不同潮气量通气对大鼠呼吸机相关性肺损伤模型的影响

目的通过建立过度通气导致呼吸机相关性肺损伤（VILI）大鼠模型，评估不同潮气量对肺损伤的影响。方法清洁级SD大鼠随机分成对照组（A组）、正常通气组（B组）、过度通气小潮气量[潮气量（VT）=20ml／kg]组（C组）和过度通气大潮气量（VT=40ml／kg）组（D组）。机械通气组中每只大鼠采用经口气管插管。观察各组通气1、2和4h肺病理学改变、肺含水量、肺泡灌洗液（BALF）中自细胞总数（WBC）、总蛋白（Tp）、乳酸脱氢酶（LDH）含量的变化，以及两组过度通气组大鼠不同时程机械通气后3d内的死亡率。结果与A组和B组相比，两组过度通气组大鼠的肺组织湿／干比值及肺损伤评分均明显升高，BALF中的WBC计数、LDH、Tp含量显著性增加，且D组BALF中WBC计数、LDH、Tp含量较C组更高，并随着通气时间延长而增加。两组过度通气组大鼠生存率无明显差异。结论过度通气会导致严重的VILI。潮气量40ml／kg通气4h更能可靠复制VILI大鼠模型。     

高浓度氧加重大鼠通气机所致肺损伤的实验研究

目的研究高浓度氧（100％）对大鼠通气机所致肺损伤（VILI）的影响。方法将48只健康雄性SD大鼠随机分为4组，行机械通气，通气时间4h。A组实施空气常规潮气量（VT=8mL／kg）通气，B组实施高氧常规潮气量通气，C组实施空气大潮气量（VT=40mL／kg）通气，D组实施高氧大潮气量通气。每小时行1次动脉血气分析，计算氧合指数（PaO2／FiO2）。行支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞、中性粒细胞计数，测定左肺湿干重比值（W／D），BALF中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、巨噬细胞炎症蛋白2（MIP-2）含量以及肺组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平，并观察肺脏的组织病理学改变。结果组织病理学显示D组大鼠较C组肺脏内有更多的中性粒细胞浸润和肺泡壁结构的破坏。与C组比较，D组大鼠氧合指数显著下降，左肺W／D值显著升高，BALF中自细胞、中性粒细胞计数明显增加，BALF中TNF-α、IL-1β、MIP-2含量显著增高，肺组织MDA水平显著增加，SOD水平显著下降。B组与A组比较，除肺组织中MDA水平增加、SOD活性下降外，其余各项指标差异均无统计学意义。结论高浓度氧能明显加重大鼠大潮气量通气所致肺损伤，而对常规潮气量通气影响较小。     

人参皂甙Rb1对机械通气大鼠肺组织NF-资B和iNOs表达的影响

目的观察人参皂甙Rb1对机械通气肺损伤（VILI）大鼠炎症信号通路蛋白NF-资B及诱导型一氧化氮合酶（iNOs）的影响。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组（C组）、VILI组和人参皂甙Rb1预处理组（Rb1组）,每组10只。后两组大鼠潮气量40ml/kg机械通气4h建立大鼠VILI模型,Rb1组在通气前30min尾静脉注射40mg/kg人参皂甙Rb1,其他两组予等容量0.9%氯化钠溶液。观察各组大鼠肺组织病理改变,肺组织湿／干重比（W/D）,收集肺泡灌洗液（BALF）,采用ELISA法测定BALF中TNF-α、IL-6水平,硝酸盐还原酶法检测一氧化氮（NO）水平;RT-PCR测定肺组织中iNOsmRNA的表达水平,Westernblot检测肺组织的NF-资B蛋白水平。结果与C组相比,VILI组肺组织病理损伤严重,肺组织W/D显著增加,BALF中TNF-α、IL-6、NO水平增加,iNOsmRNA表达增加,NF-资B蛋白表达上调;与VILI组比较,Rb1组肺组织病理损伤程度减轻,肺组织W/D降低,BALF中TNF-α、IL-6、NO水平降低,iNOsmRNA表达降低,NF-资B蛋白表达下调。结论人参皂甙Rb1可下调机械通气大鼠NF-资B及iNOs活性,降低促炎因子TNF-α、IL-6、NO释放,减轻肺损伤。     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织Bax和 Bcl-2表达及凋亡的影响

