心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型MMP-2＼TIMP-2表达的影响

[目的】探讨心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型基质金属蛋白酶一2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制因子一2（TIMP一2）表达的影响。【方法】通过喂养高脂饲料和主动脉球囊内皮拉伤术复制动脉粥样硬化易损斑块模型,实验分为模型组,假手术组,心脑血脉宁组,历时15周。处死后,取腹主动脉行苏木精一伊红（HE）染色,观察镜下病变,计数斑块破裂数,免疫组化方法检测MMP一2、TIMP一2蛋白含量。【结果】1）HE观察：假手术组镜下形态结构完整,模型组斑块中心可见大量脂核,斑块表面覆盖纤维帽,在斑块肩部可见残存泡沫细胞和大炎细胞浸润。心脑血脉宁组介于两者之间。2）免疫组化结果：与假手术组相比,模型组MMP一2、TIMP一2蛋白含量明显升高,差异有显著性（P〈0．01）;心脑血脉宁组MMP一2与模型组比较表达降低,差异有显著性（P〈0．01）,而TIMP一2含量与模型组相比有降低趋势,但无统计学差异（P〉0．05）;心脑血脉宁组能够有效降低两者比值,与模型组相比差异有显著性（P〈0．01）。【结论】心脑血脉宁干预家兔动脉粥样硬化易损斑块模型,能减少斑块破裂,其机制可能与降低斑块MMP一2含量以及调节MMP一2与TIMP一2比值有关。     

心脑血脉宁对家兔易损斑块模型血清CRP和斑块内炎细胞浸润的影响

[目的]探讨心脑血脉宁对家兔易损斑块内炎细胞浸润和血清C反应蛋白(CRP)的影响。[方法]通过球囊拉伤主动脉内皮配合高脂饲料喂养复制家兔易损斑块模型。术后1周始,给予心脑血脉宁口服12周,于处死前24h和48h,分别予以药物触发斑块破裂,触发前收集血液,应用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测家兔血清CRP含量,处死后切取斑块,观察炎细胞浸润情况。[结果]心脑血脉宁可降低血清CRP的浓度,减少斑块内炎细胞浸润,与模型组相比有显著性差异。[结论]心脑血脉宁可以通过抑制炎症反应,达到稳定易损斑块的目的。     

痰瘀同治方对大鼠颈总动脉粥样硬化易损斑块稳定性的影响

目的:探讨痰瘀同治方对大鼠颈总动脉粥样硬化(AS)易损斑块稳定性的影响。方法:采用高脂、高蛋氨酸喂养,4周末行颈总动脉球囊拉伤术造模,术后将大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组、复方维生素组、痰瘀同治方(TYTZ)7.8,3.9,1.95 g.kg-1组,连续ig 8周。实验结束后,测定各组血清同型半胱氨酸(Hcy)、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9),基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)和斑块中MMP-9,TIMP-1阳性表达。结果:与模型组比较,辛伐他汀组、复方维生素组和痰瘀同治方7.8,3.9 g.kg-1组血清MMP-9降低并TIMP-1升高,斑块中MMP-9阳性表达降低。结论:痰瘀同治方可通过调节MMP-9/TIMP-1起到稳定颈总动脉粥样硬化易损斑块的作用。     

黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠MMP-2及TIMP-1表达的影响

目的:观察黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:将健康SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、黄芪建中汤组、生胃酮组,每组10只。采用改良Okabe法复制动物模型。胃黏膜MMP-2、TIMP-1表达水平检测采用免疫组织化学法。结果:模型组MMP-2表达较假手术组显著升高(P<0.01),各治疗组MMP-2表达水平显著低于模型组(P<0.01);模型组TIMP-1表达较假手术组显著降低(P<0.05,P<0.01),各治疗组TIMP-1表达水平显著高于模型组(P<0.01);黄芪建中汤组较生胃酮组MMP-2表达水平显著降低(P<0.01),TIMP-1表达水平显著升高(P<0.01)。结论:黄芪建中汤通过调控MMP-2、TIMP-1的表达水平,修复胃黏膜损伤。     

中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP-2,MMP-9和TIMP-1的影响

观察中药川贝母对哮喘模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。BALB/C小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0,9.0 mg·kg-1剂量给予中药川贝母灌胃;阳性对照组于腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。观察各组小鼠气道反应性的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和白细胞分类的变化以及支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度的变化;ELISA法检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1水平;RT-PCR检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果显示,模型组气道反应性、BALF中细胞总数以及中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数、支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组MMP-2,MMP-9和TIMP-1水平和mRNA表达明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。推断中药川贝母可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其降低MMP-2,MMP-9和TIMP-1有关。     

