胞变形能力（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｄｅｆｏｒｍ ａｂｉｌｉｔｙ，ＥＤ）、红细胞膜磷脂成分及红细胞膜收缩蛋白（ｓｐｅｃｔｒｉｎ，ＳＰ）变化的关系。　方法　１０８例Ⅱ型糖尿病患者根据视网膜病变的有无分为ＤＲ组（５５例）和非ＤＲ（ｎｏｎｄｉａｂｅｔｉｃ ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＮＤＲ）组（５３例），检测其ＥＤ、红细胞膜磷脂成分和红细胞膜收缩蛋白二聚体（ｓｐｅｃｔｒｉｎ ｄｉｍｅｒ，ＳＰＤ）、四聚体（ｓｐｅｃｔｒｉｎ ｔｅｔｒａｍ ｅｒ，ＳＰＴ）相对含量的变化。并与正常对照组５３例的相同检测结果作对比。　结果　ＤＲ患者红细胞滤过指数（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｉｎｄｅｘ，ＥＦＩ）、ＳＰＤ、ＳＰＤ／ＳＰＴ、神经鞘磷脂（ｓｐｉｎｇｏｍ ｙｌｉｎｅ，ＳＭ）／磷脂酰胆碱（ｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ，ＰＣ）明显增高，而ＳＰＴ、ＳＭ、ＰＣ、磷脂酰丝氨酸（ｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ，ＰＳ）和磷脂酰乙醇胺（ｐｈａｔｉｄｙｌｔｈａｎｏｌａｍ ｉｎｅ，ＰＥ）明显降低，与对照组和ＮＤＲ 组比较有显著差异（Ｆ＝ ８．     

8-Br-cAMP可上调人视网膜母细胞瘤HX O-Rb44细胞抑癌基因的表达

目的 探讨８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人网膜母细胞瘤ＨＸＯ－Ｒｂ４４细胞抑癌基因表达的效应，方法 应用ＲＮＡ斑点印迹技术检测细胞ｐ１６、ｐ２１ｗａｆｌ、ｗｐ５３、ｍｐ５３和Ｒｂ的ｍＲＮＡ、应用免疫组化斑点印迷技术检测细胞Ｐ１６、Ｐ２１ｗａｆｌ、ＰＲｂ、ｃｄｋ２、ｃｄｋ４和ＰＣＮＡ蛋白质表达的免疫反应（ＩＲ）。结果 在斑点印迹标本上，人ＨＸＯ－Ｂｂ４４细胞ｐ１６、ｐ２１ｗａｆｌ、ｗｐ５３及Ｒｂ的ｍＲＮＡ信号     

点突变对RB1基因拚接区的影响

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（聚合酶链反应－单链构象多态）联合序列分析对视网膜母细胞瘤肿瘤组织ＲＢ１基因存在状态进行检测，以掌握视网膜母细胞瘤发生时确切的ＲＢ１基因突变类型及发生位置。除发现编码区内ＲＢ１基因点突变、缺失和插入改变外，尚发现成熟ｍＲ－ＮＡ拚接位点（ｓｐｌｉｃｅｄｏｎｏｒ）特有序列的点突变，ＲＢ１基因此种改变尚属少见。     

恶性肿瘤的抑癌基因治疗研究进展

越来越多的证据表明,肿瘤的发生是多因素作用的结果,与癌基因的激活与抑癌基因的失活有关。研究表明几乎一半人类肿瘤都存在抑癌基因的失活,可见抑癌基因失活与肿瘤生长有着密切的关系。因此,将正常的抑癌基因导入肿瘤细胞,去补偿和代替突变或缺失的抑癌基因治疗策略,将成为肿瘤基因治疗中一种重要的治疗模式。就抑癌基因ｐ５３,ＤＣＣ,ｎｍ２３,ＴＩＭＰ,ｐ２１,ｐ１６,ｂｃｌ－Ｘ等在恶性肿瘤基因治疗方面的研究进展作一综述。     

