哮喘豚鼠嗜酸细胞Bcl-2和Bax mRNA表达及意义

目的:观察Bcl-2及Bax mRNA表达与嗜酸粒细胞（Eos）凋亡的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法:健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组,卵蛋白致敏激发制作哮喘模型,检测支气管灌洗液（BALF）中低密度EoS（HEos）及正常密度Eos（NEos）细胞凋亡,原位杂交及RT-PCR法检测Bcl-2及Bax mRNA表达。结果:哮喘组EoS显著高于正常组,以HEos为著（P<0.01）;Eos凋亡率明显低于正常组（P<0.01）。哮喘组不同密度Eos表达Bcl-2 mRNA明显增加,而Eos表达Bax mRNA明显减少。结论:哮喘时Eos存在凋亡抑制,这是哮喘时Eos增多的原因之一,哮喘豚鼠BALF Eos表达Bcl-2增加,表达Bax减少,表明Bcl-2及Bax可通过调节Eos凋亡参与哮喘发病。     

温阳益气平喘方对支气管哮喘大鼠嗜酸粒细胞凋亡和相关基因蛋白Bcl-2和Bax表达的影响

目的:研究温阳益气平喘方对支气管哮喘大鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及相关基因蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法:60只SD大鼠随机分为6组,即正常组、模型组、温阳益气平喘高剂量组、温阳益气平喘低剂量组、桂龙咳喘宁组,氨茶碱组,每组10只.除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠支气管哮喘模型,各治疗组均从第1次哮喘激发开始(造模第3周)至处死前每天灌胃给药,激发并给药4周后处死大鼠.应用TUNEL法检测肺组织嗜酸粒细胞凋亡,免疫组织化学检测肺组织Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:温阳益气平喘方高低剂量组大鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡指数显著高于哮喘模型组(P＜0.01和P＜0.05),高低剂量组优于桂龙咳喘宁组(P＜0.01),高剂昔组优于氨茶碱组(P＜0.01);肺组织及气道壁中Bcl-2蛋白阳性细胞的比例显著低于哮喘模型组(P＜0.01和P＜0.05),高剂量组优于桂龙咳喘宁和氨茶碱组(P＜0.01);Bax蛋白阳性细胞的比例显著高于哮喘模型组(P＜0.01),高低剂量组优于桂龙咳喘宁组(P＜0.01),高低剂量组优于氨茶碱组(P＜0.01和P＜0.05).结论:温阳益气平喘方可通过调节抑制凋亡基因bcl-2和促进凋亡基因bax蛋白的表达,促进肺内EOS凋亡,减少炎细胞浸润,减轻哮喘气道炎症.     

地塞米松对哮喘大鼠嗜酸性粒细胞中p53表达的影响

目的： 研究支气管哮喘支气管肺泡灌洗液（BALF）嗜酸性粒细胞中凋亡相关基因p53的表达以及地塞米松对其的作用及其机制。方法： 将36只大鼠随机分为对照组、哮喘组和激素组，并对其BALF的嗜酸性粒细胞进行计数，以免疫印迹法(Western blotting)检测嗜酸性粒细胞中p53的表达。结果： 哮喘组BALF的 总细胞数及嗜酸性粒细胞均高于激素组及对照组（P<0.01）。哮喘组BALF的嗜酸性粒细胞中p53表达弱于激素组和对照组（P<0.01）。结论： 哮喘气道炎症与嗜酸性粒细胞生存增加亦即嗜酸细胞凋亡减少密切相关。糖皮质激素可诱导嗜酸性粒细胞凋亡，其机制可能与促嗜酸性粒细胞凋亡的p53表达有关。     

PPD对豚鼠实验性哮喘气道炎症的作用

目的：探索结核菌素纯蛋白衍生物（purified protein derivative,PPD）对豚鼠实验性哮喘气道炎症的作用。方法：实验采用31只豚鼠，体质量250g左右，分为对照组、卵蛋白（ovalbumin,OVA)致敏组和PPD治疗组。用OVA（Ⅲ级）致敏豚鼠复制豚鼠哮喘模型。结果：经过OVA致敏的动物气道支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织中嗜酸粒细胞以及BALF中白细胞总计数有明显增加，PPD可不同程度地降低肺组织嗜酸粒细胞的气道浸润，并使BALF中炎性细胞总数降低。结论：使用本实验体系PPD可以减轻实验性哮喘的气道炎症反应。     

