灵芝多糖肽对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响

目的　研究灵芝多糖肽 (GLPP)对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响并探讨其作用机制。方法　以Griess法 ,观察GLPP对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)产生的影响 ;以免疫组化法检测诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)的表达 ,观察GLPP对iNOS的影响。结果　GLPP(2 5～ 2 0 0mg·kg-1)灌胃给药 5d或体外给药 (3 12 5～ 2 0 0mg·L-1)均可促进巨噬细胞NO释放 ,但对LPS刺激NO的释放影响不大 ;GLPP(10 0mg·kg-1)灌胃给药 5d或体外给药 (10mg·L-1)均可使巨噬细胞iNOS含量增加。结论　GLPP可增加小鼠腹腔巨噬细胞NO产生 ,其机制可能与其促进巨噬细胞iNOS合成有关。     

隐孔菌多糖对小鼠内毒素性肺损伤的保护作用

目的研究隐孔菌多糖(cryptoporus polysaccharide,CP)对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法LPS气管内滴入诱导小鼠ALI模型,设立对照组、模型组、隐孔菌多糖(1、10、30mg·kg-1)组和地塞米松(0·5mg·kg-1)组,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中中性粒细胞的浸润情况、比色法测定伊文氏兰渗出量及BALF中的中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)、超氧根阴离子自由基(O2·)含量,观察肺组织病理及肺湿重/干重比值改变,ELISA法检测肺组织中TNF-α和IL-10含量。结果隐孔菌多糖(1、10、30mg·kg-1)尾静脉给药能够抑制BALF MPO活性,改善ALI小鼠BALF及肺组织中的炎症细胞的聚集和肺水肿程度,降低肺组织中TNF-α水平及升高IL-10/TNF-α比值。结论隐孔菌多糖通过抑制中性粒细胞黏附、趋化、减轻肺水肿等改善LPS诱导的小鼠ALI。     

5-乙酰氨基阿司匹林抗炎作用的初步研究

目的:对5-乙酰氨基阿司匹林(AASA)的抗炎作用进行初步研究。方法:采用小鼠耳廓肿胀、腹腔毛细血管通透性增加以及大鼠足跖肿胀法研究抗炎作用。结果:AASA高、低剂量组的耳廓肿胀度分别为4.7和2.8mg,伊文思蓝渗出量分别为3.5和1.2μg·mL~(-1),足跖肿胀度(1～4h)分别为0.28～0.31和0.18～0.29ml;对照组耳廓肿胀度为11.4mg,伊文思蓝渗出量为5.1μg·mL~(-1),足跖肿胀度为0.35-0.51ml。AASA的LD_(50)为2 709mg·kg~(-1)(小鼠,ig)。结论:AASA的抗炎作用比阿司匹林(ASA)强,毒性比ASA低。     

西地那非对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的作用

目的明确西地那非对急性肺损伤(ALI)的治疗作用及可能机制。方法采用脂多糖(LPS,4 mg·kg~(-1))气道滴入诱导的小鼠ALI模型。随机分为生理盐水组、LPS模型组、西地那非3,10及30 mg·kg~(-1)组、地塞米松5 mg·kg~(-1)组。测定肺干/湿重比值,常规细胞形态学检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞,肺组织切片观察病理改变;测定肺组织匀浆髓过氧化酶(MPO)活性、NO含量、NOS活性及TNF-α含量。结果LPS诱导的ALI小鼠肺干/湿重比值明显下降;BALF中白细胞总数及中性粒细胞比例明显增加;肺毛细血管通透性明显增加;肺组织间隙大量中性粒细胞浸润和红细胞渗出;肺组织匀浆TNF-α含量和MPO活性明显增加,NO含量、总NOS活性及iNOS活性明显增加。同时腹腔注射西地那非可剂量依赖性地降低ALI小鼠肺干/湿重比值;减少BALF中的白细胞总数及中性粒细胞的比例;降低肺毛细血管通透性;改善肺组织病理变化;抑制肺组织匀浆TNF-α含量、MPO活性及NO含量、总NOS活性及iNOS活性的增加。结论西地那非对LPS诱导的ALI有保护作用,提示NO- cGMP途径可能在ALI中起重要作用。     