新火针对家兔膝骨性关节炎基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶抑制剂-1影响的实验研究

目的观察新火针对家兔膝关节骨性关节炎模型血清基质金属蛋白酶(MMP-1)、金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)的调节作用,探讨其防治膝骨关节炎的作用机制。方法将40只正常新西兰兔随机分为空白组、模型组、西药组、传统火针组、新火针组,每组8只。参照KITOH方法制造膝关节骨性关节炎模型,造模后第7天开始,分别用玻璃酸钠、传统火针、新火针对各治疗组(西药组、传统火针组、新火针组)家兔进行治疗。疗程结束后采用ELISA法测定各组家兔血清中MMP-1、TIMP-1含量。结果与空白组比较,模型组家兔血清MMP-1和TIMP-1表达极显著升高(P0.01);经治疗后,西药组、传统火针组和新火针组家兔血清中MMP-1和TIMP-1表达较模型组极显著降低(P0.01);三个治疗组间两两比较无显著性差异,其中西药组和新火针组MMP-1水平已接近于空白组,传统火针组与空白组仍有显著差异(P0.05)。结论新火针是治疗膝关节骨性关节炎的一种简便有效方法,其作用机制可能是通过降低血清中异常升高的MMP-1含量,调节MMP-1和TIMP-1比例关系,调节细胞外基质的降解过程,从而减缓软骨退变的进程。     

益气活血方对心肌梗塞后左室重构大鼠心肌基质金属蛋白酶-2、白细胞介素-1β的影响

目的 通过观察益气活血方对心肌梗塞后左室重构大鼠心肌梗塞边缘区心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)及血清白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨益气活血方防治心肌梗塞后左室重构的作用机理.方法 结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗塞模型,术后24h存活大鼠分为益气活血方大剂量组(简称大剂量组)、益气活血方小剂量组(简称小剂量组)、卡托普利组(简称西药组),模型组.另设假手术组.分别以相应药物灌胃6周.6周末检测各组大鼠左心室质量指数,梗塞边缘区心肌MMP-2、TIMP-2蛋白的表达及血清IL-1β的含量.结果 与假手术组比较,模型组6周末大鼠MMP-2、TIMP-2蛋白的表达明显增加,左心室质量指数增加;药物干预组,尤以大剂量组为优,可显著降低心肌梗塞后心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/ TIMP-2比值,降低左心室质量指数,降低血清IL-1β的含量.结论 益气活血方可抑制心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/TIMP-2,这可能是益气活血方抑制左室重构,防治心梗后心衰的作用机制之一,且存在量效关系.其抑制心肌MMP-2、增加心肌TIMP-2蛋白表达的作用可能跟降低血清IL-1β含量有关.     

六郁同治法对动脉粥样硬化小鼠易损斑块胶原代谢的影响

目的观察六郁同治法对动脉粥样硬化小鼠易损斑块处Ⅰ型、Ⅲ型胶原的含量及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,探讨其稳定易损斑块的机制。方法采用高脂饮食喂养ApoE基因敲除小鼠的方法建立易损斑块模型。将小鼠分为正常组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、辛伐他汀组,每组10只,给药组给予相应药物干预,模型组和正常组给予等量生理盐水,12周后,用苦味酸-天狼星红染色观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原,免疫组化法检测MMP-9表达。结果与正常组比较,模型组形成易损斑块;与模型组比较,中药高、低剂量组Ⅰ型胶原增加、Ⅲ型胶原减少(P0.01),Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原比值降低(P0.01),MMP-9表达减少(P0.01)。结论六郁同治法可稳定易损斑块,调节Ⅰ型、Ⅲ胶原的含量和抑制MMP-9的表达可能是其作用机制之一。     

