siRNA对胃腺癌细胞株SGC-7901血管内皮生长因子基因表达的作用

目的 研究siRNA对人胃腺癌细胞株SGC-7901血管内皮生长因子（VEGF）基因表达的影响。方法 利用体外合成带有T7启动子的VEGF基因DNA片段,转录针对VE F mRNA的siRNA．通过脂质体2000将合成的siRNA转染入SGC7901细胞,设置转染VEGF错义序列组、脂质体组、空白对照组作为对照．用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞周期的改变,RT—PCR检测转染后VEGF mRNA表达水平的变化．ELISA法检测细胞培养液中VEGF蛋白分泌量的变化。结果 所设计的两个靶位点siRNA均能有效抑制胃腺癌细胞的生长,并使细胞周期阻滞于G0／G1期;VEGF mRNA的表达也受到有效抑制,明显减少;同时,对应的VEGF蛋白水平也显著降低,作为阴性对照的错义序列组siRNA则没有出现这种变化。结论 体外转录合成的siRNA可抑制胃腺癌SGC-7901细胞VEGF基因的表达。     

微量胃液单克隆抗体筛查胃癌的研究

目的 :探讨胃癌的早期诊断。方法 :在 1 4 687例有消化道症状人群中筛选出 60 0例胃癌高危人群进行微量胃液单克隆抗体检测。结果 :对胃癌病人检测的敏感性为 86.66% ,特异性为 77.5 4% ,准确性为 78% ,阳性预测值为 1 5 .85 %。结论 :微量胃液单克隆抗体检测对胃癌的早期发现 ,及时进行胃癌的二级预防提供了有效途径。     

五味子乙素B对人胃癌细胞MGC－803增殖和迁移能力的影响

目的：观察五味子乙素B（ Schisandrin B , Sch B）对人胃癌细胞MGC－803增殖、迁移能力及基质金属蛋白酶－9（matrix metalloproteinase 9, MMP－9）mRNA表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法：采用CCK－8法检测50、100、200、400和800μmol／L Sch B对胃癌细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞生长状态变化,并计数细胞分裂指数;细胞划痕实验检测200μmol／L Sch B对细胞迁移能力的影响;定量PCR检测细胞MMP－9 mRNA的表达。结果：CCK－8结果显示,Sch B对胃癌细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;胃癌细胞经不同浓度Sch B处理24、48、72 h,光镜下可见大量细胞皱缩,胞膜界限模糊,核质浓缩及凋亡小体形成,细胞分裂指数随Sch B剂量增加和作用时间延长而降低;200μmol／L Sch B作用24、48、72 h,细胞迁移率分别为（39．57±9．14）％,（56．57±10．04）％和（68．21±11．43）％,明显低于对照组（P＜0．05）;PCR结果显示,胃癌细胞中MMP－9 mRNA表达显著低于对照组。结论：Sch B对胃癌细胞的增殖抑制呈剂量和浓度依赖性,并降低胃癌细胞迁移能力,可能与下调MMP－9基因的表达有关。     

Survivin基因在不同胃黏膜中的表达的研究

目的:研究胃癌(gastric cancer,GC)及不同胃黏膜组织中生存素(Survivin)基因的表达关系,为临床应用以生存素为靶点的胃癌防治措施提供理论依据.方法:采用免疫组织化学染色(SP法)检测不同胃黏膜组织中Survivin.30例浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG);31例萎缩性胃炎(chronic Atrophic gastritis,CAG),15例异型增生(Dysplasia,Dys).胃癌组织32例.结果:从CSG→CAG→ Dys→GC过程中,Survivin表达均呈递增趋势.CSG灰度值(57.64±4.44)、CAG灰度值(55.05±6.97)、Dys灰度值(48.59±4.16);GC灰度值(32.25±4.13).Survivin表达在CSG、CAG、Dys、GC之间表达有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织Survivin的表达与年龄,性别,肿瘤大小无关;在临床分期和组织分化程度方面Survivin阳性表达率明显不同,具有统计学意义(P＜0.05).结论:Survivin基因在胃癌的发生发展过程中可能起重要作用.     