目的：探讨不同潮气量（tidal volume,Vt）机械通气对大鼠肺组织Bax和Bcl-2表达及凋亡的影响。方法：将24只健康SD大鼠随机分成4组：对照组、低潮气量组、中等潮气量组和大潮气量组。对照组保留自主呼吸,其余组分别以不同潮气量（10,20,40 mL/kg）机械通气2 h,通气结束后24 h观察大鼠肺组织病理学改变、肺湿干比（W/D）、肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数、免疫组织化学法观察肺组织Bax和Bcl-2蛋白表达及评分、TUNEL染色情况。结果：与对照组比较,大、中潮气量组W/D值、BALF中白细胞计数、病理学评分、Bax蛋白表达及凋亡率（AI）均显著增加,而Bcl-2表达明显减少（P＜0.05）。与对照组相比,低潮气量组以上指标无明显变化（P＞0.05）。结论：低潮气量机械通气不引起肺损伤;较大潮气量机械通气引起肺损伤,可能与增加肺组织Bax和减少Bcl-2的表达,促进靶细胞凋亡有关。     

环氧化酶2抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤肺水代谢的影响

目的:探讨环氧化酶2 (COX-2)抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤(VILI)肺水代谢的影响.方法:健康成年雄性SD大鼠30只,体质量300～ 350 g,随机分为3组(n=10),对照组(TV组,潮气量8 mL/kg)、机械通气肺损伤组(HV组,潮气量40 mL/kg)、NS398预处理组(HV+NS398组).NS398预处理组于机械通气前30 min腹腔注射COX-2抑制剂NS398 8 mg/kg.于机械通气4h时处死大鼠,Western Blot法检测肺组织中水通道蛋白l(AQPl)、水通道蛋白5(AQP5)表达;检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度,计算肺通透性指数(LPI);检测BALF中肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度;计算肺组织湿/干重比(W/D).结果:与TV组相比,HV组BALF中TNF-α浓度增加,AQP1、AQP5表达降低(P＜0.05),LPI升高,肺组织W/D升高(P＜0.05);与HV组相比,HV+NS398组BALF中TNF-α浓度降低,AQP1、AQP5表达升高(P＜0.05),LPI及肺组织W/D降低(P＜0.05).结论:COX-2抑制剂可能通过上调AQP1、AQP5的表达,减轻肺水肿改善肺水代谢,从而减轻大鼠机械通气所致肺损伤.     

还原型谷胱甘肽对大鼠不同潮气量机械通气NF-κB、TNF-α蛋白表达影响

目的探讨还原型谷胱甘肽对大鼠不同潮气量机械通气对NF-κB、TNF-α表达影响。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分成对照组（A组）、正常通气组（B组）、过度通气组（C组）、正常通气组＋还原型谷胱甘肽组（D组）、过度通气组＋还原型谷胱甘肽组（E组），D、E组在机械通气前5min阴茎背静脉注射还原型谷胱甘肽。各组大鼠通气时间均为4h。观察各组肺组织的病理改变，用干／湿重比值来比较肺水肿的程度，用免疫组织化学技术检测肺组织核转录因子NF-KB的表达，ELISA法检测肺匀浆中肿瘤坏死因子TNF-α变化。结果病理学改变C组与A、B、D，E组比较的肺组织有更多白细胞浸润和肺泡壁结构的破坏。C组肺组织中TNF-α含量与D、E组比较明显增加，C组肺组织NF-KB的表达与D、E组比较明显增加。结论还原型谷胱甘肽能减少大鼠不同潮气量机械通气中NF-κB、TNF-α表达，在一定程度上减少肺损伤。     

依达拉奉对机械通气所致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨自由基清除剂依达拉奉对机械通气所致急性肺损伤的保护作用。方法清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为3组（n=8）,常规潮气量组（C组）,大潮气量组（MV组）,大潮气量＋依达拉奉组（E组）。C组行常规潮气量（VT=8 mL/kg）机械通气4 h,其余两组均行大潮气量（VT=40 mL/kg）机械通气4 h。E组于机械通气前30 min经股静脉注射0.2%的依达拉奉15 mg/kg,C组和MV组于机械通气前30 min经股静脉注射等量的生理盐水。机械通气4 h后留取肺标本,分别测定肺组织湿/干重比值（W/D）和肺组织匀浆中髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量,观察肺组织病理改变及肺组织核因子κB（NF-κB）表达情况。结果 MV组肺组织MPO、MDA含量、W/D及肺组织NF-κB表达均高于C组（P〈0.05）,肺组织SOD含量低于C组（P〈0.05）。E组肺组织MPO、MDA含量、W/D及肺组织NF-κB表达均低于MV组,仍高于C组（P〈0.05）;E组肺组织SOD含量高于MV组,仍低于C组（P〈0.05）。结论依达拉奉可以减轻机械通气所致的大鼠急性肺损伤,其机制可能与清除活性氧族（ROS）,降低了NF-κB信号转导通路的活化,进而减轻炎症级联放大效应有关。     