五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织MMP-2及其抑制剂表达的影响

[目的]研究五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织中Ⅳ型胶原以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子TIMP-2表达的影响,探讨五田保肝液对大鼠酒精性肝纤维化的治疗效果和可能机制。[方法]随机将100只Wistar大鼠分成6组:正常组、五田保肝液低、中、高剂量组、模型组、阳性药对照组,其中正常组10只,其他各组均18只。采用白酒加少量玉米油、吡唑的混合物灌胃,制备大鼠酒精性肝纤维化模型,造模12周后处死大鼠,以免疫组化法检测大鼠肝组织Ⅳ型胶原蛋白的表达,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2mRNA的表达。[结果]各组Ⅳ型胶原蛋白的表达均比正常组显著升高,但五田保肝液各剂量组和阳性药组Ⅳ型胶原蛋白的表达比模型组降低;模型组大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2的mRNA表达比正常组显著升高,但TIMP-2的mRNA表达升高幅度更大;五田保肝液和阳性药组MMP-2mRNA的表达较模型组升高,但TIMP-2mRNA的表达较模型组降低,且五田保肝液以中、高剂量效果更明显。[结论]五田保肝液可能通过上调MMP-2的表达、下调TIMP-2的表达,从而抑制大鼠酒精性肝纤维化的发生发展。     

人参三七川芎提取物延缓衰老小鼠血管老化的实验研究

目的探讨衰老小鼠血管老化所导致的血管壁结构和功能的改变以及人参、三七、川芎提取物的干预作用。方法建立自然衰老小鼠模型,小鼠随机分为衰老模型组、人参三七川芎提取物高、中、低剂量组、维生素E组,另设青年对照组,观察各组主动脉形态学改变,检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管组织抗超氧阴离子、晚期糖基化终末产物(AGEs)、基质金属蛋白酶(MMP-2)与其抑制剂(TIMP-2)含量以及MMP-2/TIMP-2比值。结果人参三七川芎提取物能够改善衰老小鼠主动脉形态学衰老变化,HE染色见内皮细胞脱落减少,平滑肌细胞(SMC)增生减少,Masson染色显示中药各组胶原纤维相对含量降低(P0.05),中药高剂量组SMC相对含量降低(P0.05)。中药高、中、低剂量组血管组织抗超氧阴离子含量显著增高,AGEs含量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。中药各剂量组小鼠血管组织MMP-2水平降低,TIMP-2水平显著升高,MMP-2/TIMP-2比值明显增高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论人参三七川芎提取物能够改善衰老小鼠主动脉形态学衰老变化,降低血管组织中活性氧的生成,减少AGEs生成,抑制MMP-2的活性,调节MMP-2/TIMP-2的平衡,从而最终降低衰老小鼠血管的僵硬度,减少血管重构,延缓小鼠血管老化的发生。     

心脑通络液对腹主动脉粥样硬化家兔TXB2、hs—CRP的影响

[目的]通过心脑通络液对腹主动脉粥样硬化兔血浆血栓素B2（TXB2）及血清高敏C反应蛋白（hs—CRP）的影响,探讨心脑通络液对动脉粥样硬化的治疗作用。【方法】选取雄性新西兰兔40只,随机分成5组,即空白组、模型组、血脂康组、心脑通络液高剂量组（简称高剂组）、心脑通络液低剂量组（简称低剂组）,每组8只。造模成功后,连续治疗3个月,观察兔血清TXB2及hs—CRP的水平变化。【结果】与空白组对比,模型组TXB2及hs—CRP值显著升高（P〈0．05）。血脂康组及高、低剂量组的TXB：及hs—CRP值均减低,且高剂组TXB2及hs—CRP值与血脂康组相比差异无统计学（P〉0．05）。心脑通络液对动脉粥样硬化家兔有治疗作用。     

心脑通络液对动脉粥样硬化兔平滑肌细胞Bcl-2、Caspase-3的影响

目的：探讨心脑通络液对动脉粥样硬化兔平滑肌细胞的干预作用。方法：选取健康雄性新西兰大耳兔40只。随机分成假手术组、模型组、血脂康组、心脑通络液高、低剂量组,对除假手术组外的其余组动物建立腹主动脉粥样硬化模型。造模成功后,各组分别灌胃给药,连续治疗8周,采用SP法测定各组家兔Bcl-2、Caspase-3的阳性表达率。结果：与假手术组比较,模型组Bcl-2含量明显降低,Casapase-3含量明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;与模型组比较,血脂康组和高低剂量组Bcl-2含量均增高、Caspase-3含量均降低（P〈0．05）,以高剂量改善最显著（P〈0．05）。结论：心脑通络液可能通过对bcl-2及Caspase-3蛋白表达的调控而降低动脉斑块内过度凋亡的平滑肌细胞,从而抑制粥样斑块的形成。     