IL-13对小鼠哮喘模型气道黏蛋白基因Muc5ac及Bcl-2、Bax表达的作用

目的研究白细胞介素-13(IL-13)处理小鼠支气管哮喘(哮喘)模型前后肺组织黏蛋白基因Muc5ac、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的作用,探讨气道黏液过度分泌的机制.方法45只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和IL-13组,每组15只.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫组化法分别检测Muc5acmRNA、Muc5ac蛋白、Bcl-2蛋白以及Bax蛋白在肺组织的表达.结果哮喘组和对照组肺组织Muc5acmRNA分别为(0.1552±0.0057)和(0.0633±0.0013),Muc5ac蛋白分别为(0.8849±0.0257)和(0.1166±0.0064),两组比较差异均有统计学意义(P<0.01);IL-13组肺组织Muc5acmRNA和蛋白分别为(0.2807±0.0027)和(1.6138±0.0483),与哮喘组、对照组比较差异也均有统计学意义(P均<0.01).与对照组Bcl-2蛋白(0.3279±0.0136)、Bax蛋白(1.7284±0.0263)相比,哮喘组分别增加和降低(分别为0.8383±0.0310和0.8987±0.0106),两组差异均有统计学意义(P均<0.01);IL-13处理后可分别促进Bcl-2和Bax蛋白增加和降低(分别为1.6934±0.0229和0.3522±0.0152),其和哮喘组的差异均有统计学意义(P均<0.01);哮喘组和IL-13组小鼠肺组织Muc5acmRNA、蛋白表达与Bcl-2蛋白表达均呈直线正相关(P均<0.05),而与Bax蛋白表达则均呈直线负相关(P均<0.05).结论IL-13是引起哮喘气道黏液过度分泌的重要细胞因子,它可能通过改变Bcl-2和Bax的表达导致了上述病变.     

地塞米松对哮喘豚鼠肺组织嗜酸细胞bcl-2表达的影响及意义

目的 研究哮喘豚鼠肺内不同密度嗜酸细胞（Eos）凋亡与bcl-2 mRNA表达的关系及地塞米松（DM）对它们的影响。方法 应用DM干预哮喘豚鼠，分离哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中不同密度Eos，以TUNEL法检测细胞凋亡，以原位杂交检测bcl-2 mRNA表达。结果 哮喘组Eos凋亡率较正常组明显降低（P〈0．01），应用DM后均显著增加（P〈0．01）。正常豚鼠Eos可检测到bcl-2 mRNA表达，不同密度Eos表达无显著差异（P〉0．05）。哮喘组bcl-2mRNA明显增加，应用DM后其表达明显减少。结论凋亡调节的缺失是导致组织及血中Eos增多的重要原因，bcl-2参预了哮喘Eos凋亡的调节。DM可促进哮喘肺组织中的Eos细胞凋亡，bcl-2可能是DM调节Eos细胞凋亡的重要途径之一。     

西酞普兰对慢性应激大鼠额叶皮质神经细胞Bcl-2、Bax表达及凋亡的影响

目的： 探讨西酞普兰对慢性应激大鼠额叶皮质神经细胞Bcl-2、Bax表达及凋亡的影响。方法: 将24只雄性SD大鼠随机分为对照组、慢性应激组、西酞普兰+慢性应激组，每组8只，采用免疫组化检测Bcl-2、Bax表达水平，TUNEL法检测细胞凋亡,尼康图像分析（NIS DR）软件测量分析Bcl-2、Bax、TUNEL阳性细胞数量及灰度值(gray value)。结果: 各组大鼠每周体重基本呈自然增长趋势，差异无统计学意义（P>0.05）。组内额叶皮质的阳性细胞数和灰度值比较（除Bcl-2灰度值外），差异均显著（P<0.05）。慢性应激组与对照组比较：额叶皮质神经细胞Bcl-2阳性细胞数量减少（30.63±10.75 vs 11.50±4.24），Bax阳性细胞数量增多（48.88±6.55 vs 65.13±15.05）、表达增强（155.21±8.55 vs 148.91±4.47），TUNEL检测阳性细胞增多（16.94±6.46 vs 31.69±19.89）、表达增强（152.56±5.28 vs 141.91±10.38），差异显著（P<0.05）；西酞普兰+慢性应激组与应激组比较：Bcl-2阳性细胞数量增多（27.00±9.89 vs 11.50±4.24），Bax阳性细胞数量减少（50.56±12.70 vs 65.13±15.05），TUNEL检测阳性细胞减少（17.31±5.41 vs 31.69±19.89），差异有统计学意义（P<0.05）。结论: 慢性应激影响大鼠额叶皮质神经细胞Bcl-2、Bax表达水平，促进细胞凋亡；西酞普兰可调节慢性应激大鼠额叶皮质神经细胞Bcl-2、Bax表达水平，拮抗细胞凋亡。     

