慢性肾炎患者治疗前后血清MMP-2、MMP-9水平检测及其临床意义

文献报道,基质金属蛋白酶（MMPS）是一种具有共同生化活性可降解的细胞外基质（extra—cellular matrix,ECM）酶。MMP-2在未成熟的肾单位上皮中已有表达。MMP-9检测的临床意义远高于常规的尿微量白蛋白水平检测,在临床实践中有重要的临床价值。国内尚少见慢性肾炎患者治疗前后血清MMP-2和MMP-9联检的相关报导。为此,本文现将初步的探讨报告如下。     

慢性肾炎患者输注红细胞前后血清Ferritin、MMP-2和MMP-9检测的临床意义

目的：探讨了慢性肾炎患者在输注红细胞前后Ferritin、MMP-2和MMP-9水平的变化。方法：应用放射免疫分析和酶联法对32例慢性肾炎患者进行了输注红细胞前后Ferritin、MMP-2和MMP-9检测,并与35名正常人组作比较。结果：慢性肾炎患者在输注红细胞前血清Ferritin和MMP-9水平非常显著地低于正常人组（P〈0.01）,而MMP-2水平则显著地高于正常人组（P〈0.01）。经2周输注红细胞后则与正常人组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：检测慢性肾炎患者输注红细胞治疗前后血清Ferritin、MMP-2和MMP-9水平的变化对其病情的发展和预后的判断均具有重要的临床价值。     

妊高征肾病患者血清MMP-2、MMP-9检测的临床意义

目的：探讨了妊高征肾病患者血清MMP2、MMP9水平的变化及临床意义。方法：应用酶联法测定了32例妊高征肾病和50例无肾病组及35名正常孕妇血清MMP2、MMP9水平的变化。结果：妊高征肾病组和无肾病组血清MMP2水平非常显著高于正常孕妇组（P〈0.01）,而MMP9水平则非常显著地低于正常孕妇组（P〈0.01）,妊高征肾病组与无肾病组亦有显著性差异（P〈0.05）。结论：检测妊高征患者血清MMP2、MMP9水平的变化对其病情和预后判断均具有重要的临床价值。     

抑制NF-_κB对鼻咽癌细胞CNE-2中MMP-9表达的影响

目的　　为探讨高转移性和高复发性的鼻咽癌中ＭＭＰ－９的表达及ＮＦ－κＢ抑制剂ＰＤＴＣ对其表达的影响。方法　　采用常规培养的鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２,通过流式细胞仪检测ＣＮＥ－２中ＭＭＰ－９的表达及核因子κＢ抑制剂ＰＤＴＣ对其表达的影响。结果　　ＣＮＥ－２中有高表达的ＭＭＰ－９,ＰＤＴＣ可有效抑制其ＭＭＰ－９的表达。结论　　ＭＭＰ－９在肿瘤转移过程中起重要作用,抑制ＮＦ－κＢ和ＭＭＰ－９可抑制肿瘤转移。     

左向右分流型先天性心脏病患儿血清MMP-2和MMP-9变化

目的探讨左向右分流先天性心脏病（CHD）患儿血清基质金属蛋白酶（MMPs）-2、9水平的变化及意义。方法采用ELISA方法检测并比较40例CHD患儿（其中无肺动脉高压组22例、肺动脉高压组18例）和20例健康患儿的血清MMP-2、MMP～9。结果CHD无肺动脉高压组及肺动脉高压组患儿MMP-2（分别为206．14±20．62及258．83±31．44,pg／ml）、MMP-9（分别为207．68±20．77及240．00±31．10pg／m1）与正常对照组相比均有显著性（P均小于0．05）;而肺动脉高压组MMP-2及MMP-9水平明显高于无肺动脉高压组,差异有显著性（P均小于0．01）。CHD患儿血清MMP-2、MMP-9与LVEF、LVFs均无明显相关性（P〉0．05）;CHD患儿血清MMP-2及MMP-9浓度与肺动脉收缩压呈正相关（r分别为0．783及0．635,n=40,P〈0．05）。结论CHD肺动脉高压患儿血清MMP-2、MMP-9浓度升高并与肺动脉收缩压成正相关,提示MMP-2、MMP-9与肺动脉高压的病理生理有关。     

低氧致肺动脉平滑肌细胞增殖及其作用机制初探

目的和方法：实验采用ＰＤＧＦ生物活性检测法，流式细胞术，「＾３Ｈ」－ＴｄＲ掺入以及细胞免疫线化等方法探讨了低氧状态下，血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）及其受体与肺动产滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖间的相互关系。结果：低氧可以增强ＰＤＧＦ的活性，上调ＰＧＦ受体促进ＰＡＳＭＣ增殖以ＰＤＧＦ作为刺激嘲一步促进低氧的促增殖作用。结论：低氧状态下，ＰＡＳＭＣ的ＰＤＧＦ及其受体进一步活化，从而增强了ＰＤＧＦ自分泌、旁     

