水中大肠埃希菌f2噬菌体反冲超滤装置浓缩效果评价

水环境中存在100多种威胁人类健康的血清型病毒,因饮用水污染病毒引起传染病的暴发流行屡见不鲜[1],受到广泛关注.自然水体特别是饮用水中,病毒含量极低,病毒的浓缩成为检测水病毒的关键.大肠杆菌噬菌体f2噬菌体属无包膜单链RNA病毒,直径为22 ～ 26 nm[2],其物理、化学性质及对外界环境耐力与脊髓灰质炎病毒等相似,检测方法简便,对人不致病.已有人建议将f2噬菌体作为肠道病毒的指示物[3-4].浓缩水体病毒方法多样,其中超滤法可用于污水处理、制备纯水和实验室病毒浓缩[5],但鲜见于大体积地表水的病毒浓缩.本实验采用直径10 nm的超滤膜,建立反冲式闭路浓缩系统,进行f2噬菌体回收实验并评价浓缩效果,旨在建立一种适用于地表水、饮用水的病毒浓缩方法.     

基于阳离子膜滤芯的环境水体病毒浓缩方法效果评价

摘要:目的　本研究评价和优化基于阳离子膜滤芯的环境水体病毒浓缩方法,为监测环境水体中的病毒提供方法依据。方法　采用基于阳离子膜滤芯 NanoCeram 的膜吸附洗脱法作为初级浓缩手段,结合有机絮凝和超滤法,从大体积初始水量中浓缩目标病毒。预实验评价不同有机絮凝条件对病毒基因拷贝数回收和病毒滴度的影响。结果　随着有机絮凝牛肉浸膏洗脱液 pH 值的上升,回收病毒的基因拷贝数存在下降趋势（β＝41.59,P＜0.01）。采用2种浓缩流程回收4种水体中的目标病毒,成组 t 检验显示两者差异有统计学意义（t＝2.261,P＜0.05）。当调节有机絮凝洗脱液 pH 值为 2.0 时,水源水中脊髓灰质炎病毒的回收率最高达到7.87%。结论　本研究建立的方法可作为今后环境水体常规监测的有效手段。     

水中诺如病毒浓缩与应急检测研究

目的探索适合于基层实验室开展的水中诺如病毒浓缩与应急检测的方法,评估钙离子法对水体中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度,为水源性诺如病毒突发疫情的病原检测提供可靠的检测数据。方法将不同浓度的指示病毒(GⅡ型诺如病毒)加入到不同水样中,用钙离子法进行富集,用荧光定量PCR检测,根据富集前后的病毒浓度,评估方法的回收率;根据不同梯度的检测值,评估方法的灵敏度。同时制备不同的模拟水样进行荧光定量PCR检测。结果钙离子法的平均回收率为81.6%,检测灵敏度为模拟样本中病毒浓度为10 copy/μl。而10份不同模拟水样荧光定量PCR检测阳性9份。结论钙离子法浓缩水样中的诺如病毒,回收率与灵敏度均较高,操作简单;同时,荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏的优点,适用于基层实验室开展水体中诺如病毒的应急检测。     

水体中GⅡ型诺如病毒荧光定量RT-PCR检测

目的建立水体中诺如病毒的富集和荧光定量RT-PCR检测方法。方法梯度稀释诺如病毒阳性便样标本,模拟水体通过含有阳离子混合醋酸纤维膜的微生物抽滤系统,加入浓度20%的PEG6000,高速离心2次浓缩水体获取病毒粒子,以构建标准质粒作对照,荧光定量RT-PCR检测水体中GII型诺如病毒。结果重组质粒T-NVS定量荧光PCR扩增良好,线性相关系数98%,最低检测灵敏度为100 copies/μL;10-1~10-4倍稀释的模拟水样经富集浓缩后,病毒回收率为5.75~19.74%。结论初步建立了水体中诺如病毒的富集与检测方法。     

