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丙肝抗HCV与HCV RNA定性、荧光定量之间的关系 总被引:3,自引:0,他引:3
自从1989年丙型肝炎病毒(HCV)正式命名以来,HCV研究即成为病毒性肝炎的热点之一。丙型肝炎呈全球分布,我国整体人群的流行率约为3%,而其慢性化率高达85%,其中20%患者易发展为肝硬化,且与肝细胞癌的发生密切相关犤1犦。血清HCVRNA阳性是HCV感染的直接依据,对丙肝的早期诊断具有重要意义。本文采用常规PCR定性、实时荧光定量PCR检测丙肝患者血清HCVRNA,并与ELISA夹心法测定抗HCV的结果相比较分析,认为HCVRNA荧光定量的检出率明显高于前两者,这可能与方法学敏感性、病毒感染所处的临床阶段、基因的突变及抗病毒药物的应用相关… 相似文献
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目的探讨丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV-RNA的相关性,为丙型肝炎的防治提供参考。方法选取2015年6月-2016年6月期间诊治的80例丙型肝炎患者,以ABI3500dx基因测序仪对基因分型进行测序,确定基因分型,以化学发光法检测抗HCV浓度,计算测定值/临界值(S/CO)比值,采用荧光定量PCR技术检测HCV-RNA浓度。结果患者基因分型主要为1b、1c、2a分别有48例、14例、8例,占60.00%、17.50%、10.00%,其中1型共62例、非1型18例,分别占77.50%、22.50%;抗HCV阳性者79例、HCV-RNA阳性者53例,阳性率分别为98.75%、66.25%;基因型1型的患者抗HCV(S/CO)比值、HCV-RNA浓度分别为(13.27±3.33)、(6.54±1.24)×106 copies/ml均高于非1型患者(11.28±3.25)、(5.86±1.03)×106copies/ml,比较差异有统计学意义(P0.05);HCV-RNA阳性患者抗HCV(S/CO)比值为(13.33±4.39)高于阴性患者(9.74±3.84),比较差异有统计学意义(P0.05)。结论丙型肝炎患者基因分型主要为1b、1c、2a,不同基因型时抗HCV、HCV-RNA浓度不同,基因分型与抗HCV、HCV-RNA的之间存在一定相关性。 相似文献
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目的 评价丙型肝炎病毒核心抗原(HCV抗原)、丙型肝炎病毒抗体(HCV抗体)及丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)三种检测方法在丙型肝炎实验室诊断中的作用.方法 HCV抗原采用双抗体夹心法;HCV-RNA采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR),HCV抗体采用酶联免疫技术(间接法),对44例HCV抗体阳性标本进行HCV抗原和HCV-RNA检测.结果 在HCV抗体阳性标本中,HCV抗原阳性检出率为43.2%,HCV-RNA阳性检出率为82.5%;在HCV-RNA阳性标本中,HCV抗原阳性检出率为45.5%.结论 三种丙肝标志物中,实时荧光定量PCR技术检测HCV-RNA是判断丙肝感染最可靠的方法而HCV抗原诊断丙肝,仍有54.5%的漏检率,其应用于临床还有距离.所以在没有条件应用实时荧光定量PCR技术检测HCV-RNA的医院,在用HCV抗原对HCV抗体阳性标本进行确认,来判断HCV既往感染或现症感染时,应结合肝功能指标及临床表现以明确诊断. 相似文献
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丙型肝炎病毒(HCV)是一种严重威胁人们身体健康的疾病,主要途径是血源性传播。目前对丙型肝炎的检测主要用酶联免疫吸附法(ELISA)检测病毒抗体。我们对2000年以来的120例ELISA法抗-HCV阳性患者的血清,再用PCR技术进行HCV RNA检测,现将结果报告如下。 相似文献
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目的 探讨抗-HCV和HCV-RNA、ALT的联合检测在丙型肝炎诊断的应用价值.方法 采用ELISA法检测抗-HCV,FQ-RT-PCR法检测HCV-RNA,全自动生化分析仪测定ALT.结果 174例丙肝病毒感染的样本中抗-HCV和HCV-RNA同时阳性在急性丙型肝炎组中所占百分率(30.09%)显著低于慢性丙型肝炎患... 相似文献
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丙型肝炎病毒 (HCV)感染常引起慢性活动性肝炎并导致肝纤维化 ,在患病早期使用 IFNa有一定疗效。过去丙型肝炎的检测主要靠转氨酶和 Anti- HCV的测定 ,而血清中 HCV RNA才是病毒复制和肝炎进程的更确切的标准。因此定量 PCR检测 HCV RNA为 HCV感染及其疗效的判定提供了一项重要指标。本室采用定量 PCR法 ,对 12 0例患者同时检测血清唾液尿液中 HCV RNA的含量报道如下。1 对象和方法1.1 对象 本院住院患者。1.2 定量 PCR试剂盒 深圳匹基生物技术开发有限公司生产的 Fluorogenic PCR Kit。1.3 仪器 美国 BIO- RAD… 相似文献