黄芩有效成分SBM对炎症模型及免疫功能的影响

目的研究通过常温超高压方法得到的黄芩有效成分SBM的抗炎作用,并初步探讨其作用机制。方法观察SBM体外对淋巴细胞增殖、IL-1β合成的影响;观察给药后对佐剂性关节炎大鼠原发性及继发性病变、免疫功能及对甲醛诱导足肿胀、醋酸诱导腹腔渗出的影响。结果SBM(31.25～500mg.L-1)体外可明显抑制ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及LPS诱导的腹腔巨噬细胞合成IL-1β;SBM(20mg.kg-1)灌胃给药可明显抑制佐剂性关节炎大鼠原发性及继发性足肿胀,并可抑制脾淋巴细胞增殖、IL-1β合成;SBM(20mg.kg-1)灌胃给药还可明显抑制甲醛诱导的大鼠足肿胀及醋酸诱导的腹腔渗出。结论SBM可通过抑制免疫细胞的功能及促炎因子的产生发挥抗炎作用。     

侧柏总黄酮的抗炎作用

目的研究侧柏总黄酮的抗炎作用。方法以二甲苯致小鼠耳肿胀及角叉菜胶诱发大鼠足爪肿胀模型分别探讨侧柏总黄酮对小鼠耳片肿胀及大鼠足爪肿胀的抑制作用。测定大鼠足爪组织中一氧化氮 (NO)及前列腺素E2 (PGE2 )的含量。结果侧柏总黄酮在 12 5～ 5 0 0mg·kg-1内呈剂量依赖地抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀 ,2 5 0mg·kg-1剂量能显著抑制大鼠足爪肿胀 ,其作用强于2 0mg·kg-1的地塞米松。侧柏总黄酮能抑制大鼠炎症足爪组织NO及PGE2 的生物合成。结论侧柏总黄酮具有较强的抗炎作用 ,其抗炎作用可能与抑制NO及PGE2 的生物合成或释放有关。     

乙酰半胱氨酸对半乳糖胺致小鼠引起免疫性肝衰竭的治疗作用

目的 :观察乙酰半胱氨酸 (NAC)治疗小鼠免疫性肝衰竭的疗效。方法 :ICR小鼠随机分成 6组 :正常对照组、模型对照组、阳性对照组 ,乙酰半胱氨酸 2 5 ,5 0 ,10 0mg·kg- 1剂量组 ,每组 30只。除正常对照组外 ,每组腹腔注射半乳糖胺 (D galac tosamine ,Gal) 80 0mg·kg- 1,并同时腹腔注射脂多糖 (lipopolysacharides ,LPS) 10 μg·kg- 1,正常对照组、模型对照组、阳性对照组、给药组于注入Gal/LPS前、后 2h分别静脉注射生理盐水 ,生理盐水 ,促肝细胞生长素 (pHGF) 6 0mg·kg- 1,NAC 2 5 ,5 0 ,10 0mg·kg- 1。结果 :乙酰半胱氨酸能明显阻止Gal/LPS攻击 6h后引起小鼠血清转氨酶活力增高 ,改善凝血功能 ,使肝组织腐胺水平下降 ,肝组织损害减轻 ,降低小鼠死亡率 ,显示剂量依赖。结论 :乙酰半胱氨酸对Gal/LPS致小鼠免疫性肝衰竭有明显预防和治疗作用     

阿司匹林丁香酚酯的抗炎作用及其可能的作用机制

目的研究阿司匹林丁香酚酯(AEE)的抗炎作用及其可能的作用机制。方法阿司匹林0.2g.kg-1组、丁香酚0.18 g.kg-1组、AEE 0.18和0.36 g.kg-1组小鼠按体重ig给予相应药物,每天1次,连续3 d。用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型、角叉菜胶致小鼠足跖肿胀模型及小鼠棉球肉芽肿模型观察AEE的抗炎作用,并测定血清中一氧化氮(NO)和足爪组织中前列腺素E2(PGE2)、丙二醛(MDA)和5-羟色胺(5-HT)的含量。结果二甲苯致小鼠耳肿胀实验,模型组肿胀度为(7.0±1.2)mg,阿司匹林、丁香酚、AEE 0.18和0.36 g.kg-1明显抑制耳肿胀度,肿胀度分别为3.9±1.2,4.7±1.9,3.9±1.9和(3.8±1.1)mg(P<0.05,P<0.01)。小鼠腹腔毛细血管通透性实验结果表明,模型组伊文思蓝的渗出(A590 nm)为0.56±0.11,阿司匹林、丁香酚、AEE 0.18和0.36 g.kg-1组腹腔毛细血管通透性均降低,伊文思蓝的渗出(A590 nm)分别为0.29±0.15,0.34±0.12和0.35±0.18(P<0.05,P<0.01)。小鼠棉球肉芽肿实验结果表明,模型组肉芽肿增生(12.5±2.4)mg,阿司匹林、丁香酚、AEE 0.18和0.36 g.kg-1组明显降低,分别为7.0±2.1,9.0±1.7,9.9±1.4和(8.8±1.8)mg(P<0.01);角叉菜胶致小鼠足跖肿胀实验结果表明,AEE 0.18 g.kg-1显著抑制角叉菜胶致炎小鼠足跖肿胀(P<0.05),降低致炎足组织中PGE2,5-HT和血清NO含量,作用与阿司匹林和丁香酚较强或相当。结论 AEE具有明显的抗炎作用,与阿司匹林和丁香酚作用相当;其抗炎机制可能与抑制炎性介质释放有关。     

