免疫检查点分子在妊娠期糖尿病患者调节性T细胞中的表达

目的探讨正常妊娠妇女和妊娠期糖尿病(GDM)患者外周血和脐血调节性T细胞(Treg)免疫检测点分子表达水平。方法流式细胞术检测58例正常妊娠妇女和43例GDM患者外周血和脐血中程序化细胞死亡受体-1(PD-1)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)、人白细胞抗原G(HLA-G)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)在调节性T细胞(CD4^+Treg细胞和CD8^+Treg细胞)中的表达和调节性T细胞比例。结果与正常妊娠妇女相比,GDM患者外周血和脐血中CD4^+Treg细胞比例降低,CD8^+Treg细胞比例升高,外周血中PD-1和GITR+Treg细胞及脐血中PD-1/CD4^+Treg细胞比例降低,差异均有统计学意义(均P<0.01)。两组中,脐血HLA-G表达高于外周血,而PD-1和GITR表达低于外周血,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论外周血和脐血CD4^+Treg细胞、CD8^+Treg细胞表型及功能具有不同的免疫学特征,PD-1和GITR表达下调可能与GDM有关。     

卵巢癌患者外周血CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞及Foxp3的检测及临床意义

目的:检测CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)及Foxp3在卵巢癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫调节中的作用及临床意义。方法:采用流式细胞术检测75例卵巢癌患者PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞百分比以及CD4+CD25+及CD4+CD25highT细胞中Foxp3+T细胞的表达,并与73例正常对照组进行比较。结果:卵巢癌患者治疗前PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞百分比及Foxp3表达水平均较正常对照组增高(P<0.05),治疗后上述指标较治疗前减低(P<0.05)。结论:卵巢癌患者外周血调节性T细胞增高可能是其免疫异常的主要原因之一,定期检测外周血中上述指标的变化有助于了解卵巢癌患者的病情变化及判断预后。     

老年脑出血患者相关感染调节性T细胞与辅助性T细胞表达的分析

目的 探讨老年脑出血合并相关感染患者的调节性T细胞与辅助性T细胞的表达.方法 对医院2009年2月-2010年2月60例老年脑出血合并感染患者(观察组)和同期的60例老年脑出血无感染患者(对照组)的调节性与辅助性T细胞的表达采取间接免疫荧光法进行测定.结果 通过两组的对比分析,观察组患者的调节性T细胞中的CD4+、CD25+和CD4+、CD25+Foxp3水平含量(15.44±4.56)％、(3.97±0.56)％明显的高于对照组的CD4+、CD25+和CD4+、CD25+ Foxp3水平含量(12.32±3.45)％、(3.23±0.45)％,差异有统计学有意义(P＜0.05);观察组辅助性T细胞中的CD3+、CD4+及CD4 +/CD8+比值的(54.34±8.67)％、(30.24±5.35)％、1.24±0.36均明显的低于对照组的(66.72±12.34)％、(37.44±6.34)％、1.78±0.46,而CD8+的(28.45±4.33)％含量明显的高于对照组的(20.23±3.46)％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 老年脑出血合并相关感染患者外周血中的调节性T细胞与辅助性T细胞得到异常的表达,可以作为临床中诊断该病的一种新指标,具有重要的临床意义.     

大剂量地塞米松对ITP患者调节性T细胞及叉头状转录因子FoxP3表达的影响

目的:观察特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者调节性T细胞(Treg)和叉头状转录因子FoxP3的表达情况及地塞米松治疗前后的变化。方法:用流式细胞术检测ITP患者外周血Treg、FoxP3的表达情况并与正常人群进行比较、并同时记录大剂量地塞米松治疗前后ITP患者Treg、FoxP3的表达情况,比较激素治疗对机体免疫的影响。结果:ITP患者外周血中CD4+T细胞的比例显著低于正常组(P<0.05),CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+T在总CD4+T细胞中所占比例也低于正常对照组(P<0.05)。ITP患者未经激素治疗前外周血中FoxP3表达比例明显低于正常对照组(P<0.05),经大剂量地塞米松治疗后Foxp3表达比例升高(P<0.05),与正常人群比较差别仍有统计学意义(P<0.05)。结论:ITP患者的Foxp3表达下降,CD4+CD25+Treg细胞患者数量减少,Treg及Foxp3在ITP的发生发展中起到重要作用,大剂量地塞米松可显著提高CD4+CD25+Treg及FoxP3的表达。     