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干扰素治疗前丙肝患者血清及外周血单个核细胞中HCV—RNA的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
本文采用RT-PCR方法对26例干扰素治疗前丙肝患者血清HCV-RNA进行检测,并对14例血清HCV-RNA阴性的标本进行外周血单个核细胞中HCV-RNA进行检测,发现26例血清标本中HCV-RNA阳性率为26.9%,而14例血清HCV-RNA阴性标本,其PBMC中HCV-RNA有3例阳性,阳性率为21.1%。因此,PBMC中HCV-RNA是丙肝病毒血症的又一个诊断指标,是否可作为干扰素疗效判断的 相似文献
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目的回顾性分析患者抗HCV与HBV-M检出情况,探讨HCV与HBV感染之间的相互关系。方法使用电化学发光法(ECL)比较分析196例抗HCV阳性患者与32026例抗HCV阴性患者血清HBV-M单项检出率和不同模式的检出率。结果抗HCV阳性组HBV-M检出率为73.47%;抗HCV阳性组HBsAb单阳性模式检出率低于抗HCV阴性组(P<0.05);而HBcAb单阳性模式、HBeAb和HBcAb双阳性模式、HBsAg和HBcAb双阳性模式检出率却高于抗HCV阴性组(P<0.05);抗HCV阳性组单项HBsAg、HBeAg以及HbsAb的检出率与抗HCV阴性组间差异无统计学意义(P>0.05),而单项HBeAb和HBcAb阳性率却高于HCV抗体阴性组(P<0.05)。结论 HCV与HBV共感染在人群中分布面较广,共感染后存在互相干扰抑制作用,主要表现为HBcAb、HBeAb的产生,及对保护性HBsAb产生过程的干扰与抑制。 相似文献
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目的 研究不同临床分型HCV感染者血清中HCV RNA与TNF-α之间的差异,探讨HCV RNA和TNF-α含量与肝损伤程度的关系.方法 收集HCV感染者45例,其中慢性肝炎轻度组11例,慢性肝炎重度组14例,肝硬化组11例,肝癌组9例,健康对照组20例.用ELISA法检测HCV IgG和TNF-α,制作标准曲线计算TNF-α含量.荧光定量PCR方法检测HCV RNA含量.血清ALT水平用HITACHI 7600型全自动生化分析仪采用速率法进行检测.HCV感染者血清HCV-RNA含量的对数值、TNF-α含量和ALT水平与正常对照组比较用t检验,各组之间的TNF-α含量和ALT水平及lg HCV RNA比较用方差分析,HCV RNA含量的对数值、TNF-α含量和ALT之间的相关性用直线相关性分析,用相关系数(r)表示.结果 丙肝患者各组之间ALT水平和TNF-α含量差异有统计学意义,F值分别为9.75和14.69,P<0.001;用t检验得出:各组丙肝患者血清TNF-α水平均明显高于健康对照组(P<0.001),t值分别为6.596,9.857,6.673和8.358;各组患者血清ALT水平均明显高于健康对照组(P<0.001),t值分别为12.031,6.61,3.971和6.857;慢性肝炎重度组、肝癌组与慢性肝炎轻度组之间ALT含量比较,差异有统计学意义(P<0.05),t值分别为3.242和3.246;慢性肝炎重度组和肝癌组HCV RNA的对数值分别为6.05±0.8和5.76±1.05,均低于慢性肝炎轻度组,t值分别为2.573和2.393,差异有统计学意义(P<0.05).ALT水平与TNF-α含量之间呈正相关,r=0.341,P<0.05.结论 不同临床类型HCV感染者血清中TNF-α和ALT含量存在差异,慢性肝炎轻度HCV感染者ALT水平明显低于其他临床类型组,HCV感染者血清ALT水平和TNF-α含量之间呈正相关. 相似文献
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目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞(PBMC)中HCV RNA存在情况及其临床意义。方法 应用套式PCR检测46例急性丙型肝炎(丙型肝炎以下简称丙肝)和42例慢性丙肝患者血清和PBMC中HCV RNA.结果 慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于急性丙肝患者(P<0.001);急、慢性丙肝患者血清和慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于ALT正常的抗-HCV阳性者(P<0.001);2例患者血清中HCV RNA阴性,PBMC中可测及,12例患者血清抗-HCV阴性,而血清HCV RNA阳性。结论 血清HCV RNA检测有助于抗-HCV阴性丙肝的诊断和早期诊断;丙肝的肝损害可能与HCV RNA血症有关;PBMC中HCV感染在丙肝的慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用,PBMC中可贮存HCV RNA。 相似文献