扁蒴藤素对急性实验性炎症的作用及其机制研究

目的 研究扁蒴藤素对急性实验性炎症的作用及其机制。方法 用巴豆油致小鼠耳肿,角叉菜胶致小鼠足肿,醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增高,角叉菜胶致大鼠腹膜炎模型,观察扁蒴藤素对小鼠耳肿、足肿、毛细血管通透性增高以及对大鼠腹膜炎渗出液中的白细胞计数、蛋白质含量、一氧化氮(NO)含量、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)释放、丙二醛(MDA)生成、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果 扁蒴藤素ip 0.156～0.625 mg·kg~(-1)或im 1～4 mg·kg~(-1)明显抑制小鼠耳肿和足肿(P<0.05);im 2～4 mg·kg~(-1)明显抑制小鼠毛细血管通透性增高(P<0.05);im 1～2 mg·kg~(-1)抑制大鼠腹膜炎白细胞渗出、蛋白质渗出及NAG释放,降低NO含量,抑制MDA生成,增强SOD及CAT活性。结论 扁蒴藤素有明显的抗炎作用;抗炎作用可能与其抑制NO生成、清除氧自由基、抗脂质过氧化、稳定溶酶体膜有关。     

cAMP在LPS及BCG +LPS诱导的免疫性肝损伤中的作用比较(英文)

目的　比较LPS、BCG +LPS诱导的免疫性肝损伤模型的特点及肝中cAMP的变化 ,以建立合适的动物模型 ,并为药物作用及肝损伤机制探讨提供参考。方法　昆明种小鼠 ,分为 5组 :①对照组 ;②BCG组 (ip 1mg·kg- 1 BCG ,7d后处理动物 ) ;③LPS 0 2mg ;④LPS 0 4mg组 (分别ip 0 2 ,0 4mg·kg- 1 ,6h后处理动物 ) ;⑤BCG +LPS组 (ip 1mg·kg- 1 BCG 7d后ip 0 2mg·kg- 1 LPS 6h后处理动物 )。取血清 ,测定ALT、GST活性 ;HE染色 ,光镜观察组织损伤情况 ;制备肝匀浆 ,放射免疫法测定cAMP含量。结果　组织学检查表明 ,给予BCG或LPS均能引起中性粒细胞浸润。单独给予BCG或 0 2mg·kg- 1 LPS未见明显的肝组织损害 ,但经BCG预处理后 ,0 2mg·kg- 1 LPS可使血清ALT、GST水平显著增高。单独给予 0 4mg·kg- 1 LPS也能引起明显的肝组织损伤。经BCG预处理后的小鼠肝组织内cAMP含量明显下降 ,而单独LPS刺激 ,则使肝内cAMP含量呈剂量依赖性增高。结论　LPS、BCG +LPS均能引起典型的免疫性肝损伤 ,经BCG预处理 ,能增强内毒素刺激诱导的肝脏毒性。不同的免疫性肝损伤模型所致肝内cAMP含量的变化不同 ,在进行机制研究及药物药理作用研究时应予以考虑     

N-乙酰半胱氨酸对小鼠免疫性肝损伤的影响

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对卡介苗(BCG)与细菌脂多糖(LPS)引起小鼠免疫性肝损伤的影响。方法建立BCG/LPS引起的小鼠免疫性肝损伤模型。采用两种处理方式给予NAC:方式A,于LPS处理前4h和15min分别经腹腔注射给予NAC(预处理);方式B,于LPS处理后0h和4h分别经腹腔注射NAC(后处理)。LPS处理后8h剖杀动物,取血和肝脏,并检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性与一氧化氮(NO)水平、肝脏组织谷胱甘肽(GSH)与丙二醛(MDA)含量以及肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达水平。结果与模型组比较,NAC预处理组小鼠血清ALT活性下降,肝脏TNF-α mRNA表达明显减少,而体内NO生成和肝脏脂质过氧化水平无改变;NAC后处理组与模型组相比,小鼠死亡率升高,血清NO生成增加,肝脏GSH含量进一步下降,而小鼠血清ALT活性未见明显改变。结论NAC对小鼠免疫性肝损伤有双重效应,NAC预处理对抗BCG/LPS引起的小鼠免疫性肝脏损伤,NAC后处理加重BCG/LPS引起的氧化应激并升高动物死亡率。     