抗癌生物活性肽对实验性胃癌PCNA、caspase-8基因表达的影响

目的:探讨抗癌生物活性肽作用于荷胃癌裸鼠后,对其增殖及凋亡相关基因表达变化的影响.方法:将裸鼠接种胃癌MGC-803细胞后使之致瘤.实验随机分为3组,对照组11只,脾肽实验组12只,肝肽实验组11只;分别尾静脉注射生理盐水0.4mL、脾肽0.4mL(0.15mg/mL)、肝肽0.4mL(0.05mg/mL).连续处理35d,停药4d后处死裸鼠,取肿瘤,以4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,4μm切片.应用免疫组化SABC法检测PCNA、caspase-8蛋白在实验组与对照组中的表达情况.结果:PCNA蛋白在对照组(NS组)肿瘤中阳性表达较强,在P组、G组裸鼠肿瘤中PCNA蛋白的表达均比对照组的表达弱,且有显著性差异(P<0.01);caspas-8蛋白在对照组(NS组)肿瘤中阳性表达较弱,P、G组裸鼠肿瘤中caspas-8蛋白的表达均比对照组表达强,且有显著性差异(P<0.01).结论:抗癌生物活性肽能降低胃癌移植瘤细胞的增殖活性,并能促进其凋亡.     

组合单克隆抗体提高人胃癌细胞系反应性的研究

目的：将胃癌单克隆抗体（ ＭｃＡｂ） 组合提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，为肿瘤定位诊断及导向治疗提供有效的ＭｃＡｂ 组合。方法：采用ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 观察了单一胃癌ＭｃＡｂ 及组合ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性。结果：经ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 分析单一的ＭｃＡｂ３Ｇ９ 、ＢＢ４．３ 与胃癌细胞结合的膜荧光阳性率分别为７４－２ ％ 和５４－９ ％ 。平均膜荧光强度分别为５３－６ 和６５－８。两者组合后，在相同抗体浓度下，膜荧光阳性率为９７－４ ％ （ Ｐ＜０－０１）；平均膜荧光强度为１２５－５（ Ｐ＜ ０－０１） 。结论：合理采用组合的ＭｃＡｂ 可提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，降低抗原表达的异质性，从而提高ＭｃＡｂ 的载体效应。     

有机锡化合物对S-180和胃癌细胞的影响

有机锡化合物(Et_2SnCl_2phen)是类似于顺铂结构的新型抗癌物质。实验结果表明,Et_2SnCl_2phen对S-180细胞生长有明显的抑制作用,阻止G_2+M→G_1期的进行,造成G_2+M期细胞堆集。Et_2SnCl_2phen与胃癌作用后,扫描电镜观察表明,粘着在裸露的玻璃表面的癌细胞变为球形,膜皱襞,微绒毛减少。可使S-180和人胃癌细胞的DNA相对含量明显减少。     

抗癌生物活性肽对人胃癌BGC-823细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4表达的影响

目的：探讨抗癌生物活性肽对人胃癌细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4的影响及其作用机制。方法：实验分为活性肽组及对照组,将不同浓度的抗癌生物活性肽按不同时间作用于培养的人胃癌细胞株（BGC-823）,应用MTT法检测增殖抑制率。建立荷胃癌裸鼠模型,给予生理盐水作为阴性对照组,应用免疫组化技术对抗癌生物活性肽作用前后的胃癌裸鼠肿瘤中CDK4、CDC2的表达进行检测。结果：不同浓度的抗癌生物活性肽对胃癌细胞均有增殖抑制作用;抗癌活性肽S-2作用后人胃癌组织中的CDK4表达明显低于对照组（P〈0.01）,而CDC2表达高于对照组（P〈0.01）。结论：抗癌生物活性肽具有抗胃癌细胞增殖作用,其抗肿瘤作用机制可能是通过下调CDK4和上调CDC2的表达实现。     

胃溃疡和胃癌患者胃窦粘膜内胃泌素和生长抑素阳性细胞数量变化的免疫组织化学研究

采用改良的钴—葡萄糖氧化酶—二氨基联苯胺法研究了外科手术切除的胃溃疡（溃疡组织区，８例）和胃癌（非癌组织区、非癌组织与癌组织交界区、癌组织区，１０例）患者局部胃粘膜内胃泌素（ｇａｓｔｒｉｎ，ＧＡＳ）和生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＯＭ）免疫阳性细胞的动态变化。实验发现，ＧＡＳ和ＳＯＭ阳性细胞主要位于胃底腺的下部，散在或成群分布，胞体呈多边形、椭圆形或锥体形。胞质内充满棕褐色沉淀物，核阴性反应，呈空泡状。除阳性细胞外，毛细血管壁也呈ＧＡＳ和ＳＯＭ阳性反应。ＧＡＳ免疫阳性细胞的数目明显高于ＳＯＭ阳性细胞，但两种阳性细胞的形态和分布没有明显差异。癌组织区的两种阳性细胞的数目（ＧＡＳ：１１７．３０±１３．９９个／ｍｍ~２；ＳＯＭ：２１．１９±２．３３个／ｍｍ~２；）明显高于非癌组织区（ＧＡＳ：５１．１７±８．４ｌ个／ｍｍ~２；ＳＯＭ：９．２８±１．５２个／ｍｍ~２，Ｐ＜０．０５）、非癌组织与癌组织交界区（ＧＡＳ：６８．０２±５．９８个／ｍｍ~２；ＳＯＭ：１２．２８±１．０８个／ｍｍ~２，Ｐ＜０．０５）和溃疡组织区（ＧＡＳ：４７．０３±４．５４个／ｍｍ~２；ＳＯＭ：８．３１±１．８４个／ｍｍ~２，Ｐ＜０．００１）。非     