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用TthDNA聚合酶行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增丙型肝炎病毒(HVC)5’端非编码序列,对262例肝炎患者血清进行HCVRNA测定,结果HCVRNA阳性者53例,阳性率20.2%。凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗HCVIgG,其中30例测到抗HCV,阳性重叠率56%(30/53);HCVRNA阳性中的15例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录。套式聚合酶链反应检测对照,14例阳性,符合率达93.3%(14/15)。TthDNA聚合酶用于RT-PCR检测HCVRNA5’端非编码序列片段具有敏感性高、特异性强、稳定性好的优点。 相似文献
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血浆丙型肝炎病毒核酸稳定性的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:建立血浆丙型病毒性肝炎病毒(HCV)核酸的稳定保存方法,提高荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测的准确性。方法:HCV混合血浆以TRIZOL提取病毒核酸,分别保存于70%乙醇溶液及溶解于焦碳酸二乙醇(DEPC)水中。在4℃放置不同时间后,以FQ-PCR检测HCV RNA拷贝数。HCV RNA冻干质控品溶解于DEPC水并提取核酸后同时测定作为对照。另外,对保存的HCV RNA稀释后作线性分析。结果:未提取核酸的病毒血浆及70%乙醇溶液中的HCV RNA在4℃保存8d后,病毒核酸拷贝数无明显改变。HCV RNA DEPC水溶液在4℃放置30min后即发现拷贝数降低,5h后下降为零。质控品测定值无明显降低。在70%乙醇溶液中保存的HCV RNA稀释后测定值具有线性(r=0.9991)。结论:病毒在血浆及70%乙醇溶液中保存,其核酸可以在4℃稳定保存至少8d并具有良好的线性。病毒核酸DEPC水溶液在4℃易发生降解。 相似文献
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目的 建立检测丙型肝炎病人血清HCVRNA水平的竞争性逆转录 聚合酶链式反应定量方法。方法 采用含HCV 5 非编码区 ( 5 NCR)缺失突变的重组质粒 5T1d ,将其目的基因亚克隆到体外转录载体pCDNAⅠ多克隆位点上 ,获得转录重组体 5T1d 。将其线性化后用SP6RNA聚合酶体外转录竞争性缺失突变模板RNA ,该模板定量后与血清HCVRNA一起作逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR) ,建立检测血清HCVRNA水平的竞争性定量方法。结果 检测 15例丙肝病人 2 0份血清 ,滴度为 6.6× 10 2 ~ 6.6× 10 6copies/ml。 结论 各类丙型肝炎患者血清病毒滴度均较高 ,经干扰素治疗后病毒水平下降 1~ 5个Log ,年龄小于 2 0岁者干扰素治疗效果较好。 相似文献
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献血人群中丙型肝炎病毒第1高变区抗体检测及意义 总被引:4,自引:0,他引:4
目的研究丙型肝炎病毒(HCV)第一高变区(HVR1)抗体检测在献血者血液筛查中的意义。方法采用融合F4HVR1抗原检测不同血清样本中的抗-HVR1的存在情况,并与现有C、NS3、NS4、NS5抗体进行比较。结果在HCV-RNA阳性样本中,HVR1抗体的阳性率为96.8%;在90份可疑HCV感染血清中HVR1抗体的阳性率为61.1%,与C区、NS3区接近,高于NS4区、NS5区(P<0.05),共检测出4份单独HVR1抗体阳性血清。结论在现有HCV诊断试剂基础上,对献血人群进行HCV-HVR1抗体的检测可以提高血液筛查灵敏度,减少HCV的经血传播。 相似文献
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应用NASBA技术对献血者血浆/血清进行HCVRNA检测 总被引:7,自引:2,他引:5
目的 探讨对献血者混合血浆标本检测HCVRNA的必要性和可行性。方法 每 5 0份血浆混合为一组 ,用NucliSensExtractor提取核酸 ,以NASBA技术扩增HCVRNA和用ECL检测扩增产物。标本贮存 ,核酸提取、扩增、检测过程设立系统对照和阳性对照。结果 在抗 HCVELISA阴性的献血者 10 0 0 0人中发现 2例HCVRNA阳性。结论 用NASBA技术对混合血浆进行HCVRNA检测可有效控制输血后丙型肝炎的发生。 相似文献
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建立了改良二氧化硅吸附法检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA的方法。将待检血清50μl、二氧化硅悬液20μl、裂解液300μl(含硫氰酸胍、EDTA、TritonX—100、Tris·Cl)混匀置室温60分钟,病毒颗粒裂解释放的核酸吸附在二氧化硅颗粒上,经离心和双蒸水洗脱,所得HCVRNA模板以5'NC区引物作套式聚合酶链反应扩增。使用该方法可检出10μl血清中的HCVRNA。110份抗-HCV阳性血清中HCVRNA的检出率为82.7%。实验全过程约7小时,为丙型肝炎检测提供了快速、简便、灵敏的新方法。 相似文献