肠淋巴途径在二次打击大鼠肺组织细胞凋亡中的作用

目的： 观察结扎肠系膜淋巴管对二次打击大鼠肺组织细胞凋亡、凋亡相关基因以及TNF-α、IL-6水平的影响。方法： 雄性Wistar大鼠45只，均分为结扎组、未结扎组、假手术组，以失血、LPS复制二次打击模型，结扎组行肠系膜淋巴管结扎术。在手术创伤后24 h，选择肺固定位置制作切片，TUNEL法检测细胞凋亡率，免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白表达；并制备肺组织匀浆，ELISA法检测血清、肺匀浆TNF-α、IL-6。结果： 二次打击后，未结扎组肺组织细胞凋亡率、Bax表达、血清及肺匀浆TNF-α、IL-6明显高于假手术组及结扎组，Bcl-2表达显著低于假手术组及结扎组（P<0.01，P<0.05），细胞凋亡以上皮细胞为主；结扎组肺组织细胞凋亡率与假手术组比较无显著差异（P>0.05），肺组织Bcl-2表达显著增高，Bax表达显著低于假手术组（P<0.01，P<0.05）。结论： 阻断肠淋巴途径可减轻失血-LPS致大鼠肺组织细胞凋亡，其机制可能与肠系膜淋巴管结扎降低促细胞凋亡介质TNF-α、IL-6水平、提高Bcl-2表达有关。提示二次打击的肠源性淋巴液在大鼠急性肺损伤的发病过程中发挥着重要作用。     

抗TNF-α和IL-1βIgY抗体治疗豚鼠过敏性鼻炎机理研究

目的：探讨抗TNF-α和IL-1βIgY治疗豚鼠过敏性鼻炎的作用及机制。方法：随机分正常对照组（ C组,17只）、模型组（ M组,27只）、0.1％抗TNF-α和IL-1βIgY治疗组（ Z1组,21只）、丙酸氟替卡松治疗组（ Z2组,21只）;应用卵清白蛋白建立豚鼠过敏性鼻炎模型;分别在治疗后2、4、8 h进行鼻灌洗和支气管肺灌洗,收集鼻灌洗液（ NLF）和支气管肺泡灌洗液（BALF）,观察炎症细胞;HE染色观察鼻黏膜和肺组织病理改变;免疫组化分析其炎症因子原位表达情况。结果：M组鼻黏膜可见大量嗜酸性粒细胞浸润和炎症改变,肺间质水肿、肺间隔和支气管平滑肌增厚,嗜酸性粒细胞浸润, Z1组和Z2组炎症病理改变明显减轻。 NLF和BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞在Z1和Z2组显著少于M组（ P＜0.05）。 Z1组鼻黏膜IL-1β和肺组织IL-1β和TNF-α从2 h开始,而IL-5和IL-33从4 h开始表达显著低于M组（ P＜0.05）。结论：抗TNF-α和IL-1βIgY滴鼻治疗显著减轻了豚鼠过敏性鼻炎伴过敏性支气管哮喘的炎症病理反应,抑制了嗜酸性粒细胞浸润及炎症细胞因子表达。     

钙激活的氯通道gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达

目的：研究“钙激活的氯通道”成员之一gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达。 方法： 22只清洁级BALB/c小鼠随机分成哮喘组和对照组，用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）和免疫组化法分别测定肺组织gob-5 mRNA和粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达。 结果： 小鼠哮喘组肺组织gob-5 mRNA表达阳性（0.2297±0.0186，A），而对照组未出现gob-5 mRNA的表达(P<0.01)；哮喘组Muc5ac蛋白表达（0.6637±0.0127，A）明显高于对照组（0.2060±0.0179，A）（P<0.01）；哮喘组肺组织gob-5 mRNA表达与Muc5ac蛋白表达呈直线正相关（r=0.864, P<0.05）。 结论： Gob-5 mRNA表达的上调可能在哮喘小鼠气道粘液过度分泌中起着关键作用；抑制gob-5的表达将为哮喘的治疗提供新的策略。     