眼部鳞状细胞癌p53基因突变的研究

目的 探讨眼部鳞状细胞癌发生的分子生物学机制。方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ,ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法,对６３例患者的送检标本（包括３６例浸润性鳞状细胞癌７例原位癌,２０例乳头状瘤）,中ｐ５３基因２４８位点的突变进行检测,结果 ２２．２％（８／３６）的浸润性鳞状     

遗传性视网膜变性视细胞凋亡与p53基因表达

目的 研究遗传性视网膜变性视细胞凋亡的基因调控。方法 对出生后第１３－６０天的遗传性神经网膜变性动物模型（ＲＣＳ）大鼠视网膜,进行末端脱氧核糖核苷酸连接酶介导 ｄＵＴＰ末端标记（ＴＵＮＥＬ）凋恨细胞检测、ｐ５３蛋白免疫组织化学染色、ｐ５３ｍＲＮＡ原位杂交和ＲＴ－ＰＣＲ。结果 ＲＣＳ大鼠视网膜视细胞自生后第２５天出现凋亡,第３０－３５天达高峰;视细胞凋亡初期,妈隆后第２８－３０天,视细胞内Ｐ５３蛋白     

点突变对RB1基因拚接区的影响

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ联合序列分析对视网膜母细胞瘤肿瘤组织ＲＢ１基因存在状态进行检测，以掌握视网膜母细胞瘤发生时确切的ＲＢ１基因突变类型及发生位置。除发现编码区内ＲＢ１基因点突变、缺失和插入改变处，尚发现成熟ｍＲ－ＮＡ拚接位点特有序列的点突变，ＲＢ１基因此种改变尚属少见。     

生长激素、胰岛素样生长因子Ⅰ与糖尿病视网膜病变的关系

目的 探讨生长激素（ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ，ＧＨ）、胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒⅠＩＧＦ－Ｉ）水平与非胰岛素依赖型糖尿病（ｎｏｎｉｎｓｕｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ，ＮＩＤＤＭ）患者糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）的关系。方法 用直接放射免疫法测定６１例无ＤＲ的ＮＩＤＤＭ患者、７７例     

兔眼前节碱烧伤免疫机理的研究

目的研究碱烧伤后角膜溃疡形成的免疫学机理。方法将５５只右眼碱烧伤的家兔随机分为两组：Ⅰ组３１只，于烧伤前、后７、１４、２１、３５及４９天分别检测血中循环免疫复合物（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｉｍｍｕｎｅｃｏｍｐｌｅｘ，ＣＩＣ），红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ｒｅｄｂｌｏｏｄｃｅｌＣ３ｂｒｅｃｅｐｔｏｒｒｏｓｅｔｅ，ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ）和免疫复合物花环率（ｒｅｄｂｌｏｏｄｃｅｌｉｍｍｕｎｅｃｏｍｐｌｅｘｒｏｓｅｔｔｅ，ＲＢＣ－ＩＣＲ）。Ⅱ组２４只，于碱烧伤后２１天时用免疫荧光法（ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｃｅｎｃｅ，ＩＦ）和免疫金银染色法（ｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄ－ｓｉｌｖｅｒｓｔａｉｎｉｎｇ，ＩＧＳＳ）检测烧伤组织中的免疫复合物，并于光镜下行组织病理学观察。结果在烧伤后１４～２１天时，ＣＩＣ、ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ和ＲＢＣ－ＩＣＲ均明显升高，组织中检测出免疫复合物的沉积，大量多形核白细胞（ｐｏｌｙｍｏｒ－ｐｈｏｎｕｃｌｅａｒｌｅｕｋｏｃｙｔｅ，ＰＭＮ）聚集在角膜溃疡底部。结论免疫机理参与了碱烧伤后角膜溃疡形成的病理过程，并在化学性损伤的基础上促进了角膜溃疡的形成和发展。     

