用于人牙周细菌药敏试验的琼脂培养基

牙周病是具有不同临床表现及不同微生物所致的炎症。牙周囊中隐藏着100-150种细菌,占优势的有5-10种。主要是厌氧菌、兼性厌氧菌和嗜碳酸菌。单纯使用抗菌素,或者与手术清创术联合治疗牙周病都是有效的。药敏试验有助于合理选用抗菌药物,为此提出了一种适用于多数牙周菌株体外药敏试验的培养基,称V培养基。该培养基的优点是:(1)牙周菌生长良好;(2)成分容易配制;(3)药物最小抑菌浓度(MIC)同其他培养基得到的一致;(4)不需添加血液。 V培养基的成分如下:每升含胰蛋白胨15克,酵母浸膏5克,氯化钠5克,葡萄糖2克,丙酮酸钠2克,甲酸钠1克,延胡索酸钠1.5克,琥珀酸钠0.1克,吐温-800.25毫升,琼脂15克,氯血红素5毫克,维生素K_30.5毫克。作者比较了50株牙周菌在V培养基和6种其他培养基(Wilkins-Chalgren琼脂WCA、Schaedler琼脂、Brucella琼脂、胰蛋白酶黄豆血平板TSA、以及加血液的Schaedler和Brucella琼脂)上的生长情况。 V培养基同TSA在牙周细菌生长的能力和数量上相似;同WCA相比,试验的24种细菌中有17种结果相似,有6种细菌在V培养基上生长优于WCA;V培养基明显优于Schaedler和Brucella琼脂,牙周细菌在这些琼脂上生长不良。加血液能增加Brucella琼脂上细菌的生长,但对Schaedler琼脂无明显促进作用。用同样的上述牙周菌株在V培养基及常用于临床厌氧菌敏感试验的培养基WCA上进行青霉素、四环素、氯霉素、克林达霉素和红霉素等5种抗菌素的药敏试验比较,测得的MIC基本相同。只有腐蚀类杆菌(“Corroding”Bacteroides)在V培养基上的MIC高于WCA,可能是因细菌在V培养基上生长较好,以致抑菌需要的抗菌素浓度增高。总之,V培养基用于培养牙周病分离的细菌可与血琼脂培养基媲美,甚至更佳。在药敏试验上,其价值同WCA类似。因此,V培养基不失为进行人牙周菌药敏试验的合适培养基。     

鉴别产气单胞菌属(Aeromonas)的选择性 A-2培养基

近年来有不少关于从各种疾病和外界环境中分离到产气单胞菌属的报导。作者曾研究了有关的液体和固体培养基。 A-1培养基(增菌培养基)的成份是,水100毫升,硫酸镁0.02克,NaNH_4HPO_4 0.15克,KH_2PO_40.1克,可溶性淀粉0.2克,0.01%结晶紫水溶液2毫升。高压灭菌15分钟。 A-2培养基(固体鉴别培养基)的成份是以A-1培养基为基础,加入2%琼脂,5%明胶。淀粉含量增加到1%,不加NaNH_4HPO_4。为了观察细菌的还原性能,可加入10%氯化三苯基四唑(TTC)水溶液0.2毫升。用10%KOH调pH至7.4。为排除由明胶引起的培养基表面的粗糙性,可薄薄地浇注一层琼脂(用蒸馏水配)。     

培养基对产单核李斯特菌溶血活性的影响

产单核李斯特菌的溶血能力对其鉴定非常重要。已知血液和培养基成分对其溶血活性有较大影响。为此,作者应用产单核李斯特菌的ATCC标准菌株及东京大学医学科学研究所(HD)的标准菌株进行观察。菌株包括L.innocua,L.ivanovii,L.Seel-igeri,L.welshimeri,L.grayi,L.murrayi,应用的九种培基基础是胰酶大豆汤琼脂(TSA),改良胰酶大豆琼脂(加入生长因子),脑心浸液琼脂.心浸液琼脂,酵母浸液琼脂,哥伦比亚血琼脂(CBA),2号血球脂基础(BA).2号营养琼脂以及血液琼脂。血液     