磷脂酰肌醇3激酶在支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞中的表达

 目的： 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的表达。方法: 根据随机化分配原则将16只Wistar大鼠随机均分成2组，即哮喘组和正常对照组；模型建立后分别从每只大鼠分离培养ASMC，流式细胞检测方法检测ASMC的生长分数，用免疫细胞化学荧光染色及Western blotting方法进行PI3K表达的检测，并利用图像分析系统进行半定量对比分析。结果: 流式细胞仪检测发现哮喘组ASMC的S+G2/M期细胞所占细胞总数的百分比 (27.90±3.44) %显著高于正常对照组(13.00±1.56)%,P<0.05；免疫细胞化学荧光染色及Western blotting方法检测发现哮喘组和正常对照组ASMC胞浆内均有PI3Kp85阳性表达，且哮喘组的表达明显高于正常对照组；大鼠ASMC中PI3K的表达与大鼠ASMC的生长分数呈显著正相关。 结论: PI3K表达的增加可能在哮喘ASMC增殖中起重要作用。     

支气管哮喘豚鼠肺组织中丝裂原活化蛋白激酶对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶的作用

目的： 研究在支气管哮喘豚鼠肺组织中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）的影响。方法: 成年雄性豚鼠20只随机分成哮喘组和对照组，每组10只，以腹腔内注射联合雾化吸入卵蛋白复制哮喘模型。测支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数并进行分类计数；原位杂交和RT-PCR测肺组织中γ-GCS-h mRNA表达；免疫组化测γ-GCS、磷酸化细胞外激活蛋白激酶（p-ERK）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和磷酸化 p38（p-p38）在肺组织中的表达;Western blotting 测 p-ERK、p-JNK和p-p38在肺组织中的表达；双酶法测γ-GCS的活性。结果: （1）哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞明显多于对照组 (P<0.01)。（2）免疫组化显示肺组织中p-ERK、p-p38、p-JNK和γ-GCS 蛋白质表达哮喘组明显高于对照组（P<0.01）；Western blotting 亦显示肺组织中p -ERK、p-JNK和p-p38 蛋白质表达哮喘组均明显高于对照组。（3)原位杂交和RT-PCR显示在肺组织中γ-GCS-h mRNA 表达哮喘组明显高于对照组(P<0.01)。（4) γ-GCS活性哮喘组明显高于对照组（P<0.01）。（5）直线相关性分析显示：在肺组织中p-ERK、p-p38与γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白质呈显著正相关，p-JNK与γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白质无明显相关性。结论: 支气管哮喘豚鼠肺中 p-ERK、p-p38、p-JNK和γ-GCS表达均增加；p-ERK和p-p38可能上调γ-GCS表达。     

哮喘豚鼠下呼吸道MMP-2的表达及NGF的调节作用

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在哮喘豚鼠下呼吸道的表达及神经生长因子(NGF)对MMP-2的调节作用。方法应用免疫组织化学方法检测各组豚鼠下呼吸道MMP-2免疫反应的变化。用W estern b lot蛋白印迹方法检测各组豚鼠肺组织NGF和MMP-2的表达。用Luzex-F实时图像分析系统和凝胶成像分析系统分别对结果进行图像分析。结果①免疫组织化学结果显示:豚鼠气道上皮和肺内炎性细胞的MMP-2阳性免疫反应产物的平均灰度值(0-深色,255-浅色),生理盐水组(185.60±4.81、161.47±5.71)与单纯致敏组(184.80±9.64、160.33±4.03)比较没有显著差异(P>0.05);哮喘组(141.93±4.66、129.77±4.07)明显低于生理盐水组和单纯致敏组(P<0.01);哮喘+NGF抗体组(鼻腔吸入NGF抗体,179.73±6.11、150.23±8.13)则明显高于哮喘组(P<0.01)。②W estern b lot结果显示:与生理盐水组和单纯致敏组比较,哮喘组豚鼠肺组织MMP-2和NGF阳性产物的IDV(Integrated Density Value)与β-actin IDV的比值均明显升高(P<0.01),而哮喘+NGF抗体组则明显低于哮喘组(P<0.01),表明NGF可上调MMP-2的表达。结论MMP-2可能是哮喘气道重塑的一种调控因素,NGF诱发MMP-2的表达可能是NGF参与哮喘发病的机制之一,NGF抗体抑制哮喘时下呼吸道MMP-2的表达有可能延缓气道重塑的发生,可能是治疗哮喘的新途径。     