眼眶横纹肌肉瘤N-ras癌基因点突变及rasp21、p53蛋白的异常表达

目的　研究眼眶横纹肌肉瘤 (rhabdomyosarcoma ,RMS )N ras癌基因点突变、rasp2 1、p5 3蛋白的异常表达 ,探讨基因突变在眼眶RMS发病中的作用。方法　应用特异性高突变区位不同的突变型寡核苷酸探针及突变型rasp2 1、p5 3单克隆抗体 ,对 2 1例眼眶RMS组织进行DNA斑点杂交和免疫组织化学分析。结果　 4例眼眶RMS细胞中发生N ras癌基因 12密码子第 2个碱基突变 ,5例眼眶RMS组织中发生 6 1密码子第 3个碱基突变 ,其中 2例同时有 2个密码子碱基突变。免疫组织化学检测 ,rasp2 1及p5 3蛋白阳性表达增强者分别为 9例和 16例 ,rasp2 1、p5 3蛋白阳性表达增强者其预后较无异常表达者差。结论　眼眶RMS组织中癌基因ras和抑癌基因p5 3突变 ,在眼眶RMS发病中起重要作用     

血清可溶性肿瘤坏死因子受体与2型糖尿病视网膜病变相关性研究

目的　研究血清可溶性肿瘤坏死因子受体（ｓｏｌｕｂｌｅｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ,ｓＴＮＦＲ）与２型糖尿病视网膜病变的相关性。方法　６６例２型糖尿病患者通过眼底检查和眼底荧光血管造影按照ＥＤＴＲＳ分期分为３组:无糖尿病视网膜病变（ｎｏｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＮＤＲ;ｎ＝２２）组、非增殖型糖尿病视网膜病变（ｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＮＰＤＲ;ｎ＝２４）组和增殖型糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＤＲ;ｎ＝２０）组。２１名健康人作为对照组。检测４组研究对象血清中肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）-α、ｓＴＮＦＲ-１、ｓＴＮＦＲ-２水平。组间统计分析采用非参数Ｍａｎｎ-ＷｈｉｔｎｅｙＵ检验。结果　血清中ＴＮＦ-α中位数分别为:对照组０ｐｇ·ｍＬ－１、ＮＤＲ组３．４５ｐｇ·ｍＬ－１、ＮＰＤＲ组３．９２ｐｇ·ｍＬ－１、ＰＤＲ组８．１２ｐｇ·ｍＬ－１。对照组与ＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）、ＮＤＲ组与ＰＤＲ组（Ｐ＝０．００８）比较差异均有统计学意义。血清中ｓＴＮＦＲ-１水平中位数:对照组１．５０ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＤＲ组１．８８ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＰＤＲ组２．５８ｎｇ·ｍＬ－１、ＰＤＲ组３．００ｎｇ·ｍＬ－１。对照组与ＮＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）、对照组与ＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）、ＮＤＲ组与ＮＰＤＲ组（Ｐ＝０．００７）、ＮＤＲ组与ＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）比较,差异均有统计学意义。血清中ｓＴ-ＮＦＲ-２中位数分别为:对照组３．８８ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＤＲ组５．０１ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＰＤＲ组５．２１ｎｇ·ｍＬ－１、ＰＤＲ组６．３３ｎｇ·ｍＬ－１。除了ＮＤＲ组与ＮＰＤＲ组（Ｐ＝０．０７０）间差异无统计学意义外,其他组间差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　血清中ｓＴＮＦＲ与２型糖尿病视网膜病变密切相关,表明ｓＴＮＦＲ在糖尿病视网膜病变的发生发展中起到了一定的作用。对ｓＴＮＦＲ进行进一步研究可以寻找治疗糖尿病视网膜病变新的靶点。     