水中病毒浓缩方法研究进展

<正>全球范围内由病毒污染水源引起疾病暴发事件不断发生[1-2]。水环境的恶化为水体中病毒提供了良好的栖息场所,水体中致病性病毒的存在严重威胁着人体健康。由于水体中的病毒含量很少,滴度很低,一般很难直接检测到,常常需要预先富集浓缩。为了监测水中的病毒,最好的方法是简单、快速、经济,并且重复性好的方法。因此,许多技术已经被开发和优化,但仍然难以满足检测所有存在于自然界和人造设施的水中相关病毒的需要。     

水样中病毒浓缩和回收

近年来,由于水污染的加剧,病毒污染引起的水源性疾病正在增多,已经引起人民的广泛关注。即使很少量的病毒颗粒亦可致病。目前各种水样微生物学质量控制主要是通过常规监测粪大肠菌群和大肠埃希菌这样的细菌指示物来实现的,然而大多数观点表明环境水样中细菌和病毒污染水平并不相关,因而建立饮用水中病毒学监测指标十分必要。由于水样中只有少量病毒颗粒存在,进行水样检测前必须浓缩水样中的病毒。水中病毒的检测除了要有准确、灵敏的检测方法外,水中病毒的浓缩与回收的效率亦是决定病毒检测成败的关键。目前水样中病毒浓缩的方法很多,本文对常用的浓缩回收方法作一综述,并对各个浓缩回收方法的优缺点作一评价。     

水环境中病毒检测方法的研究进展

水环境中存在130多种威胁人类健康的血清型病毒。水体中病毒浓度低,检测方法繁杂,更增加了水环境中病毒检测的难度。发展和提高水环境中病毒检测技术刻不容缓。水环境中病毒的检测可通过两个途径,一是直接检测水环境中的病毒,二是寻找水环境中病毒的指示物反映病毒的污染情况。对某种病毒的检测不能代表水环境中所有的病毒,选用病毒指示物是一个比较好的方向。但是由于对病毒指示物,尤其是噬菌体,目前的研究还不能肯定其作为病毒指示物的效果,因此还有待更进一步的研究。     

三氯化铝-氯化钠絮凝法浓缩水中肠道病毒

三氯化铝－氯化钠絮凝法浓缩水中肠道病毒郭润霞黄海云冀玲常平吴联熙水体中肠道病毒必须通过有效的浓缩才能提高检出率。本法依据絮凝原理，采用三氯化铝和氯化钠联合絮凝，有利于水中肠道病毒的浓缩，方法操作简便，结果满意。１材料与方法１．１絮凝与浓缩取含Ｐｏｌｉ...     

两种方法浓缩污水水样及HBV-DNA基因探针检测

采用滑石粉-硅藻土浓缩法和Al_2(SO_4)_3·18H_2O浓缩法,浓缩某医院经处理的污水水样,并用基因探针检测该污水水样中的乙型肝炎病毒。将污水水样浓缩液点在硝酸纤维素膜上,再用HBV-DNA基因探针进行杂交。经放射自显影,结果表明,用Al_2(S0_4)_3·18H_2O浓缩法浓缩的经处理污水水样中发现有乙型肝炎病毒存在,其阳性率为50％;而用滑石粉-硅藻土浓缩法浓缩的经处理污水水样中未发现有乙型肝炎病毒。     

提高乙型肝炎表面抗原栓出耿敏度的方法探讨

目的提高医院感染监测中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检出灵敏度。方法采用离心沉淀法、中和剂浓缩法和聚丙烯酰胺凝胶粒法对监测标本如使用中消毒液内的HBsAg进行提纯浓缩。结果通过864份标本的检测,与常规法相比上述3种方法均能不同程度地浓缩标本,使通过ELISA法检测HBsAg就能得到SPRIA法的效果,达到国家要求的灵敏度≤1ng／ml的标准。结果3种方法均方便快捷是确实可行的,同时也为其他病毒的监测提供了借鉴。