三种辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG方法的比较

目的：探讨三种辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗人IgG方法的差异，方法：应用过碘酸钠氧化法，简易戊二醛二步法和戊二醛－过碘酸钠法三种HRP标记羊抗人IgG方法的酶标记物含量和浓度作了比较，同时对45人份血清O．D值进行了比较，结果：应用过碘酸钠氧化法的标记率（LR）和克分子比均较简易戊二醛二步法，戊二醛－过碘酸钠法高；且应用过碘酸钠氧化法制备的酶标记物效价远远高于其它两种方法；结论：应用HRF标记羊抗人IgG制备酶标记物最好应用过碘酸钠氧化法。     

检测PAIg酶标抗体制备中的影响因素探讨

以过碘酸钠法为基础，选用一定实验条件制备酶标抗体，探讨制备过程中影响酶标抗体质量的因素。结果显示，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）与抗体比例在１∶１．５时，其标记率适当，容易获得质量较好的酶标抗体；ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析法纯化交联产物明显优于硫酸铵沉淀法。     

α-BT-RHP结合物的某些特性及制备方法的研究

研究了α-BT-HRP结合物的某些特性及其制备(过碘酸盐法)。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、吸收光潜和观察的结果,证明了α-BT-HRP结合物是不均一的,但是稳定的。好的结合物的RZ数值约1.0。用于本研究中的过碘酸盐法是可重演的。α-BT与HRP的结合效率是高的。     

两种LsAB染色标记方法及其抗原修复方法的比较

目的 比较两种标记生物素链亲和素法(LsAB),并探讨抗原修复的最佳方法。方法 采用碱性磷酸酶(AP)LsAB法和辣根过氧化物酶(HRP)LsAB法染色肺癌合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织石蜡切片中类胰蛋白酶(tryptase)的抗肥大细胞类胰蛋白酶抗体(AA1,小鼠抗人),并比较染色效果;用高压、胰蛋白酶和微波三种方法进行抗原修复,比较修复效果。结果 AP-LsAB法染色比HRP-LsAB法背景清晰、颜色对比鲜明;高压修复效果优于胰蛋白酶和微波修复。结论 在肺组织免疫组化染色中推荐使用AP-LsAB法,并采用高压修复抗原。     

应用戊二醛──过碘酸钠法交联辣根过氧化物酶与白色念球菌MN抗原

本文介绍一种免疫学检测中酶标记抗原的新方法。将戊二醛──过碘酸钠法交联辣根过氧化物酶与白色念珠菌MN抗原上，此法可供酶联免疫EUSA检测中竞争抑制法应用。     

十七种哺乳动物二级抗体的制备和辣根过氧化物酶标记

目的制备兔抗17种哺乳动物的二级抗体,并进行辣根过氧化物酶标记,为哺乳血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A或protein G亲和层析的方法进一步纯化哺乳动物的IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗哺乳动物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗哺乳动物的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blot方法考察标记抗体的特异性。结果纯化了恒河猴、东北虎、布氏田鼠、黑线姬鼠、斑羚、原驼、果子狸、食蟹猴、梅花鹿、长爪沙鼠、马鹿、骆驼、大仓鼠、豚鹿、熊猴、大耳羊和雪貂等17种哺乳动物的血清IgG,分别免疫大耳白兔制备了这17种哺乳动物的兔抗血清,免疫双扩散法测定兔抗这17种哺乳动物的抗血清效价均达到1∶32,并对纯化的兔抗恒河猴IgG、兔抗东北虎IgG、兔抗布氏田鼠IgG、兔抗黑线姬鼠IgG、兔抗斑羚IgG、兔抗原驼IgG、兔抗果子狸IgG、兔抗食蟹猴IgG、兔抗梅花鹿IgG、兔抗长爪沙鼠IgG、兔抗马鹿IgG、兔抗骆驼IgG、兔抗大仓鼠IgG、兔抗豚鹿IgG、兔抗熊猴IgG、兔抗大耳羊IgG和兔抗雪貂IgG等17种哺乳动物的二级抗体进行了辣根过氧化物酶标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1∶(2000～60000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性。结论成功制备了HRP标记的兔抗17种哺乳动物的二级抗体,为哺乳动物血清学检测体系的建立提供了工具。     