红景天苷抑制胃癌细胞SGC7901增殖及对PKC-α的影响

目的观测红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖和PKC-α表达的影响,为红景天苷治疗恶性肿瘤提供实验依据。方法采用细胞形态学方法及MTT法、流式细胞术检测分析不同浓度红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用;Western Blot法检测对照组、红景天苷10-40μmol/L各组PKC-α蛋白表达水平。并对上述结果做相关分析。结果红景天苷作用SGC7901细胞24 h后细胞变圆,贴壁生长状态变差,死亡细胞数增多。MTT示红景天苷浓度在10-100μmol/L时,细胞死亡率随药物浓度增加而增多,细胞生存率与红景天浓度呈负相关。流式细胞术结果显示,红景天干预后凋亡细胞随着药物浓度增加而增多（P〈0.05）。Western blot检测结果示PKC-α蛋白的表达随红景天苷浓度（10、20、40μmol/L）的增加逐渐降低（P〈0.05）。结论红景天苷对胃癌细胞SGC7901具有抑制增殖并诱导凋亡的作用。红景天苷对SGC7901细胞有抑制PKC-α蛋白表达的作用。红景天苷对恶性肿瘤具有相关治疗作用。     

ESTABLISHMENT AND BEHAVIOR OF A TRANSPLANTED HUMAN PRIMARY GASTRIC CANCER IN NUDE MICE

A human primary gastric cancer tissue (adenocarcinoma Ⅱ—Ⅲ) was transplanted into nude mice (SWISS/DF, nu/nu). It has been transfered for 8 generations at 56 sites in 28 nude mice with transplanting rate of 100%. The transplanted tumor is designated as transplanted human primary gastric cancer-1 in nude mice (THPGC-1). The growth rate of THPGC-1 is rather rapid and the size of transplanted tumor reaches 1cm~2 in 4—5 weeks after transfer. The morphology and histochemistry of the original tumor were retained well in the initial and serial transplanted tumors. THPGC-1 could secrete carcinoembryonic antigen (CEA). After intravenous or intraperitoneal injection of ~(131)Ⅰ-antiCEA monoclonal antibody into the THPGC-1 bearing nude mice, the radiolabeled antibody was concentrated and localized in the tumor as shown by γ-camera analysis. Similar pattern of lactate dehydrogenase isoenzyme was observed both in primary gastric cancer tissue and THPGC-1 tissue. Chromosomal examination revealed that THPGC-1 was human aneuploid ones. Southern blot analysis showed that the pattern of repetitive DNA bands and the structure of 28S rDNA, c-H-ras and c-myc genes in THPGC-1 were identical to the original primary gastric cancer DNA. The results suggest that THPGC-1 be a reliable model for the research of the molecular biology of cancer cells and experimantal gastric cancer diagnosis and treatment.     

端粒酶在胃癌和癌前病变中的表达及相关性研究

目的:探讨胃癌及癌前病变中端粒酶(hTERT)的表达及临床意义.方法:采用原位杂交方法,检测了130例石蜡包埋标本.结果:1.端粒酶(hTERT)主要分布在细胞浆中,在慢性浅表性胃炎(CSG) 、慢性萎缩性胃炎(CAG) 、非典型增生(DYS) 及胃癌(GC)中表达率分别是0%、10%、30%、78.75%.在GC中表达率最高,GC组中的端粒酶与CSG 、CAG、DYS相比P＜0.01.2. 80例胃癌中,端粒酶在高分化、中分化、低分化癌中表达率分别为71.43%,75%,75%,各组之间无差异性(P>0.05).结论:端粒酶的表达与胃癌的发生密切相关.端粒酶检测对胃癌诊断具有重要意义,是一个很好的恶性肿瘤标记物;端粒酶表达强度与胃癌的分化程度无相关性.     

