清开灵有效组份对局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞间黏附分子表达的影响

脑缺血后脑组织的炎症损伤反应因其预后差，死亡率高，而日益受到人们的关注，已成为该领域的研究热点。此炎症反应是以脑微血管内白细胞聚集并穿越血管壁，浸润脑组织，同时伴有微血管功能紊乱，局部脑组织中液体和血浆蛋白积聚为标志的急性炎症。白细胞转化为病源性细胞之前，必须与内皮紧密相连，     

红景天苷对局灶性脑缺血大鼠脑组织MAPK信号通路的影响

目的研究红景天苷对局灶性脑缺血大鼠在基因层面的保护作用及其作用机制。方法从正常组、局灶性脑缺血组（模型组）、红景天苷给药组（给药组）SD大鼠的脑组织中抽提总RNA,用基因表达谱技术,用GO和Pathway生物信息学手段对获取的数据进行分析。结果红景天苷能明显影响局灶性脑缺血大鼠MAPK通路,影响该通路的关键基因为CACNA1S、CACNB3、CACNG3、DUSP6、FOS、MAPK11、NLK、NR4A1、PRKCB等。结论红景天苷可通过影响MAPK通路的关键基而产生相应的脑组织保护作用。     

二苯乙烯苷对脑缺血再灌注大鼠神经生长因子表达及神经细胞凋亡的影响

目的探讨二苯乙烯苷 (TSG) 对缺血再灌注大鼠的神经保护作用及分子机制。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,再灌注后 6 h、24 h、48 h、7 d 观察动物神经行为学变化并评分,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法 (TUNEL) 检测神经细胞凋亡;免疫组化法检测神经生长因子 (NGF) 蛋白表达。结果神经功能评分显示模型组各时间点均有明显的神经功能缺损症状,除 6 h 时间点外,两个剂量 TSG 治疗组其余各时间点神经功能评分明显低于模型组,差异显著 (P＜0.05);与模型组相比,除 7 d 时间点外,两个剂量 TSG 组其余各时间点凋亡细胞数均减少,差异非常显著 (P＜0.01);与模型组相比,两个剂量 TSG 组各时间点 NGF 表达均升高,差异非常显著 (P＜0.01)。结论TSG 能够增加脑缺血再灌注大鼠缺血周边区 NGF 蛋白表达,拮抗神经细胞凋亡,改善神经功能。     

局灶性脑缺血后修复蛋白表达与细胞凋亡影响的实验研究

目的 :研究成年大鼠局灶性脑缺血脑内的增生细胞核抗原 (ProliferatingCellNuclearAntigen ,PCNA)或称修复蛋白表达。方法 :建立大脑中动脉阻塞模型 ,对大鼠局灶性脑缺血缺血 2小时再灌不同时间。检测PCNA的蛋白表达及神经元细胞凋亡 ,观察梗死区面积。结果 :在大脑中动脉阻塞再灌注 12小时单纯缺血组PCNA最高 ,随着再灌注时间的延长 ,表达逐渐下降 ,48小时PCNA少量表达但仍略高于正常对照组。脑细胞凋亡在再灌注 1小时开始出现 ,随着缺血再灌注时间延长 ,凋亡细胞越来越多。TTC染色后可见梗塞区苍白、未染色 ,梗塞区周围染色为紫红色 ,面积约 (1.0× 0 .7)cm2 。结论 :脑缺血PCNA大量表达 ,启动细胞内的DNA修复机制 ,对损伤的DNA进行修复     

经颅磁刺激对局灶性脑缺血大鼠脑神经细胞凋亡、NO的影响

目的观察经颅磁刺激对局灶性脑缺血大鼠脑组织的神经细胞凋亡数、NO的影响。方法制备一侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,造成大鼠左脑缺血24h,以改良的神经系统损害严重程度评分表(modified neurological severityscore,NSS)评定神经功能缺损程度并筛选大鼠。随机分为对照组和磁刺激组(TMS)。两组大鼠神经功能缺损无统计学差异。对照组给予5d假TMS刺激,TMS组给予5d TMS刺激。5d后采用干重湿重法测定脑含水量,采用流式细胞仪及硝酸还原酶法分别检测脑组织神经细胞凋亡率及一氧化氮含量变化。结果 TMS组大鼠的脑水肿程度明显减轻(P<0.05);TMS组神经细胞凋亡率及一氧化氮含量明显减少(P<0.05)。结论 TMS对脑缺血损伤具有神经保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后Hsp70的表达及与细胞凋亡的关系