慢性吸烟对哮喘豚鼠肺内神经激肽A含量及基因表达的影响研究

目的：研究慢性吸烟对哮喘豚鼠肺组织中神经激肽A（NKA）含量及NKA mRNA表达的影响，探讨慢性吸烟对哮喘肺组织中NKA含量影响的机制。方法： 用卵蛋白超声雾化法复制豚鼠哮喘模型；随机分成：①诱喘前吸烟2周组，②诱喘后吸烟2周组，③诱喘后2周对照组（非吸烟），④常规诱喘组（非吸烟），⑤正常对照组。用酶联免疫法检测各组肺组织中NKA含量；用RT-PCR方法检测各组肺组织中NKA mRNA的相对含量。结果： ①哮喘豚鼠肺组织中NKA含量及NKA mRNA表达均明显高于正常豚鼠（均P<0.01）；②诱喘前吸烟2周豚鼠，诱喘后其肺组织中NKA含量及NKA mRNA表达均明显高于非吸烟诱喘豚鼠（均P<0.01）；③诱喘后吸烟2周豚鼠，其肺组织中NKA含量及NKA mRNA表达均显著高于诱喘后2周对照豚鼠（均P<0.01）。结论： 结果提示：①NKA可能参与了卵蛋白诱发的豚鼠哮喘发病机制；②慢性吸烟刺激可能增加哮喘豚鼠肺组织中NKA含量； ③慢性吸烟刺激可能具有在转录水平上调NKA mRNA表达的作用而导致肺内NKA蛋白含量增多。     

内源性一氧化氮对哮喘大鼠支气管平滑肌细胞钾通道的影响

目的：观察体内应用一氧化氮（NO）前体左旋精氨酸（L-Arg）对哮喘大鼠支气管平滑肌细胞（BSMC）钾通道电生理特性的影响，为哮喘治疗提供理论基础。 方法： 雄性SD大鼠，随机分为对照组、哮喘组和哮喘L-Arg(300 mg/kg)治疗组（L-Arg组）。急性酶消化法分离获得大鼠单个BSMC。用常规全细胞膜片钳技术记录3组BSMC的静息膜电位（Em）、钙激活钾通道(BKCa)电流和电压依赖性钾通道（Kv）电流的差异。 结果： （1）哮喘组的静息膜电位为(-29.4±5.6) mV，显著低于对照组(-34.8±6.2)mV, (P<0.05)；L-Arg治疗组的静息膜电位为(-36.1±6.8) mV, 与哮喘组差异显著(P<0.05)。（2）钙激活钾通道电流：+50 mV电压刺激时，方波刺激模式下哮喘组大鼠BSMC的BKCa峰值电流密度［(43.8±16.5) pA/pF, n=8］低于对照组［(72.5±19.9)pA/pF, n=8］,(P<0.01)；L-Arg组的BKCa电流密度［(58.7±12.4) pA/pF, n=8］则高于哮喘组(P<0.05)。（3）电压依赖性钾通道电流：+50 mV电压刺激时，方波刺激模式下哮喘组大鼠BSMC的Kv峰值电流密度为［(32.4±8.7)pA/pF, n=8］，显著低于对照组［(57.7±9.8)pA/pF, n=8］ (P<0.01)；L-Arg组的Kv峰值电流密度［(43.6±7.9)pA/pF, n=8］，显著高于哮喘组［(32.4±8.7)pA/pF, n=8］ (P<0.05)。结论： 体内应用L-Arg可增加钙激活钾通道和电压依赖性钾通道电流，明显改善哮喘大鼠BSMC的静息膜电位，从而降低气道平滑肌细胞的兴奋性，可能具有抑制气道高反应性的作用。     