机械通气致大鼠急性肺损伤时肺组织及血MDA、SOD的变化

目的观察机械通气致大鼠肺损伤时肺组织及血MDA和SOD含量变化,探讨氧化应激在大鼠急性肺损伤发病机制中的作用。方法24只SD雄性大鼠随机分为自主呼吸组（A组）和机械通气组（B组）,每组12只。A组采用自主呼吸,B组采用大潮气量机械通气。于通气后4 h放血处死动物,收集肺组织和肺灌洗液标本,测定肺灌洗液中蛋白总量、白细胞计数和肿瘤坏死因子α（TNF-α）;测肺湿/干重比（W/D）;测定肺组织和血中MDA及SOD含量;取肺组织观察病理变化。结果与A组相比,B组肺灌洗液中白细胞计数、TNF-α和蛋白总量明显增加（P〈0.01）;肺组织和血中MDA含量上升,SOD含量下降（P〈0.01）;肺W/D增加（P〈0.01）。肺组织出现明显病理组织学损伤。结论机械通气致急性肺损伤时肺组织发生了强烈的氧化应激损伤,同时伴有机体抗氧化能力相对不足。     

人心房利钠肽对机械通气肺损伤大鼠肺组织NF-κB p65的表达及影响

目的 探讨人心房利钠肽（hANP）对大鼠机械通气性肺损伤（VILI）时炎症因子和NF-κB p65表达的影响.方法 采用高气道压机械通气模式制备机械通气性肺损伤模型.雄性SD大鼠30只随机分为空白对照组、机械通气肺损伤组（HV组）和人心房利钠肽组（HV＋ hANP组）.HV＋hANP组于机械通气30 min静脉注射hANP（0.1g/kg· min）,机械通气4小时时处死大鼠,免疫蛋白印迹法测定肺组织NF-κB p65的表达,酶联免疫吸附法测定肺组织TNF-a和IL-1β含量,计算肺组织湿/干重比（W/D）.结果 与TV组相比,HV组、HV＋ hANP组肺组织NF-κB p65表达明显增加,肺组织TNF-a和IL-1β含量明显上升（P＜0.05）,肺组织W/D明显升高（P＜0.05）;与HV组相比,HV＋ hANP组肺组织NF-κB p65表达明显抑制,肺组织TNF-a和IL-1β含量明显降低（P＜0.05）,肺组织W/D降低（P＜0.05）.结论 人心房利钠肽通过抑制肺组织NF-κB p65表达,减轻肺部炎症反应,从而减轻大鼠机械通气所致肺损伤.     

大鼠机械通气相关性肺损伤与肺组织细胞凋亡的关系

目的观察不同机械通气潮气量对大鼠肺细胞凋亡的影响,探讨细胞凋亡在机械通气所致肺损伤中的作用机制及意义。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分成A、B、C三组,分别给予不同潮气量（VT）：A组7ml／kg,B组20ml／kg,C组40ml／kg,各组大鼠通气时间均为4h。凋亡细胞的检测使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术（TUNEL）,用免疫组织化学技术检测肺组织核转录因子-κB（NF—κB）的表达;观察各组肺组织的病理改变,用湿／干重比值来比较肺水肿的程度。结果A、B、C三组大鼠肺组织病理改变依次加重,肺湿／干重比值依次增加,肺组织凋亡细胞逐渐增加,NF—κB的表达也逐渐增强。结论三组大鼠肺组织病理改变、细胞凋亡及NF—κB的表达一致,细胞凋亡在大潮气量机械通气所致肺损伤中起重要作用。     

参麦注射液对机械通气相关肺损伤大鼠肺炎性反应的影响

目的：探讨参麦注射液对机械通气相关肺损伤（VILI）大鼠肺炎性反应的影响。方法：健康成年雄性SD大鼠30只,体质量300~350 g,随机分为3组（n=10）：常规潮气量通气组（TV组,潮气量8 m L/kg）、大潮气量通气组（HV组,潮气量40 m L/kg）、大潮气量通气＋参麦注射液组（HS组）。HS组于机械通气前30min通过尾静脉注射10 m L/kg参麦注射液。机械通气4 h后抽取股动脉血行血气分析,留取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）,计算大鼠肺湿干重比（W/D值）和肺泡通透性指数（PPI）,测定BALF中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素10（IL-10）浓度,测定肺组织匀浆Na＋-K＋-ATP酶活性,观察肺组织病理学变化。结果：与TV组相比,机械通气4 h后HV组Pa O2下降,W/D值和PPI升高,BALF中TNF-α、IL-1β及IL-10浓度增加,TNF-α/IL-10比值升高,Na＋-K＋-ATP酶活性降低（P〈0.05）,肺组织出现明显损伤;与HV组相比,HS组Pa O2升高,W/D值、PPI及TNF-α/IL-10比值降低,TNF-α及IL-1β浓度降低,IL-10浓度、Na＋-K＋-ATP酶活性增高（P〈0.05）,肺组织损伤程度减轻。结论：参麦注射液可减轻炎性反应,改善肺水代谢,从而减轻VILI。     