从外环境标本中分离军团菌的甘氨酸选择培养基

目前,虽可用BCYE(缓冲活性碳酵母浸膏)琼脂来分离培养军团菌,但由于外界环境中存活着大量杂菌,因而给检出带来了困难。如用豚鼠腹腔接种法,则又耗钱费时,一般实验室难以进行。作者推荐一种含甘氨酸的选择培养基。即以BCYE琼脂为基础并稍加改进。原法是先加入琼脂待融化后再调pH至6.9,现改为在加入琼脂前调pH至6.97～6.99。经高压灭菌置室温中冷却后的最终pH为6.85～6.95。甘氨酸按0.3%(W/V)比例在灭菌前加入,并加万古霉素(5μg/ml)及多粘菌素B(100U/ml)以增强甘氨酸之选择作用。缓冲剂采用ACES(N-2-乙酰胺基-2-氨基乙烷磺酸)。此培养基称为GVP(甘氨酸-万古霉素-多粘菌素B)琼脂。     

对分离胚胎弯曲杆菌空肠亚种的选择培养基所作的比较

胚胎弯曲杆菌空肠亚种(Campylobacter fe-tus Subsp jejuni)原是家畜的肠道致病菌,最近证明也是人类胃肠炎的主要病因。受染的狗可能是引起人类感染的主要传染源。作者在研究狗弯曲杆菌症时,对所用的3种选择培养基作了比较,并确立了培养72小时的价值。这3种培养基是Skirrow氏培养基(简称SK,见Br Med J 2.9～11,1977)、Butzler氏提出的培养基(BU10,见Lancet(i):604～605,1978)及作者改良的Butzler培养基(BU40)。在1升SK培养基中含Oxoid2号血琼脂基础培养基40克、蒸馏水1000毫升、溶解了的马血70毫升、万古霉素10毫     

介绍一种脑膜炎双球菌的分离培养基

为便于基层开展流脑带菌检查,设计了奶粉麦乳精抗菌素培养基,培养基制备方法如下。1.称取营养琼脂42克置1000毫升三角烧瓶中,加入蒸馏水900毫升,加热溶化.     

肠道条件致病菌的快速鉴定试验

作者介绍一种半固体培养基,能及时和正确地鉴别肠道条件致病菌。培养基的制备方法:氯化钠4克,磷酸钠0.5克、硫酸铵1克、硫酸钾2克、硫酸镁0.5克、碳酸钠0.2克、乳糖20克、甘露醇 1克、蛋白胨20克、中性红0.04克、溴麝香草酚兰0.02克,琼脂3克、蒸馏水1000毫升。琼脂先于少量水中、用玻棒研磨,静置1-2小时。中性红放试管内,加水3毫升,煮沸溶解,滇麝香草酚兰溶于0.5毫升酒精中。其它成份均先用少量水溶解,(蛋白胨可用玻棒研磨),余下的蒸馏水用0.1N NaOH校正至pH 7.0-7.2。上述成份混合后,煮沸5-7分钟,琼脂全部溶解后,用棉花纱布过滤,待冷至30-40℃时再校正pH 7.0-7.2,分装试管,每管     

一种改良的厌氧菌的增菌培养基（文摘）

作者介绍了一种改良的含糖的液体培养基，能使厌氧菌在很短时间内迅速、大量的繁殖，从而有利予纯培养和厌氧菌的鉴定。该培养基成分为：布鲁氏肉膏30克、酵母浸膏5克、(shi)胨1克、蒸馏水1000毫升，加热溶解后，分装于含有1．5克肉渣的25×150毫米有螺帽的玻璃试管内，每管18毫升，高压灭菌，15磅15分钟，临用前以无菌技术加入经蔡氏滤菌器过滤的2毫升下列碳水化物营养液：葡萄糖7克、纤维二糖1克、麦芽糖1克、淀粉1克、蒸馏水100毫升。     