目的：研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后热休克蛋白（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｔｅｉｎ,Ｈｓｐ）７０的表达及与细胞凋亡的关系。方法：用线栓法制备ＭＣＡＯ模型,用免疫组化法测定Ｈｓｐ７０阳性细胞及用ＴＵＮＥＬ法测定凋亡细胞。结果：缺血２ｈ即有Ｈｓｐ７０阳性细胞,６～２４ｈ明显,４８ｈ减弱,３ｄ消失。ＴＵＮＥＬ阳性细胞于再灌注后２ｈ出现,２４～４８ｈ达高峰,７２ｈ减弱。结论：脑缺血再灌注后早期即有Ｈｓｐ７０表达及细胞凋亡发生。     

大鼠局灶性脑缺血后一氧化氮合酶活性与细胞凋亡关系

目的：了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶（NOS）变化与脑细胞凋亡的关系。探索阻断脑细胞凋亡的时间窗。方法：用线栓法建立局灶性脑缺血模型，大脑中动脉阻塞（MCAO）的时间分别为15、30、60、90、120min，再灌注24h，用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH-d)组化法，检测局灶性脑缺血再灌注后缺血中心区（顶叶皮层和尾壳)NOS活性变化，用苏木精－伊红和TUNEL染色法检测缺血中心式脑细胞凋亡情况。结果：NOS阳性神经元数于30min时增多最显著，90－120min隐剧减少，各组凋亡细胞数随缺血时间延长而增多。结论：局灶性脑缺血再灌注过程中神经型NOS、nNOS对缺血早期的脑损伤尤其是细胞凋亡起主要作用。     

肉苁蓉总苷对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响

目的研究肉苁蓉总苷(GCs)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法采用插线法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO)制造大鼠局灶性脑缺血模型，采用NBT染色测定脑梗死范围．用“重量求面积法”计算梗死组织占对侧大脑质量的百分比作为对梗死范围的判定．行为指标评分采用11分评分制，并测定缺血脑组织的抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)含量。结果GCs125，250mg／kg可明显缩小脑梗死范围，改善神经症状，脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性明显升高，MDA含量显著下降。结论GCs对大鼠局灶性脑缺血损伤具有神经保护作用，此作用可能与SOD，GSFH-Px活性水平的升高有关。     

调节性T细胞对局灶性脑缺血影响的研究进展

调节性T细胞(Treg)是一类控制体内自身免疫反应性T细胞的重要亚群,对维持机体免疫稳定、防治自身免疫性疾病等具有重要作用.目前研究发现,免疫炎性反应贯穿于局灶性脑缺血发生发展的全过程,脑缺血及缺血后的再灌注所引发的免疫炎性反应在脑缺血再灌注损伤中发挥重要作用.Treg具有负性免疫调节作用,可以抑制局灶性脑缺血引起的炎...     

中风康对局灶性脑缺血大鼠脑水肿的影响

目的 探讨中风康对局灶性脑缺血大鼠脑水肿的影响。方法 采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型，以步长脑心通为对照，于脑缺血6、12、24、48h动态观察中风康对局灶性脑缺血大鼠脑水肿的影响。结果 与假手术组比较，大鼠局灶性脑缺血6h，模型组出现明显脑水肿（P〈0．01），随缺血时间延长，水肿逐渐进展，至24h水肿达到高峰（P〈0．01），与同时点模型组比较，各治疗组脑水肿均有不同程度减轻，以中风康高剂量组减轻最为显著（P〈0．01）。结论 中风康可减轻脑水肿，有效维护血脑屏障的完整性，减轻局灶性脑梗死引起的缺血性损伤。     