MMP-2、MMP-9及EMMPRIN在子宫内膜异位症中的表达及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）在子宫内膜异位症（EMs）的表达和意义。方法应用免疫组化二步法检测EMs患者异位内膜42例、在位内膜42例及正常内膜20例中的MMP-2、MMP-9、EMMPRIN的表达情况,并对它们的EMMPRIN、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平进行相关性分析。结果 MMP-2、MMP-9、EMMPRIN在异位内膜组中阳性表达率分别为95.24%、92.86%和90.48%,显著高于在位内膜组、正常内膜组（P〈0.05）;而在位内膜组和正常内膜组差异无统计学意义（P〉0.05）。异位内膜组中,EMMPRIN分别和MMP-2,MMP-9呈正相关性（P〈0.01）。结论 MMP-2、MMP-9、EMMPRIN共同参与了子宫内膜异位症的发生发展;EMMPRIN可能通过促进MMP-2和MMP-9的合成与分泌发挥其作用。     

氧化低密度脂蛋白促进血管平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶-2

目的：用氧化低密度脂蛋白对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞进行干预，观察其对血管平滑肌细胞表达MMP-2的影响。方法：用组织贴块法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞，分组后分别予以0、25μg/ml LDL，25μg/ml OX-LDL进行干预。提取细胞总RNA和总蛋白分别进行RT-PCR，western blot-ting检测，同时取出条件培养基经含1mg/ml明胶的10％聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳行酶谱法（zymo-gra-phy）检测分泌于培养基中的MMP-2活性。结果：经mRNA、蛋白和酶活性检测，发现25μg/ml OX-LDL干预48h时，MMP-2的表达水平较对照和25μg/ml LDL明显增加。结论：OX-LDL能促进血管平滑肌细胞表达MMP-2，这提示血管细胞外基质的降解在氧化脂蛋白诱发的动脉粥样硬化斑块产生和破裂机制中起着一定作用。     

慢性肾炎患者SF、血清CysC和MMP-2、MMP-9检测的临床意义

目的:探索了慢性肾炎患者治疗前后SF、血清CysC和MMP-2、MMP-9水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析和酶联法对31例慢性肾炎患者进行了治疗前后SF、血清CysC和MMP-2、MMP-9检测,并与35名正常人作比较。结果:慢性肾炎患者在治疗前SF、血清MMP-9水平非常显著地低于正常人组(P<0.01),而CysC、MMP-2水平又非常显著地高于正常人组(P<0.01),经中西医结合治疗3个月后与正常人组比较仍有显著性差异(P<0.05)。结论:检测慢性肾炎患者SF、血清CysC和MMP-2、MMP-9水平的变化对其病情的发展和预后的判断均有重要的临床价值。     

MMP-2和TIMP-2在小细胞肺癌患者血清中的表达及其临床意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）在小细胞肺癌（SCLC）中的表达、两者相关性及临床病理意义。方法：采用放射免疫分析检测80例SCLC患者和35例正常人血清中的MMP-2、TIMP-2水平。结果：80例SCLC患者的MMP-2、TIMP-2血清水平明显高于正常对照组（P〈0.01）;广泛期SCLC患者的血清MMP-2和TIMP-2明显高于局限期患者（P〈0.05）。结论：MMP-2和TIMP-2的高表达对SCLC的发生发展均起重要作用,两者表达水平与SCLC的浸润转移及恶性程度有关。     

缓激肽对TGF-β1诱导的猪肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

 目的：研究缓激肽（BK）对转化生长因子 β1（TGF-β1）诱导的肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖的影响及其可能机制。方法：原代培养猪PASMCs,采用CCK-8法测定BK对TGF-β1诱导的PASMCs增殖能力的影响,同时应用Western blotting检测PASMCs PI3K、p-Akt和p-ERK1/2表达的变化。结果：TGF-β1呈剂量依赖性促进PASMCs增殖（P<005）,BK显著抑制了TGF-β1诱导的PASMCs增殖（P<005）,而BK 2型受体（B2R）抑制剂HOE-140可以显著抑制BK的效应（P<005）;Western blotting结果显示,BK抑制TGF-β1诱导的PASMCs增殖主要是通过阻断PI3K/Akt和ERK1/2信号通路活化而实现。结论：BK显著抑制TGF-β1诱导的PASMCs增殖,此作用可能与其抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路活化有关。     

MicroRNA-133b regulates the growth and migration of vascular smooth muscle cells by targeting matrix metallopeptidase 9