吸毒人群外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞和免疫功能变化及意义

目的通过测定不同吸毒方式的吸毒人群外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryTcell,Treg)的变化,从免疫调节方面探讨吸毒对人体免疫功能的影响以及机体的调节功能改变。方法清晨空腹抽取静脉血,采用流式细胞仪同期测定吸毒组和正常对照组人群CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25+Foxp3Treg细胞及CD8+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞的表达。结果口吸组和静脉注射组调节性T细胞与正常对照组比较,差异有统计学意义(LSD-t=2.34,4.35,P﹤0.05),静脉注射组和口吸组CD4+CD25+、CD4+CD25+Foxp3Treg细胞相比差异有统计学意义(LSD-t=3.37,4.07,P﹤0.05);不同吸毒途径淋巴细胞CD4+、CD8+表达不同,与对照组比较口吸组、静脉注射组CD4+和CD8+T淋巴细胞差异有统计学意义(LSD-t=5.18,4.94,2.17,2.23,P﹤0.05)。结论吸毒人群CD4+CD25+调节性T细胞功能代偿升高和不同吸毒方式导致机体免疫功能受损程度也不同。     

子痫前期患者蜕膜中CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性 T细胞及NK细胞的相关研究

目的:对子痫前期(PE)患者蜕膜中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg)和NK细胞进行相关研究,探讨子痫前期发病机制中相关的免疫学变化。方法:选择子痫前期患者30例(轻度13例、重度17例)、正常晚期妊娠妇女30例。采用免疫组织化学法检测胎盘蜕膜CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和NK细胞后计数并检测其平均灰度值。结果:①子痫前期患者蜕膜CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞阳性表达率均明显低于正常晚期妊娠者(P均<0.05);②子痫前期患者蜕膜NK细胞数高于正常孕妇(P均<0.05)且NK细胞CD56组化染色平均灰度值高于正常孕妇(P均<0.05)。结论:子痫前期患者蜕膜的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞均低于正常孕妇;蜕膜的NK细胞数均高于正常孕妇,这一结果造成母胎免疫耐受失衡且NK细胞呈激活状态,杀伤活性增强,导致子痫前期。     

煤工尘肺壹期患者周围血CD4+ CD25+调节性T细胞与CD4+ 、CD8+T细胞表达及意义

目的 探讨周围血CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)与CD4+、CD8+T细胞在煤工尘肺(CWP)壹期中的水平变化及临床意义.方法 采用流式细胞术检测103例CWP壹期患者(CWP组)、45例具有与CWP组相同接尘条件的健康井下接尘矿工(接尘对照组)及48例井上健康检查人员(正常对照组)周围血CD4+ CD25+ Treg及其CD4+、CD8+T细胞水平.结果 与接尘对照组和正常对照组比较,CWP组CD4+ CD25+ Treg、CD4+T细胞水平及CD4+CD25 +/CD4+、CD4+ CD25 +/CD8+比值明显升高,差异具有统计学意义(均P＜0.01),CD8+T细胞则无明显改变(P＞0.05),但接尘对照组CD8+T细胞水平明显低于正常对照组(P＜0.05).CWP组吸烟患者CD4+ CD25+ Treg水平和CD4+ CD25 +/CD4+比值均明显高于非吸烟患者,差异有统计学意义(均P＜0.01).CWP组CD4+ CD25+ Treg与CD4+T细胞呈正相关[相关系数(r) =0.627,P＜0.01],与CD8+T细胞呈负相关(r=-0.362,P＜0.01),CD4+T细胞与CD8+T细胞呈负相关(r=-0.436,P＜0.01).结论 CWP壹期患者周围血CD4+ CD25+ Treg表达增加,可能影响CD4+T细胞和CD8+T细胞的分布平衡,导致细胞免疫功能紊乱;吸烟可加重T细胞亚群分布失衡.     