降纤酶对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响

目的:观察降纤酶对大鼠脑缺血再灌注后脑细胞凋亡的影响。方法:96只雄性SD大鼠,随机分为降纤酶治疗1,2组和对照组1,2组,制造大鼠脑中动脉栓塞模型,降纤酶治疗1,2组于缺血3h经腹腔注射降纤酶治疗,对照1,2组在相同时间点给予等量生理盐水。降纤酶治疗和对照1组利用流式细胞仪检测缺血3h再灌注3h、6h、24h、72h后脑组织中凋亡细胞百分率。降纤酶治疗和对照2组利用Tunel方法检测神经元凋亡数目及利用免疫组化方法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:降纤酶治疗和对照1组凋亡细胞率、降纤酶治疗和对照2组凋亡细胞数均随再灌注时间延长而渐增多,于24h达高峰,以后逐渐减少,2组6h、24h和72h差异均有统计学意义(P<0.05)。降纤酶治疗和对照2组bcl-2蛋白表达于24h明显减低,bax蛋白表达于24h升至最高,Bcl-2和Bax蛋白表达时相与神经细胞凋亡高峰基本一致,降纤酶治疗2组24hBcl-2和Bax蛋白表达较对照2组明显减少(P<0.05)。结论:降纤酶有降低大鼠脑缺血再灌注后脑细胞凋亡的作用,对脑组织有保护作用。     

Effect of batroxobin on neuronal apoptosis during focal cerebral ischemia and reperfusion in rats.

We have found that Batroxobin plays a protective role in ischemic brain injury, which attracted us to investigate the effect of Batroxobin on apoptosis of neurons during cerebral ischemia and reperfusion. The apoptotic cells in ischemic rat brains at different reperfusion intervals were tested with method of TdT-mediated dUTP-DIG nick end labeling (TUNEL) and the effect of Batroxobin on the apoptosis of neurons was studied in left middle cerebral artery (LMCA) occlusion and reperfusion in rat models (n = 18). The results showed that few scattered apoptosis cells were observed in right cerebral hemispheres after LMCA occlusion and reperfusion, and that a lot of apoptosis cells were found in left ischemic cortex and caudoputamen at 12 h reperfusion, and they reached peak at 24 h-48 h reperfusion. However, in the rats pretreated with Batroxobin, the number of apoptosis cells in left cerebral cortex and caudoputamen reduced significantly and the neuronal damage was much milder at 24 h reperfusion than that of saline-treated rats. The results indicate that administration of Batroxobin may reduce the apoptosis of neurons induced by cerebral ischemia and reperfusion and afford significant cerebroprotection in the model of focal cerebral ischemia and reperfusion.     

MK-801对局灶性脑缺血再灌注大鼠细胞增殖的影响

目的 研究MK-801对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经干细胞增殖的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为正常时照组(n=6)、假手术组(n=6)、手术组(n=12)和手术MK-801不同浓度干预组(0.2、0.4、0.6、0:8、1.0和1.2 mg/kg n=36).用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,在模型制作前30 min按照不同浓度组的剂量腹腔注射MK-801,假手术组和手术对照组腹腔注射等量的生理盐水.在模型建立后第7天,通过免疫组化技术标记大鼠梗塞区大脑皮质的Brdu阳性细胞数目.结果 MK-801浓度为0.4mg/kg时,可以明显抑制内源性神经干细胞的增殖,0.8ms/ks剂量以上有显著的抑制作用,并且随着浓度升高抑制作用呈递增趋势.结论 NMDA受体拮抗剂MK-801在局灶性脑缺血后对大鼠内源性神经干细胞的增殖有抑制作用,并且随浓度的增加抑制作用增强.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经细胞凋亡的动态变化

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的动态变化.方法:采用健康雄性大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,阻断大脑中动脉(MCA)血流2h后再灌注,在0.5h,6h,12h,24h和48h不同时间点断头取脑,连续取脑进行TuNEL染色。结果:①假手术组、缺血再灌注组非缺血侧大脑半球未见阳性的凋亡细胞。②脑缺血再灌注早期部分神经细胞发生了凋亡。随着再灌注时间的延长,凋亡细胞数目逐渐增多,12h～24h达到高峰。③凋亡细胞主要分布在梗死灶的边缘区,梗塞灶中心区和正常区无凋亡细胞。结论:神经细胞凋亡在脑缺血再灌注损伤时起着重要作用。     

血栓通对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡影响的研究

目的 研究血栓通在脑缺血再灌注过程中对神经细胞的作用机理,特别是血栓通与细胞凋亡的关系。方法 利用末端标记法,测定血栓通干预后脑缺血鼠脑组织中神经细胞的凋亡情况。结果 血栓通能明显降低神经细胞凋亡百分率,降低凋亡神经细胞积分光密度,减轻病理损害。结论 血栓通可显著抑制缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡,起到一定程度的神经保护作用。     