不同潮气量的机械通气对大鼠肺组织内TNF-α和IL-10的影响

目的 观察不同潮气量机械通气对大鼠肺组织中TNF-α和IL-10的影响及其作用机制。方法 选取24只SD大鼠并随机分成三组（F组、L组、H组）,每组8只,其中F组为插管不通气组,L组给予10 ml/kg小潮气量,H组给予40 ml/kg大潮气量行机械通气。L组与H组的通气时间均为2 h,并在通气的过程中给予维库溴铵抑制呼吸。通气结束24 h后,取各组大鼠的肺组织检测湿干重比值（W/D值）,用ELISA法观察肺组织匀浆中细胞因子（TNF-α,IL-10）蛋白的浓度,观察肺组织病理改变并分析具体的作用机制。结果 L组和H组机械通气后肺组织的TNF-α、IL-10蛋白含量表达均较F组有增高,其中H组与F组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,L组浓度虽有升高,但差异无统计学意义（P〉0.05）,此外H组较L组的升高变化也非常明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 大量的机械通气会对大鼠造成明显的肺损伤,从而引发炎症反应,使得炎性因子TNF-α和IL-10含量产生变化,由此可以得出不同机械通气量与大鼠的促炎及抑炎反应有明显相关性的结论。     

辛伐他汀对脓毒症大鼠肺组织核转录因子-κB表达的影响

目的探讨辛伐他汀对脓毒症大鼠肺组织不同时间点的核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法 90只SD大鼠随机分为空白对照组(生理盐水2 mL)、内毒素组(脂多糖5 mg/kg,用生理盐水稀释至2 mL)、辛伐他汀组(脂多糖5 mg/kg,辛伐他汀20 mg/kg,生理盐水稀释至2 mL),每组30只,给药途径均通过鼠尾静脉注射。分别在用药后2、4、6、12 h随机快速处死6只大鼠,用免疫法检测肺组织NF-κB表达。结果大鼠肺组织HE染色所见:对照组各时点肺泡结构正常;内毒素组2 h开始出现炎症损伤,以6 h最为显著;辛伐他汀组中性粒细胞细胞浸润较内毒素组减轻。大鼠肺组织不同时间点NF-κB的表达:对照组各时间点NF-κB微量表达;内毒素组各时间点NF-κB较对照组明显增高(P<0.05),6 h达到峰值,12 h开始下降;辛伐他汀组各时间点NF-κB的表达与内毒素组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论辛伐他汀能改善脓毒症时肺组织的病理性炎症损伤,与其抑制NF-κB的表达有关。     

高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液对内毒素性急性肺损伤大鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:研究高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液(HSH40)对内毒素性急性肺损伤(ALI)大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,并探讨其在ALI防治中的作用。方法:建立大鼠急性肺损伤模型。将健康雄性SD大鼠54只,体重250～300g,随机分为3组,每组18只。空白对照组(C组)给予等容量的NS,急性肺损伤组(L组)和HSH40组(H组)均经股静脉注射大肠杆菌脂多糖(LPS)5mg/kg,1min后以5ml/kg输注NS或HSH40于10min内输完。检测各组大鼠血气、肺湿/干重(W/D)比值和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,采用ELISA法检测创伤后0.5、2、4h血清中TNF-α的表达情况,观察肺组织病理形态学变化并进行病理损伤评分。结果:与C组比较,L组TNF-α在给予LPS后0.5h表达开始升高(P<0.01),2h达峰值(P<0.01),以后逐渐下降,而H组较L组则明显下降(P<0.01);与L组比较,H组动脉血气明显改善(P<0.01),W/D和MPO活性均显著下降(P<0.01),同时肺组织的病理损伤程度也减轻。结论:HSH40能够调节炎性介质TNF-α的产生与释放,从而减轻ALI时组织器官炎症反应的病理损害而起保护作用。     