支气管哮喘患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞水平及Foxp3 mRNA表达的分析

目的 观察支气管哮喘(哮喘)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)水平及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达的变化,探讨CD4+ CD25+ Treg在哮喘发病中的作用.方法采用流式细胞仪检测78例哮喘患者(急性发作期组30例,慢性持续期组25例,缓解期组23例)和29例健康志愿者(正常对照组)PBMCs中CD4+ CD25+ Treg的比例;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMCs中Foxp3 mRNA的表达.结果 急性发作期组和慢性持续期组PBMCs中CD4+ CD25+ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达明显低于缓解期组和正常对照组(P＜0.05);缓解期组CD4+ CD25+ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达虽亦低于正常对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);急性发作期组CD4+ CD25+ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达低于慢性持续期组(P＜0.05).结论 哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+ CD25+ Treg数量减少,功能下降,可能参与哮喘的发生和发展.     

HBV宫内感染新生儿外周血调节性T细胞表达

目的 探讨CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)在乙肝病毒(HBV)宫内感染新生儿外周血中的表达和意义.方法 选择乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕妇及其分娩新生儿79例,用酶联免疫吸附试验检测孕妇和新生儿外周血HBV标志物,实时荧光定量PCR检测母亲和新生儿外周血HBV DNA含量,用流式细胞仪检测新生儿外周血CD4+ CD25+ Treg和CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg水平.结果 宫内感染HBV新生儿外周血CD4+ CD25+Treg和CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T细胞比例分别为(10.57±2.25)％和(1.67±0.37)％,均高于未感染新生儿,差异有统计学意义(P＜0.05),随产妇HBV DNA载量增加,新生儿外周血CD4+ CD25+ Treg和CD4+CD25+ Foxp3+ Treg增加,CD4+ CD25+ Treg比例高于阴性组(P ＜0.05);CD4+CD25+ Treg和CD4+ CD25+Foxp3+ Treg均与产妇HBV DNA载量呈正相关(r=0.430、0.409,P＜0.05).结论 Treg可能通过抑制机体细胞免疫反应影响乙肝病毒清除,新生儿HBV宫内感染可能与Treg表达上调有关.     

妊娠期调节性T细胞与雌激素水平变化对母胎免疫耐受的影响

目的:探讨不同妊娠期外周血调节性T细胞与雌激素水平变化对母胎免疫耐受的影响。方法:选择非妊娠妇女30例为对照组,早、中、晚孕及产后3天妇女各30例为研究组;应用流式细胞术检测外周血CD4+ CD25+ Treg及Foxp3+细胞占CD4+ T细胞的比例,用电化学免疫发光法测定其外周血E2含量。结果:外周血E2含量、CD4+ CD25+ Treg、CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+细胞的比例分别为:非妊娠对照组(211.30±107.30)pmol/L、(10.99±2.64)%、(2.12±0.83)%;早孕组(16644.00±12131.20)pmol/L、(12.63±3.05)%、(2.99±1.22)%;中孕组(90846.60±36335.20)pmol/L、(19.48±5.11)%、(3.92±1.46)%;晚孕组(109354.1±40671.6)pmol/L、(17.44±5.36)%、(3.47±1.15)%;产后组(420.70±214.80)pmol/L、(13.86±2.61)%、(2.56±0.74)%。各妊娠组CD4+ CD25+ Treg和CD25+ Foxp3+ Treg均明显高于非妊娠对照组(t值分别为2.22,8.90,5.91和3.22,5.83,5.21;P均<0.05);中孕期达高峰;晚孕略有下降,但仍维持高水平,与中孕组比较无统计学差异(t=1.51和1.30,P>0.05);产后3天下降明显,但仍高于非妊娠对照组(t=4.24和2.13,P<0.05)。外周血E2含量从早孕到晚孕逐渐升高,产后迅速下降,但仍明显高于非妊娠对照组(t=4.78,P<0.01)。各妊娠组均明显高于非妊娠对照组(t值分别为7.42,13.66,14.69;P均<0.01);中、晚孕组明显高于早孕组(t=10.61和11.59,P<0.01),中、晚孕组比较无统计学差异(t=1.86,P>0.05)。结论:妊娠期CD4+ CD25+ Treg增殖和Foxp3+表达在诱导母胎免疫耐受和维持正常妊娠过程中发挥重要作用,而高水平E2对CD4+ CD25+ Treg增殖和Foxp3+表达起促进作用。     

