乙肝患者淋巴细胞内腺苷脱氨酶活性变化与T—淋巴细胞亚群？…

腺苷脱氨酶(adenosine deaminase, ADA)是一种与机体细胞免疫系统有重要关系的核酸代谢酶.近年的研究证实:ADA测定对肝胆疾病的诊断和鉴别诊断具有一定的临床价值[1,2],但尚未见有乙肝患者淋巴细胞内ADA活性变化与T-淋巴细胞亚群关系的报道,为此,我们进行了探讨,现将结果报道如下:     

尿毒症患者淋巴细胞内腺苷脱氨酶活性变化及其与淋巴细胞亚群的关系

采用分光光度法对３２例尿毒症患者和３０例正常人外周血淋巴细胞内ＡＤＡ活性进行了测定，并采用单克隆抗体技术测定了Ｔ细胞亚群，同时对淋巴细胞内ＡＤＡ活性与Ｔ细胞亚群做了相关性分析。结果显示：尿毒症患者淋巴细胞内ＡＤＡ活性明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），尿毒症患者的外周血淋巴细胞ＣＤ＿３、ＣＤ＿４、ＣＤ＿８及ＣＤ＿４／ＣＤ＿８明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。淋巴细胞内ＡＤＡ活性与ＣＤ＿３、ＣＤ＿４、ＣＤ＿４／ＣＤ＿８呈明显正相关（Ｐ＜０．０１）。提示尿毒症患者淋巴细胞内ＡＤＡ活性与Ｔ细胞亚群的比例失调有密切关系。     

鼠小肠上皮内淋巴细胞与脾脏T淋巴细胞的差异比较和功能初探

目的：比较小鼠小肠上皮内淋巴细胞（intestine intraepithelial lymphocytes,iIEL)与脾脏T淋巴细胞的差异并寻找刺激iEL活化的特异性抗原。方法：分别提取新鲜分离的iEL和脾脏T细胞的细胞膜蛋白，通过SDS－PAGE和银染法比较二者的区别；用蛋白定量和磷定量方法，比较两种细胞的膜蛋白与膜磷脂比。提取Daudi细胞和小鼠小肠上皮细胞的细胞膜脂，将其制成脂质体，采用H^3-TdR掺入法检测其刺激iEL和脾脏T细胞增殖的能力。结果：两种细胞的膜蛋白存在着质和量的差异，iEL膜蛋白与膜磷脂之比高于脾脏T细胞，脾脏T细胞对Daudi细胞膜脂和小肠上皮细胞膜的刺激无反应，甚至有负反应，而iEL对小肠上皮细胞膜刺激的增殖反应强于对Daudi细胞膜脂的。结论：iEL与脾脏T淋巴细胞在形态、表型、起源、发育以及功能上的差异存在相应的分子基础，小肠上皮细胞膜脂可能作为一种特异性抗原参与iEL的活化。     

SEB诱导的正常人外周血T淋巴细胞的增殖

葡萄球菌肠毒素Ｂ (ＳＥＢ )是一种新型的蛋白质抗原分子 ,具有多种免疫学活性 ,是超抗原 (ｓｕｐｅｒａｎｔｉｇｅｎ ,ＳＡｇ )中的一种。本研究以正常人外周血Ｔ淋巴细胞为材料 ,用ＳＥＢ刺激后 ,检查Ｔ淋巴细胞的增殖与活化 ,报道如下 :1　材料和方法1 1　材料　ＳＥＢ购于军科院五所 ;ＭＴＴ (Ｓｉｇｍａ ) ;ＣＤ4、ＣＤ8单抗 (Ｓｉｇｍａ) ;ＲＰＭＩ 1640 (ＧＩＢＣＯ ) ;二甲基亚砜 (ＤＭ ＳＯ ,北京化工厂 ) ;ＩＬ 2、ＩＬ 4、ＴＮＦ α、ＩＦＮ γ试剂盒均购自北京邦定泰克生物技术有限公司 ,均为美国进口分装酶联免疫试剂盒 ,操作…     