十六种鸟类二级抗体的制备和辣根过氧化物酶标记

目的制备兔抗16种鸟类的二级抗体,并进行辣根过氧化物酶标记,为鸟类血清学检测系统的建立提供工具。方法采用水稀释法粗纯抗体后,再利用改良的饱和硫酸铵分级沉淀法,或亲和层析结合饱和硫酸铵沉淀法,或饱和硫酸铵沉淀法结合SDS-PAGE凝胶切胶纯化的方法进一步纯化鸟类的IgY,利用纯化的IgY免疫大耳白兔制备抗血清,用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗鸟类的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗鸟类的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blots考察标记抗体的特异性。结果纯化了灰雁、鸬鹚、鸵鸟、小鹈、鸽子、鹅、孔雀、鹌鹑、贵妃鸡、草鹭、夜鹭、赤嘴潜鸭、燕鸥、长脚鹬、虎皮鹦鹉、翘鼻麻鸭等16种鸟类的IgY,免疫双扩散法测定兔抗这16种鸟类的抗血清效价均达到1∶32,并对纯化的兔抗灰雁IgY、兔抗鸬鹚IgY、兔抗鸵鸟IgY、兔抗小鹈IgY、兔抗鸽子IgY、兔抗鹅IgY、兔抗孔雀IgY、兔抗鹌鹑IgY、兔抗贵妃鸡IgY、兔抗草鹭IgY、兔抗夜鹭IgY、兔抗赤嘴潜鸭IgY、兔抗燕鸥IgY、兔抗长脚鹬IgY、兔抗虎皮鹦鹉IgY、兔抗翘鼻麻鸭IgY等16种兔抗鸟类IgY的二级抗体进行了辣根过氧化物酶标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1∶800～80000左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性。结论成功制备了辣根过氧化物酶标记的兔抗16种鸟类的二级抗体,为鸟类血清学检测体系的建立提供了工具。     

RmIL-18多克隆抗体的制备及辣根过氧化物酶的标记

目的用纯品rmIL-18免疫新西兰兔，制备多克隆抗体，并予辣根过氧化物酶标记。方法使用免疫佐剂包被rmIL-18分次免疫新西兰兔，得到兔血清，再采用硫酸铵沉淀粗提法和QAE-Sephadex A-50离子交换层析法提纯IL-18抗体，最后用HRP简易过碘酸钠法标记IL-18抗体。结果用以上方法标记的IL-18抗体酶标记率为40．29％，酶标抗体的效价为1：3200，最佳工作浓度为1：1600。结论成功制备出标记HRP的IL-18多克隆抗体，建立了IL-18抗原的酶联免疫检测，以进一步用于实验研究。     

过碘酸盐与戊二醛法对制备α-BT-HRP结合物的初步研究

本文报道了关于α-BT-HRP结合物制备方法的研究。在我们的实验室条件下,按照过碘酸盐法得到了这种结合物,而用经典的戊二醛一步法和二步法则没有得到。据此认为,对于制备α-BT-HRP来说,过碘酸盐法是简便而有效的。     

免疫酶检测技术 Ⅰ、免疫酶实验方法的探讨

<正> 免疫酶法是一种特异、敏感、快速简易的血清学试验方法。近年来国内外较为盛行,有关的资料很多。免疫酶技术其中重要的环节之一是制备免疫活性较高的酶标记物,酶标记物的制备方法,常用的有两种。一种为戊二醛法包括一步法和二步法,另一种为过碘酸钠氧化法。我们对戊二醛二     

髌骨横行骨折克氏针张力带与空心拉力螺钉张力带内固定效果的比较

目的 比较克氏针张力带与空心拉力螺钉张力带钢丝内固定治疗髌骨横行骨折的效果.方法 将53例髌骨横行骨折病人随机分成两组,A组27例行切开复位克氏针张力带钢丝内固定术,B组26例行切开复位空心拉力螺钉张力带钢丝内固定术,对两组手术并发症及术后恢复优良率进行比较.结果 B组术后并发症少于A组,而恢复的优良率高于A组,差异有显著性(χ2=10.439、4.160,P＜0.05、0.01).结论 空心拉力螺钉张力带钢丝内固定是治疗髌骨横行骨折的有效方法.     

两种测定糖化血清蛋白方法的比较

目的 :评价葡萄糖苯脎分光光度法 (简称GPS法 )测定糖化血清蛋白的准确性和特异性。方法 :用GPS法和常用的四氮唑蓝比色法 (简称NBT法 )同时测定临床评价血清中的糖化血清蛋白 ,比较 2种测定方法的重复性、线性、抗干扰能力和临床样本符合情况。结果 :GPS法和NBT法的线性回归系数分别为 0 .96 9和0 .977。 2种方法不同含量样本的批内变异系数均 <5 %。黄疸、脂血及溶血对 2种方法的干扰差异无显著性(P >0 .0 5 ) ,高糖血清 (血糖 >6 .5mmol/L)对GPS法有 5 %～ 10 %的正干扰 ,对NBT法的干扰不明显。 2种方法检测临床样本的相关系数为 0 .895 (P <0 .0 5 )。结论 :GPS法具有良好的线性和重复性 ,同时与NBT法有良好的相关性。     

氨金黄敏颗粒(含糖)中对乙酰氨基酚含量测定方法的比较

目的：探讨用亚硝酸钠法测定含糖氨金黄敏颗粒中对乙酰氨基酚含量的其体方法，以控制其质量。方法：对两种国家药品标准氨金黄敏颗粒[WS-10001-(HD-1127)-2002]和小儿氨酚烷胺颗粒[WS-10001-(HD-1115)-2002]中测对乙酰氨基酚含量方法比较，并考察两种方法在含糖氨金黄敏颗粒测定对乙酰氨基酚含量时的重复性，中间精密度、回收率。结果：方法1：[WS-10001-(HD-1127)-2002]重复性、RSD(％)为5．33；中间精密RSD(％)为5．94；回收率为98．25％；方法2：[WS-10001-(HD-1115)-2002]重复性RSD(％)为0．065；中间精密度RSD(％)为0．070；回收率101．93％。结论：方法2可以作为含糖氨金黄敏颗粒中对乙酰氨基酚的有效控制方法。     