肉苁蓉多糖的巨噬细胞活化作用

目的观察肉苁蓉多糖(CDPS)对巨噬细胞的活化作用。方法采用中性红法测定吞噬活性;Griess试剂法测定NO释放量;L929细胞法及小鼠胸腺细胞法测定TNF-α及IL-1释放。结果CDPS在6.25～50mg.L-1剂量范围内可剂量依赖性地增强BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力和促进NO释放;在2.8～100mg.L-1剂量范围内可使正常和免疫抑制的RAW264.7细胞NO释放明显增加;在0.56～7.2mg.L-1或3.6～10mg.L-1范围促进RAW264.7细胞TNF-α或IL-1产生,均具有良好的量效关系。结论CDPS可明显提高巨噬细胞吞噬及分泌功能,活化巨噬细胞。肉苁蓉免疫增强作用可能与此有关。     

八肽胆囊收缩素通过p38MAPK通路抑制LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达

目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对LPS诱导RAW264.7细胞IL-1β表达的影响及相关机制。方法用ELISA及RT-PCR法检测RAW264.7细胞IL-1βmRNA及蛋白表达;用Western blot检测RAW264.7细胞p38 MAPK的磷酸化水平。结果①LPS可时间依赖性的诱导RAW264.7细胞IL-1βmRNA及蛋白的表达,分别于刺激后3 h及6 h达到高峰;②10-10 mol.L-1 CCK-8对LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达无影响;10-8、10-6 mol.L-1CCK-8浓度依赖性地抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达;③10-10 mol.L-1 CCK-8未影响LPS诱导的p-p38MAPK水平,10-8、10-6 mol.L-1 CCK-8浓度依赖性地抑制了LPS诱导的p-p38 MAPK水平;④p38 MAPK特异性抑制剂SB203580可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达,与CCK-8共同作用后,抑制作用进一步加强。结论 CCK-8通过抑制p38 MAPK磷酸化而抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达,这可能是CCK-8发挥抗炎作用的信号转导机制之一。     

八肽胆囊收缩素抑制LPS诱导的RAW264.7细胞AP-1活性及IL-6表达

目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对LPS诱导RAW264.7细胞IL-6表达的影响及相关机制。方法用ELISA及RT-PCR法检测RAW264.7细胞IL-6蛋白及mR-NA表达;用EMSA方法检测RAW264.7细胞AP-1 DNA结合活性。结果①LPS可时间依赖性的诱导RAW264.7细胞IL-6蛋白及mRNA表达;②10-10 mol.L-1 CCK-8对LPS诱导的RAW264.7细胞IL-6表达无明显影响;10-8、10-6 mol.L-1 CCK-8浓度依赖性地抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞IL-6表达;③10-10 mol.L-1 CCK-8未影响LPS诱导的AP-1活性,10-8、10-6 mol.L-1 CCK-8浓度依赖性地抑制了LPS诱导的AP-1活性。结论 CCK-8通过抑制AP-1 DNA结合活性而抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞IL-6表达,这可能是CCK-8发挥抗炎作用的信号转导机制之一。     

芦荟大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞NO生成及iNOS表达的影响

目的观察芦荟大黄素(aloe-emodin)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞一氧化氮(NO)生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的作用。方法采用LPS诱导的RAW264.7细胞株建立细胞炎症反应模型。采用Griess试剂法测定NO释放量;采用硝普钠释放NO法测定NO自由基含量的变化;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析iNOS mRNA表达改变。结果芦荟大黄素在0.69～2.50mg·L-1剂量范围内可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放,并呈剂量和时间依赖关系;芦荟大黄素在0.63～5.00mg·L-1剂量范围内可下调LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS mRNA含量;而此范围内芦荟大黄素无直接清除NO自由基作用,不影响iNOS活性。结论芦荟大黄素可明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞NO释放,呈时间和剂量依赖关系,此作用并非通过捕捉NO或抑制iNOS活性来实现,而是通过抑制iNOS mRNA表达发挥作用的。     