儿童T淋巴细胞不同剂量辐射后DNA合成的增殖反应的应答

观察儿童T淋巴细胞低剂量辐射后DNA合成的刺激效应和对大剂量辐射的适应性反应。 8例儿童外周血T淋巴细胞培养后 ,予以不同的低剂量辐射 ,用14 C TdR (14 C 胸腺嘧啶核苷 )或3 H TdR (3 H 胸腺嘧啶核苷 )掺入法观察T淋巴细胞DNA合成 ,用掺入百分率和辐射损伤减轻百分数 (DRP )分别表达刺激效应和适应性反应。T淋巴细胞经 2、 5、 10cGy照射后14 C TdR掺入与 0cGy比较分别是 10 7 7%、 12 5 5 %、 133 8% ,明显增加了DNA合成。分别予以 0 5、 1 0、 1 5、 2 0、 3 0、 4 0cGy不同剂量辐射后 ,DRP分别是 2 0 8%、 33 2 %、 5 3 4 %、 4 9 0 %、 2 8 9%。 1 5cGy辐射后 6、 2 4、 4 8、 72h ,DRP分别是2 2 2 %、 5 3 4 %、 36 6 %、 11 1%。 1 5cGy辐射后 2 4h再予以 1、 3、 5、 7Gy不同大剂量辐射 ,DRP分别是 30 7%、 4 5 1%、2 6 4 %、 11 9%。儿童T淋巴细胞经适宜的低剂量辐射后可以明显增加DNA合成 ,1 5cGy辐射后 2 4h对 3Gy大剂量辐射适应性反应表达最为充分     

青霉素类过敏病人外周血T淋巴细胞对不同抗原的增殖反应

目的 :探讨青霉素过敏病人外周血T淋巴细胞识别抗原的特异性。方法 :分离出 1 6例青霉素类过敏病人 ,1 0例健康对照者外周血单个核细胞 (PBMCs) ,分别用青霉素G(PG)钠盐及其侧链苯乙酸 (PHA)、青霉素V(PV)钾及其侧链苯氧乙酸 (PHOA)、氨苄西林(AMP)及其侧链α 氨基苯乙酸 (NPG)、阿莫西林(AX)及其侧链对羟基 α 氨基苯乙酸 (PHPG)和青霉素类抗生素母核 6 氨基青霉烷酸 (6 APA)对PBMCs进行刺激 ,用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色分析法测定T淋巴细胞的增殖情况。结果 :过敏病人组外周血T淋巴细胞受到上述 9种抗原刺激后增殖阳性…     

红霉素衍生物抑制体外培养的人T淋巴细胞株增殖

目的：观察红霉素（EM）及其衍生物对人T淋巴细胞增殖及细胞凋亡的影响，探讨红霉素衍生物抗炎作用的部分机制。方法：用MTT法检测4种无抗菌活性的红霉素衍生物对人T淋巴细胞增殖的作用，从中选出活性突出的化合物，利用流式细胞仪和TUNEL方法观察其对细胞凋亡的影响。结果：红霉素衍生物-Ⅰ抑制T淋巴细胞增殖活性优于红霉素，其IC50值分别为（425.6±32.1）μmol/L和（606.3±35.4）μmol/L（P<0.01）；红霉素衍生物-Ⅰ（3-30 mg/L）和红霉素 （30-100 mg/L）可诱导T淋巴细胞凋亡，与剂量呈正相关。红霉素衍生物-Ⅰ在100 mg/L时引起细胞死亡。结论：无抗菌活性的红霉素衍生物的抗炎活性与其抑制T淋巴细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用可能有一定关联。     

黄连素对T淋巴细胞活化和增殖的抑制作用

目的:研究黄连素(Ber)对T细胞体外活化和增殖的影响及作用机制。方法:正常人外周血全血培养,以植物血凝素(PHA)或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激活化淋巴细胞,双荧光染色及溶血获取有核细胞后,以流式细胞仪分析T细胞表达活化抗原CD69和CD25的水平,并以碘化丙锭染色分析细胞周期分布,7-AAD活染分析细胞死亡率。结果:浓度为100μmol/L和50μmol/L的Ber对PDB+Ion或PHA激活T细胞表达CD69有明显抑制,而25μmol/L的Ber抑制效应无显著性;随时间延长,对CD69表达的抑制程度下降;对于CD25表达,上述3个浓度的Ber抑制作用均有显著性,且呈剂量依赖性。同时,这3个浓度的Ber均能明显阻止淋巴细胞进入S期和G₂/M,对细胞周期的抑制作用没有时相特异性。活染分析显示Ber对淋巴细胞无明显细胞毒性。结论:Ber通过干扰早期活化信号转导通路而抑制T细胞活化和增殖,发挥其免疫抑制作用。     

ADA活性紫外吸收测定法的改良及复感儿淋巴细胞该酶活性的…

检测了４２例健康儿童和１７例反复上呼吸道感染患儿（复感儿）的血淋巴细胞腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）活性，结果表明，复感儿的血淋巴细胞中ＡＤＡ活性较健康儿童低下，且大多同样伴有不同程度的免疫功能低下，从复感儿组中筛选了两例ＡＤＡ活性和免疫功能量显低下的患儿，拟采用这两例患儿的血淋巴细胞进行ＡＤＡ－ＳＣＩＤ基因治疗的实验研究。     