土法制备干燥培养基

结合战备及农村基层检验室的需要,我们试用两种简易方法制备干燥培养基: 一、琼脂吸收法(适用于制备固体培养基),先将琼脂切成细片,置80℃烘箱中干燥2小时后研成粉末。取1:2牛肉浸液3,000毫升,蛋白胨30克,氯化钠15克,琼脂粉末45克。按常法制备普通肉汤培养基,调整至PH7.6,滤纸滤清后,先用直火浓缩至原体积五分之     

感染性恶性溃疡的细菌学

从70例伴有感染性溃疡的癌症病人中,采取溃疡伤口棉拭标本或坏死组织标本共70份,血液标本70份,立即接种于适当培养基[如分离厌氧菌用疱肉基、血琼脂、含新霉素(100μg/ml)血琼脂、含卡那霉素(75μg/ml)、万古霉素(2.5μg/ml)的BM琼脂;分离需氧菌用血琼脂、MacConKey琼脂、甘露醇高盐琼脂及结晶紫血琼脂;血培养用脑心浸汤及硫乙醇酸盐肉汤]上,在需氧(空气中加入10%CO_2)及厌氧(90%H_2、10%CO_2)环境中,置37℃孵育1—7天,并将分离细菌进行鉴定。70例并发感染性溃疡的癌症病人,包括乳癌30     

一种极灵敏的用铬天膏B测定血清铁的简易法

生化实验室中测定血清铁的主要问题是敏感度差。使用铬天青B(chromazurol B)及十六烷基三甲基溴化铵(CTMA)与铁离子反应,生成一种深色的三元复合物,使敏感度提高数倍,从而解决了这个问题。显色的最适pH是4.6-5.5,光吸收最高峰在630nm。在0-80微克分子铁/升范围内符合比耳定律。在630nm的克分子消光系数是1.68×10~5升。克分子~(-1)·厘米~(-1)。试剂 (1)pH4.75缓冲液:溶解25克无水醋酸钠、110克氯化钠于重蒸馏水,约加8毫升浓冰醋酸(100%)校正pH后稀释到1升。 (2)显色剂:每升含0.3%CTMA90毫升,0.1%铬天青B铵盐60毫升,缓冲液850毫升。 (3)隐匿试剂:每100毫升含柠檬酸(一份结晶水)17克,柠檬酸钠(二份结晶水)35克。     

消毒剂对淋球菌杀灭效果检测方法的研究

为选择消毒剂对淋球菌杀灭效果的较好检测方法,对不同培养基与接种方法进行了试验比较。结果,用平皿倾注(即将菌悬液接种平皿后倾注琼脂并混匀)接种,在培养基上生长的菌落<1 mm或不透明;用平板浸润法(即将菌悬液接种平板后轻轻旋转,让菌悬液均匀浸润平板)接种,在普通营养琼脂、酵母浸膏琼脂上生长的菌落<2 mm,菌落计数<2 515 000 cfu/ml,在酵母浸膏血琼脂、巧克力琼脂上者2～3 mm与>3 320 000 cfu/ml。结果表明,对淋球菌用平板浸润法接种比常用的平皿倾注法好,用酵母浸膏血琼脂培养结果与现用巧克力琼脂者无明显差别。     

用琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶

作者鉴于目前分离乳酸脱氢酶((?))同工酶(琼脂、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶),大多是在室温条件下采用低压电泳分离,所需时间长达2～2(1/2)小时。鉴于阴极和阳极的缓冲液pH改变和热蒸发引起电泳图象变形,从而提出一种改良的琼脂糖电泳分离法和(?)同工酶的定量测定法。试剂①巴比妥钠-巴比妥缓冲液:pH8.6,离子强度0.08(巴比妥钠13.73克,巴比妥2.45克,蒸馏水1000毫升)。②2%琼脂糖溶液。③1%琼脂糖溶液:离子强度0.04,将2%琼脂糖溶液按1∶1稀释,分装于小烧瓶内,用时再置水浴中溶解。④0.45M乳酸钠溶液:在有100毫升刻度的烧瓶内加入     