不同来源小鼠2-细胞胚胎体外发育情况的比较

目的比较小鼠配子体外授精法与2-细胞胚胎收集法所得鼠胚体外发育情况,探讨适合人类体外受精实验室的质量控制系统。方法采用雌雄小鼠配子体外授精和体内受精收集2-细胞胚胎,同时对2-细胞胚胎在相同条件下进行体外培养,观察胚胎发育情况。结果小鼠配子体外授精法的受精率为82.2%;对两种方法所获2-细胞胚胎进行培养,48 h卵裂率及72 h囊胚形成率均无显著差异。结论体内受精2-细胞胚胎收集法较小鼠配子体外授精法操作简便,是较理想的人类胚胎实验室质控方法。     

人乳腺癌组织雌二醇受体测定两种分析法的比较

用单一饱和剂量分析法(下称单点法)检测了42例人乳腺癌组织雌二醇受体(ER)的容量,每例肿瘤组织同时用葡聚糖包裹炭末法(下称多点法)作对照检查。单点法阳性检出率为59.5％,多点法45.24％,两者无显著差异(P>0。1)。在单点法阳性的25例中有16例、阴性的17例中有14例与多点法检出结果一致,总符合率为71·4％。受体平均结合容量分别为38.22±18和27.91±28fmol/mg蛋白,两者无显著差异(P>0·3),两种分析法的定量有非常显著相关(r=0.6981,P相似文献   

腭裂修复手术的两种麻醉方法对比

６０例２～６岁腭裂患儿，分为２组，每组３０例，选用２种麻醉方法。两组麻醉用药区别为第１组诱导以依手 酯为主，第２组诱导以γ－羟丁酸钠为主。两缄麻醉效果基本相同，心率、血压、心电图和氧饱和度均在正常范围，但第２组中有８例患儿清醒延迟，考虑为γ－羟丁酸钠所致，术终在清醒方面，第１组较经２组优越。     

早期使用动静脉内瘘两种方法压迫止血效果的比较

目的了解指压止血法和弹力绷带压迫止血法对早期使用的动静脉内瘘穿刺点的止血效果及并发症。方法将82例血液透析病人早期使用的动静脉内瘘随机分为两组,分别用指压止血法和弹力绷带压迫止血法对1 660例次内瘘穿刺点进行压迫止血,比较两种方法止血时间和并发症发生率。结果指压止血法与弹力绷带压迫止血法比较,止血时间短,并发症的发生率低,差异有显著性(t′=37.473,P<0.05;2χ=4.269~12.869,P<0.05)。结论指压止血法是一种简单、安全、有效的内瘘止血方法,尤其适用于早期使用的动静脉内瘘。     

两种术式治疗精索静脉曲张的研究

该文报告一种经耻骨联合上方正中一个横切口同时探查双侧精索静脉的手术新方法,发现临床诊断单侧精索静脉曲张患者,均伴有对测精索静脉曲张;并与传统的经腹膜后精索内静脉高位结扎术进行临床疗效的对比研究。认为该新方法手术简单安全,并发症少,临床疗效显著。还可同时利用一个手术切除、探查双侧精索及作双侧曲张精索静脉结扎术,对亚临床型精索静脉曲张患者不会漏扎,对提高恢复男性不育患者的生育能力可能有较大的帮助。     

β-环糊精包合干姜提取物的方法比较

目的：制备干姜提取物的β-环糊精包合物,增加其稳定性。方法：分别采用研磨法、超声法及饱和水溶液法对干姜提取物进行包合,以HPLC法测定其中6-姜辣素含量,以包合物得率和包合率加权评分为指标,确定最佳包合方法。结果：以研磨法制备的包合物得分最高。结论：研磨法包合干姜醇提物的效果最佳。     

两种方法制作大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型比较

目的 制作短暂性大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型,比较颈总动脉进线法和颈外动脉进线法(改良LONGA法)优劣.方法 颈总动脉进线法和改良LONGA法栓塞大鼠大脑中动脉,栓塞2 h后再灌注24 h,以LONGA法标准对模型评分,并对梗死体积进行测定, 7 d时流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 改良LONGA法和颈总动脉进线法神经行为学评分分别为2.30±0.82和1.00±0.63,两种方法比较差异有显著性(t=6.886,P<0.05);两法脑梗死体积相比差异有显著性(t=3.96～4.45,P<0.05);两法细胞凋亡率比较差异有显著性(F=348.46,q=22.89,P<0.05).结论 与颈总动脉进线法相比,改良LONGA法大鼠神经行为学评分高、脑梗死体积大、凋亡细胞数多,模型稳定性好.