T淋巴细胞免疫功能的研究进展

经典免疫细胞中T淋巴细胞是参与机体细胞免疫反应,并在免疫应答中起重要调节作用的免疫细胞。正常情况下T细胞及其亚群的数目在周围组织中相对稳定,机体正常免疫应答过程依赖于各种免疫细胞之间的恒定,从而形成适度的免疫应答,使之既能清除抗原性异物,又不损伤机体自身组织。近年来,随着对机体免疫功能研究的不断深入,对T细胞的研究越来越全面。本文从T淋巴细胞的发育、抗原识别、T淋巴细胞亚群进行综述。     

低氧对胎鼠中脑NSCs的促体外增殖作用

目的观察低氧对大鼠中脑神经干细胞体外增殖的影响,并探讨其增殖的可能机制。方法取孕13.5 d的W istar大鼠,麻醉后取胚胎,分离中脑神经干细胞(NSC),常规培养鉴定后分3组:对照组;10%O2组;3%O2组。采用4孔板培养3~4 d后进行神经球记数,用流式细胞仪测定其增殖指数,最后用RT-PCR方法测定低氧(10%O2)不同时间点(1、3、6、12、24、48和72 h)低氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的表达水平。结果低氧组神经球记数和增殖指数明显高于对照组,尤以10%O2组最为明显(P<0.01);10%O2组12 h和48 h时的HIF-1αmRNA表达水平比同一时间点的对照组明显增加。结论轻中度低氧有利于NSC的体外增殖,而HIF-1可能在其中发挥了重要作用。     

低氧条件下PSB603干预对少突胶质前体细胞增殖和分化的影响

目的:探讨在低氧条件下,腺苷受体A2b(A2bAR)拮抗剂PSB603对少突胶质前体细胞(OPC)增殖和分化的影响。方法:剥离新生2 d SD大鼠的脑皮层,并原代培养其OPC,随机分为对照组、PSB603组、2%O_2组和实验组,实验组在2%O_2干预的基础上再给予PSB603处理,4 d后用BrdU掺入技术和免疫细胞化学方法检测BrdU阳性细胞百分数和CNPase阳性细胞百分数的变化,并用qRT-PCR技术检测各组细胞P21cip1、P27kip1 mRNA含量的变化。结果:与对照组相比较,2%O_2组的BrdU阳性细胞百分数显著上升(P0.01),P21、P27 mRNA含量均显著下调(P0.01),各组间CNPase阳性细胞百分数无明显变化;实验组与2%O_2组间各实验差异均无统计学意义(P0.05)。结论:低氧短时间干预能够促进OPC细胞的增殖,P21cip1和P27kip1参与其调控,A2b AR未改变低氧所诱导的OPC增殖。     

Effects of bevacizumab administration on the hypoxia - induced pulmonary hypertension rat model

Background/aim Bevacizumab is a chemotherapeutic drug, which selectively binds to vascular endothelial growth factor (VEGF) and mainly inhibits angiogenesis and neovascularization. We aimed to study the possible effects of bevacizumab on right ventricular pressure (RVP), right ventricular hypertrophy, and VEGF, in hypoxia - induced pulmonary hypertension (PH) rat model.Materials and methods 24 adult Wistar Albino rats were randomly divided into four groups: control group - saline; Bevacizumab Group; PH Group; PH + Bevacizumab Group. In hypoxia - induced model, 10% oxygen and 90% nitrogen were applied in a plexiglas box for eight days to PH Group and PH + Bevacizumab Group. On day eight, RVPs were measured directly from the heart, and then animals were sacrificed. Heart and lung tissues were examined, and Fulton index was measured.Results RVP, Fulton index, and tissue VEGF scores were significantly lower in PH + Bevacizumab group than PH group: median (ranges), RVP, mmHg, 37.8 (33.0–39.0) and 32.3 (28.0–35.0), p: 0.01; Fulton index: 0.30 (0.29–0.33) and 0.25 (0.24–0.26), p: 0.003; tissue VEGF scores: 5.1 (4.8–5.3) and 4.0 (3.8 4.1), p: 0.004, respectively. Conclusion Bevacizumab, which is indeed an antineoplastic agent, might have a favorable effect on hypoxia - induced pulmonary hypertension.     

缺氧对大鼠海马神经元生物学功能的影响

为进一步探讨缺氧缺血如何诱导海马神经元损伤直至凋亡,明确缺氧对海马神经元生物学功能的影响及其相关机制,从而为缺血缺氧性脑病的防治提供实验依据,本研究以19d的SD胎鼠脑作为取材对象,经过条件培养基纯化建立海马神经元原代培养体系,通过MTT法、TUNEL法、免疫荧光、化学发光等方法检测海马神经元生长增殖活力、凋亡、Caspase-3活性等指标。结果显示缺氧可抑制SD大鼠海马神经元的生长增殖活力,并伴随着神经元凋亡和Caspase-3活性增高,且随着缺氧时间的增长程度加重。以上结果说明,缺氧通过诱导细胞凋亡导致SD大鼠海马神经元的损害,Caspase-3活性的激活可能是其重要的通路之一。     