葡萄球菌的溶血活性与红细胞的“游动”现象

在1.5%肉汤琼脂培养基表面上,加入0.15毫升枸椽酸盐抗凝血液,轻轻左右摇动,再将煮沸过的直径0.5cm,长4.5-5cm,中间插入同样长度铝丝的橡皮管,用镊子钳放在琼脂表面上,从平皿一端推移到另一端,使血液均匀分布成一薄层。移去胶管,将平血水平放置在室温或恒温器内。待血液干后,用接种环或针点种培养物,每一平皿可同时接种6-8份培养物。置培养箱18-20小时后观察结果。葡萄球菌在血平板上溶解红细胞的活性越强,红细胞“游动”现象越明显,并可见沿大菌落伸展出小菌落的链状物。当血平板上不出现溶血时,则无     

便于运输的保存百日咳杆菌生物学特性的方法

作者提出了一种长期保存百日咳杆菌而不改变其生物学特性的方法.将新近分离的百日咳杆菌或副百日咳杆菌在马铃薯甘油培养基或含20～25%人或动物血液的牛奶琼脂上孵育48小时后,用无菌的0.85%氯化钠溶液从培养基表面洗下培养物,使悬液浓度达1500万～3000万个细菌/毫升.取无菌吸管将细菌悬液分装于1毫升安瓿,每安瓿0.3～0.5毫升.安瓿熔封后保存于4℃冰箱,亦可在室温保存不长的时间(故适宜于运输).     

肝浸液培养基用于阴道滴虫、念珠菌培养效果观察

近年滴虫性阴道炎和念珠菌性阴道炎临床症状不典型病例增多 ,涂片镜检漏检率较高 ,而增殖培养能有效提高检出率。为此我们对 94例阴道炎反复发作患者的阴道分泌物标本进行了肝浸液培养基及沙堡琼脂培养基的平行检测。一、材料和方法1.肝浸液培养基[1] 的配制　 15 %的澄清肝浸液 10 0ml,蛋白胨 2 g ,盐酸半胱氨酸 0 .2 g ,麦芽糖 1g ,氯化钠0 .5 g ,溶解后调pH值至 5 .6～ 5 .8,定量分装试管 ,高压灭菌。临用前加入无菌灭活牛血清 (2 0 % ) ,同时加入青霉素 (10 0 0IU/ml)、链霉素 (0 .5mg/ml)。2 .沙堡琼脂培养基的配制　葡萄糖 4 0 g ,…     

不能用加人血的血平板做CAMP试验

无乳链球菌需用CAMP试验鉴定,该试验的准确性直接影响鉴定结果.血平板是该试验的关键培养基.为探讨血平板中的血液、基础粉、湿度、保存时间对试验的影响,我们分别用五种血平板:(1)哥伦比亚琼脂粉加羊血液;(2)哥伦比亚琼脂粉加人血液;(3)营养琼脂粉加羊血液;(4)营养琼脂粉加人血液;(5)市售商品血平板,在不同时间做CAMP试验.所用无乳链球菌为卫生部临床检验中心质评菌株.     

颅咽管瘤术后钠代谢紊乱21例分析

目的 分析颅咽管瘤切除术后钠代谢紊乱与肿瘤部位及切除程度的相关性.方法 对我院2006年2月至2010年10月30例颅咽管瘤手术切除术后发生钠代谢紊乱的21例患者的临床资料进行回顾性分析.结果 30例患者中术后出现高钠血症10例,低钠血症9例,高钠、低钠交替出现2例.死亡1例.肿瘤部位与术后发生钠代谢紊乱情况:鞍内未发生,鞍内-鞍上8例(61.5%,8/13),鞍后鞍旁3例(60.0%,3/5),三脑室及侧脑室10例(100.0%,10/10);肿瘤部位与术后发生钠代谢紊乱有关(x2=9.63,P<0.05).肿瘤切除程度与术后出现血钠异常情况:全切除患者发生血钠异常15例(62.5%,15/24),次全切除4例(100.0%,4/4),部分切除2例(100.0%,2/2)),肿瘤切除程度与术后出现血钠异常无关(x2=3.21,P>0.05).结论 颅咽管瘤切除术后钠代谢紊乱可能与肿瘤的部位有关,而与肿瘤的切除程度无关.