子痫前期患者CD4~+CD25~+Foxp~(3+)调节性T细胞检测及意义

目的:研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在子痫前期患者(PE)外周血中的比例变化,探讨其在子痫前期发病中意义。方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测22例子痫前期患者外周血中CD4+CD25high和CD4+CD25+Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:子痫前期患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+CD25+Foxp3+的表达显著降低,而且其CD4+CD25+Foxp3+的表达与平均动脉压呈负相关。结论:子痫前期患者CD4+CD25+Foxp3+的表达明显减少,表明调节性T细胞的降低可能打破了母胎之间的耐受,参与了子痫前期的病理进程。     

手术前后卵巢癌患者外周血T细胞亚群及CD4~+CD25~+调节性T细胞表达及临床意义

目的:探讨手术前后卵巢癌患者外周血T细胞亚群及CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测80例卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞及CD4+CD25+调节性T细胞水平。结果:与对照组相比,卵巢癌患者外周血中CD3+,CD4+,CD4+/CD8+比值及NK细胞含量均降低(P0.05),CD8+升高(P0.05);随着疾病进展Ⅲ期+Ⅳ期与Ⅰ期+Ⅱ期比较CD3+,CD4+,CD4+/CD8+比值及NK细胞含量均降低(P0.05),CD8+升高(P0.05)。卵巢癌患者外周血CD4+CD25+细胞比例高于正常对照组(P0.05);手术后卵巢癌患者T细胞亚群比例与术前比较并未明显恢复(P0.05),但CD4+CD25+调节性T细胞水平有所恢复(P0.05)。结论:卵巢癌患者免疫功能低下,术后短期并不能恢复,CD4+CD25+调节性T细胞水平升高,术后明显恢复,提示其在免疫耐受中起重要作用。     

慢性丙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化的临床分析

目的：分析慢性丙型肝炎（CHC）患者外周血T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+和CD8+细胞）以及调节性T淋巴细胞（CD4+CD25+Treg）表达与HCV RNA水平之间的关系。方法选取CHC 患者128例,根据HCV RNA水平高低将他们分为HCV RNA阴性组48例,低病毒组40例（HCV RNA<105 IU/mL）,高病毒组40例（HCV RNA≥105 IU/mL）,另外选取30名健康体检者作为对照组。检测4组样本的外周血T淋巴细胞亚群和调节性T淋巴细胞,分析各组间的差异。结果 CD4+CD25+Treg表达率在HCV RNA高病毒组、低病毒组、阴性组与健康对照组分别为（13.57±1.87）%、（9.38±1.74）%、（5.95±1.28）%和（5.89±1.15）%,差异存在统计学意义（F=35.28, P<0.01）。 CD4+CD25+Treg水平随HCV RNA的升高而升高,两者呈正相关（r=0.625, P<0.05）。 CD3+、CD4+及CD4+/CD8+在4组间的差异均有统计学意义（F=21.51、28.52和15.51,P均<0.01）,其中外周血CD4+百分率及CD4+/CD8+在高病毒组均低于其他3组,在低病毒组均低于健康对照组和阴性组（P均<0.05）。结论 CHC患者外周血CD4+CD25+Treg升高与HCV RNA含量正相关,提示它可能参与了HCV感染慢性化的进程;外周血CD4+百分率及CD4+/CD8+随着HCV RNA水平的升高而明显降低,提示病毒复制水平越高,机体免疫抑制就越明显。     