脑源性神经营养因子预先给药对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

目的探讨不同剂量的脑源性神经营养因子（BDNF）预先给药对大鼠局灶性脑缺血再灌注（I/R）后神经细胞凋亡的影响。方法用大鼠大脑中动脉线栓法（MCAO）建立局灶性脑缺血再灌注模型,BDNF采用侧脑室注射法给药。将30只雄性Wistar大鼠,随机分为5组：正常对照组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、BDNF预先给药低剂量组（L组）、中剂量组（M）、高剂量组（H）;除C组外,其余各组分别行脑缺血1 h再灌注72 h后处死取脑皮层标本待检。采用TUNEL法观察大鼠脑缺血再灌注后脑皮层神经细胞凋亡的变化。结果与I/R组比较,BDNF预先给药各组神经细胞凋亡指数均明显减少（P〈0.01）;在BDNF预先给药各组中,以预先给药高剂量组的神经细胞凋亡指数最小（P〈0.01）。结论不同剂量的BDNF预先给药均能明显减轻脑I/R后神经细胞凋亡,具有不同程度的脑保护作用。且随BDNF预先给药剂量的增加细胞凋亡数量进一步减少。     

大剂量一氧化氮合酶抑制剂在局灶性脑缺血中对神经细胞凋亡的影响

目的：研究一氧化氮(NO)在局灶性脑缺血再灌流过程中对神经细胞的作用机制及NO与细胞凋亡的关系。 方法：利用光镜、电镜观察N-硝基-左旋-精氨酸（N-nitro-L-arginine,NNLA）干预后局灶脑缺血大鼠脑组织的病理学改变。结果：大剂量给予NNLA干预后,手术侧电镜下半影区神经细胞改变较手术对照组明显,神经细胞核周水肿、溶解和小胶质细胞核染色质凝集,以细胞坏死为主。结论：过多的NO可能通过两种方式导致神经细胞损伤,其一是过量NO以活性氧自由基(ROS)表达式直接攻击神经细胞,是神经细胞损伤的直接毒性分子。其二是过少的NO不足以维持脑血管的基础张力,脑血流下降,导致缺氧,引起神经细胞损伤。     

缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响

目的：探讨缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法：大脑中动脉线拴法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动物模型。将30只雄性SD大鼠随机分为假手术（sham）组、脑缺血再灌注（I／R）组和缺血后适应（IP）组,每组10只。利用原位缺口末端标记法研究神经细胞凋亡的变化。应用Westernblotting检测大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后P38和Caspase一3蛋白表达水平的变化。结果：大鼠脑缺血再灌注后凋亡细胞数量,P38和Caspase-3蛋白表达水平均显著升高,而缺血后适应组凋亡细胞数量,P38和Caspase-3蛋白表达水平均显著低于缺血再灌注组（P〈0．01）。结论：缺血后适应可减少大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的发生,此作用可能与抑制P38和Caspase-3蛋白表达有关。     

七叶皂苷钠对大鼠局灶性脑缺血损伤炎症反应的作用

目的：观察七叶皂苷钠对大鼠脑缺血再灌注损伤局部炎症反应的影响。方法：线栓法阻塞大鼠左侧大脑中动脉,建立缺血再灌注模型,经视交叉的冠状脑组织块行TTC染色测梗死面积,并进行髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO)、细胞间黏附分子－1（inter-cellular adhesion molecule-1,ICAM-1)免疫组化染色。结果：再灌注即刻腹腔内注射七叶皂苷钠的治疗组较对照组神经功能缺损程度显著减轻（P＜0.05),梗死面积明显缩小（P＜0.05),MPO阳性细胞数明显减少（P＜0.05),ICAM-1免疫阳性血管数无显著变化（P＞0.05)。结论：七叶皂苷钠对局灶性脑缺血损伤的保护作用可能与抑制局部炎性渗出有一定的关系。     

针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用

目的:探讨针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用. 方法: 利用大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血模型,实验动物随机分为假手术组(Sham),单纯缺血再灌注组(I/R),针刺预处理后缺血再灌注组(EA I/R),其中EA I/R组缺血前行百会穴重复电针刺激(30 min/d×5 d). 行TTC染色观察脑梗死体积,利用免疫组化及TUNEL法观察缺血周边区域Bcl-2蛋白表达及神经细胞凋亡的情况. 结果:与I/R 组相比,EA I/R组脑梗死体积明显缩小(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达显著增加(P<0.01),神经元的凋亡数目明显减少(P<0.01). 结论:针刺预处理可以减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,可能是通过促进Bcl-2蛋白的表达,减少神经元的凋亡来实现的.