低氧条件下成骨细胞的增殖与分化

背景：低氧可通过多种途径作用于成骨细胞影响骨代谢,对骨生成、骨愈合等产生负面影响。 目的：观察低氧对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化的影响,并探讨其分子机制。 方法：分离培养新生Wistar大鼠颅盖骨成骨细胞,取第2代细胞分别在常氧(体积分数20%O₂)与低氧(体积分数3%O₂)条件下培养。 结果与结论：低氧组成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性、骨钙素水平及茜素红结节形成数量均明显低于常氧组(P < 0.05或  P < 0.01),说明缺氧条件对成骨细胞的增殖、分化及功能有抑制作用;低氧组骨形成发生蛋白2及Runx2表达低于常氧组(P < 0.05或P < 0.01),说明低氧条件下大鼠成骨细胞Runx2、骨形成发生蛋白2的表达受抑制。结果表明低氧可通过抑制大鼠成骨细胞的Runx2、骨形成发生蛋白2的表达进一步抑制成骨细胞的增殖与分化。     

Effect of adaptation to high-altitude hypoxia on the microcirculation in the rat mesentery

After prolonged adaptation of rats to high-altitude hypoxia (in a pressure chamber at an altitude of 6500 m, for 6 h daily for 30–40 days) considerable hyperemia of the intestinal wall and mesentery was observed; the number of functioning capillaries was several times greater than in the control animals but the blood flow in the dilated microvessels was slowed and its structure was disturbed. Besides obvious hemoconcentration in the arteries and veins, hemodilution was observed in the capillaries. Definite hemorheological changes evidently connected with the polycythemia and increased hematocrit index were noted.Laboratory of Pathophysiology of Extremal States, Institute of General Pathology and Pathological Physiology, Academy of Medical Sciences of the USSR, Moscow. (Presented by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR A. M. Chernukh.) Translated from Byulleten' Ésperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 83, No. 5, pp. 528–530, May, 1977.     

腺苷A1受体拮抗剂DPCPX对低氧复氧脑星形胶质细胞影响的实验研究

目的:观察腺苷A1受体拮抗剂1,3-二丙基-环戊黄嘌呤(8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine, DPCPX)对体外培养低氧复氧(hypoxia and reoxygenation, H/R)大鼠脑星形胶质细胞促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)释放量、谷氨酰胺合成酶(glutamine synthase, GS)、超氧化物歧化酶(superoxide dimutase, SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX)活性的影响,探讨腺苷A1受体在H/R星形胶质细胞神经保护中的作用.方法:对大鼠大脑皮层星形胶质细胞进行体外培养并建立H/R模型,在低氧同时加入终浓度为100 nmol/L DPCPX 12 h后复氧1,6,12,24 h,检测EPO释放量,GS,SOD和GSH-PX活性的变化.结果:与对照组比较,DPCPX组H/R星形胶质细胞的EPO释放量显著减少;GS,SOD和GSH-PX的活性降低.结论:腺苷A1受体参与H/R星形胶质细胞的神经保护作用.     

大气压冷等离子体对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:探讨大气压冷等离子体（CAP）对人肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:将处于对数生长期的人神经胶质瘤细胞（U87）和宫颈癌细胞（Hela）接种于培养板或培养皿中,待细胞贴壁生长后,将其随机分为正常对照（control）组、氦气（He）组和CAP不同时间处理组,细胞在接受不同时间CAP处理后,采用CCK-8方法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白caspase3和氧化应激相关蛋白Nrf2的表达水平。结果:He处理对U87和Hela细胞的增殖能力和自发凋亡无明显影响,CAP处理后两种肿瘤细胞的细胞活力均显著降低,凋亡水平明显上升,caspase3蛋白和Nrf2蛋白的表达显著增加,CAP处理时间越长,效应越明显。结论:本实验条件下的CAP处理可抑制人肿瘤细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与CAP导致的氧化应激有关。     

Adenosine deaminase activity in lymphocyte subpopulations of B-16 melanoma and normal C57BL bearing mice

The activity of adenosine deaminase (ADA) was measured in thymus and spleen subpopulations separated by peanut agglutinin (PNA) of melanoma B-16 C57BL bearing mice and normal age-matched C57BL mice. Groups of 10 mice were used each time and the experiments were repeated 6 times. The adenosine deaminase activity in the PNA+ thymocytes of B-16 bearing mice was about 2.5 times lower than that of the normal C57BL mice while the ADA activity in the PNA+ fraction of spleen of the B-16 melanoma bearing mice was 2.5 times higher. These results demonstrate that the tumor burden probably induces a different redistribution and traffic of lymphocytes from one lymphopoietic organ to another. This traffic can also explain the thymus involution and spleen enlargement found in the B-16 mice.