ReSTOR SV25T0与ReSTOR SN6AD1多焦点人工晶状体植入术后临床疗效对比

目的　对比观察ＲｅＳＴＯＲＳＶ２５Ｔ０与ＲｅＳＴＯＲＳＮ６ＡＤ１多焦点人工晶状体（ｍｏｌｔｉｆｏｃａｌｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒｌｅｎｓ,ＭＩＯＬ）植入术后的临床视觉效果。方法　行白内障超声乳化吸出联合ＭＩＯＬ植入术的白内障患者４１例（４３眼）,根据植入的ＭＩＯＬ不同分为两组:ＳＮ６ＡＤ１组２０例（２２眼）植入ＲｅＳＴＯＲＳＮ６ＡＤ１ＭＩＯＬ,ＳＶ２５Ｔ０组２１例（２１眼）植入ＲｅＳＴＯＲＳＶ２５Ｔ０ＭＩＯＬ,观察两组患者术前及术后３个月裸眼近视力、裸眼中距离视力（５０ｃｍ、７０ｃｍ）及裸眼远视力,绘制离焦曲线,并进行对比敏感度检查、视觉质量及满意度问卷调查。结果　术后３个月两组患者５ｍ裸眼远视力对比差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）;ＳＶ２５Ｔ０组患者５０ｃｍ及７０ｃｍ的裸眼中距离视力分别为（０．１２±０．０７）ｌｏｇＭＡＲ和（０．１７±０．０８）ｌｏｇＭＡＲ,均明显优于ＳＮ６ＡＤ１组患者的（０．１８±０．０８）ｌｏｇＭＡＲ和（０．２４±０．０９）ｌｏｇＭＡＲ（均为Ｐ＜０．０５）,而ＳＮ６ＡＤ１组患者３３ｃｍ的裸眼近距离视力为（０．１１±０．０８）ｌｏｇＭＡＲ,高于ＳＶ２５Ｔ０组患者的（０．１６±０．０８）ｌｏｇＭＡＲ（Ｐ＜０．０５）;ＳＶ２５Ｔ０组术后暗视下３．０ｃ·ｄ－１及６．０ｃ·ｄ－１空间频率的对比敏感度优于ＳＮ６ＡＤ１组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;术后问卷调查示两组患者均未出现明显视觉干扰,ＳＶ２５Ｔ０组患者在近距离视力的视近满意度较ＳＮ６ＡＤ１组低,在中距离和远距离下满意度稍高,但是两组间差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　ＲｅＳＴＯＲＳＶ２５Ｔ０与ＳＮ６ＡＤ１ＭＩＯＬ均能改善白内障患者术后视力及对比敏感度,ＲｅＳＴＯＲＳＶ２５Ｔ０在中距离视力的表现优于ＲｅＳＴＯＲＳＮ６ＡＤ１。     

TMS—3角膜地形图仪在圆锥角膜诊断中的应用

ＴＭＳ－３角膜地形图仪,采用最新的圆锥角膜筛选软件（Ｋｅｒａｔｏｃｏｎｕｓ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ）,我们对筛选出的病人进行分析,以正确评价此系统在圆锥角膜诊断中的作用。１材料和方法 （１）对象：门诊１９９９年～２０００年角膜地形图筛选出的可疑圆锥角膜病人仪器：角膜地形图仪 ＴＭＳ－３（ＶＥＲＳＩＯＮ２． ２）日本ＴＯＭＥＹ公司。 （２）方法：应用 ＴＭＳ－３（ＶＥＲＳＩＯＮ ２．２）中圆锥角膜筛选对病人角膜地形图进行分析。此系统采用两个综合指数：圆锥角膜指数（ＫＣＩ Ｋｅｒａｔｏｃｏｎｕｓ Ｉｎｄｅｘ）,…     

视网膜母细胞瘤中p53蛋白表达的研究

视网膜母细胞瘤中ｐ５３蛋白表达的研究郭浩轶宋绣雯刘政国张成关键词视网膜母细胞瘤蛋白质ｐ５３／分析免疫细胞化学视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）的发生与位于染色体１３ｑ１４的Ｒｂ抗癌基因的失活有关。以往对ＲＢ的研究多集中于对Ｒｂ基因的...     