P^53表达在早期胃癌进展中的作用

目的 :探讨P53表达在早期胃癌进展中的作用。方法 :用免疫组化法检测了 114例早期胃癌中P53及细胞周期蛋白 (Cyclin)E的表达。 结果 :正常胃腺上皮无阳性表达 ;胃癌中P53阳性表达位于癌细胞核内 ;P53总阳性率 3 1% ( 3 5 / 114 )P53表达率为男性 3 7% ( 3 1/ 83 ) ,组织学分化型 4 1% ( 3 3 / 80 ) ,均显著增高 ;此率在侵入粘膜下者是 4 0 % ( 2 1/ 5 3 ) ,侵润淋巴管者 4 2 % ( 14 / 3 3 ) ,侵入静脉者 4 7% ( 9/ 19) ,都倾向高于对照组。P53阳性癌的CyclinE表达率显著升高。P53阳性者 5年生存率 74 % ( 2 6/ 3 5 ) ,显著低下。结论 :P53表达很可能参与和促进了早期胃癌的进展 ,P53阳性的早期胃癌生物学恶性度高 ,须给予积极的治疗     

不同浓度五味子乙素对人胃癌细胞株MGC-803增殖、凋亡的影响

目的：观察五味子乙素诱导人胃癌细胞株MGC-803凋亡作用。方法：用10、50、100、200μmol/L浓度五味子乙素作用胃癌细胞株48 h,倒置显微镜下观察细胞增殖情况;MTT法检测五味子乙素对细胞增殖的抑制作用;凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结果：倒置显微镜下,随着五味子乙素作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降;MTT法亦检测到上述结果;当五味子乙素作用浓度是100μmol/L时,可检测到明显的凋亡细胞。结论：高浓度的五味子乙素可诱导胃癌细胞株MGC-803细胞的凋亡,具有量效依赖关系。     

P^53蛋白在42例胃癌的表达与分析

应用免疫化技术检测了４２例胃癌标本Ｐ＾５３蛋白的异常表达。结果显示：Ｐ＾５３蛋白表达的阳性率为３３．３３％（１４／４２），癌旁粘膜及癌间质Ｐ＾５３蛋白表达为阴性。     

PURIFICATION AND IDENTIFICATION OF THE ANTIGEN ASSOCIATED WITH MONOCLONAL ANTIBODY 3H11 AGAINST GASTRIC CANCER CELL

The object of this study is to investigate the properties of gastric cancer assoiciated antigen by McAb3H11 against gastric cancer cell line. Antigen purified by affinity chromatography and further characterized by biochemical and immunological techiques. Results showed that assoiciated antigen of McAb 3H11 was mainly located on the membrane of target calls. It was sensitive to heat and digestion of proteases,but resistant to treatment with sodium perioclate. Schiff‘s reagent staining was negative. SDS-PAGE and IEF-analysis showed that the antigen was a 210 kD molecular weight with pl of 8.5 protein. The molecular weight of antigen extracted from target cell with tunicamycin was not changed. We concluded that the corresponding antigen of MeAb 3H11 might be an alkaline protein.     

膜联蛋白A7在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨膜联蛋白A7在胃癌组织中的表达变化和意义。方法：分别采用SP免疫组织化学染色法和Western Blotting法检测膜联蛋白A7在55例胃癌组织和25例癌旁正常胃组织中的表达情况。结果：胃癌组织膜联蛋白A7的表达水平明显高于癌旁正常胃组织,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：膜联蛋白A7高〈br〉 表达可能参与了胃癌的发生发展。     

胃癌单克隆抗体GL—013对应抗原的免疫电镜分布观察

运用酶标免疫电镜技术,对16例不同类型胃癌进行了胃癌单克隆抗体GL-013对应之抗原的超微结构水平分布观察。证实了GL-013抗原在胃癌细胞及癌旁“正常”粘膜分布的差异,首次提出该抗原可能是一种可溶性胃癌相关抗原,可做为胃癌研究及血清学诊断的免疫指标之一。     

胃癌普查方法探讨

我室在5159名年龄35～64岁人中,采用特制的中空金属球吸取胃液,检测pH、OB、IgA和IgG,开展胃癌普查。检出胃液阳性者1250例,检出率为24.23％(1250/5159)。对835例胃液阳性者和87例胃液阴性者行胃镜病理检查,发现23例胃癌,均为胃液阳性者,癌检出率为0.45％(23/5159),其中早癌7例,占30.43％(7/23)。胃液阳性组癌～癌前期变化者检出率为61.32％(512/835),明显高于胃液阴性组的21.84％(19/87),经X~2检验有非常显著性意义(P<0.005)。此方法操作简单、安全病人痛苦小,癌检出率高,有一定实用价值。