CD4+CD25+调节性T细胞治疗反复性流产的动物实验研究

目的:通过动物实验,探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞用于反复性流产免疫治疗的效果。方法:密度梯度离心法从正常昆明白新生鼠的血液和能正常生育的BALB/c雄鼠血液中分别分离单核淋巴细胞,再用免疫磁珠法筛选出CD4~+CD25~+调节性T细胞;以CBA/J雌鼠×DBA/2J雄鼠交配组合作为反复自然流产的动物模型,于孕期给予鼠尾静脉注射不同种类的淋巴细胞;采用独立样本t检验对各组得到的数据进行分析和处理。结果:注射CD4~+CD25~+T细胞组小鼠CD4~+CD25~+T细胞在CD4~+T细胞中的占比为(17.49±0.60)%,高于注射单核淋巴细胞组的(14.68±0.83)%、无菌PBS组的(9.54±0.85)%和不注射组的(9.28±0.68)%(t=4.754,P0.05;t=13.242,P0.05;t=15.621,P0.05)。CD4~+CD25~+调节T细胞中的Foxp3蛋白相对表达量(5.85±0.45)高于注射单核淋巴细胞组(2.86±0.54)、无菌PBS组(1.08±0.16)和不注射组(1.00±0.00)(t=7.276,P0.05;t=17.227,P0.05;t=18.635,P0.05)。在第4天和第8天分别注射调节T细胞得到了较好的效果,胚胎吸收率为(4.92±0.08)%,低于注射单核淋巴细胞组的(13.07±0.06)%、注射无菌PBS组的(23.11±0.12)%和不注射组的(25.47±0.11)%(t=-2.603,P0.05;t=-4.012,P0.05;t=-4.700,P0.05)。结论:给反复性流产小鼠于孕期进行多次CD4+CD25+T细胞注射,免疫治疗效果好于传统的注射单核淋巴细胞。     

肺结核合并糖尿病患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测分析

目的:检测肺结核合并糖尿病患者外周血CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞,探讨Treg细胞在疾病发生发展中的作用。方法:采用流式细胞技术多色荧光分析法,对81例肺结核合并糖尿病患者、63例肺结核患者及38例健康对照者外周血中Treg细胞测定,观察肺结核合并糖尿病患者与肺结核患者、健康对照者之间的差别。结果:肺结核合并糖尿病组与肺结核组外周血Treg细胞增多,两组间比较:t=2.24,P<0.05;肺结核合并糖尿病组与健康对照组外周血Treg细胞比较:t=3.79,P<0.01;肺结核组与健康对照组外周血Treg细胞比较:t=2.77,P<0.01。肺结核合并糖尿病初治组和复治组外周血Treg细胞比较:t=2.19,P<0.05;相关性分析显示肺结核合并糖尿病组中血糖浓度与Treg细胞数量之间呈正相关(r=0.269,P<0.01)。结论:肺结核合并糖尿病患者外周血Treg细胞数量增多,诱导免疫耐受,在疾病的发生发展中起到一定作用。     

外周血调节性CD_4~+ CD_(25)+ T细胞比例在体外受精与胚胎移植中的意义

目的:研究外周血调节性CD4+CD25+T(CD4+CD25+Tr)细胞的比例变化,探讨CD4+CD25+Tr细胞在妊娠免疫母胎耐受中的作用。方法:应用流式细胞术检测试管婴儿成功孕妇外周血中CD4+CD25+Tr细胞的比例变化。结果:试管婴儿成功孕妇外周血中CD4+CD25+Tr细胞比例较高,高于同孕期的正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD4+CD25+Tr细胞在体外受精与胚胎移植的发生发展中发挥一定作用。该研究将有助于阐明妊娠的本质,为探讨妊娠相关免疫异常疾病的发生机制及提高试管婴儿的成功率提供理论依据。     

乳腺癌患者外周血T细胞亚群与NK、NKT细胞检测的临床意义

目的:检测乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群及NK、NKT细胞表达率的变化,探讨乳腺癌患者免疫状况与肿瘤分期的关系以及免疫指标变化在治疗前后的临床价值。方法 :采用荧光标记法与多参数流式细胞仪检测40例正常女性和120例乳腺癌患者的总T淋巴细胞(CD3+)、T辅助/T诱导细胞(CD3+CD4+)、T抑制/细胞毒细胞(CD3+CD8+)、自然杀伤细胞(NK)、NK样T细胞(NKT)的表达率,并进行统计学分析。结果:无淋巴结转移组乳腺癌患者治疗前CD3+、CD3+CD4、CD3+CD8+、CD4+/CD8+与对照组比较无统计学意义,NK、NKT显著低于对照组(P<0.05)。淋巴结转移组乳腺癌患者CD3+、CD3+CD4、CD3+CD8+、NK、NKT表达率均明显低于对照组(P<0.05)。经过综合治疗后乳腺癌组各项免疫指标均恢复到正常值。结论:外周血T细胞亚群的检测对判断乳腺癌患者的病情、临床分期有一定意义;经过治疗后能够有效地改善乳腺癌患者的免疫状态。