人心房利钠肽对机械通气肺损伤大鼠肺组织NF-κB p65表达的影响

目的 探讨人心房利钠肽（hANP）对大鼠机械通气性肺损伤（VILI）时炎症因子和NF-κB p65表达的影响.方法 采用高气道压机械通气模式制备VILI模型.雄性SD大鼠30只随机分为空白对照组（TV组）、机械通气肺损伤组（HV组）和人心房利钠肽组（HV＋hANP组）.HV＋hANP组于机械通气30 min后静脉注射hANP 0.1 g/（kg·min）,机械通气4h时处死大鼠.免疫蛋白印迹法测定肺组织NF-κB p65的表达;酶联免疫吸附法测定肺组织TNF-α和IL-lβ的含量;计算肺组织湿/干重比（W/D）.结果 与TV组相比,HV组、HV＋hANP组肺组织TNF-α[（519.22±35.31）、（283.54±24.16）ng/L]和IL-lβ[（751.82±65.35）、（316.29±25.65）ng/L]含量明显上升（P＜0.05）,NF-κB p65[（238±24）、（178±14）]表达明显增加,肺组织W/D[（9.7±1.2）、（6.4±0.9）]明显升高（P＜0.05）;与HV组相比,HV＋ hANP组肺组织TNF-α和IL-lβ含量明显降低（P＜0.05）,NF-κB p65表达明显抑制,肺组织W/D降低（P＜0.05）.结论 hANP通过抑制肺组织NF-κB p65表达,减轻肺部炎症反应,从而减轻大鼠机械通气所致肺损伤.     

戊乙奎醚联合机械通气对急性呼吸窘迫综合征大鼠炎症的影响

目的 观察戊乙奎醚联合机械通气对油酸静脉注射诱导的大鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺组织炎症反应的影响.方法 通过颈静脉注射油酸(0.15 mL/kg)制作大鼠ARDS模型.32只成年健康雄性SD大鼠按简单随机法分为4组,每组8只:对照组、油酸组、戊乙奎醚组及机械通气组.油酸注射前30 min经腹腔注入戊乙奎醚0.5 mg/kg制作大鼠ARDS模型.机械通气组(戊乙奎醚+机械通气)呼吸机参数设置:潮气量(VT) =4 mL/kg,呼吸频率(R) =70欠/min,吸呼比(I∶E)=1∶2,吸入氧浓度(FiO2)=21％.机械通气4h后为实验终点,测定大鼠动脉血氧分压(PaO2)并计算氧合指数(PaO2/FiO2),肺组织湿干重比(W/D);光镜下观察肺组织病理改变,并计算病理评分;酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织匀浆中髓过氧化酶(MPO)、白细胞介素8(IL-8)及核转录因子κB(NF-κB)含量.结果 油酸组大鼠肺间质明显水肿,肺出血及灶性肺不张,肺组织大量炎细胞浸润,肺微血管充血明显;与对照组比较,油酸组大鼠肺组织病理评分(8.63 ±2.20比1.38±0.92)和W/D比值明显升高(8.37±0.99比4.08±0.65,P均＜0.01),PaO2/FiO2明显降低[(206±32) mm Hg比(428±28) mmHg),P＜0.01];肺组织匀浆中MPO[(33.91±1.43) ng/mL比(20.92±1.40) ng/mL)]、IL-8[(809±39) ng/L比(583±91) ng/L]和NF-κB[(1163±105) ng/L比(803±130) ng/L]高于对照组大鼠(P均＜0.01).戊乙奎醚组、机械通气组炎细胞浸润、肺水肿、肺出血等改变均较油酸组轻,肺组织病理评分(7.12±0.75和6.03±0.87比8.63±2.20)、W/D比值(6.38±1.51和4.00±2.27比8.37±0.99)均较油酸组明显降低(P均＜0.05),PaO2/FiO2明显升高[(256±33)和(309±61)比(206±32) mm Hg,P均＜0.05],肺组织匀浆MPO[(28.40±3.51)和(24.23±1.24)比(33.91±1.43) ng/mL,P均＜0.05]、IL-8[(768±49)和(700±55)比(809±39) ng/mL,P均＜0.05]、NF-kB[(1159±104)和(946±91)比(1163±105) ng/mL,P均＜0.05]均低于油酸组,而机械通气组改变较戊乙奎醚组改善更为明显(P均＜0.05),但均未达到对照组水平(P均＜0.05).结论 戊乙奎醚能减轻油酸静脉注射诱导ARDS大鼠肺组织炎症反应,戊乙奎醚联合机械通气的作用优于戊乙奎醚单独使用;通过抑制肺组织炎症反应可能是戊乙奎醚联合机械通气对油酸性ARDS大鼠实施肺保护作用的机制之一.