心脑通络液对腹主动脉粥样硬化家兔TXB_2、hs-CRP的影响

[目的]通过心脑通络液对腹主动脉粥样硬化兔血浆血栓素B2(TXB2)及血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响,探讨心脑通络液对动脉粥样硬化的治疗作用。[方法]选取雄性新西兰兔40只,随机分成5组,即空白组、模型组、血脂康组、心脑通络液高剂量组(简称高剂组)、心脑通络液低剂量组(简称低剂组),每组8只。造模成功后,连续治疗3个月,观察兔血清TXB2及hs-CRP的水平变化。[结果]与空白组对比,模型组TXB2及hs-CRP值显著升高(P0.05)。血脂康组及高、低剂量组的TXB2及hs-CRP值均减低,且高剂组TXB2及hs-CRP值与血脂康组相比差异无统计学(P0.05)。[结论]心脑通络液对动脉粥样硬化家兔有治疗作用。     

补阳还五汤对家兔易损斑块内新生血管的影响研究

[目的]研究补阳还五汤对兔动脉粥样硬化斑块内新生血管的影响及机制。[方法]选取50只雄性新西兰白兔为研究对象,将其随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组,12周后处死。取斑块组织苏木精-伊红(HE)染色评估斑块破裂出血情况;取冰冻斑块组织,采用免疫荧光染色,评估血管密度情况;采用酶联免疫吸附(ELISA)及蛋白印记测定血中及斑块内碱性成纤维生长因子(b FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板源性生长因子(PDGF)表达情况。[结果]补阳还五汤组斑块破裂数明显少于模型组(P0.05)斑块内b FGF、PDGF表达与模型组比较有统计学差异(P0.05)。[结论]补阳还五汤具有稳定易损斑块的作用,其机制可能与增加斑块内b FGF、PDGF表达,促进血管成熟有关。     

补阳还五汤对易损斑块模型家兔心脏和肝脏组织学的影响

[目的]探讨补阳还五汤对动脉粥样硬化易损斑块模型家兔心脏和肝脏组织学的影响。[方法]通过喂养高脂饲料和主动脉球囊内皮拉伤术复制动脉粥样硬化易损斑块模型,实验分为假手术组,模型组,补阳还五汤组,历时10周。称质量,处死后,称取心肝质量,计算心体指数和肝体指数。取部分心肝组织行苏木精-伊红(HE)染色,观察镜下病变。[结果]1)心体指数和肝体指数的观察:补阳还五汤能够有效降低心体指数和肝体指数,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2)HE观察:补阳还五汤可以有效减轻心肌细胞和肝细胞水肿。[结论]补阳还五汤可以减轻易损斑块模型家兔心肝组织的细胞水肿,其机制尚待进一步研究。     

益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达影响的实验研究

[目的]本实验旨在通过动物实验观测中药益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达的影响。[方法]采用腹主动脉缩窄法结合皮质激素造模法建立慢性心衰阳虚水泛证大鼠模型,随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、假手术组,用药8周后,观察各组大鼠的心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达。[结果]益气强心饮能明显下调慢性心衰大鼠心肌组织Bax基因蛋白表达、上调Bcl-2基因蛋白表达,疗效等同西药对照组。[结论]益气强心饮可调控慢性心衰大鼠的心肌细胞凋亡,具有治疗及延缓心衰发展等作用。     

心脑通络液对动脉粥样硬化家兔模型ET-1、NO含量的影响研究

目的：观察心脑通络液对动脉粥样硬化家兔血浆ET-1、血清NO含量的影响,探讨心脑通络液抗动脉粥样硬化作用。方法：选取雄性新西兰白兔40只,随机分成5组,即假手术组、模型组、血脂康组、心脑通络液高剂量组（简称高剂量组）、心脑通络液低剂量组（简称低剂量组）,建立腹主动脉粥样硬化家兔模型。造模成功后,连续治疗3个月,分光光度计检测血浆NO含量、放射免疫法检测血浆ET-1含量。结果：心脑通络液高剂量组、血脂康组血浆ET-1含量均降低,血清NO升高,与空白对照组相比有明显差异（P〈0．05）,心脑通络液高剂量组较模型组血清NO含量升高,血浆ET-1含量降低,均具有显著差异（P〈0．05）;心脑通络液高剂量组与血脂康组血清NO含量,血浆ET-1含量指标无显著性差异（P〉0．05）。结论：心脑通络液能明显降低AS兔模型血血浆ET-1水平,升高血清NO水平,从而达到保护血管内皮细胞、抗动脉粥样硬化的作用。