激素预处理树突状细胞对哮喘Th2型反应的影响

目的： 研究激素预处理的树突状细胞（DCs）对哮喘DCs与T细胞共培养上清液中T辅助细胞1(Th1)和Th2型细胞因子的影响及其机制。方法: 采集哮喘组和健康组外周血,分别常规培养和加入地塞米松培养至成熟DCs。将2组常规培养和地塞米松预处理的DC-T细胞共培养72 h。流式细胞仪测定2组常规培养或地塞米松培养成熟DCs的表型。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测DC-T细胞共培养上清液中白细胞介素-5(IL-5)和干扰素-γ（IFN-γ）的含量。结果: 哮喘组常规培养的DC-T细胞共培养上清液中IL-5水平高于健康组（P<0.01）,其IFN-γ含量较健康组有减少的趋势,但无显著差异（P>0.05）;地塞米松预处理的DC-T细胞上清液中IL-5水平低于常规培养组（P<0.01）。无论哮喘组或健康组,地塞米松预处理的DC-T细胞共培养上清液中IFN-γ水平均低于未用地塞米松预处理的DC-T细胞共培养上清液（P<0.01）。2组地塞米松预处理的DCs均部分抑制了肿瘤坏死因子-α(TNF-α)所诱导的DCs表型CD83上调（P<0.01）,而上调了CD14的表达（P<0.01）。结论: 哮喘患者常规培养的DCs与同种自体T细胞共培养后呈Th2型反应,地塞米松预处理的DCs可使Th2型反应减弱,其机制可能与地塞米松影响DCs的分化、成熟有关。     

Endogenous nitric oxide downregulates the Bcl-2 expression of eosinophils through mitogen-activated protein kinase in bronchial asthma

BACKGROUND: Eosinophil apoptosis might play a crucial role in the maintenance of persistent airway inflammation in asthma. Nitric oxide (NO) synthase activity is upregulated in eosinophils of asthmatic patients. Mitogen-activated protein kinase (MAPK) is implicated in regulating eosinophil apoptosis by modulating Bcl-2 expression. NO-induced cell apoptosis is associated with an inhibition of Bcl-2 expression. OBJECTIVE: We sought to study whether NO might induce eosinophil apoptosis through extracellular signal-regulated protein kinase (ERK) or p38 MAPK pathways and Bcl-2 expression. METHODS: Eosinophils were freshly isolated from peripheral blood of 16 asthmatic patients and 12 healthy subjects and then cultured with or without the NO synthase inhibitor N-nitro-l-arginine methyl ester (L-NAME) at 1 and 10 mmol/L for 16 hours. The expression of Bcl-2 and induced NO synthase on eosinophils was analyzed by means of flow cytometry. Apoptosis was assessed by means of propidium iodide and DNA ladder. The activity of ERK and p38 MAPK was determined by means of Western blotting. RESULTS: The induced NO synthase immunoreactivities and the spontaneous release of nitrite from the eosinophils of asthmatic patients were higher compared with those of healthy subjects. Eosinophils of asthmatic patients were found to express more highly constitutive Bcl-2 than those of healthy subjects. After incubation for 16 hours, the expression of Bcl-2 on eosinophils from patients with asthma was significantly enhanced by L-NAME. The percentage of apoptosis was decreased by the addition of 1 mmol/L L-NAME in patients with asthma. The activity of p38 MAPK and ERK in eosinophils from patients with asthma was enhanced in the presence of L-NAME. An inhibition of MAPK reduced the Bcl-2 expression and increased eosinophil apoptosis in patients with asthma. CONCLUSION: We concluded that inhibition of endogenous NO might increase the expression of Bcl-2 in eosinophils from patients with asthma through the signaling pathway of ERK or p38 MAPK, which in turn decrease the apoptosis.     

N-乙酰半胱氨酸对慢性间歇缺氧大鼠海马神经元凋亡及氧化应激的影响

目的：探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对慢性间歇缺氧(CIH)模型大鼠海马组织氧化应激及海马神经元凋亡的影响。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为慢性缺氧组、NAC治疗组及正常对照组3组，每组10只。采用化学比色法测定海马组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平，同时应用免疫组化方法检测海马CA1 区磷酸化JNK(p-JNK)表达水平，应用TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡率。结果:NAC治疗组 MDA水平低于CIH组（1.71±0.43 vs 1.37±0.26，P＜0.05）、SOD活性高于CIH组（44.94±14.01 vs 57.66±14.07，P＜0.05），p-JNK表达水平低于CIH组 （0.53±0.10 vs 0.39±0.16，P＜0.05），海马神经元凋亡率显著低于CIH组（0.32±0.18 vs 0.20±0.11，P＜0.05）。结论:NAC能抑制慢性间歇缺氧导致的氧化应激，从而影响JNK信号转导通路，减少海马神经元凋亡。