SB431542和TGF-β1对甲状腺相关性眼病患者眼眶成纤维细胞α-SMA及CTGF基因表达的影响

目的　探讨转化生长因子-β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β１,ＴＧＦ-β１）和ＳＢ４３１５４２（ＴＧＦ-β１受体酶抑制剂）对甲状腺相关性眼病（ｔｈｙｒｏｉｄ-ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｏｐｈｔｈａｌｍｏｐａｔｈｙ,ＴＡＯ）患者眼眶成纤维细胞α平滑肌激动蛋白（α-ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ,α-ＳＭＡ）及结缔组织生长因子（ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＣＴＧＦ）基因表达的影响,为ＴＡＯ眼外肌纤维化的治疗寻找潜在的药物治疗靶点。方法　实验分为３组。第１组:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（ｒｅａｌ-ｔｉｍｅＰＣＲ,ＲＴ-ＰＣＲ）检测不同浓度ＴＧＦ-β１（０μｇ?Ｌ－１、１μｇ?Ｌ－１、５μｇ?Ｌ－１、１０μｇ?Ｌ－１、２０μｇ?Ｌ－１）刺激ＴＡＯ患者眼眶成纤维细胞后α-ＳＭＡ及ＣＴ-ＧＦｍＲＮＡ的表达情况;第２组:采用ＲＴ-ＰＣＲ检测１０μｇ?Ｌ－１ＴＧＦ-β１在不同的时间点（０ｈ、３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ）刺激ＴＡＯ患者眼眶成纤维细胞后α-ＳＭＡ及ＣＴＧＦｍＲＮＡ的表达情况;第３组（分为４小组处理）:眼眶成纤维细胞不加任何干预、使用３０μｍｏｌ?Ｌ－１ ＳＢ４３１５４２刺激眼眶成纤维细胞、１０μｇ?Ｌ－１ ＴＧＦ-β１ 单独刺激眼眶成纤维细胞、３０μｍｏｌ?Ｌ－１ ＳＢ４３１５４２联合１０μｇ?Ｌ－１ ＴＧＦ-β１刺激眼眶成纤维细胞（ＳＢ４３１５４２预先刺激眼眶成纤维细胞１ｈ,然后再加入ＴＧＦ-β１）,采用ＲＴ-ＰＣＲ检测α-ＳＭＡ及ＣＴＧＦｍＲＮＡ的表达。结果　ＴＧＦ-β１在一定的浓度范围内（１～１０μｇ?Ｌ－１）以剂量依赖的方式诱导眼眶成纤维细胞表达α-ＳＭＡｍＲＮＡ及ＣＴＧＦｍＲＮＡ,随着浓度增加ｍＲＮＡ表达增加,各浓度组（１μｇ?Ｌ－１、５μｇ?Ｌ－１、１０μｇ?Ｌ－１、２０μｇ?Ｌ－１）与空白对照组（０μｇ?Ｌ－１）相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。ＴＧＦ-β１在一定的时间范围内（０～２４ｈ）以时间依赖的方式诱导眼眶成纤维细胞表达α-ＳＭＡｍＲＮＡ及ＣＴＧＦｍＲＮＡ,随着时间延长ｍＲＮＡ表达增加,各时间组（３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ）与０ｈ相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。１０μｇ?Ｌ－１的ＴＧＦ-β１诱导眼眶成纤维细胞表达α-ＳＭＡｍＲＮＡ在２４ｈ达到峰值,而ＣＴＧＦｍＲＮＡ在１２ｈ即可达到峰值。ＳＢ４３１５４２对眼眶成纤维细胞α-ＳＭＡｍＲＮＡ及ＣＴＧＦｍＲＮＡ的表达均有抑制作用。结论　一定范围内,ＴＧＦ-β１以剂量和时间依赖的方式诱导眼眶成纤维细胞α-ＳＭＡ及ＣＴＧＦｍＲＮＡ的表达,ＳＢ４３１５４２可抑制其表达。     

RDS／peripherin表达载体的构建和在COS—1细胞的表达

目的 构建大鼠ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,并观察在ＣＯＳ－１细胞中的表达,方法 将全长度的ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎｃＤＮＡ（１．５ｋｂ）插入到真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＭＡＸ中,构建了ＲＤＳ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,采用电穿孔技术将其转染ＣＯＳ－１细胞,转染４８ｈ后,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＲＤＳ／ｐｅｒｉｈｐｅｒｉｎｃＤＮＡ的表达,结果 采用ＲＴ－ＰＣＲ