Atherosclerosis is a systemic disease affecting the whole arterial tree of the human body, and it is the leading cause of cardiovascular diseases.Vascular smooth muscle cells (VSMCs) have been identified to play a key role in the development of atherosclerosis. MicroRNAs (miRNAs) are a group of endogenous small non-coding RNAs, and they play a critical role in many biological processes including regulating cell proliferation, migration and apoptosis. However, till now, the expression and role of miR-133b in atherosclerosis remain largely unknown. Therefore, our purpose was to investigate the expression and role of miR-133b in atherosclerosis and to explore the underlying mechanism. The results showed that miR-133b was down-regulated in the blood and vascular plaque tissues of rabbits with atherosclerosis. Matrix metallopeptidase 9 (MMP-9) was a direct target of miR-133b. In addition, our data indicated that miR-133b mimic could significantly inhibit rVSMC cell proliferation activity, migration ability and induce cell apoptosis compared with the control group, and all these effects were reversed by MMP-9-plasmid. Taken together, these findings highlight an important role for miR-133b/MMP-9 axis in atherosclerosis. And miR-133b might be a valuable clinical marker and therapeutic target for atherosclerosis.     

Mobilization of free Ca2+ measured during contraction-relaxation cycles in smooth muscle cells of the porcine coronary artery using quin2

Ca²⁺ mobilization in dispersed smooth muscle cells of the porcine coronary artery was investigated using the fluorescent Ca²⁺ indicator, quin2. The resting [Ca²⁺]_i was 113±8 nM (a mean±SE), and was independent of intracellular quin2 concentrations. Acetylcholine (ACh; over 10 nM) or caffeine (over 3 mM) transiently increased the intensity of fluorescence, thereby reflecting the elevation of intracellular free Ca²⁺ (Ca²⁺ transient), while excess K⁺ gradually increased and maintained the intensity of fluorescence. Application of EGTA reduced the resting intensity of the fluorescence and blocked the K⁺-induced Ca²⁺ transient, but did not supress the Ach-or caffeine-induced ones. Nisoldipine (0.1 M) did not affect the resting intensity of the fluorescence. This agent blocked the K⁺ induced but not the ACh-or caffeine-induced Ca²⁺ transient. Thus, sources of Ca²⁺ contributing to the K⁺-induced Ca²⁺ transient differ from those evoked by other agents. The amount of Ca²⁺, as estimated from the increased Ca²⁺ transient by caffeine or ACh, was increased in proportion to the excess K⁺-induced influx of Ca²⁺.     

缺氧内皮细胞介导肺动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子mRNA表达

目的探讨缺氧时肺动脉内皮细胞对肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ自分泌的影响。方法实验分３组：无血清培养组、常氧性内皮细胞条件培养液组及缺氧性内皮细胞条件培养液组。应用原位杂交和图像分析技术检测猪肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达。结果无血清培养的肺动脉平滑肌细胞有ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ弱表达;内皮细胞条件培养液明显增加肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达,两者分别为无血清培养组的１．８倍和１．７倍（Ｐ＜０．０１）,为常氧内皮细胞条件培养液培养组的１．４倍和１．５倍（Ｐ＜０．０１）。结论缺氧时肺动脉内皮细胞可以介导肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ的自分泌,可能在缺氧性肺动脉高压血管构形改建中具有重要作用     

低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞血红素加氧酶-1 mRNA 表达及细胞增殖的影响

探讨血红素加氧酶－1（HO－1）mRNA在低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC0的表达及HO－1／一氧化碳（HO－1／CO）体系对PASMC增殖的影响。应用荧光定量RT－PCR法测定HO－1mRNA表达。用双波长法检测碳氧血红蛋白（HbCO)吸光值。应用免疫细胞化学方法检测细胞增殖核抗原（PCNA）及核转录因子－κB（NF-κB）的表达。发现HO－1 mRNA在常氧大鼠PASMC有低水平的表达，低氧12h HO-1mRNA水平是常氧时的1．5倍，且HbCO产量随之显著增高（P＜0．01）；低氧24h HO-1 mRNA表达呈回落趋势，HbCO产量亦有所减少，但两者仍高于常氧水平。低氧12h及24h PASMC PCNA核阳性反应颗粒表达较常氧时增强（P＜0．01，P＜0．001），使用HO抑制剂ZnPP-9，其PCNA该阳性反应颗粒表达较单纯低氧时增加更多（P＜0．001，P＜0．01）。低氧组核NF－κB阳性染色较常氧组增强（P＜0．001），使用ZnPP-9，其表达则比低氧时更多（P＜0．01）。低氧通过诱导大鼠PASMC的HO－1 mRNA基因表达，上调HO／CO体系活性，使内源性CO含量增高，抑制PASMC增殖；NF－κB参与了PASMC增殖的调控机制。     