三肽化合物酪丝亮肽对巨噬细胞吞噬及肿瘤细胞杀伤功能的影响

目的：研究三肽化合物酪丝亮肽(YSL)对巨噬细胞(M(?))吞噬功能、肿瘤细胞杀伤功能和细胞因子分泌功能的影响。方法：通过碳粒廓清实验观察YSL对小鼠M(?)吞噬功能的影响,采用MTT法观察YSL对腹腔M(?)杀伤人肝癌细胞BEL-7402和小鼠黑色素瘤细胞B16-F10作用的影响,用ELISA法观察YSL对M(?)株RAW264．7分泌细胞因子IL-1β和NO功能的影响。结果：YSL 80,160,320μg·kg~(-1)·d~(-1)均能够明显增强小鼠M(?)的吞噬功能(P＜0．01),YSL各浓度(0．1,1,10,100 mg·L~(-1))在体外明显增强小鼠腹腔M(?)对肿瘤细胞BEL-7402和B16-F10的杀伤作用(P＜0．01)。YSL可以促进细胞毒效应分子IL- 1β和NO的分泌合成,NO和IL-1β水平分别在YSL作用12 h,24 h时达到高峰。结论：YSL可以增强M(?)吞噬功能,增强对肿瘤细胞的杀伤作用,促进细胞因子IL-1β和NO分泌。     

褪黑素对GalN/LPS引起小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究褪黑素(MT)对氨基半乳糖(D-GalN)与细菌脂多糖(LPS)共处理引起小鼠急性肝损伤的保护作用。方法建立GalN/LPS引起的小鼠急性肝脏损伤模型。于GalN/LPS共处理前30min和处理后1h、2h分别经腹腔注射给予MT,经GalN/LPS共处理8h后剖杀动物,取血和肝脏,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和一氧化氮(NO)水平,测定肝脏组织Caspase-3活性、还原性谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽还原酶(GSH-RD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,采用DNA梯度分析实验检测肝脏凋亡,并对小鼠部分肝脏进行病理组织学检查。结果与模型组比较,MT处理组小鼠血清ALT活力和TNF-α含量明显下降,肝脏Caspase-3活性、GSH损耗明显降低,肝组织GSH-RD和GSH-PX活性明显升高,DNA凋亡条带较前有所减弱,而MT对体内NO生成无明显影响。结论MT对GalN/LPS引起小鼠急性肝损伤有保护作用,主要通过其抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。     

Inhibition of lipopolysaccharide-induced nitric oxide production by flavonoids in RAW264.7 macrophages involves heme oxygenase-1

The role of heme oxygenase-1 (HO-1) played in the inhibitory mechanism of flavonoids in lipopolysaccharide (LPS)-induced responses remained unresolved. In the present study, flavonoids, including 3-OH flavone, baicalein, kaempferol, and quercetin, induced HO-1 gene expression at the protein and mRNA levels in the presence or absence of LPS in RAW264.7 macrophages. This effect was associated with suppression of LPS-induced nitric oxide (NO) production and inducible nitric oxide synthase (iNOS) protein expression. Hemin induced HO-1 protein expression and this was associated with the suppression of LPS-induced NO production and iNOS protein expression in a dose-dependent manner. In addition, an increase in bilirubin production was found in flavonoid- and hemin-treated cells. Hemin, at the doses of 10, 20, and 50 microM, dose-dependently stimulated the flavonoid (50 microM)-induced HO-1 protein expression, and enhanced their inhibitory effects on LPS-induced NO production and iNOS protein expression. Pretreatment of the HO-1 inhibitor, tin protoporphyrin (10 microM), attenuated the inhibitory activities of the indicated flavonoids on LPS-induced NO production. Morphologic analysis showed that 3-OH flavone, baicalein, kaempferol, quercetin, hemin, and tin protoporphyrin did not cause any change in cell viability in the presence or absence of LPS. In contrast, only 3-OH flavone showed a significant inhibition of cell growth using the MTT assay. Transfection of an HO-1 vector in macrophages (HO-1/RAW264.7) resulted in a 3-fold increase in HO-1 protein compared with that the parental RAW264.7 cells. NO production mediated by LPS in HO-1 over-expressed RAW264.7 cells (HO-1/RAW264.7) was significant less than that in parental RAW264.7 cells. 3-OH Flavone, baicalein, kaempferol, and quercetin showed a more significant inhibition on LPS-induced NO production in HO-1/RAW264.7 cells than in parental RAW264.7 cells. These results provide evidence on the role of HO-1 in the inhibition of LPS-induced NO production by flavonoids. A combination of HO-1 inducers (i.e. hemin) and flavonoids might be an effective strategy for the suppression of LPS-induced NO production.