Abstract：

Objective To analyze the correlation between the position and the removal extent of the tumor and the postoperative sodium metabolic disturbance in patients with craniopharyngiomas. Methods Retrospective analysis of the postoperative sodium metabolic disturbance in craniopharyngioma patients admitted from Feb.2006 to Oct. 2010 was performed. Results In the 30 casese,10 cases occurred hypernatremia,9 with hyponatremia and, 2 with fluctuating hyponatremia and hypematremia. One cases died in the population. No sodium metabolic disturbance occurred in patients with craniopharyngiomas located in the interasellar region, whereas 8 occurred in the inter and suprasellar region(61.5% ,8/13) , and 3 occurred post and beside assellar region(60.0% ,3/5) , 10 occurred in the third and lateral cerebral ventricle (100.0%, 10/10). Sodium metabolic disturbance occurred in 15 cases(62. 5% ) among 24 cases underwent total resection,in all 4 cases underwent sub-total resection (100.0% ) ,and all 2 cases underwent paritical resection ( 100. 0% ). The degree of resection was not correlated with Sodium metabolic disturbance(x2 = 3.21 ,P>0.05). Conclusion Sodium metabolic disturbance after craniopharyngioma surgery may be correlated with the position of tumor, but not correlated with the removal extent.     

应用产色培养基快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 应用ChromID MRSA产色培养基快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA).方法 将922份不同种类临床标本直接接种在ChromID MRSA产色培养基和常规血琼脂培养基,采用24、48 h两个孵育时间观察结果,血琼脂培养基疑似金黄色葡萄球菌的菌落用PC20复合板作鉴定和苯唑西林最低抑菌浓度测定(MIC),两者检出的MRSA用MRSA乳胶凝集实验确证,并进行比较.结果 产色培养基阳性率14.9%,常规血琼脂培养基阳性率13.9%,不同种类标本阳性率不同,两者对MRSA的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),24 h产色培养基MRSA符合率100%,48 h符合率91.2%.结论 ChromID MRSA产色培养基检出MRSA比常规方法缩短24 h,可用于临床实验室快速、准确地检测MRSA.     

基于高通量测序和培养组学的血小板中细菌检测方法的建立

目的建立1种基于高通量测序培养组学的细菌检测体系,以此来提高血小板中细菌的检出率。方法利用微生物高通量培养组细菌检测体系,配置培养组中的8种液体培养基,即血培养瓶(37℃)、含5 mL羊血的血培养瓶(37℃)、100 mL海生菌肉汤(37℃)、含瘤胃液和羊血各5 mL的血培养瓶(37℃)、100 mL胰蛋白大豆肉汤(37℃)、100 mL5%羊血肉汤(28、37℃)、含5 mL胃液血培养瓶(37℃)和替代传统的1种培养基-血培养瓶(37℃),取血小板标本9份(5 mL/份)做预培养:在恒温有氧条件下的液体培养基中培养60 d,将液体培养基中的培养液9份,在培养24 h后第1次用无菌注射器吸取100μL菌到血琼脂平板上,并用涂布棒涂布均匀;此后每2—3 d重复同样操作1次。血琼脂平板与预培养在温度相同的条件下培养1—2 d,用挑菌环挑取血平板上的单个菌株,用DNA Blood Mini Kit提取DNA后,采用通用引物27F/1429R扩增该细菌的16S rRNA基因片段并采用Sanger测序鉴定菌种,同时将各血小板标本混匀后分别取40 mL以96 800 g离心4 h,弃上清;采用DN...