神经调节蛋白1对冠状动脉平滑肌细胞表达血管生成因子的影响

目的:探讨神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRG-1)对人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMCs)表达血管生成因子的影响。方法:培养HCASMCs,实验使用第3代细胞。用Western blot法检测细胞Erb B的表达和磷酸化。在正常、缺氧缺血清或NRG-1(100μg/L)处理条件下,用Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素1(Ang-1)和血管生成素2(Ang-2)表达的改变。结果:Erb B2、Erb B3和Erb B4均能在HCASMCs中表达,加入NRG-1后,这3种Erb B的磷酸化水平均增加。与对照组比较,在缺氧缺血清组HCASMCs中VEGF和Ang-1的表达明显增加(P0.05),而Ang-2的表达差异无统计学显著性。与缺氧缺血清组比较,NRG-1处理组的HCASMCs表达VEGF和Ang-1进一步显著增加(P0.05),而Ang-2的表达差异无统计学显著性。结论:HCASMCs能表达Erb B2、Erb B3和Erb B4,加入NRG-1增强Erb B2、Erb B3和Erb B4的磷酸化。缺氧缺血清和NRG-1处理均能增加VEGF和Ang-1在HCASMCs中的表达。     

黏着斑激酶促进人肺动脉平滑纲细胞增生

目的探讨黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是否参与人肺血管平滑肌细胞增殖。方法将纤黏连蛋白(fibronectin,FN)预处理的培养人肺血管平滑肌细胞进行分组,采用不同浓度的FAK正义寡核苷酸转染,应用免疫沉淀及免疫印迹方法测定FAK的活性及蛋白质表达,并利用MTT比色法及3H-TdR掺入法测定细胞增殖情况。结果FAK正义寡核苷酸转染后,FAK的活性及蛋白质表达量均随着剂量增加而增加,呈浓度和时间依赖性地促进细胞增殖及3H-TdR掺入。结论FAK促进人肺动脉平滑肌细胞增殖。     

在inside-out膜片上caffeine对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的调节作用及ryanodine的影响

目的:利用膜片钳技术,研究咖啡因对钙激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)的作用机制,及咖啡因存在时兰尼定(ryanodine)对KCa的影响以阐明冠状动脉平滑肌的调控机制。方法:采用急性酶分离方法,应用膜片钳单通道电流记录技术记录猪冠状动脉平滑肌钿胞上KCa电流活动。电流信号经放大、滤波及A/D、D/A转换后输入微机进行采样和储存。应用PCLAMP9.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在内面向外式(inside-out)膜片下,咖啡因(0.1、0.5、1.0、5.0mmol/L)可浓度依赖性地增加通道开放概率,而对电流幅值无明显影响,开放概率增加是通过明显缩短平均关闭时间实现的(n=8,P0.01);洗去药物后通道活性可以恢复到对照水平;5.0mmol/L咖啡因对KCa激活作用最大(P0.01)。在细胞贴附式(cell-attached)膜片上,咖啡因激活KCa后,ryanodine(10-40μmol/L)浓度依赖性地抑制通道开放概率,开放时间缩短,关闭时间延长,对电流幅度无明显影响。结论:在inside-out膜片下,咖啡因能够直接激活猪冠状动脉平滑肌细胞KCa通道。在cell-atta-ched构型上,ryanodine可通过胞内一定的信号通路浓度依赖性间接抑制咖啡因对KCa激活。     

Morphological changes of cerebral vessels and expression patterns of MMP-2 and MMP-9 on cerebrovascular wall of alcoholic rats

Alcohol abuse increases the incidence of cerebral accidents, which correlates with cerebrovascular structural changes. The present study was designed to observe the cerebrovascular remodeling of drinking rats with light microscopy and transmission electron microscopy (TEM). Short-term alcohol administration induced apparent amplification of perivascular spaces around small vessels in brain tissue, while long-term administration caused pathological changes of basilar arteries (BAs), including endothelial exfoliation, inner elastic lamina (IEL) fragmentation and thickening of tunica media and adventitia. In addition, the relationship between cerebrovascular remodeling and MMP-2 and MMP-9 synthesized by endothelial cells and vascular smooth muscle cells was explored by immunohistochemistry. The two protein expression in cerebral vessels changed dynamically, peaking at 1-2 weeks after treatment, and decreasing as treatment continued. These results suggest that MMP-2 and MMP-9 may play a significant role in blood-brain barrier disruption after alcohol abuse. But the chronic changes of cerebral arteries resulted from drinking are not coincident with time course of MMP-2 and MMP-9 expression in situ.